Кристалічна форма диметоксидоцетакселу і способи її одержання

Реферат: Безводна форма D диметоксидоцетакселу, тобто (2R,3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2гідрокси-3-фенілпропіонату 4-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10βдиметоксі-9-оксо-такс-11-ен-13α-ілу і способи її одержання. UA 105896 C2 (12) UA 105896 C2 UA 105896 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Даний винахід стосується кристалічних форм диметоксидоцетакселу або (2R, 3S)-3-третбутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксотакс-11-ен-13α-ілу і способів їх одержання. (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонат 4-αацетокси-2αбензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксотакс-11-ен-13α-ілу виявляє помітні протиракові і протилейкозні властивості. (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонат 4-αацетокси-2αбензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксотакс-11-ен-13α-ілу одержують за способом, який описаний більш конкретно в міжнародній заявці PCT WO 96/30355 або в міжнародній заявці PCT WO 99/25704. У відповідності зі способом, описаним в цих заявках, продукт не є кристалічним і не охарактеризований. Було виявлено, що ацетоновий сольват (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9оксотакс-11-ен-13α-ілу (званий формою А) був відмінно визначений і охарактеризований в патенті, опублікованому під номером WO 2005/028462. Даний винахід стосується нових кристалічних форм, за винятком ацетонату, єдиної відомої кристалічної форми на сьогоднішній день. Відповідно до даного винаходу, деякі безводні форми, деякі етанольні сольвати або гетеросольвати і гідратовані форми відмінно охарактеризовані з точки зору їх фізичної і хімічної структур. Відповідно до винаходу, серед безводних форм (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2гідрокси-3-фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10βдиметоксі-9-оксотакс-11-ен-13α-ілу були ідентифіковані п'ять різних форм, серед етанольних сольватів або гетеросольватів (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9оксотакс-11-ен-13α-ілу були ідентифіковані чотири різні форми, (2R, 3S)-3-третбутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксотакс-11-ен-13α-ілу були ідентифіковані дві різні форми. Були одержані п'ять ідентифікованих безводних форм у відповідності з наступними способами: - Безводна форма В за способом, який полягає в нагріванні до 100-110 °C у вакуумі або при продуванні азотом ацетонової форми або форми А, одержаної відповідно до патенту, згаданого вище. Переважно, щоб ця обробка проводилася протягом щонайменше 9 годин до охолоджування до кімнатної температури, щоб не викликати хімічне розкладання. По даним ДСК, її точка плавлення становить близько 150 °C. У порошковій рентгенограмі безводної форми присутні характеристичні лінії 7,3, 8,1, 9,8, 10,4, 11,1, 12,7, 13,1, 14,3, 15,4 і 15,9±0,2 градуси кута 2-Тета. - Безводна форма С одержана дозріванням ацетонового сольвату форми А або безводної форми В у воді з подальшим сушінням до приблизно 50 °C і утриманням при відносній вологості від 0 до 5 % при кімнатній температурі. По даним ДСК, її точка плавлення становить близько 146 °C. У порошковій рентгенограмі безводної форми С присутні характеристичні лінії 4,3, 6,8, 7,4, 8,7, 10,1, 11,1, 11,9, 12,3, 12,6 і 13,1±0,2 градуси кута 2-Тета. Серед різних безводних форм вона є найменше стабільною з всіх форм даного винаходу. Вона перетворюється в гідратовану форму при відносній вологості більше 5 %. - Безводна форма D одержана відповідно до першого способу, кристалізації форми А в маслі (зокрема, Mygliol) з подальшим промиванням алканом, наприклад, гептаном; другий спосіб одержання полягає в кристалізації (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9оксотакс-11-ен-13α-ілу протягом 48 годин розчину в суміші полісорбату 80, рН 3,5, етанолу і води (переважно, суміш 25/25/50). По даним ДСК, її точка плавлення становить близько 175 °C (дивитися фіг. 1) і виявляється найбільшою серед всіх виділених безводних форм. У порошковій