Лікарський засіб, що має властивості інгібітора ендотеліну

1 Лекарственное средство, обладающее свойствами ингибитора рецепторов эндотелина, включающее активное вещество, отличающееся тем, что в качестве активного вещества включает производное карбоновой кислоты общей формулы (I) R" 4 R N b X R -Z-C-CH-Y N R в которой R означает формильную группу, карбоксильную группу или легко гидролизующийся до карбоксильной группы остаток, R2 и R3 означают алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, X означает атом азота или группу СН, R4 означает фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы, включающей атом галогена, нитрогруппу, алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, или пяти- или шести членный гетероароматический радикал, содержащий от одного до трех атомов азота и/ или атом серы или кислорода, который может быть замещен 1-4 атомами галогена и/или 1-2 остатками, выбранными из группы, включающий алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, гал о ген ал ко кс ил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкилтио- группу с числом атомов углерода от одного до четырех, фенил, феноксигруппу или фенилкарбонил, причем фенильные остатки в свою очередь могут быть замещены от одного до пяти атомами галогена и/или от одного до трех остатками, выбранными из группы, включающей алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, гал о ген ал ко кс ил с числом атомов углерода от одного до четырех и/или алкилтиольную группу с числом атомов углерода от одного до четырех, R5 означает атом водорода или алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, R6 означает алкил с числом атомов углерода от одного до восьми, незамещенный или замещенный фенилом, замещенным один или несколько раз атомом галогена или галогеналкилом с числом атомов углерода от одного до четырех, или фенил незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы, включающей атом галогена, нитрогруппу, гидроксил, алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкилтиогруппу с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех и ал кокси карбон ил с числом атомов углерода от одного до четырех, Y означает атом серы или кислорода, Z означает атом кислорода О го 44734 Настоящее изобретение относится к лекарственным средствам на основе производных карбоновои кислоты, обладающим свойствами ингибитора рецептора эндотелина Эндотелии представляет собой построенный из 21 аминокислоты пептид, который образуется в эндотелии кровеносных сосудов и секретируется им Эндотелии существует в трех изоформах ЕТ1, ЕТ-2 и ЕТ-3 Далее термин "эндотелии" или "ЕТ" будет означать одну или все изоформы эндотелина Эндотелии представляет собой мощный вазоконстриктор, оказывающий сильный эффект на тонус сосудов Известно, что связанное с ним сужение сосудов обусловлено взаимодействием эндотелина с его рецептором (Nature, 332, 411 415 1988, FEBS Letters, 231, 440 - 444, 1988 и Вюchem Biophys Res Comm , 154, 868 - 875, 1988) Повышенное или отклоняющееся от нормы выделение эндотелина вызывает длительное сужение периферических и почечных сосудов, а также кровеносных сосудов центральной нервной системы, что приводит к болезненным состояниям Как сообщается в литературе, повышенный уровень эндотелина обнаруживается в плазме крови у пациентов с гипертонией, острым инфарктом миокарда, легочной гипертонией, синдромом Рейно, атеросклерозом, а также в дыхательных путях астматиков (Japan J Hypertension, 12, 79 (1989), J Vascutar Med Biotogy 2, 207 (1990), J Am Med Assotiation 264, 2868(1990)) В соответствии с этим вещества, которые избирательно ингибируют связывание эндотелина с рецептором, должны противодействовать названным выше различным физиологическим эффектам эндотелина и поэтому представляют собой ценные фармакологические препараты Известно лекарственное средство, обладающее свойствами ингибитора рецепторов эндотелина, включающее производные (1,4хинолинокси)-метилбифенил карбоновои кислоты в качестве активного вещества (см заявку ЕР № 0 498 723 А1, кл C07D 215/12, А61К 31/395, 12 08 1992г) Задачей изобретения является разработка нового лекарственного средства, обладающего свойствами ингибитора рецепторов эндотелина, включающего активное вещество на основе производных карбоновои кислоты Поставленная задача решается предлагаемым лекарственным средством, обладающим свойствами ингибитора рецепторов эндотелина, которое в качестве активного вещества включает производное карбоновои кислоты общей формулы (I) X означает атом азота или группу СН, R4 означает фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы, включающей атом галогена, нитрогруппу, алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, или пяти- или шестичленный гетероароматический радикал, содержащий от одного до трех атомов азота и/или атом серы или