Пептидні кон’югати агоністів рецептора glp-1 і гастрину та їх застосування

Реферат: Даний винахід належить до пептидних кон'югатів, що мають формулу: H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2; H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-GWLDF-NH2; H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-AGWLDF-NH2 або H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNYGWTDF-NH2, та їх застосування при лікуванні різноманітних захворювань або розладів, включаючи діабет (1 типу і/або 2 типу), і захворювань або розладів, викликаних діабетом. UA 112630 C2 (12) UA 112630 C2 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ОБЛАСТЬ ТЕХНІКИ Даний винахід відноситься, зокрема, до деяких пептидних кон'югатів і застосування зазначених кон'югатів при лікуванні різноманітних захворювань або розладів, включаючи діабет (1 типу і/або 2 типу), і захворювань або розладів, викликаних діабетом. Дана заявка претендує на пріоритет згідно із заявками на патент США № 61/395,119 і 61/470,170, які включені до даного опису в повному об'ємі за допомогою посилання. РІВЕНЬ РОЗВИТКУ ТЕХНІКИ Діабет, зокрема, діабет 1 типу й 2 типу, разом із ожирінням, яке вважається основним фактором, який обумовлює розвиток, зокрема, діабету 2 типу, являють собою зростаючу й одну з найсерйозніших у світі проблему охорони здоров'я. Захворювання або розлади, які можуть виникнути внаслідок невилікуваного діабету, включають серцевосудинні захворювання і захворювання периферичних артерій, хвороби мікро- і макросудин, інсульт і, можливо, деякі форми раку. Для діабету характерна порушена фізіологічна регуляція рівня глюкози в крові, а серед основних умов, які можуть призвести до діабету, вважаються зниження або втрата маси й функції β-клітин підшлункової залози із супутнім скороченням або втратою вироблення ендогенного інсуліну і/або резистентністю до інсуліну (зниженою чутливістю до інсуліну), тобто зниження або втрата здатності ендогенного інсуліну здійснювати адекватну регуляцію рівня глюкози в крові. У відповідь на присутність і всмоктування поживних речовин у кишечнику слизовою оболонкою ШКТ виробляються деякі гормони, які знижують рівень глюкози в крові. До них відносяться глюкагон-подібний пептид-1 (GLP-1), глюкозозалежний інсулінотропний пептид (GI P) і секретин. GLP-1 [див., наприклад, Ørskov, Diabetologia 35: 701-711 (1992)] виробляється в результаті процесингу в тканинах проглюкагону, пептиду з 180 амінокислот [дивіться, наприклад, Drucker, Diabetes 47: 159-169 (1998)]. Повна послідовність проглюкагону містить 29 амінокислотну послідовність глюкагону, 36 або 37 амінокислотну послідовність GLP-1, а також 34 амінокислотну послідовність глюкагон-подібного пептиду-2 (GLP-2; кишковотропний пептид). GLP-1 людини (7-37) має амінокислотну послідовність HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG (SEQ I D NO: 114). Відмічено, що GLP-1 виконує ряд функцій. Це гормон, який підсилює глюкозо-стимульовану секрецію інсуліну у здорових людей (і, отже, належить до групи гормонів, відомих як інкретинові гормони). Крім того, GLP-1 знижує концентрацію глюкагону, затримує спорожнювання шлунка, стимулює біосинтез (про)інсуліну й підвищує чутливість до інсуліну [див, наприклад, Nauck, Horm. Metab. Res. 47: 1253-1258 (1997)]. Також GLP-1 підсилює здатність β-клітин підшлункової залози сприймати й реагувати (за допомогою секреції інсуліну) на глюкозу у пацієнтів із порушеною переносимістю глюкози [див., наприклад, Byrne, Eur. J. Clin. Invest. 28: 72-78 (1998)]. Інсулінотропний ефект GLP-1 у людини збільшує швидкість зникнення глюкози і зменшує ендогенну продукцію глюкози, частково через підвищення рівня інсуліну, а частково через підвищення чутливості до інсуліну [дивіться, наприклад, D'Alessio, Eur. J. Clin. Invest. 28: 72-78 (1994)]. Проте, короткий період напіввиведення нативного GLP-1 in vivo складав основну фармакологічну проблему при спробах використовувати гормон як лікарський засіб. У людини і пацюка GLP-1 швидко розкладається дипептидилпептидазою-IV (DPP-IV) до GLP-1 (9-36) аміду, який виступає ендогенним антагоністом рецептора GLP-1. Було запропоновано кілька стратегій для подолання цієї проблеми, в одних із яких використовуються інгібітори DPP-IV, у той час як у інших використовуються DPP-IV-стійкі аналоги GLP-1 (7-36) аміду. Так звані ексендини, які складають іншу групу пептидів, які знижують рівень глюкози в крові, мають деяку подібність послідовностей (53 %) із GLP-1 (7-36) [див., наприклад, Гок і співавт., J. Biol. Chem. 268: 19650-19655 (1993)]. Ексендини були знайдені в слині видів Helodermatidae (ядозуби). Екзендин-3 присутній у слині Heloderma horridum (мексиканський ядозуб), у той час як ексендин-4 присутній у слині Heloderma suspectum (Gila Monster). Амінокислотна послідовність екзендину-4, яка відрізняється від екзендину-3 в положеннях два і три, являє собою HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLF!EWLKNGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ ID NO: 115). Повідомляли, що ексендин-4 є потужним агоністом рецептора GLP-1 на моделі виділених клітин інсуліноми пацюка [Goke et al., loc.cit.]. У публікації WO 99/07404 описано, що при системному введенні ексендину-4 рівень глюкози в крові знижується на 40 % у мишей db/db з діабетом, також повідомляли про тривалу глюкозознижуючу дію при однократній щоденній ін'єкції ексендину-4 у мишей із діабетом ob/ob [Grieg et al., Diabetologia 42: 45-50 (1999)]. У публікаціях US 5,424,286 і WO 98/05351 описано, що агоністи ексендину-3, ексендину-4 і ексендину можна використовувати при лікуванні діабету для зниження рухової активності 1 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 шлунка й відстрочки спорожнення шлунка та профілактики гіперглікемії, і в публікації WO 98/30231 також описано, що їх можна застосовувати для зниження споживання їжі. Пептидний гормон гастрин секретується клітинами слизової шлунка й G-клітинами дванадцятипалої кишки, і серед головних фізіологічних функцій даного гормону у людини є стимуляція секреції шлункового соку (тобто HCl) і сприятливий вплив на перистальтику шлунка. Інші виявлені дії гастрину включають стимуляцію росту клітин, і також є показання, що гастрин може відігравати роль при неогенезі острівців, тобто стимуляції росту інсулін-секретуючих βклітин острівців підшлункової залози [дивіться, наприклад, Korc, M., J. Clin. Invest., 92: 1113-1114 (1993); Rooman et al. Diabetes 51: 686-690 (2002)], і завдяки цьому сприяти регуляції рівня глюкози в крові. Гастрин має один рецептор з іншим пептидним шлунково-кишковим гормоном, холецистокініном (CCK). Рецептори CCK-A R і CCK-B R мають різні афінності до варіантів гастрину і CCK. CCK-A R (або CCK R1) виступає переважно рецептором для сульфатованого CCK, тоді як CCK-B R (або CCK R2) зв'язує однаковою мірою добре CCK і гастрин. Вважається, що CCK-B R являє собою "рецептор гастрину" через більш високий рівень гастрину в порівнянні з CCK у плазмі [Foucaud et al. Reg. Peptides 145: 17-23 (2008)]. CCK-B R може запускати декілька внутрішньоклітинних шляхів після зв'язування ліганда, що вважається причиною різних фізіологічних функцій CCK. Ключовими шляхом, який регулюється CCK-B R, є шлях MAPK (мітоген-активовані протеїнкінази) або ERK (позаклітинні регульовані кінази), який також активується декількома гормонами росту. Це є ключовою особливістю функції проліферації клітин гастрину. Оскільки CCK-B R експресується в підшлунковій залозі, гастрин може брати участь у проліферації клітин і регенерації острівців у даній тканині. У людей гастрин зустрічається в основному в трьох формах, а саме: Гастрин-34, Гастрин-17 і Гастрин-14 (в залежності від загальної кількості амінокислот у послідовності, що розглядається). Також виявили Гастрин-6. Більш короткі форми виходять при розщепленні Скінцевого амідованого Гастрину-34, таким чином, Гастрин-17 складається з C-кінцевих останніх 17 залишків Гастрину-34 (які відповідають залишкам прогастрину (55-71)), Гастрин-14 з Cкінцевих останніх 14 залишків (які відповідають залишкам прогастрину (58-71)) і Гастрин-6 складається тільки з C-кінцевих останніх 6 залишків (які відповідають залишкам прогастрину (66-71)). Вони являють собою амідовані форми гастрину, які зв'язуються з високою спорідненістю з CCK-B R і виконують функцію проліферації клітин. У Гастрині-17 людини Nкінцевий амінокислотний залишок являє собою залишок піроглутамінової кислоти (PyroGlu). Амідовані С-кінцеві 6 амінокислот є ключовими рецептор-зв'язуючими залишками гастрину. У публікації WO 2005/072045 описані, зокрема, комбінації "агоністів GLP-1" і "сполук гастрину", які ймовірно виявляють сприятливу дію на профілактику і/або лікування станів і/або захворювань, при яких була показана терапевтична дія "агоніста GLP-1" або "сполуки гастрину". У публікації WO 2007/095737 описані, між іншим, аналогічні комбінації "агоністів ексендину" і "сполук гастрину", які також імовірно виявляють сприятливу дію на профілактику і/або лікування станів і/або захворювань, при яких була показана терапевтична дія "агоністів ексендину" або "сполуки гастрину". Дані [одержувані з досліджень із застосуванням мишей із діабетом без ожиріння (NOD), які широко використовуються як тваринна модель діабету людини 1 типу], представлені в публікації WO 2005/072045, очевидно вказують на те, що деякі комбінації "агоніста GLP-1" і "сполуки гастрину" згідно з описом можуть виявляти сприятливу дію з нормалізації рівнів глюкози в крові на моделі мишей із гострим діабетом NOD у порівнянні з дією, яка спостерігається при застосуванні розглянутого "агоніста GLP-1" (або "сполуки гастрину") окремо. Дані [також отримані в результаті досліджень із застосуванням діабетичних мишей без ожиріння (NOD)], представлені в публікації WO 2007/095737, очевидно вказують на те, що деякі комбінації "агоніст ексендину"/"сполука гастрину" згідно з описом виявляють сприятливу дію стосовно нормалізації рівнів глюкози й інсуліну в крові на моделі мишей із гострим діабетом NOD у порівнянні з дією, яка спостерігається при застосуванні розглянутого "агоніста ексендину" (або "сполуки гастрину") окремо, і що деякі комбінації "агоніст рецептора GLP-1"/"гастрин" згідно з описом можуть виявляти сприятливу дію стосовно індукції регенерації клітин острівців у порівнянні з дією, яка спостерігається при використанні "агоніста рецептора GLP-1" окремо. У публікаціях WO 2005/072045 і WO 2007/095737 також описана можливість утворення кон'югатів, що містять "агоніст GLP-1" або "агоніст ексендину" відповідно і "сполуку гастрину", ковалентно спарені або зв'язані (тобто кон'юговані) один із одною можливо за допомогою проміжного лінкера або спейсера. Підходящим спейсером є моно- або дисахарид, амінокислота, сульфат, сукцинат, ацетат або олігомерний полімерний спейсер чи лінкер, який містить одну або декілька таких груп. Також описані передбачувані способи, за допомогою яких можна 2 UA 112630 C2 5 10 15 20 одержати розглянуті типи кон'югатів. Проте, у жодному з останніх розглянутих документів не наведені препаративні або інші дані для обґрунтування того, що будь-який розглянутий тип кон'югата був насправді приготований і охарактеризований або були перевірені його біологічні/фізіологічні властивості чи активність - на момент подачі відповідної міжнародної заявки. Також можна відзначити, що ні в публікації WO 2005/072045, ні в публікації WO 2007/095737 не наведені дані in vivo, in vitro або інші дані, які підтверджують, що комбінації "агоніст GLP1"/"сполука гастрину" або "агоніст ексендину"/"сполука гастрину" згідно з описом і використані в даному описі можуть бути корисними при лікуванні, наприклад, діабету 2 типу. КОРОТКИЙ ОПИС ВИНАХОДУ Згідно з даним винаходом було виявлено, що деякі кон'югати, які містять дві ковалентно спарені або зв'язані пептидні групи, можуть проявляти несподівано високу терапевтичну активність при лікуванні, наприклад, діабету (діабету 1 типу і/або 2 типу) або різних захворювань чи станів, викликаних діабетом, у порівнянні з терапевтичною активністю комбінації двох окремих пептидів, що розглядаються. У більш широкому аспекті даний винахід забезпечує пептидний кон'югат агоніста рецептора GLP-1 і гастрину, зокрема, гастрину із заміною в положенні 15, обраною з Leu, Nle, Phe і Thr. Більш конкретно, даний винахід забезпечує пептидні кон'югати Ексендину-4 і гастрину, а також пептидні кон'югати GLP-1 і гастрину. Згідно з першим аспектом даний винахід, таким чином, забезпечує пептидний кон'югат, який має формулу I: R1-Z-L-Y-R2 25 30 35 40 (I), у якій R1 являє собою Н, С1-4 алкіл, ацетил, форміл, бензоїл або трифторацетил; R2 являє собою OH або NH2; Z містить послідовність ексендину-4 (1-39), яка має послідовність His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-IleGlu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser (SEQ ID NO: 115), або його аналог Za; L являє собою необов'язкову лінкерну групу; і Y містить послідовність Гастрину-17, яка має послідовність Gln-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe (SEQ ID NO: 116), у якій Y15 обраний із Leu, Nle, Phe і Thr, або його аналог Ya. Також даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: (i) Za має до 10 замін у положеннях і/або містить укорочення на С-кінці на 1-12 амінокислот у порівнянні з послідовністю ексендину; і/або (ii) Ya має до 5 замін у порівнянні з послідовністю Гастрину-17 і/або містить укорочення на Nкінці на 1-13 амінокислот у порівнянні з послідовністю Гастрину-17. Згідно з одним варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому Za являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IІa: His-Z2-Z3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Z10-Z11-Z12-Z13-Z14-Glu-Z16-Z17-Z18-Z19-Z20Z21-Z22-Z23-Z24-Z25-Z26-Z27-Z28-Z29-Z30-Z31-Z32-Z33-Z34-Z35-Z36-Z37-Z38-Z39 45 50 55 в якій Z2 