рентгенограмі безводної форми D (дивитися фіг. 2) присутні характеристичні лінії 3,9, 7,7, 7,8, 7,9, 8,6, 9,7, 10,6, 10,8, 11,1 і 12,3±0,2 градуси кута 2-Тета. У спектрі ІЧ-Фур'є безводної форми D присутні характеристичні смуги, розташовані при 979, 1072, 1096, 1249, 1488, 1716, 1747, -1 3436±1 см (дивіться фіг. 3). Серед всіх описаних форм даного винаходу ця безводна форма є найбільш стабільною. - Безводна форма Е одержана дозріванням ацетонатної форми або форми А в етанолі таким чином, щоб в проміжку утворилася етанольна форма, яка потім десольватується продуванням азоту або нагріванням протягом 2 годин розчину при 100 °C. По даним ДСК, її точка плавлення становить близько 157 °C. У порошковій рентгенограмі безводної форми Е 1 UA 105896 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 присутні характеристичні лінії 7,1, 8,1, 8,9, 10,2, 10,8, 12,5, 12,7, 13,2, 13,4 і 13,9±0,2 градуси кута 2-Тета. - Безводна форма F одержана десольватацією етанольно-водного гетеросольвату при 120 °C в атмосфері азоту протягом 24 годин, потім утриманням в сухому середовищі при відносній вологості від 0 % при кімнатній температурі. По даним ДСК, її точка плавлення становить близько 148 °C. У порошковій рентгенограмі безводної форми F присутні характеристичні лінії 4,4, 7,2, 8,2, 8,8, 9,6, 10,2, 10,9, 11,2, 12,1 і 12,3±0,2 градуси кута 2-Тета. Були ідентифіковані чотири кристалічні форми в формі сольвату або гетеросольвату з етанолом: - Етанольна форма В одержана при кімнатній температурі утримуванням безводної форми В в насиченій парами етанолу атмосфері. У порошковій рентгенограмі етанольної форми В присутні характеристичні лінії 7,3, 7,8, 8,8, 10,2, 12,6, 12,9, 13,4, 14,2, 14,7 і 15,1±0,2 градуси кута 2-Тета. - Етанольна форма D одержана при кімнатній температурі утримуванням безводної форми D в насиченій парами етанолу атмосфері. У порошковій рентгенограмі етанольної форми D (дивіться фіг. 4) присутні характеристичні лінії 3,8, 7,5, 7,7, 8,4, 9,4, 10,3, 10,5, 11,1, 11,5 і 11,9±0,2 градуси кута 2-Тета. - Етанольна форма Е одержана при кімнатній температурі визріванням ацетонатної безводної форми А в етанолі. У порошковій рентгенограмі етанольної форми Е (дивитися фіг. 5) присутні характеристичні лінії 7,1, 8,1, 8,8, 10,2, 10,7, 12,5, 13,2, 13,4, 13,9 і 14,2±0,2 градуси кута 2-Тета. - Етанольно-водна гетеросольватна форма F одержана утримуванням форми В в мінімальній кількості етанолу із зворотним холодильником, повільним охолоджуванням і виділенням при кімнатних температурі і відносній вологості. У порошковій рентгенограмі етанольно-водної гетеросольватної форми F присутні характеристичні лінії 4,4, 7,2, 8,2, 8,3, 8,8, 9,6, 10,3, 10,9, 11,2 і 12,2±0,2 градуси кута 2-Тета. Були ідентифіковані дві кристалічні форми в формі гідрату: - Гідратовані форми С одержані при кімнатній температурі утримуванням безводної форми С в атмосфері з щонайменше 10 % відносної вологості. У порошковій рентгенограмі моногідратної форми С присутні характеристичні лінії 4,3, 6,8, 7,4, 8,6, 10,1, 11,1, 11,9, 12,2, 12,6 і 13,3±0,2 градуси кута 2-Тета. - Дигідратована форма С одержана при кімнатній температурі утримуванням безводної форми С в атмосфері з щонайменше 60 % відносної вологості. У порошковій рентгенограмі дигідратованої форми С присутні характеристичні лінії 4,2, 6,9, 7,5, 8,4, 9,9, 10,9, 11,7, 12,3, 12,6 і 13,2±0,2 градуси кута 2-Тета. Інші сольвати, не етанольні, форми В одержані також, зокрема, з наступними розчинниками: дихлорметан, діізопропіловий ефір, н-пропанол, ізопропанол, толуол, метилізобутилкетон, тетрагідрофуран, диметилформамід, етилацетат. Даний винахід буде більш повно описаний наступними прикладами, які не повинні розглядатися як обмеження винаходу. Експериментальні умови аналізу: Диференціальна скануюча калориметрія (ДСК): Вимірювання проводилися на термічному аналізаторі DSC2010 T.A. Instruments. Зразок нагрівали по програмі температури від 25 °C до 225 °C з швидкістю нагрівання 5 °C/хв. Продукт вміщували в заправлену алюмінієву капсулу, і кількість продукту, що аналізується, становила від 2 до 5 