кислорода, который может быть замещен 1 - 4 атомами галогена и/или 1 - 2 остатками, выбранными из группы, включающий алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, гал о ген ал ко кс ил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкилтиогруппу с числом атомов углерода от одного до четырех, фенил, феноксигруппу или фен ил карбон ил, причем фенильные остатки в свою очередь могут быть замещены от одного до пяти атомами галогена и/или от одного до трех остатками, выбранными из группы, включающей алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, гал о ген ал ко кс ил с числом атомов углерода от одного до четырех и/или алкилтиольную группу с числом атомов углерода от одного до четырех, R означает атом водорода или алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, R6 означает алкил с числом атомов углерода от одного до восьми, незамещенный или замещенный фенилом, замещенным один или несколько раз атомом галогена или галогеналкилом с числом атомов углерода от одного до четырех, или фенил незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы, включающей атом галогена, нитрогруппу, гидроксил, алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкилтиогруппу с 1 - 4 атомами углерода, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех и ал кокси карбон ил с числом атомов углерода от одного до четырех, Y означает атом серы или кислорода, Z означает атом кислорода Получение соответствующих изобретению соединений исходит из эпоксидов IV, которые получают общеизвестными способами, например, как это описано в J March, Advanced Organic Chemistry, 2 изд , 1983, с 862 и с 750, из альдегидов или или же из олефинов III Г"1 — V R 5 N в которой R означает формильную группу, карбоксильную группу или легко гидролизующиися до карбоксильной группы остаток, R и R означают алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, Производные карбоновых кислот общей формулы VI могут быть получены по реакции эпокси 44734 дов общей формулы IV (в которой, например, R 10 означает COOR ) со спиртами или тиолами об6 щей формулы V, в которых R и Z имеют приведенное в пункте 1 формулы изобретения значение IV + R 6 ZH RO— т — ґ* /""її R5 R V ґ\хх VI Для этого соединения общей формулы IV нагревают с соединениями формулы V, которые берут в избытке, например, от 1,2 до 7, предпочтительно от 2 до 5 мольных эквивалентов, при температуре 50 - 200°С, предпочтительно при 80 150°С Реакция может протекать и в присутствии разбавителя Для этой цели могут применяться различные инертные к используемым реагентам растворители Примерами таких растворителей или, соответственно, разбавителей служат вода, алифатические, эпициклические и ароматические углеводороды, которые могут быть и хлорированными, как, например, гексан, циклогексан, петролейный эфир, лигроин, бензол, толуол, ксилол, метиленхлорид, хлороформ, четыреххлористый углерод, этиленхлорид и трихлорэтилен, простые эфиры, как, например, диизопропиловый эфир, дибутиловый эфир, пропиленоксид, диоксан и тетрагидрофуран, кетоны, как, например, ацетон, метилэтил кетон, метилизопропилкетон и метилизобутилкетон, нитрилы, как, например, ацетонитрил и пропионитрил, спирты, как, например, метанол, этанол, изопропанол, бутанол и этиленгликоль, сложные эфиры, как, например, этилацетат и амилацетат, амиды кислот, как, например, диметилформамид и диметилацетамид, сульфоксиды и сульфоны, как, например, диметилсульфоксид и сульфолан, и основания, как, например, пиридин Реакция при этом проводится предпочтительно в температурном интервале между 0°С и температурой кипения растворителя или смеси растворителей Определенные преимущества могут быть получены в присутствии катализатора реакции В роли катализаторов при этом могут выступать сильные органические и неорганические кислоты, а также кислоты Льюиса Примерами этому могут служить среди прочих серная кислота, соляная кислота, три фтору ксусная кислота, эфират трифторида бора и алкоголяты титана (IV) Соответствующие изобретению соединения, в которых Y означает атом кислорода и остальные заместители имеют приведенное для общей формулы I значение, могут быть получены, например, таким образом, что производные карбоновых кислот общей формулы V), в которой заместители имеют приведенное выше значение, вводят в реакцию с соединениями общей формулы VII, R2 VI + 15 // VII X I п в которой R означает галоген или R16-SO2-, 6 16 причем R может означать алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех или фенил Реакция предпочтительно протекает в одном из названных выше инертных разбавителей с добавлением подходящего основания, то есть основания, которое вызывает депротонирование промежуточного продукта VI, в интервале температур от комнатной до температуры кипения растворителя В качестве основания может служить гидрид щелочного или