Спосіб одержання мультипробіотика “симбілюкс”

Реферат: Спосіб одержання мультипробіотика включає культивування мультисимбіозу пробіотичних бактерій родів Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, Propionibacterium і Acetobacter у живильному середовищі, що містить гель бентоніту, одержання біомаси й змішування її з бентоніто-олійним гелем. До складу живильного середовища вводять шрот насіння льону й морквяне пюре, а до складу бентоніто-олійного гелю - масло амаранту, катіони йоду, цинку й селену. UA 99291 U (12) UA 99291 U UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до біотехнології і може бути використана при одержанні препаратів із пробіотичними властивостями, зокрема для людей літнього віку, а також осіб, що страждають метаболічним синдромом, ендокринними й серцево-судинними захворюваннями. В останні десятиліття проблема розширення асортименту і підвищення ефективності пробіотичних препаратів здобуває все більшу актуальність і перспективність. Розробка й масове використання пробіотиків, що оптимізують мікробіом людини, є еволюційно обґрунтованим підходом до підтримки фізичного й духовного здоров'я, збільшення тривалості й активності життя населення. Разом з тим, незважаючи на безперервне поповнення препаратів і продуктів пробіотичної серії новими розробками, відчувається дефіцит ефективних препаратів, особливо для таких категорій населення, як люди літнього віку, хворі з ожирінням, цукровим діабетом, гіперхолестеринемією та іншою патологією, асоційованою з порушеннями метаболізму й мікробіому. Відомий спосіб одержання продукту "Довголіття" включає нормалізацію й очищення молочної сировини, що складається зі знежиреного молока й 2-5 % амарантового борошна, гомогенізацію, пастеризацію й охолодження суміші до температури заквашування, внесення закваски, що містить йогуртові культури Streptococcus thermophilus і Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus та штам Bifidobacterium adolescentis MC-42 у співвідношенні від 1:15 до 1:30, сквашування при температурі 37-39 °C протягом 5-9 годин до кислотності 92-100°Т, перемішування сквашеного продукту, охолодження й розлив [патент РФ № 2514579, А23С 9/127, А23С 9/133, 2014]. Спосіб дозволяє одержати продукт на молочно-рослинній основі, збагачений живими клітинами біфідобактерій і біологічно активними речовинами амарантового борошна. Однак використання в складі продукту тільки одного штаму пробіотичних бактерій значно обмежує оздоровчий потенціал продукту й сферу його застосування. Відомо також спосіб приготування лікувально-профілактичного препарату з живих штамів лактобацил і біфідобактерій, що включає роздільне культивування штамів L. plantarum 8RA-3, L. fermentum 39, L. fermentum 90 TC-4, В. bifidum 1, В. bifidum 791 та В. longum 379 на живильному середовищі, що містить гідролізат казеїну, хлористий натрій, лактозу й рафінозу, агар-агар, розфасовку рідкого препарату з урахуванням необхідної для пацієнтів добової дози. Після закінчення роздільного культивування суміш штамів додають до біологічно-активної добавки "Літовіт-М" на основі цеоліту, суміш витримують для іммобілізації на сорбенті при температурі 6±2 °C протягом 18-24 год. [патент РФ № 2441907, C12N 1/20, А61К 35/74, А23С 9/127, 2012]. Комплексне застосування пробіотичної флори й сорбенту сприяє розширенню спектра корисних властивостей препарату. Недоліком способу є використання механічної суміші культур пробіотичних бактерій, що перешкоджає їхній активній спільній діяльності в біотопах людини. Використання як ентеросорбенту цеоліту обмежує сферу застосування пробіотика через здатність цього мінералу спричиняти негативний вплив на слизову оболонку, зв'язувати й виводити з організму корисні мікронутрієнти. Найбільш близьким до способу, що заявляється, є спосіб одержання пробіотика "Симбітер омега", який включає приготування живильного середовища, що містить гель бентоніту й суспензію зародків пшениці, культивування клітин полівидового мультисимбіозу, що складається з біфідобактерій видів Bifidobacterium bifidum, В. longum, В. breve, В. infantis, В. adolescentis, лактобацил видів Lactocobacillus acidophilus, L. casei, L. brevis, L. plantarum, L. gasseri, L. fermentum, L. salivarius, L. helveticus, молочнокислих стрептококів видів Lactococcus lactis і Streptococcus salivarius ssp. thermophilus, пропіоновокислих бактерій видів Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii і P. acidipropionici, відділення біомаси й змішування її у співвідношенні 1:1-1:3 з бентоніто-олійним гелем, який одержують попереднім змішуванням гелю бентоніту з біологічно активними оліями природного походження [патент України № 76111, А61К 35/74, А61К 33/44, 2012]. Спосіб дозволяє одержувати комплексні препарати, що містять високу концентрацію живих клітин багатовидового пробіотичного симбіозу, ефективний ентеросорбент і широкий комплекс