обраний із Gly, Ala, Ser, Aib, Thr, Leu і Ile; Z3 обраний із Glu і Asp; Z9 обраний із Asp і Glu; Z10 обраний із Leu, Val, Ile і Ala; Z11 обраний із Ser і Aib; Z12 обраний із Ser, Gln, Arg, Cys, Lys, Glu і Orn; Z13 обраний із Arg, Ser, Gln, Tyr і Glu; Z14 обраний із Gly, Cys, Phe, Tyr, Trp, Lys, Met, Leu, NІe і Ile; Z16 обраний із Asp, Gly, Aib, Glu, Lys і Cys; Z17 обраний із Glu, Cys, Lys, Ser і Gln; Z18 обраний із Ala і Aib; Z19 обраний із Val, Leu, Ile і Ala; 3 (IIa), UA 112630 C2 5 10 15 20 Z20 обраний із Arg, Lys, Cys, Orn і Glu; Z21 обраний із Leu і Glu; Z22 обраний із Phe і Ala; Z23 обраний із Ile і Leu; Z24 обраний із Glu, Cys, Lys, Ala і Аrg; Z25 обраний із Trp, Cys, Lys і Phe; Z26 обраний із Leu і Ile; Z27 обраний із Ile, Val, Gln, Lys, Cys, Arg і Orn; Z28 обраний із Asn, Ser, Asp, Aib, Gln, Lys, Cys, Arg, Tyr, bАla, Glu, Orn і Leu або він відсутній; Z29 обраний із Gly, Aib і bАla або він відсутній; Z30 обраний із Gly, Cys, Lys і Arg або він відсутній; Z31 обраний із Pro, Ser і Asp або він відсутній; Z32 обраний із Ser і Lys або він відсутній; Z33 являє собою Ser або він відсутній; Z34 обраний із Gly і Lys або він відсутній; Z35 являє собою Ala або він відсутній; Z36 являє собою Pro або він відсутній; Z37 являє собою Pro або він відсутній; Z38 являє собою Pro або він відсутній; Z39 являє собою Ser або він відсутній; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IІb: L1-L2-L3-L4 25 (IІb), у якій L1 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys і Gln або він відсутній; L2 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys і Gln або він відсутній; L3 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys і Gln або він відсутній; L4 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys і Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IІc: 30 Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Y7-Y8-Y9-Y10-Y11-Y12-Y13-Y14-Y15-Аsp-Y17 35 40 45 50 у якій Y1 являє собою Gln або він відсутній; Y2 являє собою Gly або він відсутній; Y3 являє собою Pro або він відсутній; Y4 являє собою Trp або він відсутній; Y5 являє собою Leu або він відсутній; Y6 являє собою Glu або він відсутній; Y7 являє собою Glu або він відсутній; Y8 являє собою Glu або він відсутній; Y9 являє собою Glu або він відсутній; Y10 являє собою Glu або він відсутній; Y11 являє собою Ala або він відсутній; Y12 обраний із Ala і Tyr або він відсутній; Y13 обраний із Gly і Ala або він відсутній; Y14 обраний із Trp, Phe, 1 Nal і Met; Y15 обраний із Leu, Nle, Phe і Thr; і Y17 обраний із Phe і 3-(3-піридил)-аланіну. Згідно з іншим варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому Za являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IІІa: His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Z12-Z13-Z14-Glu-Z16-Glu-Ala-Val-Z20-LeuPhe-lle-Z24-Z25-Leu-Z27-Z28 55 (IIc), в якій Z9 обраний із Asp і Glu; Z12 обраний із Lys, Arg і Orn; Z13 обраний із Gln і Tyr; 4 (IIIa), UA 112630 C2 5 Z14 обраний із Met і Leu; Z16 обраний із Glu, Cys і Lys; Z20 обраний із Arg, Lys і Orn; Z24 обраний із Lys і Glu; Z25 обраний із Trp, Lys, Cys і Phe; Z27 обраний із Lys, Arg і Orn; Z28 обраний із Asn і Asp або він відсутній; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IІІb: L1-L2-L3-L4 (IІІb), 10 15 в якій L1 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L2 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L3 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L4 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IІІc: Y12-Y13-Y14-Y15-Asp-Y17 20 25 (IIIc), в якій Y12 обраний із Tyr і Ala або він відсутній; Y13 обраний із Gly і Ala або він відсутній; Y14 обрано з Trp, 1 Nal і Phe; Y15 обраний із Leu, Nle, Thr та Phe; і Y17 обраний із Phe і 3-(3-піридил)-аланіну. Згідно з іншим варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому Za являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IVa: His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Z12-Gln-Met-Glu-Z16-Glu-Ala-Val-Arg-LeuPhe-lle-Glu-Trp-Leu-Z27-Z28 30 35 в якій Z9 обраний із Glu і Asp; Z12 обраний із Lys і Orn; Z16 обраний із Glu і Lys; Z27 обраний із Lys і Orn; Z28 обраний із Asn і Asp або він відсутній; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IVb: L1-L2-L3-L4 40 (IVa), (IVb), в якій L1 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L2 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L3 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L4 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IVc: Y12-Y13-Trp-Leu-Asp-Phe (IVc), 45 50 в якій Y12 являє собою Tyr або він відсутній; і Y13 являє собою Gly або він відсутній. Згідно зі ще одним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому Za являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Va: His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Z12-Tyr-Leu-Glu-Z16-Glu-Ala-Val-Arg-LeuPhe-lle-Glu-Phe-Leu-Z27-Z28 5 (Va), UA 112630 C2 5 в якій Z9 обраний із Glu і Asp; Z12 обраний із Lys і Orn; Z16 обраний із Glu і Lys; Z27 обраний із Lys і Orn; Z28 обраний із Asn і Asp або він відсутній; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Vb: L1-L2-L3-L4 (Vb), 10 15 20 25 30 35 в якій L1 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L2 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L3 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L4 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Vc: Y12-Y13-Trp-Leu-Asp-Phe (Vc), в якій Y12 являє собою Tyr або він відсутній; і Y13 являє собою Gly або він відсутній. Більше того, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому пептидна послідовність формули I містить один або більше внутрішньомолекулярних містків. Також даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, згідно з яким зазначений внутрішньомолекулярний місток утворюється між бічними ланцюгами двох амінокислотних залишків, які розділені трьома амінокислотами, в лінійній амінокислотній послідовності згідно з формулою I. Згідно з певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому внутрішньомолекулярний місток утворюється між бічними ланцюгами пар залишків x та x+3, x+4, x+5 і т.д. Згідно з іншим певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому зазначений внутрішньомолекулярний місток являє собою лактамне кільце. Згідно з іншим певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому зазначений внутрішньомолекулярний місток включає пари залишків, при цьому: Z12 являє собою Lys, і Z16 являє собою Glu; Z12 являє собою Glu, і Z16 являє собою Lys; Z16 являє собою Glu, і Z20 являє собою Lys; Z16 являє собою Lys, і Z20 являє собою Glu; Z20 являє собою Glu, і Z24 являє собою Lys; Z20 являє собою Lys, і Z24 являє собою Glu. Згідно з іншим аспектом даного винаходу забезпечується пептидний кон'югат, який має формулу VI: 1 R X-L-Y-R 2 (VI), 40 45 50 55 в якій 1 R являє собою Н, С1-4 алкіл, ацетил, форміл, бензоїл або трифторацетил; 2 R являє собою OH або NH2; X містить послідовність GLP-1 (7-36), яка має послідовність: His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-IleAla-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (SEQ ID NO: 114), або його аналог Xa; L являє собою лінкер, який містить до 4 природних або неприродних амінокислот чи їх комбінацію, або він відсутній; Y містить послідовність Гастрину-17, яка має послідовність: Gln-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe, при цьому Y15 обраний із Leu, Nle, Phe і Thr, або його аналог Ya. Згідно з одним варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: (i) Xa має до 5 замін у положеннях і/або має укорочення на C-кінці на 1-2 амінокислоти в порівнянні з послідовністю GLP-1; і/або (ii) Ya має до 5 замін у положеннях у порівнянні з послідовністю Гастрину-17 і/або містить укорочення на N-кінці на 1-13 амінокислот у порівнянні з послідовністю Гастрину-17. 6 UA 112630 C2 Згідно з іншим варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: Xa являє собою пептидну послідовність, яка має формулу VІІa: His-X8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-AlaX26-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X34-Gly-X36 5 10 в якій X8 обраний із Ala, Aib і Gly; X26 обраний із Arg і Lys; X34 обраний із Arg і Lys; X36 обраний із Arg і Lys; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу VІІb: L1-L2-L3-L4 15 (VIIa), (VІІb), в якій L1 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys, Gln або він відсутній; L2 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys, Gln або він відсутній; L3 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys, Gln або він відсутній; L4 обраний із Ser, Ala, Lys, Orn, bАla, 8Aoc, DBF, Peg3, Cys, Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу VІІc: Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Y7-Y8-Y9-Y10-Y11-Y12-Y13-Y14-Y15-Asp-Y17 (VIIc), 20 25 30 35 40 в якій Y1 являє собою Gln або він відсутній; Y2 являє собою Gly або він відсутній; Y3 являє собою Pro або він відсутній; Y4 являє собою Trp або він відсутній; Y5 являє собою Leu або він відсутній; Y6 являє собою Glu або він відсутній; Y7 являє собою Glu або він відсутній; Y8 являє собою Glu або він відсутній; Y9 являє собою Glu або він відсутній; Y10 являє собою Glu або він відсутній; Y1 1 являє собою Ala або він відсутній; Y12 обраний із Ala, Tyr або він відсутній; Y13 обраний із Gly, Ala або він відсутній; Y14 обраний із Trp, Phe, 1 Nal і Met; Y15 обраний із Leu, Nle, Phe і Thr; і Y17 обраний із Phe і 3-(3-піридил)-аланіну. Згідно зі ще одним варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: Xa являє собою пептидну послідовність, що має формулу VІІІa: His-X8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-X26Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X34-Gly-X36 45 в якій X8 обраний із Ala, Aib і Gly; X26 обраний із Arg і Lys; X34 обраний із Arg і Lys; X36 обраний із Arg і Lys; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу VІІІb: L1-L2-L3-L4 (VІІІb), 50 в якій L1 обраний із Peg3, Orn, Cys, Lys, Gln або він відсутній; L2 обраний із Ser, Ala, Orn, Cys, Lys, Gln або він відсутній; 7 (VIIIa), UA 112630 C2 L3 обраний із Lys, Ala, Cys, Orn, Gln або він відсутній; L4 обраний із Lys, Orn, Ala, Peg3, Cys, Lys, Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу VІІІc: Y12-Y13-Y14-Y15-Asp-Phe (VIIIc), 5 10 в якій Y12 обраний із Tyr, Ala або він відсутній; Y13 обраний із Gly, Ala або він відсутній; Y14 обраний із Trp і Phe; і Y15 обраний із Leu, Thr і Phe. Згідно з певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: Xa являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IXa: His-X8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-AlaX26-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X34-Gly-X36 15 20 в якій X8 обраний із Ala, Aib і Gly; X26 обраний із Arg і Lys; X34 обраний із Arg і Lys; X36 обраний із Arg і Lys; L являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IXb: L1-L2-L3-L4 25 (IXa), (IXb), в якій L1 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L2 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L3 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; L4 обраний із Orn, Peg3, Cys, Lys і Gln або він відсутній; Ya являє собою пептидну послідовність, яка має формулу IXc: Y12-Y13-Trp-Leu-Asp-Phe (IXc), 30 35 в якій Y12 являє собою Tyr або він відсутній; і Y13 являє собою Gly або він відсутній. Згідно з іншим певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: щонайменше один із Lys або Cys також кон'югований із ліпофільним замісником. Згідно з іншим аспектом, даний винахід відноситься до пептидного кон'югата, який має формулу: Ексендин-4(1-39)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-K-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-AAA-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-Peg3-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-8Aoc-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-DBF-SKK-[Gln1, Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-8Aoc-8Aoc-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, Ексендин-4(1-39)-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-K-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-AAA-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-SKK-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-Peg3-SKK-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-8Aoc-SKK-[Leu4]Гастрин-6, Ексендин-4(1-39)-DBF-SKK-[Leu4]Гастрин-6, 8 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) (13) (14) (15) (16) (17) UA 112630 C2 5 10 15 20 Ексендин-4(1-39)-8Aoc-8Aoc-[Leu4]Гастрин-6, (18) Ексендин-4(1-28)-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (19) Ексендин-4(1-28)-K-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (20) Ексендин-4(1-28)-AAA-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (21) Ексендин-4(1-28)-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17 (22) Ексендин-4(1-28)-Peg3-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17 (23) Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (24) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17 (25) Ексендин-4(1-28)-DBF-SKK-[Gln1, Leu15]Гастрин-17 (26) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-8Aoc-[Gln1,Leu15]Гастрин-17 (27) Ексендин-4(1-28)-[Leu4]Гастрин-6 (28) Ексендин-4(1-28)-K-[Leu4]Гастрин-6 (29) Ексендин-4(1-28)-AAA-[Leu4] Гастрин-6, (30) Ексендин-4(1-28)-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (31) Ексендин-4(1-28)-Peg3-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (32) Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, (33) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (34) Ексендин-4(1-28)-DBF-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (35) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-8Aoc-[Leu4]Гастрин-6, (36) GLP-1(7-36)-[Gln1, Leu15]Гастрин-17, (37) GLP-1(7-36)-K-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (38) GLP-1(7-36)-AAA-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (39) GLP-1(7-36)-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (40) GLP-1(7-36)-Peg3-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (41) GLP-1(7-36)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (42) GLP-1(7-36)-8Aoc-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (43) GLP-1(7-36)-DBF-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (44) GLP-1(7-36)-8Aoc-8Aoc-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (45) GLP-1(7-36)-[Leu4]Гастрин-6, (46) GLP-1(7-36)-K-[Leu4]Гастрин-6, (47) GLP-1(7-36)-AAA-[Leu4]Гастрин-6, (48) GLP-1(7-36)-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (49) GLP-1(7-36)-Peg3-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (50) GLP-1(7-36)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, (51) GLP-1(7-36)-8Aoc-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (52) GLP-1(7-36)-DBF-SKK-[Leu4]Гастрин-6 (53) або GLP-1(7-36)-8Aoc-8Aoc-[Leu4]Гастрин-6, (54) при цьому кожна пептидна група з Ексендину-4(1-39), Ексендину-4(1-28) і GLP-1(7-36) ковалентно приєднана (тобто зв'язана або спарена) до частини, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її C-термінальну частину, і кожна пептидна група з [Gln1,Leu15]Гастрину-17 і [Leu4]Гастрину-6 ковалентно приєднана (тобто зв'язана або спарена) до частини, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її N-термінальну частину; або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату. Згідно з певним аспектом, пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можна одержати за допомогою стандартних синтетичних методів із застосуванням рекомбінантних систем експресії або будь-якого іншого підходящого методу. Таким чином, кон'югати можна синтезувати різними шляхами, включаючи, наприклад, методи, які включають: (a) синтез пептидного кон'югата за допомогою стандартної твердофазної чи рідкофазної методології, поетапно або за допомогою складання фрагментів, і виділення й очищення кінцевого продукту пептидного кон'югата; (б) експресію конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, у хазяйській клітині й виділення продукту експресії або культури хазяйських клітин; або (в) здійснення експресії in vitro в безклітинній системі конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, і виділення продукту експресії; або за допомогою будь-якої комбінації зазначених методів (a), (б) або (в) для одержання фрагментів пептидного кон'югата, наступного легування фрагментів для одержання пептидного кон'югата й виділення пептидного кон'югата. Серед інших аспектів даного винаходу перебувають способи лікування різних станів, захворювань або розладів (включаючи діабет (тип 1 і тип 2) і різні стани, захворювання і 9 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 розлади, пов'язані з діабетом), які включають введення пептидного кон'югата згідно з даним винаходом (у вільній формі або у вигляді його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату), а також фармацевтичних композицій, що містять пептидний кон'югат або його фармацевтично прийнятну сіль чи сольват згідно з даним винаходом. Згідно з конкретним аспектом, пептидні кон'югати згідно з даним винаходом також можна використовувати як фармацевтичні агенти для лікування резистентності до інсуліну, непереносимості глюкози, предіабетів, підвищених рівнів глюкози натщесерце, діабетів 1 і 2 типів, гіпертензії і/або дисліпідемії (або комбінації зазначених метаболічних факторів ризику), атеросклерозу, артеріосклерозу, хвороби коронарних артерій серця, хвороби периферичних артерій та інсульту. Їх також можна застосовувати для профілактики збільшення ваги, сприяння втраті ваги, зниження надлишкової маси тіла і/або лікування ожиріння (наприклад, завдяки контролю апетиту, харчування, споживання їжі, споживання калорій і/або витрат енергії), включаючи патологічне ожиріння, а також пов'язані з ним захворювання, розлади і стани здоров'я, включаючи, але не обмежуючись ними, запалення, пов'язане з ожирінням, пов'язану з ожирінням хворобу жовчного міхура і викликане ожирінням апное сну. Дія пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом на зазначені стани може бути опосередкована в цілому або частково впливом на масу тіла або може не залежати від цього. КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР Фігура 1. Середня концентрація в плазмі в залежності від часу (прямо пропорційна) після внутрішньовенного й підшкірного введення мишам 100 нмоль/кг. A: Сполуки 33, B: Сполуки 1. Дані представлені у вигляді середнє ± SD, n=3/точка вимірювання. Фігура 2. Середня концентрація в плазмі в залежності від часу (прямо пропорційна) після підшкірного введення мишам 100 нмоль/кг Сполуки 33, 74, 76, 77, 78 і 80. n=2/точка вимірювання. На Фігурі 3 представлені дані загального вмісту панкреатичного інсуліну (у мкг) у мишей db/db з діабетом після введення (i) трьох концентрацій (1,10 і 50 нмоль/кг) Сполуки 1 згідно з даним винаходом [Ексендин-4(1-39)-Peg3-Рeg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17; див. нижче], (ii) трьох відповідних концентрацій 1:1 адитивної комбінації пептидів Ексендину-4(1-39) і h[Leu15]Гастрину-17 (1, 10 і 50 нмоль/кг кожного пептиду) і (iii) носія. Фігура 4. Δ-глюкози в крові у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію КрускалаУолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, ***p < 0,001. Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та h[Leu15]Гастрину-17 і носія відповідно; n=16-19 у групі. Ексендин-4(1-39)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (1) Ексендин-4(1-39)-[Gln1,Leu 15]Гастрин-17, (2) Ексендин-4(1-39)-K-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (3) Ексендин-4(1-39)-AAA-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (4) Ексендин-4(1-39)-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (5) Ексендин-4(1-39)-Peg3-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (6) Ексендин-4(1-39)-8Aoc-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (7) Ексендин-4(1-39)-DBF-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (8) Ексендин-4(1-39)-8Aoc-8Aoc-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (9) Ексендин-4(1-39)-[Leu4]Гастрин-6, (10) Ексендин-4(1-39)-K-[Leu4]Гастрин-6, (11) Ексендин-4(1-39)-AAA-[Leu4]Гастрин-6, (12) Ексендин-4(1-39)-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (13) Ексендин-4(1-39)-Peg3-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (14) Ексендин-4(1-39)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, (15) Ексендин-4(1-39)-8Aoc-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (16) Ексендин-4(1-39)-DBF-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (17) Ексендин-4(1-39)-8Aoc-8Aoc-[Leu4]Гастрин-6, (18) Ексендин-4(1-28)-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (19) Ексендин-4(1-28)-K-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (20) Ексендин-4(1-28)-AAA-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (21) Ексендин-4(1-28)-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (22) Ексендин-4(1-28)-Peg3-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (23) Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (24) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (25) Ексендин-4(1-28)-DBF-SKK-[Gln1, Leu15]Гастрин-17, (26) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-8Aoc-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (27) 10 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 Ексендин-4(1-28)-[Leu4]Гастрин-6, (28) Ексендин-4(1-28)-K-[Leu4]Гастрин-6, (29) Ексендин-4(1-28)-AAA-[Leu4]Гастрин-6, (30) Ексендин-4(1-28)-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (31) Ексендин-4(1-28)-Peg3-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (32) Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, (33) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (34) Ексендин-4(1-28)-DBF-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (35) Ексендин-4(1-28)-8Aoc-8Aoc-[Leu4]Гастрин-6, (36) GLP-1(7-36)-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (37) GLP-1(7-36)-K-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (38) GLP-1(7-36)-AAA-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (39) GLP-1(7-36)-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (40) GLP-1(7-36)-Peg3-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (41) GLP-1(7-36)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (42) GLP-1(7-36)-8Aoc-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (43) GLP-1(7-36)-DBF-SKK-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (44) GLP-1(7-36)-8Aoc-8Aoc-[Gln1,Leu15]Гастрин-17, (45) GLP-1(7-36)-[Leu4]Гастрин-6, (46) GLP-1(7-36)-K-[Leu4]Гастрин-6, (47) GLP-1(7-36)-AAA-[Leu4]Гастрин-6, (48) GLP-1(7-36)-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (49) GLP-1(7-36)-Peg3-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (50) GLP-1(7-36)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, (51) GLP-1(7-36)-8Aoc-SKK-[Leu4]Гастрин-6, (52) GLP-1(7-36)-DBF-SKK-[Leu4]Гастрин-6 (53) або GLP-1(7-36)-8Aoc-8Aoc-[Leu4]Гастрин-6, (54) Фігура 5. Δ-інсуліну в плазмі у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію КрускалаУолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, ***p < 0,001. Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та h[Leu15]Гастрину-17 і носія відповідно; n=16-19 у групі. Фігура 6. Вміст панкреатичного інсуліну у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, **p < 0,01. Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та h[Leu15]Гастрину-17 і носія відповідно; n=16-19 у групі. Фігура 7. Δ-HbАlc у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, **p < 0,01, ***p < 0,001. Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та h[Leu15]Гастрину-17 і носія відповідно; n=16-19 у групі. Фігура 8. Δ-С-пептиду в плазмі у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, *p < 0,05. Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та h[Leu15]Гастрину-17 і носія відповідно; n=16-19 у групі. Фігура 9. Вплив підшкірного введення Ексендину-4, Ліраглутиду або Сполуки 33 на переносимість глюкози за результатами вимірювання площі під кривою (AUC) після навантаження глюкозою мишей db/db. Застосовували три режими введення (A) Профілактика, (Б) Лікування або (C) Канікули. Дані представлені у вигляді середнього і SEM (n=8-13/група). Статистика: дані порівнювали із застосуванням двохфакторного аналізу АNOVА з наступною поправкою Бонферроні: *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 проти носія. Фігура 10. Вплив підшкірного введення Ексендину-4, Ліраглутиду або Сполуки 33 на рівень глюкози в крові натщесерце через 8 годин після останнього приймання їжі у мишей db/db. Застосовували три режими введення: (A) Профілактика, (Б) Лікування або (C) Канікули. Дані представлені у вигляді середнього і SEM (n=8-13/група). Статистика: дані порівнювали із застосуванням двохфакторного аналізу АNOVА з наступною поправкою Бонферроні: *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 проти носія. Фігура 11. Вплив підшкірного введення Ексендину-4, Ліраглутиду або Сполуки 33 на кінцеві значення (93 день) рівня (A) С-пептиду в плазмі, (Б) інсуліну в плазмі або (C) HbА1 c (%). Дані представлені у вигляді середнього і SEM (n=8-13/група). Статистика: дані порівнювали з 11 UA 112630 C2 5 10 використанням однофакторного аналізу АNOVА, тесту Крускала-Уолліса з наступним аналізом Данна: ***p < 0,001, **p < 0,01, *p < 0,05 проти носія. ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ Як уже показане вище, один аспект даного винаходу відноситься до пептидного кон'югата, який має формулу: при цьому кожна з пептидних груп Ексендину-4(1-39), Ексендину-4(1-28) і GLP-1(7-36) ковалентно з'єднана з частиною, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її Cкінець, і кожна з пептидних груп [Gln1,Leu15]Гастрину-17 і [Leu4]Гастрину-6 ковалентно з'єднана з частиною, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її N-кінець; або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату. Згідно з іншим аспектом даний винахід відноситься до пептидного кон'югата, який має формулу: Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu3]Гастрин-5 Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Ala1,Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Ala2,Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu2]Гастрин-4 [Leu14]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Orn12]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Orn27]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Phe25]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Asp28]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Tyr13]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Orn20]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-27)-[Leu4]Гастрин-11 Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu3]Гастрин-5 Ексендин-4(1-26)-Peg3-[Leu3]Гастрин-5 Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu2]Гастрин-4 [Tyr13,Leu14]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Tyr13,Phe25]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Leu14,Phe25]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Tyr13,Leu14,Phe25]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Бічний ланцюг-цикло([Lys12,Glu16]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Бічний ланцюг-цикло([Glu16,Lys20]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Бічний ланцюг-цикло([Lys20,Glu24]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Lys16]Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-Peg3-K-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-[Thr4]Гастрин-6 Ексендин-4(1-28)-[Phe4]Гастрин-6 [Leu14]Ексендин-4(1-28)-[1Nal3,Leu4]Гастрин-6 [Leu14]Ексендин-4(1-28)-[Nle4]Гастрин-6 [Leu14]Ексендин-4(1-28)-[Leu4,[3-(3-Піридил)-Ala]6]Гастрин-6 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4,Phe3]Гастрин-6 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Peg3-[Leu4,Phe3]Гастрин-6 [Arg27,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Arg12,27,Leu14,Lys16,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Arg12,27,Leu14,Lys20,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Arg12,27,Leu14,Lys24,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Arg12,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-[Leu2]Гастрин-4 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu2]Гастрин-4 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Orn-Peg3-[Leu2]Гастрин-4 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Orn-[Leu2]Гастрин-4 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Orn-Orn-[Leu2]Гастрин-4 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-[Leu4]Гастрин-6 12 (55) (56) (57) (58) (59) (60) (61) (62) (63) (64) (65) (66) (67) (68) (69) (70) (71) (72) (73) (74) (75) (76) (77) (78) (79) (80) (81) (82) (83) (84) (85) (86) (87) (88) (89) (90) (91) (92) (93) (94) (95) (96) (97) (98) (99) (100) (101) UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (102) [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Orn-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (103) [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Peg3-Orn-[Leu4]Гастрин-6 (104) [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-Orn-Orn-[Leu4]Гастрин-6 (105) [Lys(Гексадеканоїл-ізоGlu)34]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (106) [Arg34,Lys(Гексадеканоїл-ізоGlu)26]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (107) [Arg26,34,Lys(Гексадеканоїл-ізоGlu)36]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (108) [Lys(Гексадеканоїл-ізоGlu)26]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (109) [Arg26,34,Gly8,Lys(Гексадеканоїл-ізоGlu)36]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (110) [Aib8,Arg34,Lys(Гексадеканоїл-ізоGlu)26]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (111) [Aib8,Arg34]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (112) [Arg34]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6, (113) або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату. Наведені вище формули для пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом, які записані з використанням традиційних і широко використовуваних скорочень/позначень для різних розглянутих пептидних груп [тобто Ексендин-4(1-39), Ексендин-4(1-28) і GLP-1(7-36)], можуть бути записані у вигляді традиційної повної амінокислотної послідовності, як представлено нижче (лінкерні групи виділені жирним шрифтом): (SEQ ID NO: 1) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-Peg3-Peg3QGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 2) HHGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (без лінкера) (SEQ ID NO: 3) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-KQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 4) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-AAAQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 5) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 6) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-Peg3-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 7) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-8Aoc-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 8) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-DBF-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 9) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-8Aoc-8AocQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 10) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSYGWLDF-NH2 (без лінкера) (SEQ ID NO: 11) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-K-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 12) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-AAA-YGWLDFNH2 (SEQ ID NO: 13) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-SKK-YGWLDFNH2 (SEQ ID NO: 14) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-Peg3-SKKYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 15) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-Peg3-Peg3YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 16) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-8Aoc-SKKYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 17) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-DBF-SKKYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 18) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-8Aoc-8AocYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 19) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (без лінкера) (SEQ ID NO: 20) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-K-QGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 21) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-AAA-QGPWLEEEEEAYGWLDFNH2 13 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 (SEQ ID NO: 22) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-SKK-QGPWLEEEEEAYGWLDFNH2 (SEQ ID NO: 23) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 24) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3QGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 25) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-8Aoc-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 26) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-DBF-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 27) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-8Aoc-8AocQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 28) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-YGWLDF-NH2 (без лінкера) (SEQ ID NO: 29) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-K-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 30) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-AAA-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 31) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 32) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 33) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 34) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-8Aoc-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 35) H-HGEGTFTSDLSKQM EEEAVRLFI EWLKN-DBF-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 36) H-HGEGTFTSDLSKQM EEEAVRLFI EWLKN-8Aoc-8Aoc-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 37) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (без лінкера) (SEQ ID NO: 38) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-K-QGPWLEEEEEAYGWLDFNH2 (SEQ ID NO: 39) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-AAAQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 40) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 41) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-Peg3-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 42) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-Peg3-Peg3QGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 43) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-8Aoc-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 44) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-DBF-SKKQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 45) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-8Aoc-8AocQGPWLEEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ I D NO: 46) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRYGWLDF-N H2 (без лінкера; (SEQ ID NO: 47) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-K-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 48) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-AAA-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 49) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 50) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-Peg3-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 51) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 52) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-8Aoc-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 53) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-DBF-SKK-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 54) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-8Aoc-8Aoc-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 55) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFI EWLKN-Peg3-Peg3-GWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 56) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFI EWLKN-Peg3-Peg3-AGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 57) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFI EWLKN-Peg3-Peg3-YAWLDF-N H2 (SEQ ID NO: 58) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFI EWLK-Peg3-Peg3-YGWLDF-N H2 (SEQ ID NO: 59) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-WLDF-NH2 (SEQ ID NO: 60) H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 61) H-HGEGTFTSDLS-Orn-QMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 62) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWL-Orn-N-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 63) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEFLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 64) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKD-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 65) H-HGEGTFTSDLSKYMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 66) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAV-Orn-LFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 14 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 (SEQ ID NO: 67) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 68) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 69) H-HGEGTFTSDLSKQ EEEAVRLFIEWLKEEEEAYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 70) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 71) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK-Peg3-GWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 72) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWL-Peg3-GWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 73) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK-Peg3-WLDF-NH2 (SEQ ID NO: 74) H-HGEGTFTSDLSKYLEEEAVRLFIEWLK-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 75) H-HGEGTFTSDLSKYMEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 76) H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 77) H-HGEGTFTSDLSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 78) H-HGEGTFTSDLS-K()-QME-E()-EAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 79) H-HGEGTFTSDLSKQME-E()-EAV-K()-LFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 80) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAV-K()-LFI-E()-WLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 81) H-HGEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 82) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-K-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 83) H-HGEGTFTSDLSKQ EEEAVRLFIEWLKNYGWTDF-NH2 (SEQ ID NO: 84) H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNYGWFDF-NH2 (SEQ ID NO: 85) H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNYG-1Nal-LDF-NH2 (SEQ ID NO: 86) H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNYGW-Nle-DF-NH2 (SEQ ID NO: 87) H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNYGWLD-[3-(3-Піридил)-аланіл]NH2 (SEQ ID NO: 88) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 89) H-HGEGTFTSDLSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Peg3-YGFLDF-NH2 (SEQ ID NO: 90) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Peg3-YGFLDF-NH2 (SEQ ID NO: 91) H-HGEGTFTSDLSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 92) H-HGEGTFTSDLSRYLEKEAVRLFIEFLR-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 93) H-HGEGTFTSDLSRYLEEEAVKLFIEFLR-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 94) H-HGEGTFTSDLSRYLEEEAVRLFIKFLR-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 95) H-HGEGTFTSDLSRYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 96) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 97) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-WLDF-NH2 (SEQ ID NO: 98) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Orn-Peg3-WLDF-NH2 (SEQ ID NO: 99) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Orn-WLDF-NH2 (SEQ ID NO: 100) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Orn-Orn-WLDF-NH2 (SEQ ID NO: 101) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKYGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 102) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 103) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Orn-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 104) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Peg3-Orn-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 105) H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-Orn-Orn-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 106) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAA-K(Гексадеканоїл-ізоGlu)-GRG-Peg3-Peg3YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 107) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAA-K(Гексадеканоїл-ізоGlu)-EFIAWLVRGRGPeg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 108) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVRG-K(Гексадеканоїл-ізоGlu)-GPeg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 109) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAA-K(Гексадеканоїл-ізоGlu)-EFIAWLVKGRGPeg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 110) H-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVRG-K(Гексадеканоїл-ізоGlu)-GPeg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 