щелочноземельного металла, например, гидрид натрия, гидрид калия или гидрид кальция, такая соль угольной кислоты, как карбонат щелочного металла, например, карбонат натрия или калия, гидроксид щелочного или щелочноземельного металла, например, гидроксид натрия или калия, металлорганическое соединение, например, бутиллитий, или же амид щелочного металла, такой как диизопропиламид лития Соответствующие изобретению соединения, в которых Y означает атом серы и остальные заместители имеют указанное для общей формулы I значение, могут быть получены, например, в результате взаимодействия производных карбоновых кислот общей формулы VIII, которые образуются по известным способам из соединений общей формулы VI и в которых заместители имеют приведенное выше значение, с соединениями общей формулы IX, в которой R2, R3 и X имеют указанное для общей формулы I значение NR 6 - Z - C - C H - O S O 2 R 1 6 4 HS—{' IX R Реакция предпочтительно протекает в одном из названных выше инертных разбавителей с добавлением подходящего основания, то есть основания, которое вызывает депротонирование промежуточного продукта IX, в интервале температур от комнатной до температуры кипения растворителя В роли основания наряду с названными выше могут также служить такие органические основания, как третичные амины, например, триэтиламин, пиридин, имидазол или диазабициклоундецен Соединения формулы I могут быть также получены исходя из соответствующих карбоновых кислот, то есть таких соединений формулы I, в которых R1 означает гидроксил, переводя их сначала обычными методами в активированную форму, например в галогенид, ангидрид или имидазолид, и уже затем вводя их в реакцию с соответствующим гидроксильным соединением HOR10 Это взаимодействие может быть проведено в обычных растворителях и оно часто нуждается в добавлении основания, в роли которого могут выступать названные выше вещества Обе эти стадии могут быть также упрощены тем, что карбоновой кислотой действуют на гидроксильное соединение в присутствии водоотнимающего средства, например, карбодиимида Кроме того, соединения формулы I могут быть 44734 также получены исходя из солей соответствующих карбоновых кислот, то есть из соединений формулы I, в которых R означает группу COR1 и R означает ОМ, где М может быть катионом щелочного металла или одним эквивалентом катиона щелочноземельного металла Эти соли могут вступать в реакцию со многими соединениями формулы R10А, где А означает обычную нуклеофильную уходящую группу, например, такие атомы галогена, как хлор, бром, иод, или же арил- или алкилсульфогруппу, которая может иметь замещение атомом галогена, алкилом или галогеналкилом, например, толуолсульфогруппа или метансульфогруппа или же другую эквивалентную уходящую группу Соединения формулы R10-A с реакционноспособным заместителем А известны или могут быть легко получены по общим известным в этой области способам Это взаимодействие может проводиться в обычных растворителях и, предпочтительно, с добавлением основания, в роли которого выступают вышеупомянутые вещества Предпочтительны производные карбоновых кислот общей формулы І, в которых R4 и R6 имеют следующее значение R4 означает пяти- или шестичленный гетероароматический радикал, такой как фурил, тиенил, пирролил, пиразолил, имидазолил, триазолил, изоксазолил, оксазолил, изотиазолил, тиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, триазинил, например, 2-фуранил, 3фуранил, 2-тиенил, 3-тиенил, 3-изоксазолил, 4изоксазолил, 5-изоксазолил, 3-изотиазолил, 4изотиазолил, 5-изотиазолил, 2-оксазолил, 4оксазолил, 5-оксазолил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, 5имидазолил, 2-пирролил, 3-пирролил, 3пиразолил, 4-пиразолил, 5-пиразолил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, окса-2,4-диазолил, окса3,4-диазолил, тиа-2,4-диазолил, тиа-3,4-диазолил и триазолил, причем гетероа ром этические фрагменты, как это указывалось выше, могут нести от одного до пяти атомов галогена, особенно фтора и хлора и/или 1 - 2 остатками, выбранными из группы, включающей алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех и алкилтиогруппу с числом атомов углерода от одного до четырех, фенил, феноксигруппу, фен ил карбон ил, при этом фенил может быть замещен от одного до пяти атомами галогена и/или от одного до трех остатками, выбранными из группы, включающей алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех и/или алкилтиольную группу с числом атомов углерода от одного до четырех, R означает алкил с числом атомов углерода от одного до восьми, незамещенный или замещенный фенилом, замещенным один или несколько раз атомом галогена или галогеналкилом с числом атомов углерода от одного до четырех, или фенил незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы, вклю 8 чающей атом галогена, нитрогруппу, гидроксил, алкил с числом