біологічно активних сполук зародків пшениці й природних олій. Однак у способі не реалізована можливість використання цінних сполук, що перебувають у складі інших природних продуктів, а також додаткового збагачення мультипробіотика есенціальними мікроелементами, необхідними для поліпшення якості життя людини, особливо в літньому віці й при патології. В основу корисної моделі поставлена задача створення способу одержання мультипробіотика "Симбілюкс", в якому шляхом використання в складі живильного середовища шроту насіння льону й морквяного пюре, а в складі бентоніто-олійного гелю - масла амаранту, а також введення в структуру гелю катіонів цинку, йоду й селену, забезпечується розширення спектра оздоровчих властивостей пробіотика. 1 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Поставлена задача вирішується тим, що в способі одержання мультипробіотика "Симбілюкс", що включає культивування мультисимбіозу пробіотичних бактерій родів Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, Propionibacterium і Acetobacter у живильному середовищі, що містить гель бентоніту, змішування біомаси з бентоніто-олійним гелем, згідно з корисною моделлю, до складу живильного середовища вводять шрот насіння льону й морквяне пюре, а до складу бентоніто-олійного гелю - масло амаранту, катіони йоду, цинку й селену. При цьому як додаткове джерело йоду може бути використана ламінарія (бурі водорості), а до складу живильного середовища можна вводити висівки і/або зародки злакових рослин. Спосіб включає використання живильного середовища на основі шроту насіння льону з додаванням морквяного пюре й гелю бентоніту. Як показали спеціально проведені дослідження, живильне середовище запропонованого складу забезпечує інтенсивне зростання симбіозу, що використовується, й накопичення біомаси з високою концентрацією життєдіяльних клітин і оптимальним співвідношенням між окремими видами пробіотичних бактерій, які входять до складу мультикомпонентного симбіозу. Введення до складу мультипробіотика комплексу природних продуктів, що складається зі шроту насіння льону, морквяного пюре й гелю бентоніту, збагачує препарат цінними біологічними сполуками й мінералами. Так, насіння льону багате протеїнами, ненасиченими жирними кислотами класів омега-3 і омега-6, клітковиною, антиоксидантами, широким спектром вітамінів і мінеральних речовин. Особливе значення має високий вміст у льняному насінні  ліноленової кислоти, яка сприяє реалізації в організмі людини ряду важливих біологічних функцій. Морквяне пюре є джерелом каротинів, харчових волокон, вітамінів і мінералів, має високу стимулюючу здатність відносно пробіотичних бактерій і фізіологічної мікробіоти біотопів людини. Гель бентоніту є джерелом цінних мінеральних сполук, має стимулюючий ефект відносно пробіотичних бактерій, сприяє підвищенню їх резистентності до природних інгібіторів травного тракту. Біологічно активні органічні й мінеральні сполуки лляного насіння, морквяного пюре й гелю бентоніту раціонально доповнюють спектр життєво важливих для людини нутрієнтів. Крім цього введення до складу мультипробіотика гелю бентоніту надає препарату властивості ентеросорбенту, активного щодо елімінації з організму бактеріальних ендотоксинів і інших токсичних субстанцій, ентеровірусів, холестерину, важких металів, радіонуклідів і інших шкідливих сполук. До складу бентоніто-олійного гелю в комбінації із іншими природними оліями - джерелами поліненасичених жирних кислот класу омега-3 і вітаміну Е, додатково вводять олію амаранту. Поліненасичені жирні кислоти класу омега-3 нормалізують кров'яний тиск, поліпшують зір, сприяють редукції запальних процесів у суглобах, зміцненню імунітету, допомагають при шкірних захворюваннях, екземі, алергії, депресії. Олія амаранту містить унікальний антиоксидант - сквален, який також має широкий спектр інших корисних властивостей, зокрема імуномодулюючі й цитопротекторні властивості, здатність пригнічувати збудників бактеріальних і грибкових інфекцій. Згідно із пропонованим способом, гель бентоніту, що використовується для приготування бентоніто-олійного гелю, додатково збагачується катіонами йоду, цинку й селену. Йод є одним з основних есенційних мікроелементів, що впливають на гормональну активність щитоподібної залози, енергетичний, вуглеводний, жировий обмін, імунні механізми, ріст, психічний розвиток, адаптацію. Оскільки в сучасних умовах йодної профілактики потребує практично кожна людина, питанню розробки й використання ефективних йодних препаратів для профілактичних і лікувальних цілей приділяється все більша увага. Цинк також має особливе значення для організму, обумовлене високою фізіологічною активністю цього мікроелемента, що бере участь у білковому, жировому, вуглеводному обмінах, синтезі нуклеїнових кислот, імуногенезі й біоенергетичних процесах. Цинк активує більш 200 металоензимів, є присутнім у