Кристалічна форма і дималеатного інгібітору тирозинкінази і способи її одержання

Реферат: Кристалічна форма І дималеату (R,Е)-N-(4-(3-хлоро-4-(піридин-2-іл-метокси)-феніламіно)-3ціано-7-етоксихінолін-6-іл)-3-(1-метилпіролідин-2-іл)пропенаміду (під назвою SHR1258 дималеат для скорочення), способи її одержання та фармацевтична композиція на її основі. Кристалічна форма І SHR1258 дималеату має добру стабільність кристала та хімічну стабільність та може бути використана при одержанні медикаментів для лікування хвороб, що пов'язані з EGFR рецептором тирозинкінази або HER-2 рецептором тирозинкінази. UA 113658 C2 (12) UA 113658 C2 UA 113658 C2 5 10 15 20 25 Галузь винаходу Даний винахід стосується кристалічної форми дималеату інгібіторів тирозинкінази, зокрема кристалічної форми I дималеату (R,E)-N-(4-(3- хлоро-4- (піридин-2-іл-метокси) феніламіно)-3ціано- 7-етоксихінолін-6-іл) -3-(1-метилпіролідино -2-іл)акриламіду, їх одержання та застосування. Рівень техніки В останні роки рівень смертності від раку в нашій країні дуже зріс. Життя і якість життя людей були під серйозною загрозою через ракові захворювання. Таким чином, складним та важливим завданням в галузі медико-біологічних наук нині є пошук нових протиракових препаратів з високим ефектом і низькою токсичністю. Рецептор тирозинкінази являє собою вид трансмембранного білка, що бере участь у передачі сигналу. Показано, що більш ніж 50% прото-онкогена і онкогенного продукту мають активність тирозинкінази, аномальна експресія якої буде викликати утворення пухлин. Інгібітор тирозинкінази був затверджений для виходу на ринок з 2001 року та став новим класом протипухлинних препаратів з підвищеною продуктивністю. Рецептор фактора росту епідермісу (EGFR) є членом сімейства тирозинкіназ. Перебіг метаболізму рецептора фактора росту епідермісу відіграє дуже важливу роль в утворенні пухлин та їх розвитку, що стало основним завданням досліджень та однією з цілей розвитку у галузі протиракової терапії. Список ліків, що був наявний на ринку, тепер включає ерлотиніб, гефінітіб та лапатиніб (Tykerb, GW572016), а також нератиніб, який на даний час знаходиться на стадії клінічних випробувань. Патент WO2011029265 описує спосіб одержання сполуки (R, E)-N(4-(3-хлоро -4-(піридин- 2-ілметокси) феніламіно)- 3-ціано-7- етоксихінолін-6-іл) -3-(1метилпіролідино -2-іл)акріламід (нижче зазначається як SHR1258 для зручності). Ця молекула ліків має очевидні переваги з точки зору фармакокінетики та фармакодинаміки. Хоча патент WO2011029265 описує хімічну структуру та спосіб одержання сполуки SHR1258, він не описує умови утворення її солей. У Китайській патентній заявці 201110062359.8 був описаний дималеат цієї сполуки (нижче зазначається як SHR1258 дималеат), з наступною структурою: Cl O N H N O EtO 30 35 40 45 50 N HN CN N 2 HOOC COOH Проте, винахідники не проводили додаткове дослідження щодо поліморфів та способу одержання SHR1258 дималеату. Як відомо фахівцям у цій галузі, поліморфна структура фармацевтично активного інгредієнта завжди дозволяє впливати на хімічну стабільність ліків. Різні умови зберігання та кристалізації можуть призвести до зміни поліморфної структури сполуки, що іноді супроводжується іншими формами поліморфу. Загалом, аморфний лікарський продукт не має регулярної кристалічної структури, та часто має інші дефекти, такі як погана стабільність продукту, менший розмір частинок, утруднене фільтрування, легка агломерація та погана ліквідність. Таким чином необхідно покращити усі аспекти основних