атомов углерода от одного до четырех, галогеналкил с числом атомов углерода от одного до четырех, алкоксил с числом атомов углерода от одного до четырех Особенно предпочтительны соединения формулы І, в которой R2 и R3 означают метоксигруппу и X означает СН-группу Далее предпочтительны соединения формулы І, в которой R и R3 означают метоксигруппу, X означает СН-группу, Y и Z означают атом кислорода и R5 означает алкил с числом атомов углерода от одного до четырех R4 особенно предпочтительно означает возможно замещенный фенил или ароматический гетероциклический остаток, содержащий один гетероатом, такой, как фурил или тиенил R6 особенно предпочтительно означает фенил, который может быть моно-, ди- или тризамещен атомом галогена, алкилом с числом атомов углерода от одного до четырех и/или алкоксилом с числом атомов углерода от одного до четырех Лекарственное средство согласно изобретению предлагает новые терапевтические возможности для лечения гипертонии, высокого легочного давления, инфаркта миокарда, стенокардии, острой и хронической почечной недостаточности, спазма церебральных сосудов, церебральной ишемии, субарахноидальных кровоизлияний, мигрени, астмы, атеросклероза, эндотоксического шока, индуцированного эндотоксинами отказа органов, внутрисосудистой коагуляции, повторного стеноза сосудов после ангиопластики и индуцированной циклоспоринами почечной недостаточности, а также при гипертонии Активность лекарственного средства согласно изобретению иллюстрируется результатами следующих опытов Изучение связывания с рецепторами Для изучения связывания применялись клонированные человеческие клетки линии СНО с выраженными ЕТд-рецепторами и мембраны мозжечка морских свинок с содержанием ЕТврецепторов более 60% по отношению к ЕТдрецепторам Подготовка мембран Клетки линии СНО с выраженными ЕТдрецепторами выращивают в среде F12 с 10% фетальной телячьей сыворотки, 1% глютамина, ЮОЕ/мл пенициллина и 0,2% стрептомицина (фирма Джибко БРЛ, Гэйтерсберг, Мериленд, США) Через 48 часов клетки промывают солевым раствором с фосфатным буфером и в течение 5 минут инкубируют с фосфатным буфером, содержащим 0,05% трипсина После этого нейтрализуют добавлением среды F12 и отделяют клетки центрифугированием при ЗООд Для лизиса клеток осадок после центрифугирования непродолжительно промывают буфером для лизиса (5ммоль/л гидрохлорида ТРИС (трисгидроксиметиламнометан) с рН 7,4 с 10% глицерина) и после этого инкубируют при температуре 4°С в течение 30 минут при концентрации 10 клеток на 1мл лизирующего буфера Мембраны отделяют центрифугированием при 20000д в течение 10 минут и хранят осадок в жидком азоте Мозжечки морских свинок гомогенизируют в гомогенизаторе Поттера-Элвейхема и отделяют экспериментальный материал дифференцированным центрифугированием в течение 10 минут при ЮООд и повторным центрифугированием супернатанта при 20000д в течение 10 минут Опыты по изучению связывания Для опытов по связыванию с ЕТд- и ЕТврецепторами мембраны суспендируют в буфере для инкубирования (50ммоль/л гидрохлорида ТРИС, рН 7,4, с 5ммоль/л хлорида марганца, 40мкг/мл бацитрацина и 0,2% альбумина бычьей сыворотки) при концентрации 50мкг протеина на один опыт и инкубируют с исследуемым веществом или без него при 25°С с 25пкмолей [125J]-ETi (в опыте на ЕТд-рецепторы) или с 25пкмолей [125JJ-RZ3 (в опыте на ЕТв-рецепторы) Неспеци7 фическое связывание определяют с 10 моль/л ETi Через 30 минут свободный и связанный радиол иганд отделяют фильтрованием через фильтр из стекловолокна марки GF/B (Ватман, Англия) на сборнике клеток Скатрон (фирмы Скатрон, Лиер, Норвегия) и промывают фильтр ледяным трис-буфером, рН 7,4, с 0,2% альбумина бычьей сыворотки Собранную на фильтрах радиоактивность количественно определяют на жидкостном сцинтиляционном счетчике Паккард 2200 СА 44734 10 6 снова суспендируют до плотности 2 • 10 /мл В ходе опыта непрерывно регистрируют флуоресцентный сигнал от клеток плотностью 2 • 5 10 клеток на 1мл при температуре 30°С и при значении длин волн возбуждения-излучения 380/510 К клеткам добавляют исследуемые вещества и после инкубирования в течение 3 минут с ЕТ1 определяют максимальное изменение флуоресценции Отклик клеток на ЕТ1 без предварительного добавления исследуемого вещества служит контролем и приравнивается к 100% В таблице Б под номером опытов приведены определенные таким образом значения активности соединений формулы І в виде концентрации ингибирования КИ50 [моль/л] Таблица Б Соединение КИ50 [моль/л] 4 25 7,4- 10' 4 41 1,0- 10 ь Определение значения константы ингибирования (Ки) проводят методом нелинейного регрессионного анализа по программе Лиганд (LiGAND) В таблице А под номером опытов приводится определенное в виде Ки [моль/л] активность соединений формулы I Таблица А Ки [моль/л] Соединение ЕТ-А ЕТ-В 4 25 2,5- 10' 3,0- 10 ь 