мг. Використовували обдування азотом камери пічки з постійною швидкістю 55 мл/хв. Порошкова рентгенографія (ПР): Аналізи проводили на дифрактометрі Panalytical X'Pert Pro, що представляє схему на відображення з фокусуючою геометрією типу Брегга-Брентано (θ-2θ). Продукт, що аналізується, розміщували на тонкому шарі кремнієвого монокристалу. Трубка з мідним антикатодом (45 кВ/40 мА) випромінювала падаюче CuKα1 випромінювання (λ=1,5406Å). Пучок колімували за допомогою щілин Соллера, які поліпшують паралельність, і щілин змінної величини, які обмежують дифузію. Пристрій доповнював детектор X'Celerator. Використовували наступні установки реєстрації спектрів: розгортка від 2 до 30 градусів кута 2θ, час рахунку від 100 до 500 секунд на крок з кроком 0,017°. Інфрачервона спектроскопія з Фур'є-перетворенням (ІЧ-Фур'є): Тверді лусочки аналізували за допомогою спектрометра Nicolet типу Nexus. Аналіз здійснювали в режимі порушеного повного відображення (ATR) за допомогою приставки Smart Orbit виробництва Thermo (приставка ПОО моновідбиття від кристала алмаза). Спектральний -1 -1 діапазон становив від 4000 до 400 см з розділенням см 2 см і числом накопичення сканів 20. 2 UA 105896 C2 5 10 15 20 Приклад 1 Проводили дві спроби розчинити приблизно 550 мг (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2гідрокси-3-фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10βдиметоксі-9-оксотакс-11-ен-13α-ілу в 14 г Miglyol 812 Neutraloil Sasol. Перемішували на магнітній мішалці при 500 обертах в хвилину протягом 24 годин при кімнатній температурі. Через тиждень зразки відфільтровувати у вакуумі і промивали гептаном. Кожний зразок аналізували методом порошкової рентгенографії для підтвердження одержаної форми. Після фільтрації одержували від 300 до 350 мг безводної форми D. Приклад 2 Розчиняли приблизно 3 г (2R, 3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонат 4-α-ацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1-β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксотакс-11-ен-13αілу в суміші 50 мл етанолу і 50 мл Polysorbat 80 (рН 3,5). До попередньої суміші додавали 100 мл води, і одержану суміш гомогенізували. Через 48 годин зберігання при кімнатній температурі, з'являлися кристали безводної форми D. Кількість виділеного фільтрацією кристалічного продукту становило приблизно 2,45 г. Порівняльне вивчення стабільності проводилося між формою А, сольватом з ацетоном, і безводною формою D. Порівняння дифрактограм порошкової рентгенографії, здійснене для форм А і D відразу після одержання і після витримування протягом місяця при 40 °C, привело до наступних результатів: Форма А: часткова десольватація, що приводить до одержання суміші форми А, сольвату ацетону, і безводної В. Форма D: після витримування протягом місяця при 40 °C, ніякої зміни виявлено не було. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 25 30 35 1. Безводна форма D (2R,3S)-3-трет-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонату 4αацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксо-такс-11-ен-13α-ілу, яка відрізняється тим, що в порошковій рентгенограмі присутні характеристичні лінії 3,9, 7,7, 7,8, 7,9, 8,6, 9,7, 10,6, 10,8, 11,1 і 12,3±0,2 градуса кута 2-Тета. 2. Спосіб одержання безводної форми D за п. 1 визріванням при кімнатній температурі форми А, сольвату з ацетоном, в етанолі і сушінням в азоті або у вакуумі. 3. Спосіб одержання безводної форми D за п. 1 кристалізацією при кімнатній температурі форми А, сольвату з ацетоном, в маслі з подальшим промиванням алканом. 4. Спосіб одержання безводної форми D за п. 1 кристалізацією протягом 48 годин при кімнатній температурі розчину (2R,3S)-3-тpeт-бутоксикарбоніламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонату 4αацетокси-2α-бензоїлоксі-5β,20-епокси-1β-гідрокси-7β,10β-диметоксі-9-оксо-такс-11-ен-13α-ілу в суміші полісорбату 80 (рН 3,5), етанолу і води. 5. Спосіб за п. 4, де співвідношення в суміші полісорбату 80 (рН 3,5), етанолу і води становить 25:25:50. 40 3 UA 105896 C2 4 UA 105896 C2 Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5