більшості ферментів тканинного дихання. Він необхідний для утворення сульфатних молекул ряду біологічно-активних речовин, зокрема бере участь у біосинтезі й пролонгації дії інсуліну, а також гормону росту, імуноглобулінів, каротину, використовується при синтезі ДНК і РНК. Дефіцит цинку в організмі характерний для хворих атеросклерозом і іншими серцево-судинними захворюваннями, цирозом печінки, онкологічною патологією, ревматизмом, артритами, діабетом, виразковою хворобою шлунка й 12-палої кишки, захворюваннями щитоподібної залози й ін. Оскільки з віком вміст цинку в організмі знижується, його присутність у препаратах для пацієнтів геронтологічного профілю має особливо важливе значення. Поряд з йодом і цинком край важливу роль в організмі виконує селен. Недостатність селену найчастіше проявляється у вигляді захворювань шкіри, волосся, нігтів, імунодефіцитних станів, 2 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 запальних захворювань суглобів, алергозів, зниження білоксинтезуючої і дезінтоксикаційної функцій печінки, дистрофічних змін у міокарді й м'язах у цілому. Недостатність цього мікроелемента може також відбитися на синтезі гормонів щитоподібної залози, схильності до новоутворень, катаракти, зниження гостроти зору, регенерації ушкоджених тканин. При дефіциті селену можливий розвиток порушень функцій підшлункової залози, що супроводжується також порушенням засвоєння жирів, вітаміну Е і зниженням рівня інсуліну, що веде до глибоких порушень вуглеводного обміну аж до розвитку цукрового діабету. При недостатньому надходженні до організму селену значно знижується засвоюваність йоду й цинку. Синергізм цих трьох мікроелементів особливо чітко проявляється у функціонуванні щитоподібної залози, яка не може використовувати йод при дефіциті цинку й/або селену. Як додаткове джерело йоду може бути використана ламінарія (бурі водорості). Крім йоду, ламінарія багата іншими біологічно цінними сполуками, зокрема полісахаридами з доведеними імуномодулюючими й противірусними властивостями, а також поліненасиченими жирними кислотами класу омега-3, поліфенольними сполуками, вітамінами й мінералами. Таким чином, введення ламінарії до складу мультипробіотика раціонально доповнює спектр його оздоровчих функцій. Спосіб здійснюють таким чином. Шрот насіння льону або його суміш зі шротом зародків пшениці і/або здрібненими висівками злакових культур і/або сухою ламінарією заливають гарячим 1-2 %-м гелем бентоніту в співвідношенні 1:20-1:25, витримують при температурі 90-95 °C протягом 15-30 хвилин, ретельно перемішують. До отриманої суміші додають 4-5 % морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 45-60 хвилин. Стерильне середовище, охолоджене до температури 35±2 °C, інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій та інкубують при цій температурі протягом 18-24 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1 з бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену у необхідній концентрації. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у рівних співвідношеннях із природними оліями. Корисна модель пояснюється прикладами. Приклад 1. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для людей літнього віку. Суміш, що містить 6 кг шроту насіння льону, 2 кг сухої ламінарії й 2 кг шроту зародків пшениці, заливають 200 л 1 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 95 °C, витримують при цій температурі протягом 15 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 10,5 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 45 хвилин. Стерильне середовище охолоджують до температури 35 °C та інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для одержання інокуляту в 10 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,5 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB В-7148, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus ВКПМ B-5810, Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 18 год. при температурі 36 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 95°Т, рН 4,45, 9 3 концентрацією живих клітин - 1,1×10 КУО/см . Інокульоване середовище інкубують при температурі 35 °C протягом 24 год. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1 з бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений 3 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 гель бентоніту змішують у рівних співвідношеннях із сумішшю олії зародків пшениці, риб'ячого жиру й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,2×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 5 мкг/см йоду, 0,5 мг/см цинку, 2 % риб'ячого жиру, 1,5 % олії зародків пшениці й 1,5 % олії амаранту. Приклад 2. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для профілактики розвитку або загострення ендемічного зоба. 2 кг шроту насіння льону й 2 кг сухої ламінарії заливають 100 л 1 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 92 °C, витримують при цій температурі протягом 20 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 5,25 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 60 хвилин. Стерильне середовище, охолоджене до температури 37 °C, інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для готування інокуляту в 5 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,25 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB В-7148, Bifidobacterium infantis ІMB B-7147, Bifidobacterium breve ІMB B-7132, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB B-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-5863, Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus brevis ІMB B-7114, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactobacillus gasseri ІMB B-7135, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725. Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, P. acidipropionici ВКПМ В-5800. Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 18 год. при температурі 37 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 95°Т, рН 4,40, 9 3 концентрацією живих клітин - 2,6×10 КУО/см . Після внесення інокулята середовище перемішують і інкубують при температурі 37 °C протягом 18 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1:1 з 4 %-й суспензією ламінарії й бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у рівних співвідношеннях із сумішшю олії зародків пшениці й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,0×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 6 мкг/см йоду, 0,5 мг/см цинку, 2,5 % олії зародків пшениці й 2,5 % олії амаранту. Приклад 3. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для пацієнтів, що страждають ожирінням. 12 кг шроту насіння льону й 3 кг вівсяних висівок заливають 300 л 1 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 93 °C, витримують при цій температурі протягом 30 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 15,75 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 40 хвилин. Стерильне середовище, охолоджене до температури 36 °C, інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для готування інокуляту в 15 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,75 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, 4 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Bifidobacterium adolescentis ІMB B-7112, Bifidobacterium infantis ІMB B-7131, Bifidobacterium breve ІMB B-7149, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB B-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863, Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus brevis ІMB B-7114, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactobacillus gasseri ІMB B-7135, Lactococcus lactis ВКПМ B-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacteriumfreudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, P. acidipropionici ВКПМ В-5800, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 22 год. при температурі 34 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 90°Т, рН 4,65, 9 3 концентрацією живих клітин - 1,8×10 КУО/см . Середовище із внесеним інокулятом інкубують при температурі 36 °C протягом 22 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1:1 з бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену і 10 %-ю стерильною суспензією здрібненого кореня імбиру. Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у співвідношенні 5:1 із сумішшю олії зародків пшениці й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,0×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 6 мкг/см йоду, 0,4 мг/см цинку, 0,33 г/см імбиру, 0,5 % олії зародків пшениці й 0,5 % олії амаранту. Приклад 4. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для пацієнтів, що страждають гіперхолестеринемією. 8 кг шроту насіння льону заливають 160 л 2 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 90 °C, витримують при цій температурі протягом 25 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 8,4 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 50 хвилин. Стерильне середовище, охолоджене до температури 37 °C, інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для готування інокуляту в 8,5 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,45 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB B-7148, Bifidobacterium breve ІMB B-7132, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB B-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-5863 Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactobacillus gasseri ІMB B-7135, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ B-5388, Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4545, P. acidipropionici ВКПМ В-5723, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 19 год. при температурі 36 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 96°Т, рН 4,43, 9 3 концентрацією живих клітин - 1,7×10 КУО/см . Після внесення інокуляту середовище перемішують і інкубують при температурі 37 °C протягом 20 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:2 з бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену. 5 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у співвідношенні 8:1:1 із сумішшю олії зародків пшениці, олії розторопші й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 1,8×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 5 мкг/см йоду, 0,3 мг/см цинку, 1,5 % олії зародків пшениці, 2 % олії розторопші й 1,5 % олії амаранту. Приклад 5. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для пацієнтів, що страждають запорами. Суху суміш, що містить 8 кг шроту насіння льону й 4 кг пшеничних висівків, заливають 160 л 2 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 90 °C, витримують при цій температурі протягом 25 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 8,4 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 50 хвилин. Стерильне середовище охолоджують до температури 37 °C та інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для готування інокулята у 8 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,4 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB B-7148, Bifidobacterium infantis ІMB B-7147, Bifidobacterium breve ІMB B-7132, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB В-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863, Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus brevis ІMB B-7144, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactobacillus gasseri ІMB B-7145, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, P. acidipropionici ВКПМ В-5800, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 18 год. при температурі 36 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 95°Т, рН 4,45, 9 3 концентрацією живих клітин - 1,1×10 КУО/см . Після внесення інокуляту середовище перемішують та інкубують при температурі 37 °C протягом 20 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:2 з бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Одержаний збагачений гель бентоніту змішують у співвідношенні 1:1:1 із сумішшю олії зародків пшениці, обліпихи й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,3×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 5 мкг/см йоду, 0,5 мг/см цинку, 1,5 % олії зародків пшениці, 2 % олії обліпихи й 1,5 % олії амаранту. Приклад 6. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для пацієнтів, хворих цукровим діабетом і лактазною недостатністю. Суху суміш, що містить 10 кг шроту насіння льону й 1 кг ламінарії, заливають 200 л 1 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 95 °C, витримують при цій температурі протягом 15 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 10,5 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 45 хвилин. Стерильне середовище охолоджують до температури 35 °C та інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для одержання інокуляту в 10 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,5 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих та біфідобактерій наступного штамового складу: 6 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB В-7148, Bifidobacterium infantis ІMB B-7147, Bifidobacterium breve ІMB B-7132, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB B-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863, Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus brevis ІMB B-7144, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 22 год. при температурі 37°. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 92°Т, рН 4,48, концентрацією 9 3 живих клітин - 2,1×10 КУО/см . Інокульоване середовище інкубують при температурі 37 °C протягом 24 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1:1 з 4 %-й суспензією ламінарії й бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у співвідношенні 1:1 із сумішшю олії зародків пшениці й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,5×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 5 мкг/см йоду, 0,5 мг/см цинку; 2,5 % олії зародків пшениці і 2,5 % олії амаранту. Приклад 7. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для пацієнтів, хворих неалкогольною жировою хворобою печінки. Суху суміш, що містить 10 кг шроту насіння льону, 1 кг шроту зародків пшениці й 1 кг ламінарії, заливають 200 л 1 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 95 °C, витримують при цій температурі протягом 15 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 10,5 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 45 хвилин. Стерильне середовище охолоджують до температури 35 °C, інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для одержання інокуляту в 11 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,55 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB В-7148, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB B-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863, Lactobacillus casei ВКПМ B-5724, Lactobacillus brevis ІMB B-7144, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactobacillus gasseri ІMB B-7145, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacteriumfreudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, P. acidipropionici ВКПМ В-5800, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 20 год. при температурі 36 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 90°Т, рН 4,5, 9 3 концентрацією живих клітин - 1,9×10 КУО/см . 7 UA 99291 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Інокульоване середовище інкубують при температурі 35 °C протягом 24 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1 з бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами йоду, цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у співвідношенні 1:2:1 із сумішшю олії зародків пшениці, олії розторопші й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,0×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 2 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 4 мкг/см йоду, 0,4 мг/см цинку, 1,0 % олії зародків пшениці, 3 % олії розторопші й 1,0 % олії амаранту. Приклад 8. Одержання мультипробіотика "Симбілюкс" для профілактики гострого алкогольного сп'яніння й для хворих алкогольною хворобою печінки. Суху суміш, що містить 6 кг шроту насіння льону й 5 кг висівок пшениці, заливають 200 л 1 %-го гелю бентоніту, підігрітого до температури 95 °C, витримують при цій температурі протягом 15 хвилин при безперервному перемішуванні. До отриманої суспензії додають 10,5 кг морквяного пюре й після перемішування стерилізують при температурі 121 °C протягом 45 хвилин. Стерильне середовище охолоджують до температури 35 °C та інокулюють мультивидовим симбіозом пробіотичних бактерій. Для одержання інокуляту в 10,5 л стерильного знежиреного молока з вмістом сухих речовин 10 % вносять 0,53 л культури мультикомпонентного симбіозу молочнокислих, пропіоновокислих, оцтовокислих і біфідобактерій наступного штамового складу: Bifidobacterium bifidum ІMB В-7113, Bifidobacterium longum ІMB В-7150, Bifidobacterium adolescentis ІMB B-7148, Lactobacillus fermentum ІMB B-7133, Lactobacillus salivarius ІMB B-7134, Lactobacillus helveticus ІMB B-7115, Lactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863, Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus brevis ІMB B-7144, Lactobacillus plantarum ІMB B-7116, Lactobacillus gasseri ІMB B-7145, Lactococcus lactis ВКПМ В-5725, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ В-5388, Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii ВКПМ В-4544, P. acidipropionici ВКПМ В-5800, Acetobacter aceti ВКПМ В 5495. Інокульоване молоко ферментують протягом 20 год. при температурі 37 °C. Готовий інокулят характеризується густою в'язкою консистенцією, кислотністю 98°Т, рН 4,42, 9 3 концентрацією живих клітин - 1,6×10 КУО/см . Інокульоване середовище інкубують при температурі 35 °C протягом 24 годин. Отриману біомасу змішують у співвідношенні 1:1 бентоніто-олійним гелем, збагаченим катіонами цинку й селену. Для одержання бентоніто-олійного гелю, гель бентоніту з масовою концентрацією сухих речовин 4 %, попередньо збагачують катіонами йоду, цинку й селену. Отриманий збагачений гель бентоніту змішують у співвідношенні 8:1:1 із сумішшю олії розторопші й олії амаранту. 9 3 Готовий мультипробіотик містить 2,6×10 /см життєдіяльних клітин пробіотичних бактерій, 3 3 3 2,5 % бентоніту, 1 мкг/см селену, 4 мкг/см йоду; 0,4 мг/см цинку, 1,0 % олії розторопші й 1,0 % олії амаранту. Таким чином, пропонований спосіб дозволяє одержувати ефективні пробіотики із широким спектром оздоровчої дії для різних категорій населення, у тому числі для людей літнього віку, а також осіб, що страждають метаболічним синдромом, ендокринними й серцево-судинними захворюваннями. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 1. Спосіб одержання мультипробіотика, що включає культивування мультисимбіозу пробіотичних бактерій родів Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, Propionibacterium і Acetobacter у живильному середовищі, що містить гель бентоніту, одержання біомаси й змішування її з бентоніто-олійним гелем, який відрізняється тим, що до складу 8 UA 99291 U 5 живильного середовища вводять шрот насіння льону й морквяне пюре, а до складу бентонітоолійного гелю - масло амаранту, катіони йоду, цинку й селену. 2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що як додаткове джерело йоду використовують ламінарію. 3. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що до складу живильного середовища вводять висівки і/або зародки злакових рослин. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 9