4 41 1,6- 10' 4,7- 10 ь Функциональная система испытания in vitro для поиска антагонистов эндотелиновых рецепторов подтипа А Эта система испытаний представляет собой основанный на клетках функциональный тест на эндотелиновые рецепторы Определенные клетки показывают при стимуляции эндотелином 1 (ЕТ1) повышение внутриклеточной концентрации ионов кальция Это повышение может быть измерено на неповрежденных клетках, заряженных чувствительными к кальцию красителями Изолированные из крыс 1-фибробласты, у которых было доказано присутствие эндогенного эндотелинового рецептора подтипа А, заряжают флуоресцентным красителем фура 2-ан следующим образом после обработки трипсином клетки снова суспендируют в буфере А (120ммоль/л хлорида натрия, 5ммоль/л хлорида калия, 1,5ммоль/л хлорида магния, 1 ммоль/л хлорида кальция, 25ммоль/л г\1-2-гидроксиэтил-пиперазин-г\Г-2этансульфокислоты, 10ммоль/л глюкозы, рН 7,4) до плотности 2 • 106/мл и инкубируют в течение 30 минут при температуре 37°С в темноте в растворе, содержащем фура 2-ан (2мкмоль/л), плюроникс F-127 (0,04%) и диметилсульфоксид (0,2%), затем клетки дважды промывают буфером А и Испытание ЕТ-антагонистов in vitro Самцов крыс линии SD весом 250 - ЗООг наркотизируют амобарбиталом, при искусственной вентиляции легких ваготомируют и деспинализируют В кровеносные сосуды Artena carotis и Vena jugulans вводят катетеры У контрольных животных внутривенное введение 1мкг/кг ЕТ1 приводит к выраженному повышению давления крови, которое сохраняется в течение длительного времени Подопытным животным за 5 минут до введения ЕТ1 вводят внутривенно исследуемое соединение (1 мл/кг) Для определения свойств эндотелиновых антагонистов сравнивают увеличение давления крови у подопытных и у контрольных животных Индуцированная эндотелином-1 скоротечная смерть мышей Принцип опыта заключается в предотвращении вызванной эндотелином скоротечной гибели мышей от остановки сердца, которая, вероятно, обусловлена сужением коронарных сосудов сердца, благодаря предварительному введению антагонистов рецепторов эндотелина После внутривенной инъекции Юнмоль/кг эндотелина в объеме 5мл на 1кг веса тела животные погибают в течение нескольких минут Летальную дозу эндотелина-1 во всех случаях проверяют на небольшой группе животных При внутривенном введении исследуемого вещества обычно уже через 5 минут следует инъекция летальной дозы эндотелина-1 При других способах введения время до инъекции эндотелина может быть более продолжительным, достигая при необходимости нескольких часов Долю выживших животных протоколируют и эти данные используют для определения эффективной дозы, которая защищает 50% животных в течение 24 часов и более от остановки сердца (ЭД50) Функциональный тест на сосудах для антагонистов рецепторов эндотелина В сегментах аорт кроликов после предварительного напряжения нагрузкой в 2г и релаксации в течение 1 часа в растворе Кребса-Гензелейта 11 44734 12 при температуре 37°С и значении рН между 7,3 и ченные таким образом лекарственные формы со+ 7,4 сначала вызывают обусловленную ионами К держат обычно активное вещество в количестве контрактуру После отмывки строят зависимость от 0,1 до 90% масс физиологического отклика от дозы эндотелина до Содержащиеся в качестве активного вещества достижения максимального эффекта в лекарственном средстве согласно изобретению соединения относятся к категории малотоксичных Потенциальные антагонисты эндотелина навеществ носят на другие препараты этих же сосудов за 15 минут до начала проявления действия эндотелина Синтез соединений общей формулы VI на кривой доза-активность Эффект эндотелина Пример 1 определяют в процентах от контрактуры, вызыМетиловый эфир 3-метокси-3-(3ваемой ионами калия У эффективных антагониметоксифенил)-2-гидроксимасляной кислоты стов эндотелина кривая зависимости отклика от В 200мл абсолютного метанола растворяют дозы эндотелина сдвигается вправо 19,5г (88ммолей) метилового эфира 3-(3метоксифенил)-2,3-эпоксимасляной кислоты и Лекарственное средство согласно изобретедобавляют 0,1мл эфирата трифторида бора Пению может вводиться обычными способами пероремешивают при комнатной температуре 12 часов рально или парентерально (подкожно, внутривени отгоняют растворитель, остаток растворяют в но, внутримышечно, внутрибрюшинно) Возможно этилацетате, промывают раствором бикарбоната также их применение в парах или в аэрозолях ченатрия и водой и сушат над сульфатом натрия рез носоглотку После отгонки растворителя остается 21,1 г слегка Дозировка зависит от возраста, состояния и желтоватого масла Выход 94% (смесь диастеревеса пациента, а также от способа применения омеров в соотношении 1 1) Как правило, суточная доза действующего начала составляет примерно от 0,5 до 50мг на кг веса Пример 2 тела при пероральном введении и примерно межМетиловый эфир