111) H-H-Aib-EGTFTSDVSSYLEGQAA-K(Гексадеканоїл-ізоGlu)-EFIAWLVRGRGPeg3-Peg3-YGWLDF-NH2 (SEQ ID NO: 112) H-H-Aib-EGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRGRG-Peg3-Peg3-YGWLDFNH2 (SEQ ID NO: 113) H-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRGRG-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2, при цьому скорочення Peg3, 8Aoc, DBF, 1 Nal, bAla, Orn, DPR, Dbu, Gaba і Aib позначають наступні амінокислотні групи, які не зустрічаються в природі: Peg3: -NH-CH2-CH2-0-CH2-CH2-0-CH2-C(0)- (отриманий від 8-аміно-3,6-диоксаоктанової кислоти); 15 UA 112630 C2 8Aoc: кислоти); DBF: -NH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-C(0) (отриманий від 8-амінооктанової 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 [отриманий від 4-(2-аміноетил)-6-дибензофуранпропанової кислоти]; 1 Nal: 1-нафтилаланін; bАla: бета-аланін; Gaba: γ-амінобутанова кислота; Aib: α-аміно-ізобутанова кислота; Dbu: диамінобутанова кислота; DPR: диамінопропіонова кислота; Orn: орнітин. Таким чином, беручи до уваги розташування лінкерної групи в пептидному кон'югаті згідно з даним винаходом, лінкерна група -Peg3-Рeg3-, наприклад, позначає наступну хімічну групу: -NH-CH2-CH2-О-CH2-CH2-О-CH2-C(О)-NH-CH2-CH2-О-CH2-CH2-О-CH2-C(О)-, при цьому група -NH-…. ліворуч від лінкерної групи, що розглядається, ковалентно приєднана до групи, отриманої від Ексендину-4- або GLP-1, - пептидного кон'югата, що розглядається; і група …-C(O)- праворуч від лінкерної групи, що розглядається, приєднана до групи, отриманої від гастрину, пептидного кон'югата, що розглядається. У позначених лінкерних групах, що залишилися, -K- позначає залишок амінокислоти лізину, AAA- позначає трипептидний залишок -Ala-Ala-Ala-, і -SKK- позначає трипептидний залишок Ser-Lys-Lys-. Слід розуміти, що в деяких пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом, перерахованих вище, група пептидної послідовності GLP-1(7-36) отримана від послідовності GLP-1 людини (hGLP-1) або його аналога. Слід розуміти, що в деяких пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом, перерахованих вище, група пептидної послідовності Ексендину-4(1-39) отримана від послідовності Ексендину-4 Heloderma suspectum або являє собою її аналог. Аналогічно групи [Gln1,Leu15]Гастрину-17 і [Leu4]Гастрину-6 у зазначених кон'югатах отримані від гастрину людини. Слід розуміти, що SEQ ID NO: 1 рівнозначна Сполуці 1, SEQ ID NO: 2 рівнозначна Сполуці 2 і т.д. Слід розуміти, що кожний із зазначених вище пептидних кон'югатів 1-54 окремо, тобто Сполука 1 або Сполука 2, або Сполука 3 (і т.д. до Сполуки 54), і, крім того, кожний із пептидних кон'югатів 55-113, перерахованих нижче (дивіться Таблицю 2 і 3 у Прикладі 2), окремо, тобто Сполука 55 або Сполука 56 … (і т.д. до Сполуки 113) або її фармацевтично прийнятна сіль чи сольват складають також окремий аспект даного винаходу. У контексті даного винаходу, якщо амінокислоти не позначені за допомогою їхнього повного найменування (наприклад, аланін, аргінін і т.д.), вони позначені за допомогою своїх традиційних трибуквених і/або однобуквених скорочень (наприклад, Ala або A для аланіну, Arg або R для аргініну і т.д.). Термін "пептидний кон'югат" у контексті даного винаходу позначає молекулу, в якій перша пептидна група приєднана (тобто зв'язана або з'єднана) безпосередньо або за допомогою лінкерної хімічної групи (тобто містка або спейсера) за допомогою ковалентного хімічного зв'язку з другою пептидною групою. Сполуки згідно з даним винаходом можуть нести один або декілька внутрішньомолекулярних лактамних кілець у пептидній послідовності. Кожний такий місток у сполуках, перерахованих у Таблиці 2 (позначений за допомогою приставки "бічний ланцюгцикло"), утворюється між бічним ланцюгом, який містить карбонову кислоту, й іншим бічним ланцюгом, який містить амін. Два амінокислотні залишки зазвичай розділені трьома амінокислотами в лінійній послідовності. У пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом Ексендин-4 або Za може збігатися щонайменше на 75 % із природним Ексендином-4, наприклад, щонайменше на 80, 85, 90 або 95 %. 16 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом гастрин або Ya може збігатися щонайменше на 70 % із природним гастрином, наприклад, щонайменше на 75, 80, 85, 90 або 95 %. У пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом GLP-1 або Xa може збігатися щонайменше на 85 % із природним GLP-1, наприклад, щонайменше на 90 або 95 %. Згідно з одним варіантом реалізації поліпептид згідно з даним винаходом може містити амінокислотну послідовність, представлену на одній із SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75,76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112 і 113, або її функціональний фрагмент/варіант, який щонайменше приблизно на 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 97 %, 98 %, 99 %, 99,5 % збігається з однією або декількома зазначеними послідовностями чи їх функціональними фрагментами/варіантами, яка має не більше, ніж 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1 заміну амінокислот у порівнянні з однією або декількома зазначеними послідовностями, без сигнальної послідовності або з нею, без заміни одного або декількох залишків цистеїну на інший залишок, такий як серин, або з нею, і їхніми безперервними сегментами, що мають щонайменше 2 амінокислотні залишки за довжиною. Згідно з одним варіантом реалізації, поліпептид згідно з даним винаходом (i) збігається за амінокислотною послідовністю щонайменше на 99 % з однією з SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112 і 113 або її частиною; або (ii) містить щонайменше 31, 32, 33, 34, 35,36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 або 60 безперервних амінокислот будьякої з SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 1 0, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112 і 113; або (iii) і те, і інше. Термін "фармацевтично прийнятна сіль" у контексті даного винаходу (фармацевтично прийнятна сіль пептидного кон'югата згідно з даним винаходом) позначає сіль, яка є безпечною для пацієнта або людини, якій вводять зазначену сіль. Вона може являти собою сіль, обрану з кислотно-адитивних солей і основних солей. Приклади кислотно-адитивних солей включають хлориди, цитрати й ацетати. Приклади основних солей включають солі, в яких катіон вибирають серед лужних металів, таких як йони натрію або калію, катіонів лужно-земельних металів, таких як кальцій або магній, а також йони амонію, такі як йони типу N(R1)(R2)(R3)(R4)+, де R1, R2, R3 і R4 незалежно зазвичай позначають водень, можливо заміщений C1-6 алкіл або можливо заміщений C2-6 алкеніл. Приклади C1-6 алкільних груп включають метил, етил, 1-пропіл і 2-пропіл. Приклади важливих C2-6 алкенільних груп включають вініл, 1-пропеніл і 2-пропеніл. Інші приклади фармацевтично прийнятних солей описуються в публікації 17 видання "Remington's Pharmaceutical Sciences", Alfonso R. Gennaro (Ed.), Mark Publishing Company, Easton, PA, USA, 1985 (і її більш ранніх виданнях), у третьому виданні "Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology", James Swarbrick (Ed.), Informa Healthcare USA (Inc.), NY, USA, 2007, і J. Pharm. Sci. 66:2 (1977). Термін "сольват" у контексті даного винаходу позначає комплекс із певною стехіометрією, утворений між розчиненою речовиною (у цьому випадку, пептидним кон'югатом або фармацевтично прийнятною сіллю згідно з даним винаходом) і розчинником. Розчинник у даному випадку може являти собою, наприклад, воду, етанол або інші фармацевтично прийнятні, зазвичай із малою молекулярною вагою органічні речовини, такі як, але не обмежуючись ними, оцтова кислота або молочна кислота. Якщо розглянутий розчинник являє собою воду, то сольват зазвичай позначають терміном гідрат. Інший аспект даного винаходу відноситься до пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі згідно з даним винаходом для застосування як лікарського засобу. Згідно з іншим аспектом розглянутий лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування при лікуванні пацієнта, що цього потребує, від одного з наступних захворювань або розладів, або пов'язаних станів: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу, предіабет, синдром інсулінорезистентності, розлад толерантності до глюкози (IGT), хворобливі стани, пов'язані з підвищеним рівнем глюкози в крові, гіперглікемія, гіпертензія, атерогенна дисліпідемія, артеріосклероз (наприклад, 17 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 атеросклерозу), ішемічна хвороба серця, захворювання периферичних артерій, інсульт, мікроангіопатія, захворювання шлунка, метаболічний синдром, рак (наприклад, рак товстої кишки), запальна хвороба кишечника (ЗХК) і синдром подразненого кишечника (СПК). Інші захворювання або розлади, що мають можливу актуальність у зв'язку з цим, включають ожиріння, патологічне ожиріння, запалення, викликане ожирінням, викликане ожирінням захворювання жовчного міхура і апное сну, викликане ожирінням. Згідно зі ще одним аспектом, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для індукування у пацієнта, що цього потребує, неогенезу острівців підшлункової залози (наприклад, для сприяння формуванню нових β-клітин у острівцях підшлункової залози). Згідно зі ще одним аспектом, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для індукування у пацієнта, що цього потребує, виживання β-клітин у острівцях підшлункової залози (наприклад, для запобігання втрати β-клітин у острівцях підшлункової залози). Згідно зі ще одним аспектом, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для запобігання у пацієнта, що цього потребує, апоптозу β-клітин у острівцях підшлункової залози (наприклад, для запобігання втрати β-клітин у острівцях підшлункової залози). Згідно зі ще одним аспектом даного винаходу, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для зниження у пацієнта, що цього потребує, рівнів гемоглобіну b1Ac (глікозильованого гемоглобіну; HbА1c) у крові. Згідно зі ще одним аспектом, даний винахід відноситься до пептидного кон'югата згідно з даним винаходом для виготовлення лікарського засобу для лікування пацієнта, що цього потребує, від одного або декількох наступних станів, захворювань або розладів: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу, предіабет, синдром інсулінорезистентності, розлад толерантності до глюкози (IGT), хворобливі стани, пов'язані з підвищеним рівнем глюкози в крові, гіперглікемія, гіпертензія, атерогенна дисліпідемія, артеріосклероз (наприклад, атеросклерозу), ішемічна хвороба серця, захворювання периферичних артерій, інсульт, мікроангіопатія, захворювання шлунка, метаболічний синдром, рак (наприклад, рак товстої кишки), запальна хвороба кишечника (ЗХК) і синдром подразненого кишечника (СПК). Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом можна застосовувати для: виготовлення лікарського засобу для індукування неогенезу острівців підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує; виготовлення лікарського засобу для запобігання апоптозу β-клітин у острівцях підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує; або виготовлення лікарського засобу для зниження рівнів гемоглобіну b1Ac (глікозильованого гемоглобіну; HbА1c) в крові пацієнта, що цього потребує. Серед інших родинних аспектів, додаткові аспекти даного винаходу являють собою відповідні способи лікування станів, захворювань або розладів, окрім зазначених вище. Таким чином, один такий додатковий аспект даного винаходу відноситься до способу лікування пацієнта, що цього потребує, від одного або декількох наступних захворювань або розладів: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу, предіабет, синдром інсулінорезистентності, розлад толерантності до глюкози (IGT), хворобливі стани, пов'язані з підвищеним рівнем глюкози в крові, гіперглікемія, гіпертензія, атерогенна дисліпідемія, артеріосклероз (наприклад, атеросклерозу), ішемічна хвороба серця, захворювання периферичних артерій, інсульт, мікроангіопатія, захворювання шлунка, метаболічний синдром, рак (наприклад, рак товстої кишки), запальна хвороба кишечника (ЗХК) і синдром подразненого кишечника (СПК), зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом. Крім того, інші можливі актуальні стани, захворювання або розлади в контексті способів лікування згідно з даним винаходом включають ожиріння, патологічне ожиріння, запалення, викликане ожирінням, хворобу жовчного міхура, викликану ожирінням, і викликане ожирінням апное сну. Інший аспект даного винаходу відноситься до способу індукування неогенезу острівців підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом. Додатковий аспект даного винаходу відноситься до способу забезпечення виживання βклітин у острівцях підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб 18 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом. Додатковий аспект даного винаходу відноситься до способу зниження або запобігання апоптозу β-клітин у острівцях підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або фармацевтично прийнятної солі чи її сольвату згідно з даним винаходом. Інший аспект даного винаходу відноситься до способу зниження рівнів гемоглобіну b1Ac (глікозильований гемоглобін; HbА1c) у крові пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом. Інші аспекти даного винаходу відносяться до наступного: спосіб лікування пацієнта, що цього потребує, від хворобливого стану, викликаного підвищеними рівнями глюкози; спосіб зниження рівнів глюкози у пацієнта, що цього потребує; спосіб стимуляції вивільнення інсуліну у пацієнта, що цього потребує; спосіб регуляції спорожнення шлунка у пацієнта, що цього потребує; і спосіб зниження рівнів ліпідів у плазмі у пацієнта, що цього потребує. У кожному з останніх способів згідно з даним винаходом зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом. Термін "терапевтично ефективна кількість" при використанні в контексті описаних вище способів лікування або інших терапевтичних втручань відповідно до винаходу відноситься до кількості, достатньої для того, щоб вилікувати, покращити, полегшити або частково зупинити клінічні прояви певного захворювання, розладу або стану, який є об'єктом лікування або іншого терапевтичного втручання, що розглядається. Кількість, достатня для досягнення цієї мети, визначається як терапевтично ефективна кількість. Кількість, що вводиться, і спосіб введення можна адаптувати для досягнення оптимальної ефективності. Ефективна для даної мети кількість буде залежати, зокрема, від тяжкості захворювання, розладу або стану, який є об'єктом певного лікування або іншого терапевтичного втручання, ваги тіла й загального стану пацієнта, що розглядається, харчування, можливого супутнього лікування й від інших факторів, добре відомих фахівцям у даній області медицини. Визначити підходящий розмір дози й режим дозування, найбільш підходящий для введення пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату відповідно до винаходу людині, можна за результатами, отриманими за допомогою даного винаходу, і їх можна підтвердити в ході правильно розроблених клінічних випробувань. Ефективну дозу й протокол лікування можна визначити за допомогою традиційних способів, починаючи з низької дози на лабораторних тваринах, а потім збільшуючи дозу, контролюючи при цьому ефекти, а також систематично змінюючи режим дозування. Численні фактори можуть бути прийняті до уваги лікарем при визначенні оптимального дозування для даного об'єкта. Такі міркування добре відомі фахівцеві в даній області. Терміни "лікування" та його граматичні варіанти (наприклад, "який виліковується", "лікування", "лікувати") при вживанні в даному контексті відносяться до підходу для одержання корисних або бажаних клінічних результатів. Для цілей даного винаходу, корисні або бажані клінічні результати включають, але не обмежуються ними, полегшення симптомів, зниження ступеня захворювання, стабілізацію (тобто не погіршення) стану захворювання, затримку або вповільнення прогресування захворювання, покращення або тимчасове покращення хворобливого стану і ремісію (часткову або повну), як помітну, так і непомітну. "Лікування" може також означати продовження виживаності в порівнянні з очікуваною тривалістю життя при відсутності лікування. "Лікування" в деяких варіантах реалізації винаходу може являти собою втручання, яке здійснюється з метою попередження розвитку або зміни патології стану, захворювання або розладу. Відповідно, термін "лікування" може відноситися як до терапевтичного втручання, так і до профілактичних або превентивних заходів. Суб'єкт (наприклад, людина), що потребує лікування, таким чином, може являти собою суб'єкт, який уже страждає від хвороби або розладу, про який іде мова, або суб'єкт, у якого слід попередити розлад. Термін "лікування", таким чином, включає придушення або зниження посилення тяжкості патологічного стану або симптомів (наприклад, збільшення ваги або гіперглікемії) в порівнянні з відсутністю лікування і необов'язково повинен означати повне припинення відповідного захворювання, розладу або стану. Термін "агоніст" у контексті даного винаходу позначає речовину (ліганд), яка активує тип рецептора, про який іде мова. 19 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Термін "агоніст рецептора GLP-1" у контексті даного винаходу означає речовину (ліганд) (який іноді позначається як "агоніст GLP-1"), яка активує рецептор GLP-1, такий як рецептор GLP-1 людини. Речовини, які активують рецептор GLP-1 людини, включають природні пептидні гормони GLP-1: GLP-1(7-37), GLP-1(7-36)амід, оксинтомодулін, Ексендин-3, Ексендин-4, глюкагон, шлунковий інгібіторний поліпептид (GIP) і їхні функціональні аналоги й похідні. Термін "антагоніст" при вживанні в контексті даного винаходу відноситься до речовини (ліганда), яка блокує, нейтралізує або протидіє впливу іншої речовини (ліганда), яка функціонує як агоніст стосовно розглянутого типу рецептора. У контексті даного винаходу пацієнт, який потребує певного лікування або іншого терапевтичного втручання і згаданий у зв'язку з різними аспектами даного винаходу, описаними вище, переважно являє собою ссавця і, більш точно, людину. Додатковий аспект даного винаходу відноситься до фармацевтичної композиції, яка містить пептидний кон'югат або його фармацевтично прийнятну сіль чи сольват згідно з даним винаходом разом із фармацевтично прийнятним носієм, наповнювачем або основою. Синтез пептидних кон'югатів Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть бути виготовлені за допомогою стандартних методів синтезу, за допомогою застосування систем рекомбінантної експресії або за допомогою будь-якого іншого підходящого методу. Таким чином, кон'югати можна синтезувати різними способами, включаючи, наприклад, спосіб, який включає: (a) синтез пептидного кон'югата за допомогою стандартної твердофазної або рідиннофазної методики, як поетапно, так і за допомогою складання фрагментів і виділення й очищення кінцевого продукту пептидного кон'югата; (б) експресію конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, у клітині-хазяїні та виділення продукту експресії з культури клітин-хазяїнів; або (в) здійснення експресії конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, in vitro у безклітинній системі й очищення продукту експресії; або будь-яку комбінацію способів (a), (б) або (в) для одержання фрагментів пептидного кон'югата, наступного лігування фрагментів для одержання пептидного кон'югата й виділення пептидного кон'югата. Часто може бути переважним синтезувати кон'югати згідно з даним винаходом за допомогою твердофазного або рідкофазного пептидного синтезу. У зв'язку з цим можна навести як посилання публікацію WO 98/11125 або, в тому числі, Fields, G.B. et al. "Principles and Practice of Solid-Phase Peptide Synthesis"; в: Synthetic Peptides, Gregory A. Grant (ed.), Oxford University Press (2 видання, 2002) і приклади синтезу в них. Одна або декілька бічних амінокислотних ланцюгів у сполуці згідно з даним винаходом можуть бути також кон'юговані з ліпофільним замісником. Зазначений ліпофільний замісник може бути ковалентно зв'язаний із атомом у бічному ланцюзі амінокислоти або, в іншому випадку, може бути кон'югований із бічним ланцюгом амінокислоти за допомогою спейсера. Амінокислота може являти собою частину пептиду Z або частину пептиду Y. Не бажаючи бути зв'язаними теорією, вважають, що ліпофільний замісник зв'язує альбумін у кровотоці, захищаючи, таким чином, сполуку згідно з даним винаходом від ферментативного руйнування, що підвищує період напіврозпаду сполуки. Спейсер за наявності використовується для забезпечення інтервалу між сполукою та ліпофільним замісником. Зазначений ліпофільний замісник може бути приєднаний до бічного амінокислотного ланцюга або спейсера у вигляді складного ефіру, сульфонового ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду. Відповідно буде ясно, що переважно ліпофільний замісник включає ацильну групу, сульфонільну групу, атом N, атом O або атом S, який утворює частину складного ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду. Переважно ацильна група в ліпофільних замісниках утворює частину аміду або складного ефіру з бічним ланцюгом амінокислоти чи спейсером. Ліпофільний замісник може включати вуглеводневий ланцюг, який включає 4-30 атомів. Переважно він має щонайменше 8 або 12 атомів C, і переважно він має 24 атомів C або менше чи 20 атомів C або менше. Вуглеводневий ланцюг може бути лінійним або розгалуженим чи може бути насиченим або ненасиченим. Буде ясно, що переважно вуглеводневий ланцюг заміщений на групу, яка утворює частину приєднання до бічного ланцюга амінокислоти або спейсера, наприклад, ацильну групу, сульфонільну групу, атом N, атом O або атом S. Найбільш переважно вуглеводневий ланцюг заміщений на ацил і, відповідно, вуглеводневий ланцюг може являти собою частину алкільної групи, наприклад, пальмітил, капроїл, лауроїл, мірістоїл або стеароїл. Відповідно, зазначений ліпофільний замісник може мати формулу, показану нижче: 20 UA 112630 C2 5 10 Ліпофільний замісник може являти собою, наприклад, ацильну групу, сульфонільну групу, NH, N-алкіл, атом O або атом S, переважно ацил. n являє собою ціле число від 3 до 29, переважно щонайменше 7 або щонайменше 11, і переважно 23 або менше, або більш переважно 19 або менше. Вуглеводневий ланцюг може бути додатково заміщеним. Наприклад, він може додатково мати до трьох замісників, обраних із NH2, OH і COOH. Якщо вуглеводневий ланцюг є додатково заміщеним, переважно він додатково заміщений тільки одним замісником. У іншому випадку, вуглеводневий ланцюг може включати циклоалкан або гетероциклоалкан, наприклад, показаний нижче: 15 20 25 Переважно циклоалкан або гетероциклоалкан являє собою шестичленне кільце. Більш переважно він являє собою піперидин. У іншому випадку, ліпофільний замісник може мати в основі остов циклопентанофенантрену, який може бути частково або повністю ненасиченим або насиченим. Кожний атом вуглецю в остові може бути заміщений Me або OH. Наприклад, ліпофільний замісник може являти собою холіл, дезоксихоліл або літохоліл. Як згадано вище, ліпофільний замісник може бути кон'югованим із бічним ланцюгом амінокислоти за допомогою спейсера. За наявності, спейсер приєднаний до ліпофільного замісника й до бічного ланцюга амінокислоти. Спейсер може бути приєднаний до ліпофільного замісника й бічного ланцюга амінокислоти незалежно у вигляді складного ефіру, сульфонілового ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду. Відповідно він може включати дві групи, незалежно обрані з ацилу, сульфонілу, атома N, атома O або атома S. Спейсер може мати наступну формулу: 30 35 40 45 50 При цьому кожний із B і D незалежно обирають із ацилу, сульфонілу, NH, N-алкілу, атома O або атома S, переважно з ацилу і NH. Переважно n являє собою ціле число від 1 до 10, переважно від 1 до 5. Спейсер може бути можливо заміщеним одним або декількома замісниками, обраними з C0-6 алкілу, C0-6 алкіламіну, C0-6 гідроксиалкілу й C0-6 карбоксиалкілу. У іншому випадку спейсер може мати дві або декілька повторюваних одиниць згідно з формулою вище. Кожний із B, D і n вибирають незалежно для кожної повторюваної одиниці. Суміжні повторювані одиниці можуть бути ковалентно з'єднані одна з одною через їхні відповідні B і D групи. Наприклад, групи B і D суміжних повторюваних одиниць разом можуть утворювати складний ефір, сульфоніловий ефір, тіоефір, амід або сульфонамід. Вільні одиниці B і D на кожному кінці спейсера приєднані до бічного ланцюга амінокислоти й ліпофільного замісника згідно з описом вище. Переважно спейсер має п'ять або менше, чотири або менше чи три або менше повторюваних одиниць. Більш переважно спейсер має дві повторювані одиниці або являє собою окрему одиницю. Спейсер (або одна чи декілька повторюваних одиниць спейсера, якщо він має повторювані одиниці) може являти собою, наприклад, природну або неприродну амінокислоту. Слід розуміти, що у випадку амінокислот, що мають функціональні бічні ланцюги, B і/або D можуть являти собою групу в бічному ланцюзі амінокислоти. Спейсер може являти собою природну або неприродну амінокислоту. Наприклад, спейсер (або одна чи декілька повторюваних одиниць спейсера, якщо він має повторювані одиниці) може являти собою Gly, Pro, Ala, Val, Leu, He, Met, Cys, Phe, Tyr, Trp, His, Lys, Arg, Gln, Asn, °C-Glu, γ-Glu, Asp, Ser Thr, Gaba, Aib, bAla, 5амінопентаноїл, 6-аміногексаноїл, 7-аміногептаноїл, 8-амінооктаноїл, 9-амінонаноїл або 10амінолдеканоїл. 21 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Наприклад, спейсер може являти собою одну амінокислоту, обрану серед γ-Glu, Gaba, b-Аla і oc-Gly. Ліпофільний замісник може бути кон'югований із бічним ланцюгом амінокислоти в сполуках згідно з даним винаходом. Переважно бічний ланцюг амінокислоти включає карбокси-, гідрокси-, тіол-, амідну або аміно групу для утворення складного ефіру, сульфонового ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду зі спейсером чи ліпофільним замісником. Наприклад, ліпофільний замісник може бути кон'югований із Asp, Glu, Gln, His, Lys, Arg, Ser, Thr, Tyr, Trp, Cys або Dbu, Dpr або Orn. Переважно ліпофільний замісник кон'югований із Lys або Cys. Проте, будь-яка амінокислота, позначена як Lys у формулах, наведених у даному описі, може бути заміщена на Dbu, Dpr або Orn, якщо доданий ліпофільний замісник. Приклад ліпофільного замісника і спейсера показаний на формулі нижче: На ній Lys із сполуки згідно з даним винаходом (наприклад, від X) коваленто приєднаний до γ-Glu (спейсера) через амідну групу. Пальмітил ковалентно приєднаний до спейсера γ-Glu через амідну групу. Альтернативно або додатково один чи декілька бічних ланцюгів амінокислот у сполуці згідно з даним винаходом можуть бути кон'юговані з полімерною групою, наприклад, із метою збільшення розчинності і/або періоду напіврозпаду in vivo (наприклад, у плазмі) і/або біодоступності. Такі модифікації, також відомо, знижують кліренс (наприклад, нирковий кліренс) терапевтичних білків і пептидів. Полімерна група є переважно розчинною у воді (амфіфільна або гідрофільна), нетоксичною і фармацевтично інертною. Підходящі полімерні групи включають поліетиленгліколь (PEG), гомо-або співполімери PEG, монометил-заміщений полімер PEG (mPEG) або поліоксиетиленгліцерин (POG). Див., наприклад, публікації в Int. J. Hematology 68:1 (1998); Bioconjugate Chem. 6:150 (1995); і Crit. Rev. Therap. Drug Carrier Sys. 9:249 (1992). Інші підходящі полімерні групи включають поліамінокислоти, такі як полілізин, поліаспарагінова кислота й поліглутамінова кислота (дивіться, наприклад, публікації Gombotz et al. (1995), Bioconjugate Chem., vol. 6: 332-351; Hudecz, et al. (1992), Bioconjugate Chem., vol. 3, 49-57; Tsukada, et al. (1984), J. Natl. Cancer Inst., vol 73, 721-729; і Pratesi, et al. (1985), Br. J. Cancer, vol. 52: 841-848). Полімерна група може бути лінійною або розгалуженою. Вона може мати молекулярну масу 500-40000 Да, наприклад, 500-10000 Да, 1000-5000 Да, 10000-20000 Да або 20000-40000 Да. Сполука може містити дві або більше таких груп, у цьому випадку загальна молекулярна маса всіх таких груп зазвичай буде перебувати в межах, зазначених вище. Полімерна група може бути зв'язана (за допомогою ковалентного зв'язку) з аміно-, карбоксиабо тіол-групами бічного ланцюга амінокислоти. Переважними прикладами є тіолові групи залишків Cys і епсілон-аміногрупи залишку Lys, і також можуть бути використані карбоксильні групи залишків Asp і Glu. Фахівець буде добре обізнаний про підходящі методи, які можуть бути використані для виконання реакції конденсації. Наприклад, група PEG, що має метоксигрупу, може бути пов'язана з тіоловою групою Cys за допомогою малеімідного зв'язку із застосуванням реагентів, комерційно доступних у Nektar Therapeutics AL. Див. також WO 2008/101017 і посилання, наведені вище, для більш докладного опису підходящої хімії. Терапевтичні способи застосування Надалі слід розуміти, що посилання на використання пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом також включає використання їхньої фармацевтично прийнятної солі або сольвату. 