властивостей зазначеного вище продукту. Необхідно знайти новий поліморф, який має більш високу поліморфну чистоту та кращу хімічну стабільність. Стислий опис винаходу Даний винахід призначений для забезпечення стабільної кристалічної форми SHR1258 дималеату та способу його одержання. Винахідник протестував низку продуктів кристалізації SHR1258 дималеату, отриманих за різних умов за допомогою рентгенівської дифракції та ДСК аналізу. Результати доводять, що придатна кристалічна форма SHR1258 дималеату, що має назву форма I кристалу, може бути одержана за нормальних умов кристалізації. ДСК графіки даної форми I кристалу SHR1258 дималеату демонструють чіткій пік поглинання злиття при 130C. Рентгенівські дифрактограми наведено на Фігурі 1, де використано Cu-Kα випромінювання для отримання рентгенівських дифрактограм, представлених 2θ кутами та міжплощинною відстанню у кристалі (d значення), де характеристичні піки знаходяться при 6,28(14,06), 6,74(13,10), 10,60(8,34), 11,58(7,64), 13,50(6,55), 14,90(5,94),15,80(5,60), 18,26(4,85), 20,66(4,30), 21,14(4,20), 22,96(3,87), 24,34(3,65), 25,54(3,49), 26,12(3,41). 1 UA 113658 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У способі одержання кристалічної форми I за даним винаходом відсутні спеціальні обмеження для існуючої форми SHR1258 дималеату як вихідного матеріалу, та вона може бути використана у будь-якій кристалічній формі або аморфній формі. Спосіб одержання форми I кристалу SHR1258 дималеату за даним винаходом включає такі стадії: При використанні органічних розчинників, переважним є полярний органічний розчинник з меншою кількістю атомів вуглецю та вищою леткістю, що може бути використаний як розчинник кристалізації, такий як спирти, кетони, естери, або їх суміш; ізопропіловий спирт, ацетон, етанол, етилацетат, тетрагідрофуран або їх суміш більш переважні для рекристалізації SHR1258 дималеату. Розчинник для кристалізації може бути одним розчинником або сумішшю розчинників, що містить розчинники, зазначені нижче. Конкретно, спосіб одержання форми I кристалу SHR1258 дималеату включає такі стадії: (1) Суміш SHR1258 та малеїнової кислоти або SHR1258 твердого дималеату розчиняють у достатній кількості органічних розчинників, та одержаний розчинник охолоджують до кристалізації. (2) Кристал фільтрують, промивають та висушують. У переважному втіленні даного винаходу органічний розчинник на стадії 1 обирають з одного чи більше розчинників-спиртів, що містять не більш ніж три атоми вуглецю, ацетону, етилових естерів, тетрагідрофурану, переважно етанолу, ізопропілового спирту, тетрагідрофурану. Додатково, найбільш переважним єдиним розчинником є ізопропіловий спирт. В іншому втіленні даного винаходу переважною сумішшю розчинників є суміш етанолу та тетрагідрофурану. Їх співвідношення не обмежено, а об’ємне співвідношення 1:1 переважне у втіленні даного винаходу. Процес рекристалізації не обмежується та може біти здійснений за допомогою традиційного у цій галузі процесу рекристалізації, наприклад, може бути так, що SHR1258 дималеат нагрівають для розчинення в органічному розчиннику, а потім розчин поступово охолоджують та залишають кристалізуватися, або розчин перемішують для кристалізації; після кристалізації отриманий у результаті осад збирають фільтрацією та потім висушують. Зокрема, повний процес перетворення необхідний для утворення стабільної кристалічної форми, а аморфна структура або кристали з нижчою чистотою будуть легко утворюватися, коли процес кристалізації надто швидкий, що