З-бензилокси-З-фенил-2ду 0,1 и 10мг на кг веса тела при парентеральном гидроксимасляной кислоты введении В 150мл бензилового спирта растворяют 9,6г (50ммолей) метилового эфира З-фенил-2,3Лекарственное средство согласно изобретеэпоксимасляной кислоты и добавляют 0,5мл коннию может иметься в виде стандартных твердых центрированной серной кислоты В течение 6 чаили жидких лекарственных форм, например, в сов перемешивают при 50°С и охлаждают до комвиде таблеток, облаток, капсул, порошков, гранул, натной температуры После нейтрализации драже, свечей, растворов, мазей, кремов или аэраствором бикарбоната натрия отгоняют избыточрозолей Эти формы получают обычными спосоный бензиловый спирт в высоком вакууме и очибами При этом активное вещество может переращают остаток флэш-хроматографией на силикагебатываться вместе с обычными лекарственными ле смесью н-гексан/эти л ацетат в соотношении 9 1 вспомогательными средствами, такими, как свяПосле отгонки растворителя остается 6,5г бесзующие для таблеток, наполнители, консерванты, цветного масла разрыхрытели, средства для регуляции текучести жидких форм, смягчители, смачиватели, дисперВыход 43% (смесь диастереомеров в соотногаторы, эмульгаторы, растворители, средства для шении 3 2) пролонгирования эффекта, антиоксиданты и/или Аналогичным способом получены все привепропелленты (см Н Sucker и др Pharmazeutische денные в таблице 1 соединения Technotogie, изд Тиме, Штуттгарт, 1991) Полу Промежуточные продукты формулы VI, где R1 означает СН; Таблица 1 R°-O-C-CH-OH CGOCH № 11 12 13 14 15 16 17 18 19 1 10 1 11 1 12 1 13 1 14 1 15 RD Метил Бензил Метил Метил Метил Метил Метил Бензил Метил Бензил Бензил Бензил Метил Метил Этил R4 З-Метоксифенил Фенил 2-Фторфенил 2-Метилфенил 4-Метилфенил 4-Бромфенил 4-Хлорфенил З-Метилфенил 4-Фторфенил 4-Бромфенил 4-Хлорфенил 4-Фторфенил Фенил З-Нитрофенил 4-Метилфенил RD Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Этил Метил Метил Диа* 11 32 11 21 32 31 21 11 11 11 32 11 11 21 11 Тпл (°С) масло масло масло масло масло масло масло масло масло масло масло масло масло масло масло 44734 13 116 Бензил 1 17 Бензил 1 18 4-Фторбензил * Соотношение диастереомеров 4-Метилфенил Фенил Фенил Синтез соединений общей формулы I Пример 3 Метиловый эфир З-бензилокси-3-фенил2-(4,6-диметоксипиримидин-2-ил)-оксимасляной кислоты В 40мл диметилформамида растворяют Зг (Юммолей) метилового эфира З-бензилокси-3фенил-2-гидроксимасляной кислоты (соединение 1 2) и добавляют 0,Зг (12ммолей) гидрида натрия Перемешивают 1 час и добавляют после этого 2,2г (Юммолей) 4,6-диметокси-2-метилсульфонил пиримидина После перемешивания при комнатной температуре в течение 24 часов осторожно гидролизуют добавлением 10мл воды, с помощью уксусной кислоты устанавливают значение рН 5 и отгоняют растворитель в высоком вакууме Остаток растворяют в 100мл этилацетата, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и отгоняют растворитель К остатку добавляют 10мл метил-трет -бутилового эфира и отсасывают образовавшийся осадок После высушивания остается 2,4г белого порошка Выход 55% (смесь диастереомеров в соотношении 1 1), т пл 115 - 117°С Пример 4 3-Бензилокси-3-фенил-2-(4,6диметоксипиримидин-2-ил)-оксимасляная кислота В смеси 20мл метанола и 20мл тетрагидрофурана растворяют 1,4г (Зммоля) метилового эфира 3-бензилокси-3-фенил-2-(4,6диметоксипиримидин-2-ил)оксимасляной кислоты (пример 3) и добавляют 3,7г 10%-ного раствора гидроксида натрия В течение 6 часов перемешивают при 60°С и 12 часов при комнатной температуре, отгоняют растворитель в вакууме, растворяют остаток в 100мл воды и экстрагируют этилацетатом для удаления непрореагировавшего 14 Метил Этил Метил Продолжение таблицы 1 11 масло 10 масло 11 масло сложного эфира Затем с помощью разбавленной соляной кислоты устанавливают значение рН водной фазы 1 - 2 и экстрагируют этилацетатом После высушивания над сульфатом магния и отгонки растворителя добавляют к остатку немного ацетона и отсасывают образовавшийся осадок После высушивания остается 1,2г белого порошка Выход 88% (смесь диастереомеров в соотношении 3 2), т пл 165°С (с разложением) Пример 5 Метиловый эфир З-бензилокси-З-фенил-2[(4,6-диметоксипиримидин-2-ил)-тио]-масляной кислоты В 50мл метиленхлорида растворяют 11 г (25ммолей) метилового эфира З-бензилокси-3фенил-2-гидроксимасляной кислоты (соединение 1 2), добавляют Зг (ЗОммолей) триэтиламина и при перемешивании прибавляют по каплям 3,2г (28ммолей) хлорангидрида метансульфокислоты В течение 2 часов перемешивают при комнатной температуре, промывают водой, сушат над сульфатом магния и упаривают в вакууме Остаток растворяют в диметилформамиде и при температуре 0°С прибавляют к суспензии 12,9г (75ммолей) 4,6-диметоксипиримидин-2-тиола и 8,4г (ЮОммолей) бикарбоната натрия в 100мл диметилформамида После перемешивания в течение 2 часов при