22 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть забезпечити привабливий варіант лікування метаболічних захворювань або розладів, у тому числі цукрового діабету, зокрема 1-го типу і/або цукрового діабету 2 типу й, можливо, ожиріння. Цукровий діабет являє собою групу метаболічних захворювань, які характеризуються гіперглікемією, що виникає в результаті розладів у секреції інсуліну і/або дії інсуліну. Гострі симптоми діабету включають надмірне вироблення сечі, наслідкову компенсаційну спрагу і збільшення споживання рідини, розлад зору, непоясниму втрату ваги, млявість, а також зміни в енергетичному обміні. Хронічна гіперглікемія діабету пов'язана з розладами макро- і мікросудин, які можуть призвести до довгострокового пошкодження, дисфункції і - в деяких випадках - до відмови в результаті різних органів, зокрема очей (особливо у вигляді діабетичної ретинопатії), нирок (у вигляді діабетичної нефропатії), нервів (у вигляді діабетичної нейропатії), серця і кровоносних судин. Діабет можна розділити на три класи, а саме: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу й гестаційний діабет, на основі їхніх патогенетичних особливостей. Діабет 1 типу складає 5-10 % від усіх випадків діабету й викликається аутоімунним руйнуванням інсулін-секретуючих панкреатичних β-клітин. Діабет 2 типу складає 90-95 % випадків діабету і є результатом складного комплексу метаболічних розладів. Цукровий діабет 2 типу є наслідком того, що продукція власного інсуліну і/або чутливість до інсуліну всього організму стає недостатньою для підтримки рівня глюкози в плазмі крові нижче діагностичного порога. Гестаційний діабет означає будь-який ступінь толерантності до глюкози, виявлений під час вагітності. Також визнається існування стану, відомого як предіабет. Він включає, наприклад, порушений рівень глюкози натщесерце й порушену толерантність до глюкози і в цілому відноситься до тих станів, які виникають, коли рівень глюкози в крові підвищений, але знаходиться нижче рівнів, установлених для клінічного діагнозу цукрового діабету. Велика частина пацієнтів із цукровим діабетом 2 типу й предіабетом має підвищений ризик захворюваності та смертності в зв'язку з високою поширеністю додаткових метаболічних факторів ризику, включаючи абдомінальне ожиріння (надлишкова жирова тканина навколо внутрішніх органів черевної порожнини), атерогенну дисліпідемію (розлад рівня жирів у крові, включаючи високі рівні тригліцеридів, низький рівень холестерину ЛПВЩ і/або високі рівні холестерину ЛПНЩ, що сприяє утворенню бляшок у стінках артерій), підвищений кров'яний тиск (гіпертонія), протромботичні стани (наприклад, високі рівні фібриногену або інгібітора активатора плазміногена-1 у крові) і прозапальні стани (наприклад, підвищений рівень Среактивного білка в крові). У свою чергу, ожиріння призводить до підвищеного ризику розвитку, наприклад, предіабету, діабету 2 типу, деяких видів раку, обструктивного апное сну й захворювань жовчного міхура. Дисліпідемія пов'язана з підвищеним ризиком серцево-судинних захворювань. Ліпопротеїни високої щільності (ЛПВЩ) мають клінічне значення, оскільки існує зворотна кореляція між концентраціями ЛПВЩ в плазмі та ризиком атеросклерозу. Більша частина холестерину, відкладеного в атеросклеротичних бляшках, походить від ліпопротеїнів низької щільності (ЛПНЩ) і, отже, підвищені концентрації ЛПНЩ тісно пов'язані з атеросклерозом. Співвідношення ЛПВЩ/ЛПНЩ параметрів використовується для оцінки клінічного ризику розвитку атеросклерозу й коронарного атеросклерозу зокрема. Без зв'язку з якою-небудь конкретною теорією, представляється, що пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть несподівано поєднувати фізіологічну дію агоністів рецептора GLP-1 з дією пептидів гастрину, див. вище, таким чином, що спостережувана активність може бути значно більшою, ніж при використанні відповідної адитивної комбінації (некон'югованих) окремих пептидних компонентів. Отже, вважається, що пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть бути особливо корисними при лікуванні предіабету, діабету (особливо цукрового діабету 1 типу і/або 2 типу) і викликаних діабетом станів, хвороб або розладів, таких як ті, що розглянуті вище, включаючи лікування для забезпечення утворення β-клітин панкреатичних острівців (регенерації острівців) і завдяки цьому виробництва інсуліну, що буде корисним стосовно регуляції концентрації глюкози в крові. Тому пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть мати значення, зокрема, для обмеження або гальмування прогресування захворювання цукрового діабету 1 і/або 2 типу. Пептиди згідно з даним винаходом можуть додатково бути корисними для сприяння виживанню й придушенню апоптозу β-клітин у панкреатичних острівцях. Дія GLP-1 і гастрину включає не тільки вплив на проліферацію та дозрівання β-клітин, але й запобігання апоптозу βклітин і підвищення неогенезу, таким чином, дія пептидів згідно з даним винаходом може включати такі ефекти і їх вплив на покращену регуляцію інсуліну й глюкози. 23 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом, таким чином, можуть бути корисними як лікарські засоби для лікування резистентності до інсуліну, розладу толерантності до глюкози, предіабету, підвищеного рівня глюкози натщесерце, діабету 1 і/або 2 типу, гіпертонії і/або дисліпідемії (або комбінації цих метаболічних факторів ризику), атеросклерозу, артеріосклерозу, ішемічної хвороби серця, захворювання периферичних артерій та інсульту. Вони також можуть бути корисними для запобігання набиранню ваги, забезпечення зниження ваги, зниження надлишкової маси тіла і/або лікування ожиріння (наприклад, контролю апетиту, харчування, приймання їжі, споживання калорій і/або витрат енергії), включаючи патологічне ожиріння, а також супутніх захворювань, розладів і станів здоров'я, включаючи, але не обмежуючись ними, запалення, викликане ожирінням, захворювання жовчного міхура, викликані ожирінням, і апное сну, викликане ожирінням. Вплив пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом на ці умови може бути опосередкований у цілому або частково впливом на масу тіла або може не залежати від них. Фармацевтичні композиції У описі нижче слід розуміти, що включення одного або декількох пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом до фармацевтичних композицій включає також фармацевтично прийнятну сіль або сольват пептидного кон'югата згідно з даним винаходом. Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть бути приготовані у вигляді фармацевтичних композицій, які підходять для застосування з або без зберігання і які зазвичай містять терапевтично ефективну кількість щонайменше одного пептидного кон'югата згідно з даним винаходом, разом із фармацевтично прийнятним носієм, наповнювачем або основою. Термін "фармацевтично прийнятний носій" включає будь-які стандартні фармацевтичні носії. Фармацевтично прийнятні носії для терапевтичного застосування добре відомі в області фармацевтики й описані, наприклад, у "Remington's Pharmaceutical Sciences", 17-е видання, Alfonso R. Gennaro (Ed.), Mark Publishing Company, Easton, PA, USA, 1985. Наприклад, можна застосовувати стерильний фізіологічний розчин і фосфатно-сольовий буфер при злегка кислих або фізіологічних значеннях рН. Прийнятні рН-буферні агенти можуть являти собою, наприклад, фосфат, цитрат, ацетат, трис(гідроксиметил)амінометан (TRIS), N-трис(гідроксиметил)метил-3амінопропансульфонову кислоту (TAPS), бікарбонат амонію, диетаноламін, гістидин, аргінін, лізин або оцтову кислоту (наприклад, у вигляді ацетату натрію), або їх суміші. Термін також включає будь-які носії, перераховані в Фармакопеї США для використання для тварин, включаючи людину. Фармацевтична композиція згідно з винаходом може перебувати в одиничній лікарській формі. У такій формі композиція розділена на одиничні дози, які містять відповідні кількості активного компонента або компонентів. Одинична лікарська форма може бути представлена у вигляді упакованого препарату, при цьому упаковка містить дискретні кількості препарату, наприклад, упаковані таблетки, капсули або порошки у флаконах чи ампулах. Одинична лікарська форма може являти собою, наприклад, капсули, облатки чи таблетки самі по собі або вона може являти собою відповідну кількість будь-якої з цих упакованих форм. Одинична лікарська форма також може бути надана у вигляді форми для ін'єкції однієї дози, наприклад, у формі ручки, яка містить рідкофазну композицію (зазвичай водну). Композиції можуть бути сформульовані для будь-якого підходящого шляху й засобу введення. Фармацевтично прийнятні носії або розріджувачі включають ті, які використовуються в композиціях, підходящих для, наприклад, перорального, інтравітреального, ректального, вагінального, назального, місцевого, ентерального або парентерального (включаючи підшкірне, внутрішньом'язове, внутрішньовенне, внутрішньошкірне й трансдермальне) введення або введення шляхом інгаляції. Композиції можуть бути представлені у вигляді одиничної лікарської форми і можуть бути отримані будь-яким способом з добре відомих способів у області фармацевтичного препарату. Підшкірний або трансдермальний способи введення можуть бути особливо підходящими для пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом. Ще один аспект даного винаходу відноситься до пристроїв, лікарських форм і упаковки, які використовуються для доставки фармацевтичних препаратів даного винаходу. Таким чином, принаймні один зазначений пептидний кон'югат або його частина чи варіант у стабільних або консервованих складах або розчинах згідно із даним описом може бути введений пацієнтові відповідно до даного винаходу за допомогою різних методів, включаючи підшкірні або внутрішньом'язові ін'єкції; трансдермальний, легеневий, трансмукозальний шляхи введення, імплантацію, осмотичний насос, картридж, мікронасос або інші засоби, відомі фахівцеві в даній області, а також відомі в даній області. 24 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Ще один аспект винаходу відноситься до композицій для перорального введення. Препарати для перорального введення можуть включати сумісне введення допоміжних речовин (наприклад, резорцинів і нейонних поверхнево-активних речовин, таких як поліоксиетиленолеїловий ефір і н-гексадецилполіетиленовий ефір) щоб того, щоб штучно підвищити проникність стінки кишечника, а також одночасне введення ферментативних інгібіторів (наприклад, інгібіторів трипсину підшлункової залози, диізопропілфторфосфату (DFF) і тразилолу) для придушення деградації ферментами. Активна сполука лікарської форми твердого типу для перорального введення може бути змішана щонайменше з однією добавкою, включаючи лактозу, целюлозу, маніт, трегалозу, рафінозу, мальтит, декстран, крохмаль, агар, аргінати, хітини, хітозани, пектини, трагакант, гуміарабік, желатин, колаген, казеїн, альбумін, синтетичний або напівсинтетичний полімер і гліцерид. Ці лікарські форми можуть також містити інший тип (типи) добавок, наприклад, неактивний розріджувач, змащувачі, такі як стеарат магнію, парабени, консерванти, такі як сорбінова кислота, аскорбінова кислота, альфатокоферол, антиоксиданти, такі як цистеїн, дезінтегратор, зв'язуючу речовину, загущувач, буферний агент, підсолоджувач, ароматизатор, ароматизуючий агент і т.д. Дози Звичайна доза пептидного кон'югата згідно з даним винаходом, використана в контексті даного винаходу, може перебувати в діапазоні від 0,001 до 100 мг/кг маси тіла на день, наприклад, від приблизно 0,01 до приблизно 50 мг/кг маси тіла на день, наприклад, від близько 0,05 до близько 10 мг/кг маси тіла на день, яку вводять у вигляді однієї або декількох доз, наприклад, від однієї до трьох доз. Як уже вказувалося до деякої міри вище, точна використовувана доза буде залежати, зокрема, від характеру й тяжкості захворювання або розладу, статі, віку, маси тіла й загального стану суб'єкта, що підлягає лікуванню; можливих інших супутніх захворювань або розладів, які піддаються лікуванню або повинні піддаватися лікуванню, а також інших факторів, які будуть відомі практикуючому фахівцю в даній області. Комбінована терапія Як відмічалося вище, слід розуміти, що посилання на наступні пептидні кон'югати винаходу поширюється також на його фармацевтично прийнятну сіль або сольват, а також композицію, яка містить більше одного з різних пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом. Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом можна вводити як частину комбінованої терапії разом із іншим активним агентом для лікування захворювання або розладу, що розглядається, наприклад, цукрового діабету, ожиріння, метаболічного синдрому, дисліпідемії або гіпертонії, і в таких випадках два активні агенти можна вводити разом або окремо, наприклад, як складові в тій же фармацевтичній композиції або лікарській формі, або у вигляді окремих лікарських форм. Таким чином, пептидний кон'югат можна використовувати в поєднанні з анти-діабетичним агентом відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, метформін, сульфонілсечовину, глініт, інгібітори DPP-IV, глітазон або інсулін, або аналог інсуліну. У переважному варіанті реалізації винаходу пептидний кон'югат згідно з даним винаходом вводять у комбінації з інсуліном або його аналогом, інгібітором DPP-IV, сульфонілсечовиною або метформіном, зокрема сульфонілсечовиною або метформіном для досягнення адекватного контролю глікемії. У більш переважному варіанті реалізації пептидний кон'югат вводять у комбінації з інсуліном або аналогом інсуліну для досягнення адекватного контролю глікемії. Приклади прийнятних аналогів інсуліну включають, але не обмежуються ними, Лантус™, Новорапід™, Хумалог™, НовоМікс™, Актрафан™ HM, Левемір™, Деглюдек™ і Апідра™. Інші значимі в цьому випадку антидіабетичні препарати включають агоністи рецептора GLP-1, такі як екзенатид (Буетта™; Ексендин-4) і ліраглутид (Віктоза™). Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна застосовувати в комбінації з засобом проти ожиріння відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, пептид YY або його аналог, нейропептид Y (NPY) або його аналог, антагоніст канабіноїдних рецепторів 1, інгібітор ліпази, преострівцевий пептид людини (HIP), агоніст рецептора меланокортину 4 або антагоніст рецептора меланін-концентруючого гормону 1. Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна використовувати в поєднанні з засобом проти гіпертензії відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, інгібітор ангіотензин-перетворюючого ферменту, блокатор рецептора ангіотензину II, діуретик, бетаблокатор або блокатор кальцієвих каналів. Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна використовувати в поєднанні з засобом проти дисліпідемії відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, статин, фібрат, ніацин і/або інгібітор усмоктування холестерину. 25 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна використовувати в комбінації з інгібітором протонного насоса (тобто фармацевтичним агентом, який має фармакологічну активність як інгібітор H7K+-ATPase) відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, агент типу похідної бензімідазолу або імідазопіридину, наприклад, Омепразол™, Ланзопразол™, Декслансопразол™, Езомепразол™, Пантопразол™, Рабепразол™, Золпідем™, Алпідем™, Сарипідем™ або Некопідем™. Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом, більше того, можна використовувати в поєднанні з протизапальним агентом відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними: - стероїди й кортикостероїди, такі як беклометазон, метилпреднізолон, бетаметазон, преднізолон, дексаметазон і гідрокортизон; - нестероїдні протизапальні засоби (NSAID), такі як похідні пропіонової кислоти (наприклад, альмінопрофен, беноксапрофен, буклоксова кислота, карпрофен, фенбуфен, фенопрофен, флупрофен, флурбіпрофен, ібупрофен, індопрофен, кетопрофен, міропрофен, напроксен, оксапрозин, пірпрофен, пранопрофен, супрофен, тіапрофенова кислота і тіоксапрофен); похідні оцтової кислоти (наприклад, індометацин, ацеметацин, алклофенак, кліданак, диклофенак, фенклофенак, фенклозова кислота, фентіазак, фурофенак, ібуфенак, ізоксепак, оксипінак, суліндак, тіопінак, толметин, зидометацин і зомепірак); фенамової кислоти (наприклад, флуфенамова кислота, меклофенамова кислота, мефенамова кислота, ніфлумова кислота і толфенамова кислота); біфенілкарбонової кислоти (наприклад, дифлунізал і флуфенізал); оксиками (наприклад, ізоксикам, піроксикам, судоксикам і теноксикам); саліцилати (наприклад, ацетилсаліцилова кислота і сульфасалазин) і піразолони (наприклад, апазон, безпіперилон, фепразон, мофебутазон, оксифенбутазон і фенілбутазон); інгібітори ЦОГ II, такі як рофекоксиб і целекоксиб; - препарати інтерферону бета (наприклад, інтерферон бета-1а або інтерферон бета-1б); і - деякі інші сполуки, такі як 5-аміносаліцилова кислота і проліки, і їх фармацевтично прийнятні солі. Було показано, що метформін має протизапальні властивості [дивіться Haffner et al., Diabetes 54: 1566-1572 (2005)] і тому також може бути корисним у даному контексті. Кожна з наведених публікацій і патентних заявок включена до даного опису за допомогою посилання в повному об'ємі. Наступні приклади демонструють деякі конкретні варіанти здійснення даного винаходу. Наступні приклади проводилися з використанням стандартних методик, які добре відомі фахівцям у даній області, за винятком випадків, описаних докладно. Слід розуміти, що ці приклади надані тільки для ілюстрації й не обмежують умови або масштаб винаходу. Тому їх не слід тлумачити як такі, що обмежують об'єм даного винаходу. ПРИКЛАДИ Скорочення, які використовуються в даних прикладах, включають: NMP: N-метилпіролідон DCM: дихлорметан DMF: N, N-диметилформамід HATU: 2-(7-аза-1H-бензотріазол-1-іл)-1,1,3,3-тетраметилуроніум гексафторфосфат DI PEA: диізопропілетиламін EtOH: етанол Et20: диетил ефір Peg3: 8-аміно-3,6-диоксаоктаноїл 8Aoc: 8-амінооктаноїл DBF: 4-(2-аміноетил)-6-дибензофуранпропаноїл TFA: трифтороцтова кислота MeCN: ацетонітрил ВЕРХ: високоефективна рідинна хроматографія МС: мас-спектрометрія IBMX: 3-ізобутил-1-метилксантин BSA: бичачий сироватковий альбумін cAMP: циклічний аденозинмонофосфат DMEM: середовище Ігла в модифікації Дульбекко FCS: фетальна теляча сироватка HEPES: N-2-гідроксиетипіперазин-N'-2-етансульфонова кислота p-ERK: фосфорильована позаклітинна регульована кіназа PBS: фосфатно-сольовий буфер Boc: t-бутоксикарбоніл 26 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 NEP: N-метилпіролідон Ліраглутид: [Arg34,Lys(гексадеканоїл-ізоGlu)26]GLP-1(7-37) ПРИКЛАД 1: Синтез сполуки і властивості пептидів МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ Якщо не зазначено інакше, реагенти й розчинники, використані нижче, були комерційно доступні у вигляді класу стандартних лабораторних реагентів або аналітичного класу, і їх використовували без додаткового очищення. Загальна методика синтезу пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом Твердофазний синтез пептидів здійснювали на CEM Liberty Peptide Synthesizer з використанням стандартної хімії Fmoc. Смолу TentaGel™ S Ram (1 г; 0,25 ммоль/г) вимочували в NMP (10 мл) перед застосуванням і переносили з пробірки до реакційної посудини з використанням DCM і NMP. Псевдопроліни, які являють собою дипептиди, що використовуються для мінімізації агрегації під час синтезу пептидів, такі як Fmoc-Phe-Thr(ψ-Me, Me-Pro)-OH і Fmoc-Asp-Ser(ψ-Me, Me-Pro)-OН, використовували за необхідності, і штучні амінокислоти, що утворюють лінкерні групи Peg3, 8Aoc і DBF (див. вище), використовували як Fmoc-захищені амінокислоти (тобто Fmoc-Peg3-OH, Fmoc-8Aoc-OH і Fmoc-DBF-OH відповідно) без зміни загальної методики. Конденсація: Амінокислоту-Fmoc у NMP/DMF/DCM (1:1:1; 0,2 M; 5 мл) додавали до смоли в мікрохвильовій печі CEM Discover разом із HATU/NMP (0,5 M; 2 мл) і DIPEA/NMP (2,0 M; 1 мл). Суміш нагрівали до 75 °C протягом 5 хвилин при пропусканні пухирців азоту через суміш. Потім суміш промивали NMP (4 × 10 мл). Зняття захисту: Піперидин/NMP (20 %; 10 мл) додавали до смоли для початкового зняття захисту й нагрівали суміш у мікрохвильовій печі (40 °C; 30 сек). Осушували реакційну посудину й додавали другу порцію піперидину/NMP (20 %; 10 мл) і нагрівали ще раз (75 °C; 3 хв). Смолу потім промивали NMP (6 × 10 мл). Розщеплення: Смолу промивали EtOH (3 × 10 мл) та Et20 (3 × 10 мл) і висушували до постійної ваги при кімнатній температурі (r.t.). Сирий пептид відщеплювали від смоли за допомогою обробки TFA/етандитіолом (95/5, 40 мл, 2 год.; r.t.). Більшу частину TFA видаляли при зниженому тиску й сирий пептид осаджували, тричі промивали Et20 і висушували до постійної ваги при кімнатній температурі. Очищення і характеристика: Сирий пептид очищали до ступеня чистоти більше 90 % за допомогою препаративної зворотно-фазової ВЕРХ із використанням робочої станції Perseptive Biosystems VISION, оснащеної відповідною колонкою та колектором фракцій, і пропускали через неї градієнт буфера A (0,1 % TFA, водний) і буфера B (0,1 % TFA, 90 % MeCN, водний). Фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС і відповідні фракції накопичували й ліофілізували. Кінцевий продукт характеризували методом ВЕРХ та МС. Приклад синтезу Ексендин-4(1-39)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17 (Сполука 1) синтезували на синтезаторі пептидів CEM Liberty Peptide Synthesizer з використанням смоли TentaGel S Ram (0,67 г; 0,23 ммоль/г) і хімії Fmoc згідно з описом вище. Використовували Fmoc-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопроліни Fmoc-Phe-Thr(ψ -Me, Me-Pro)-OH і Fmoc-Ser(tBu)-Ser(ψ-Me, Me-Pro)OH. Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці Gemini-NX (5 × 25 см; 10 мкм; C18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера A (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 % до 50 % протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (122 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 58 % чистий. Продукт очищали повторно на колонці Luna (1 × 25 см; 5 мкм; C8) при пропусканні 4 мл/хв суміші буфера А (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 % до 50 % протягом 47 хв і збирали фракції (2 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (63 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 82 % чистий. 27 UA 112630 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Іншу частину Сполуки 1 синтезували із застосуванням смоли TentaGel S Ram (0,70 г; 0,23 ммоль/г) і використовували ті ж умови для синтезу й відщеплення, як описано вище. Очищення проводили на колонці Gemini-NX (5 × 25 см; 10 мкм; C18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 % до 50 % протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (113 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 57 % чистий. Продукт очищали повторно на колонці Luna (1 × 25 см; 5 мкм; C8) при пропусканні 4 мл/хв суміші буфера А (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 % до 55 % протягом 47 хв і збирали фракції (2 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (29 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 77 % чистий. Продукти першого синтезу (63 мг; 82 %) і другого синтезу (29 мг; 77 %) об'єднували і ще раз очищали на колонці Kromasil (1 × 25 см; 10 мкм; C8) при пропусканні 4 мл/хв суміші буфера А (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 25 % до 65 % протягом 47 хв і збирали фракції (2 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (33 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 94 % чистий. Маса склала 6553,39 Да за результатами МС (розрахована 6553,06 Да). Ексендин-4(1-28)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (Сполука 33) синтезували на синтезаторі пептидів CEM Liberty Peptide Synthesizer з використанням смоли TentaGel S Ram (0,55 г; 0,23 ммоль/г) і хімії Fmoc згідно з описом вище. Використовували Fmoc-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопролін Fmoc-Phe-Thr(ψ-Me, Me-Pro)-OH. Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці Gemini-NX (5 × 25 см; 10 мкм; C18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера A (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 25 % до 55 % протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (70 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 90 % чистий. Маса склала 4364,08 Да за результатами МС (розрахована 4364,11 Да). [Glu9,Leu14,Phe25,Tyr13]Ексендин-4(1-27)-[Leu4]Гастрин-6 (Сполука 101) синтезували на синтезаторі пептидів CEM Liberty Peptide Synthesizer з використанням смоли TentaGel S Ram (1,15 г; 0,25 ммоль/г) і хімії Fmoc згідно з описом вище. Використовували Fmoc-Phe-Thr(ψ-Me, Me-Pro)-OH. Використовували NEP замість NMP під час спряження і зняття захисту. Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці Gemini-NX (5 × 25 см; 10 мкм; C18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера A (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 % до 50 % протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (50 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 85 % чистий. Маса склала 3952.00.08 Да за результатами МС (розрахована 3951,97 Да). GLP-1(7-36)-Peg3-Peg3-[Gln1,Leu15]Гастрин-17 (Сполука 42) синтезували на синтезаторі пептидів CEM Liberty Peptide Synthesizer з використанням смоли TentaGel S Ram (1,16 г; 0,23 ммоль/г) і хімії Fmoc згідно з описом вище. Використовували Fmoc-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопролін Fmoc-Ser(tBu)-Ser(Psi Me, Me-Pro)-OH. Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище і проводили очищення на колонці Gemini-NX (5 × 25 см; 10 мкм; C18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера A (0,1 % TFA; водний) і буфера B (0,1 % TFA; 90 % MeCN; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 25 % до 45 % протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (172 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 86 % чистий. Маса склала 5664,72 Да за результатами МС (розрахована 5664,70 Да). [Arg34,Lys(гексадеканоїл-ізоGlu)26]GLP-1(7-37)-Peg3-Peg3-[Leu4]Гастрин-6 (Сполука 107) синтезували на синтезаторі пептидів CEM Liberty Peptide Synthesizer з використанням смоли 28