зазвичай викликається наднасиченим розчином. Збільшення об’єму розчинника або зниження швидкості кристалізації може сприяти утворенню стабільної кристалічної форми з високою чистотою. Кристал, отриманий фільтрацією, завжди висушують у вакуумі при приблизно 30~100C, переважно 40~60C, для видалення розчинника рекристалізації. Отримана у результаті форма SHR1258 дималеату була визначена за допомогою графіків ДСК та рентгенівських дифрактограм. У той же час також був визначений залишковий розчинник. Кристал SHR1258 дималеат, отриманий відповідно до даного способу, не містив, або містив невелику кількість залишкового розчинника, що задовольняє вимогам національної фармакопеї для залишкового розчинника лікарських засобів. Таким чином кристал за даним винаходом може бути належним чином використаний як фармацевтично активний інгредієнт. Результати дослідження демонструють, що стабільність форми I кристалу SHR1258 дималеату, одержаної у даному винаході, значно вища, ніж у аморфної форми за умов високої температури та високої вологості. Додатково, кристал форми I має добру стабільність за умов розмелювання, пресування та нагрівання, що може задовольнити вимоги щодо виробництва, транспортування та зберігання медикаментів. Спосіб одержання є стабільним та відтворюваним, що особливо підходить для промислового виробництва. Стислий опис креслень На Фіг. 1 наведено рентгенівську дифрактограму для форми I кристалу SHR1258 дималеату. На Фіг. 2 наведено графік диференційної скануючої калориметрії для форми I кристалу SHR1258 дималеату. На Фіг. 3 наведено рентгенівську дифрактограму для аморфної форми SHR1258 дималеату. На Фіг. 4 наведено графік диференційної скануючої калориметрії для аморфної форми SHR1258 дималеату. Детальний опис винаходу Даний винахід детально проілюстровано наступними прикладами, які жодним чином не повинні тлумачитися як такі, що обмежують обсяг даного винаходу. Експериментальні прилади 1. Термічний аналіз (ДСК) 2 UA 113658 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Тип приладу: система термічного аналізу серія Perkin-Elmer Pyris 1 Газ пропускання: азот Швидкість нагрівання: 10,0C/хв Діапазон температур: 50-300 C 2. Спектр рентгенівської дифракції Тип приладу: D/ рентгенівський дифрактометр Max-RA Japan rigaku Випромінювання: монохромне Cu- K випромінювання (=1,5418 Å) o Режим сканування: /2, кутова розгортка 2-40 Напруга: 40KV, електричний струм:40мA Приклад 1 1,0 грам SHR1258 (отриманий відповідно до патенту WO2011029265) та 0,4 грам малеїнової кислоти розчиняли у 25 мл ізопропілового спирту нагріванням. Тверда речовина була присутня при кип'ятінні зі зворотним холодильником. Після усунення нагріву, отриману суміш перемішували для осадження. Отриманий у результаті осад збирали фільтруванням та потім висушували при 45 C у вакуумі протягом носі з отриманням 0,85 грам кристалу SHR1258 дималеату. Вихід: 60%. Рентгенівська дифрактограма показана на Фігурі 1 на якій характеристичні піки розташовані при 6,28 (14,06), 6,74(13,10),10,60(8,34), 11,58(7,64), 13,50(6,55), 14,90(5,94), 15,80(5,60), 18,26 (4,85), 20,66 (4,30), 21,14 (4,20), 22,96(3,87), 24,34 (3,65), 25,54 (3,49), 26,12 (3,41). ДСК графік наведено на Фіг. 2, де гострий пік поглинання при розплавленні знаходиться при 131,429C. Кристал був визначений як кристал форми I. Приклад 2 1,0 грам SHR1258 та 0,4 грам малеїнової кислоти розчиняли у 20 мл етанолу шляхом нагрівання. Після усунення нагріву суміш перемішували усю ніч (тверда речовина, яку відділяли, була