комнатной температуре и еще в течение 2 часов при 60°С выливают в 1л воды со льдом и отсасывают образующийся осадок После высушивания остается 3,2г белого порошка Выход 29% (смесь диастереомеров в соотношении 1 1) Аналогично вышеприведенным примерам получают указанные в таблице 2 соединения Таблица 2 ОСН ОСН № 21 22 23 24 25 26 27 28 210 211 112 213 214 RD Бензил Бензил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил R4 Фенил Фенил 2-Фторфенил 2-Фторфенил З-Метоксифенил З-Метоксифенил 2-Метилфенил 2-Метилфенил З-Метилфенил З-Метилфенил 4-Метилфенил 4-Метилфенил 4-Бромфенил RD Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Y О О О О О О О О О О О О О R1 ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз Диастереомеры Тпл (°С) 1 1 115-117 32 165 (разл) 1 1 126-128 2 1 185-186 1 0(5 1) 131 -132(93-95) 10 187-189 3 1 122-124 1 1 135-137 1 1 105-110 1 1 130-132 1 1 99-102 1 1 145-147 10 148-150 44734 15 215 216 217 218 219 2 20 2 21 2 22 2 23 2 24 2 25 2 26 2 27 2 28 2 29 2 30 2 31 2 32 2 33 2 34 2 35 2 36 2 37 2 38 2 39 2 40 2 41 2 42 2 43 2 44 2 45 2 46 147 2 48 2 49 150 2 51 2 52 2 53 2 54 Метил Метил Метил Бензил Изопропил Изопропил Метил Метил Бензил Бензил Метил Метил Метил Метил Бензил Бензил 4-Фторбензил 4-Фторбензил 4-Бромбензил 4-Бромбензил Бензил Бензил Бензил Бензил Бензил Бензил Бензил Бензил Этил Этил Метил Метил 4-Хлорбензил 4-Хлорбензил 2-Бутил 2-Бутил н-Пропил н-Пропил Метил Метил 2 55 Метил 2 56 Метил 2 57 2 58 2 59 2 60 2 61 2 62 2 63 2 64 2 65 2 66 2 67 2 68 4-Бромфенил 2-Пиридил 2-Пиридил 4-Хлорфенил 2-Фторфенил 2-Фторфенил 4-Фторфенил 4-Фторфенил З-Метилфенил З-Метилфенил 4-Хлорфенил 4-Хлорфенил Фенил Фенил 4-Фторфенил 4-Фторфенил Фенил Фенил Фенил Фенил 2-Фторфенил 2-Фторфенил 4-Бромфенил 4-Бромфенил 4-Метилфенил 4-Метилфенил Фенил Фенил 4-Метилфенил 4-Метилфенил 2-Фурил 2-Фурил Фенил Фенил 4-Бромфенил 4-Бромфенил 4-Фторфенил 4-Фторфенил З-Нитрофенил З-Нитрофенил 4Тр и фтор мети л фенил 4Тр и фтор мети л фенил З-Тиенил З-Тиенил Фенил Фенил Фенил Фенил З-Метоксифенил З-Метоксифенил З-Метоксифенил Фенил З-Фурил З-Фурил Метил Метил 4-Хлорбензил 4-Хлорбензил Метил Метил Бензил Бензил Бензил 2-Фенилэтил Метил Метил 32 69Тр и фтор мети л- Фенил бензил 16 Продолжение таблицы 2 189-190 масло 175-176 112-114 115-120 143-145 122-125 170-172 94-95 154-156 125-127 206 - 207 95-100 140-142 95-98 153-154 152-153 160-162 158-160 203 - 204 129-130 200 - 201 78-79 156-158 масло 158-159 110-112 92-93 117-119 масло масло масло 172-174 60-61 104-106 153-154 119-120 104-105 101 -102 165-172 Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Этил Этил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Этил Этил Метил Метил Н Н Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О он он 1 9 9 1 1 Метил О ОСНз 10 112-113 Метил О он 4 1 68-70 Н Н Метил Метил Этил Этил Метил Метил Метил Метил Н Н О О О О О О О О О О О О ОСНз он 1 1 1 1 0 1 01 13 0 1 3 1 10 0 1 10 1 1 1 1 80-82 масло 112-113 60 61 125-130 133-135 86-87 155 138-140 147-149 масло 131 -135 Метил О ОСНз 2 1 151 -152 ОСНз ONa ОСНз ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз ОСНз ОСНз ОН ОСНз ОН он он ОСНз 10 2 1 1 1 4 1 2 1 1 1 31 1 1 1 1 1 1 5 1 10 10 1 1 4 1 10 73 9 1 10 10 10 1 1 1 1 1 1 4 1 1 0 10 10 1 1 1 1 1 1 10 10 0 1 1 1 1 44734 17 32 70Тр и фтор мети лбензил 2 71 2-Фторбензол 2 72 2-Фторбензол 2 73 2-Фторбензил 2 74 З-Фторбензил 2 75 З-Фторбензил 2 76 З-Фторбензил 2 77 4-Фторбензил 18 Продолжение таблицы 2 Фенил Метил О ОН 1 1 Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил О О О О О О О ОСНз ОН ОН ОСНз ОН ONa ОСНз 2 1 1 1 4 3 1 Синтез соединений общей формулы VI Пример 6 Метиловый эфир З-фенокси-З-фенил-2гидроксимасляной кислоты Смесь 28,2г (О.Змоля) фенола и 19,2г (0,1 моля) метилового эфира З-фенил-2,3эпоксимасляной кислоты нагревают в течение 6 часов при 100°С После отгонки избыточного фенола в высоком вакууме и хроматографической очистки остатка на силикагеле смесями гексана и этилацетата получают 17,9г слегка желтоватого масла Выход 62,5% Пример 7 масло 1 0 3 1 1 1 1 170-173 160-162 138-141 81 -86 195-197 250 - 260 112-115 Метиловый эфир 3-(4-бромфенил)окси-3фенил-2-гидроксимасляной кислоты Смесь 51,9г (О.