липка). Наступного дня до суміші додавали 30 мл діетилового етеру та перемішували. Отриманий у результаті осад збирали фільтруванням, промивали діетиловим етером та потім висушували з одержанням 1,03 грам жовтої твердої речовини. Вихід: 73,5%. Рентгенівська дифрактограма цієї твердої речовини наведена на Фіг. 3, на якій відсутні характеристичні піки. ДСК графік показано на Фіг. 4, без піку поглинання при розплавленні нижче 170C. Було визначено, що продукт був аморфною формою. Приклад 3 1,0 грам SHR1258 дималеату (отриманого відповідно до прикладу 2) додавали до 5 мл метанолу та суміш нагрівали до конденсації до отримання розчину. Розчин відділяли випаровуванням у вакуумі та додавали 20 мл ізопропілового спирту. Тверду речовину повністю розчиняли нагріванням та деяка кількість твердої речовини була присутня при кип’ятінні зі зворотним холодильником. Після усунення нагріву суміш залишали кристалізуватися. Осад збирали фільтруванням та висушували з отриманням 0,80 грам твердої речовини. Вихід: 80,0%. Вона була визначена як форма I кристалу SHR1258 дималеату після порівняння рентгенівських дифрактограм та графіків ДСК. Приклад 4 2,0 грам SHR1258 та 0,8 грам малеїнової кислоти нагрівали для розчинення у 26 мл суміші етанолу та тетрагідрофурану (при об’ємному співвідношення 1:1). Розчин перемішували на водяній бані при 45C з відділенням твердої речовини. Після усунення нагріву суміш перемішували для кристалізації. Осад збирали фільтруванням та висушували при 45C у вакуумі усю ніч з одержанням 2,3 грам кристалу. Вихід: 82,0%. Вона була визначена як форма I кристалу SHR1258 дималеату після порівняння рентгенівських дифрактограм та графіків. Приклад 5 1,0 грам SHR1258 твердого дималеату (отриманого відповідно до прикладу 2) додавали у 5 мл води. Суміш нагрівали до конденсації до отримання розчину. Розчин перемішували до осадження та наступного дня одержували липку тверду речовину. Осад збирали фільтруванням та висушували з одержанням 0,68 грам твердої речовини. Вихід: 68.3%. було визначено як аморфна форма SHR1258 дималеату зі рентгенівських дифрактограм та ДСК графіків. Приклад 6 Форма I кристалу SHR1258 дималеату, отримана у прикладі 1, та аморфна форма SHR1258 дималеату, отримана у прикладі 2, була поміщена на відкрите повітря для тестування стабільності за різних умов, включаючи освітлення (4500 люкс), нагрів (60C), вологість (RH90%). Тривалість дослідження становить п’ять та десять днів та результати ВЕРХ аналізу показані у таблиці 1. 3 UA 113658 C2 Таблиця 1 Порівняння стабільності форми I кристалу та аморфної форми кристалу SHR1258 дималеату Номер партії Форма I кристал Аморфна форма 5 10 Розчинник Час (денний) 0 Ізопропіловий 5 спирт 10 0 95% етиловий 5 спирт 10 Світло 99,65% 98,20% 97,91% 98,41% 96,96% 96,91% 60 C 99,65% 98,13% 96,86% 98,41% 95,24% 93,71% ВВ90% 99,65% 98,35% 98,35% 98,41% 96,95% 96,31% Форма I кристалу SHR1258 дималеату та аморфна форма SHR1258 дималеату були поміщені на відкрите повітря за різних умов, включаючи освітлення, нагрів та вологість. Результати демонструють, що стабільність форми I кристалу SHR1258 дималеату та аморфної форми SHR1258 дималеату є однаковими у світлі без статистично значущого відхилення. Форма I кристалу SHR1258 дималеату більш стабільна, ніж аморфний SHR1258 дималеат за умов високої температури та високої вологості. Приклад 7 Форму I кристалу SHR1258 дималеату, одержану у прикладі 1, розмелювали, нагрівали та пресували, потім аналізували за допомогою рентгенівської дифракції та ДСК проб. Результати демонструють, що кристал стабільний, дані наведено у Таблиці 2. Таблиця 2 Номер партії Експеримент 7.1 S0915100402G Експеримент 7.2 S0915100402H Експеримент 7.3 S0915100402P Процес Процес аналізу Кристал 1,0 грам форми I кристалу Розмелювання SHR1258 дималеату Форма I протягом 10 хвилин розмелювали протягом 10 у ступці в атмосфері азоту. 