Змоля) 4-бромфенола и 19,2г (0,1 моля) метилового эфира З-фенил-2,3эпоксимасляной кислоты 8 часов перемешивают при температуре 100°С и 12 часов при комнатной температуре После отгонки избыточного фенола остаток очищают с помощью флэшхроматографии (силикагель, н-гексан/эти л ацетат 9 1) Получают 7,2г белого твердого вещества Выход 20%, т п л 133-135°С Аналогично получают приведенные в таблице 3 соединения Промежуточные продукты формулы VI, где R1 означает СНз R R o_ Таблица 3 4 о-с-сн-он R 5 COOCHi D R 31 32 33 34 35 36 37 38 39 310 Фенил 4-Бромфенил З-Фторфенил 4-Фторфенил 4-Метилфенил Фенил З-Метилфенил 2-Метилфенил 4-Изопропил-фенил Фенил 4 RD R Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил 2-Тиенил Фенил Фенил Фенил 4-Хлорфенил Синтез соединений общей формулы I Пример 8 Метиловый эфир 3-фенокси-3-фенил-2-(4,6диметоксипиримидин-2-ил)-оксимасляной кислоты В 40мл диметилформамида растворяют 4,4г (15,4ммоля) метилового эфира З-фенокси-3фенил-2-гидроксимасляной кислоты (соединение 1 1) и прибавляют 0,46г (18,4ммолей) гидрида натрия Перемешивают 1 час и добавляют 3,4г (15,4ммоля) 4,6-диметокси-2метилсульфонилпиримидина После перемешивания в течение 24 часов при комнатной температуре осторожно гидролизуют добавлением 10мл воды, с помощью ледяной уксусной кислоты устанавливают значение рН 5 и отгоняют растворитель в высоком вакууме Остаток растворяют в 100мл этилацетата, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и отгоняют растворитель К остатку добавляют 10мл метил-трет-бутилового эфира и отсасывают образовавшийся осадок По Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил т п л (°С) масло 130-133 масло масло масло масло масло масло масло масло сле высушивания остается 1,6г белого порошка Выход 24,5%, т пл 143-145°С Пример 9 3-Фенокси-3-фенил-2-(4,6диметоксипиримидин-2-ил)-оксимасляная кислота В 20мл метилового спирта и 40мл тетрагидрофурана растворяют 1,3г метилового эфира 3фенокси-3-фенил-2-(4,6-диметоксипиримидин-2ил)-оксимасляной кислоты (пример 8) и добавляют 3,7г 10%-ного раствора гидроксида натрия Перемешивают в течение 6 часов при 60°С и 12 часов при комнатной температуре, отгоняют растворитель в вакууме и растворяют остаток в 100мл воды Непрореагировавший сложный эфир экстрагируют этилацетатом В заключение в водной фазе с помощью разбавленной соляной кислоты устанавливают рН 1 - 2 и экстрагируют этилацетатом После высушивания над сульфатом магния и отгонки растворителя остется 1,0г белого порошка 20 19 44734 формамида и прибавляют полученный раствор Выход 79,7%, т пл 50 - 55°С при температуре 0°С при перемешивании к сусПример 10 пензии 12,9г (75ммолей) 4,6-диметоксипиримидинМетиловый эфир 3-фенокси-3-фенил-2-[(4,62-тиола и 8,4г (ЮОмолей) бикарбоната натрия в диметоксипиримидин-2-ил)-тио]-масляной кислоты 100мл диметилформамида После перемешиваВ 50мл метиленхлорида растворяют 7,2г ния в течение 2 часов при комнатной температуре (25ммолей) метилового эфира З-фенокси-3и еще в течение 2 часов при 60°С выливают в 1 фенил-2-гидроксимасляной кислоты, добавляют Зг литр воды со льдом и отсасывают образовавший(ЗОммолей) триэтиламина и при перемешивании ся осадок После высушивания остается 4,2г беприбавляют по каплям 3,2г (28ммолей) хлоранлого порошка гидрида метан сул ьфо кислоты При комнатной температуре перемешивают 2 часа, промывают Выход 38% водой, сушат над сульфатом магния и упаривают Аналогично вышеприведенным примерам пов вакууме Остаток растворяют в 100мл диметиллучают приведенные в таблице 4 соединения Таблица 4 оснR°-O-C-CH-YК5 CO-R1 Пример № 41 42 43 44 45 46 47 48 49 410 411 412 413 414 415 416 417 418 419 4 20 4 21 4 22 4 23 4 24 4 25 4 26 4 27 4 28 4 29 4 30 4 31 4 32 4 33 4 34 4 35 4 36 4 37 4 38 4 39 4 40 4 41 R6 Фенил Фенил Фенил 4-Бромфенил 4-Бромфенил 2-Фторфенил 2-Фторфенмл З-Фторфенил З-Фторфенил 4-Фторфенил 4-Фторфенил 4-Хлорфенил 4-Хлорфенил 4-Метил-фенил 4-Метил-фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил З-Метилфенил З-Метилфенил 4-Изопропил-фенил 4-Изопропил-фенил Фенил Фенил Фенил Фенил 2-Метил-фенил 2-Метил-фенил Фенил Фенил Фенил Фенил 4-Метокси-фенил 4-Метокси-фенил Фенил Фенил 4-Метилтио-фенил 4-Метилтио-фенил ОС Hi R4 Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил 2-Фторфенил 2-Фторфенил З-Метоксифенил З-Метоксифенил 4-Бромфенил 4-Бромфенил Фенил Фенил Фенил Фенил 4-Хлорфенил 4-Хлорфенил 2-Метилфенил 2-Метилфенил Фенил Фенил 4-Метилфенил 4-Метилфенил З-Метилфенил З-Метилфенил Фенил Фенил 4-Фторфенил 4-Фторфенил Фенил Фенил R5 Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил Метил R1 ОСНз ОН ОН ОСНз ОН ОСНз ОН ОСНз ОН осн 3 он ОСНз он осн 3 он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он ОСНз он Y Тпл [°С] О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О О 100-103 50-55 130-135 155-160 128-134 170-171 85-90 167-169 115-116 122-125 масло 94-98 100-114 масло ISO-132 194-195 масло масло 129-131 масло 155 100-101 130-131 230 143-144 90-92 179-180 95-114 80-85 110-112 156-157 масло 158-160 157-158 106-107 160-165 99-100 160-163 248 - 250 44734 21 4 42 4 43 4 44 4 45 4 46 4 47 4-Трет -бутил-фенил 4-Трет -бутил-фенил Фенил Фенил 4-Ацетокси-фенил 4-Гидрокси-фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Фенил Метил Метил Этил Этил Метил Метил 22 Продолжение таблицы 4 О 106-110 ОСНз ОН О 250 О 115-117 ОСНз ОН О 84-85 О 157-159 ОСНз ОН О 80-90 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90