1,0 грам форми I кристалу Нагрівання при 80C SHR1258 дималеату Форма I розпилювали та нагрівали протягом 3 годин 80C протягом 3 годин Пресування форми I Пресування кристалу SHR1258 Форма I дималеату на фрагменти ДСК ДСК пік: 130,716 C ДСК пік: 133,588 C ДСК пік: 131,726 C 15 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 20 25 30 1. Кристалічна форма І дималеату (R,Е)-N-(4-(3-хлоро-4-(піридин-2-ілметокси)-феніламіно)-3ціано-7-етоксихінолін-6-іл)-3-(1-метилпіролідин-2-іл)акриламіду, яка відрізняється тим, що використано Cu-K-випромінювання з одержанням рентгенівської дифрактограми, представленої 2 кутами та міжплощинними відстанями у кристалі, де кристал має рентгенівську дифрактограму, наведену на фіг. 1, на якій характеристичні піки розташовані при 6,28 (14,06), 6,74 (13,10), 10,60 (8,34), 11,58 (7,64), 13,50 (6,55), 14,90 (5,94), 15,80 (5,60), 18,26 (4,85), 20,66 (4,30), 21,14 (4,20), 22,96 (3,87), 24,34 (3,65), 25,54 (3,49) та 26,12 (3,41). 2. Спосіб одержання кристалічної форми І дималеату (R,Е)-N-(4-(3-хлоро-4-(піридин-2ілметокси)-феніламіно)-3-ціано-7-етоксихінолін-6-іл)-3-(1-метилпіролідин-2-іл)акриламіду за п. 1, який відрізняється тим, що включає такі стадії: 1) суміш будь-якої кристалічної форми або аморфної форми (R,E)-N-(4-(3-хлоро-4-(піридин-2ілметокси)-феніламіно)-3-ціано-7-етоксихінолін-6-іл)-3-(1-метилпіролідин-2-іл)акріламіду та малеїнової кислоти, або твердої форми будь-якої кристалічної форми або аморфної форми дималеату (R,Е)-N-(4-(3-хлоро-4-(піридин-2-ілметокси)-феніламіно)-3-ціано-7-етоксихінолін-6іл)-3-(1-піролідин-2-іл)-акриламіду нагрівають з розчиненням у достатній кількості органічного розчинника, а потім охолоджують до кристалізації; зазначений органічний розчинник являє собою один чи більше з розчинників, вибраних зі спирту, що містить не більш ніж три атоми 4 UA 113658 C2 5 10 15 вуглецю, ацетону, етилацетату, тетрагідрофурану, переважно етанолу, ізопропілового спирту, тетрагідрофурану; 2) кристал фільтрують, промивають та висушують. 3. Спосіб за п. 2, який відрізняється тим, що органічний розчинник на стадії 1) являє собою ізопропіловий спирт. 4. Спосіб за п. 2, який відрізняється тим, що органічний розчинник на стадії 1) являє собою суміш розчинників етанолу та тетрагідрофурану. 5. Фармацевтична композиція, що містить кристалічну форму І дималеату (R,Е)-N-(4-(3-хлоро-4(піридин-2-ілметокси)-феніламіно)-3-ціано-7-етоксихінолін-6-іл)-3-(1-метилпіролідин-2іл)акриламіду відповідно до п. 1 та фармацевтично придатний носій. 6. Застосування кристалічної форми І за п. 1 або фармацевтичної композиції за п. 5 при одержанні медикаменту для лікування хвороби, пов'язаної з протеїнкіназою, де зазначену протеїнкіназу вибирають з EGFR протеїнтирозинкіназ або HER-2 рецептора протеїнтирозинкіназ. 7. Застосування форми І кристала за п. 1 або фармацевтичної композиції за п. 5 при одержанні медикаменту для лікування ракового захворювання, де зазначене ракове захворювання являє собою рак легенів, рак молочної залози, плоскоклітинну карциному або рак шлунка. 5 UA 113658 C2 6 UA 113658 C2 7 UA 113658 C2 8 UA 113658 C2 Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 9