Фармацевтична композиція, що містить гестагени й/або естрогени і 5-метил-(6s)-тетрагідрофолат

1. Лікарський засіб, що містить 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат, один або декілька естрогенів, вибраних із групи, що включає етинілестрадіол, местранол, квінестранол, естрадіол, естрон, естран, естріол, естетрол і кон'юговані кінські естрогени і/або гестагени, необов'язково вітамін В6 і/або вітамін В2, а також фармацевтично прийнятні допоміжні речовини й носії при відсутності вітаміну В12. 2. Лікарський засіб за п. 1, що містить щонайменше один гестаген, вибраний із групи, що включає левоноргестрел, норгестимат, норетистерон, дигідрогестерон, дроспіренон, 3-бетагідроксидезогестрел, 3-кетодезогестрел (=етоногестрел), 17-деацетилноргестимат, 19 2 (19) 1 3 7. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 451 мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти. 8. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 0,5 до 5 мг дроспіренону. 9. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 3 мг дроспіренону. 10. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу від 10 до 50 мкг етинілестрадіолу. 11. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу від 10 до 30 мкг етинілестрадіолу. 12. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 20 мкг етинілестрадіолу. 13. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 30 мкг етинілестрадіолу. 14. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 451 мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти, щоденну дозу 3 мг дроспіренону й щоденну дозу 20 мкг етинілестрадіолу. 15. Лікарський засіб за п. 4, що містить щоденну дозу 451 мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти, щоденну дозу 3 мг дроспіренону й щоденну дозу 30 мкг етинілестрадіолу. 16. Набір, що містить щонайменше 20 щоденних дозувальних одиниць, що містять лікарський засіб за одним з вищевказаних пунктів, і щонайменше одну щоденну дозувальну одиницю, що містить 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат, а також при необхідності вітамін В6 і/або вітамін В2, причому кількість всіх дозувальних одиниць, що містяться в наборі, становить щонайменше 28 і дозувальні одиниці розташовані таким чином, що спочатку варто приймати дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб за одним з вищевказаних пунктів, і тільки потім дозувальні одиниці, що містять 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат. 17. Набір за п. 16, що містить 20-30 щоденних дозувальних одиниць, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15, і 1-10 щоденних дозувальних одиниць, що містять 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат. 18. Набір за п. 16, що містить 21-26 щоденних дозувальних одиниць, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15, і 2-7 щоденних дозувальних одиниць, що містять 5метил-(6S)-тетрагідрофолат, причому кількість всіх дозувальних одиниць, що містяться в наборі, становить 28. 19. Набір за п. 16, що містить 21 щоденну дозувальну одиницю, що містить лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15, і 7 щоденних дозувальних одиниць, що містять 5метил-(6S)-тетрагідрофолат. 20. Набір за п. 16, що містить 24 щоденні дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15, і 4 щоденні дозувальні одиниці, що містять 5-метил(6S)-тетрагідрофолат. 21. Набір за п. 16, що містить у кожній щоденній дозувальній одиниці 451 мкг солі кальцію 5-метил(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти. 22. Застосування 92491 4 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату, одного або декількох естрогенів, вибраних із групи, що включає етинілестрадіол, местранол, квінестранол, естрадіол, естрон, естран, естріол, естетрол або кон'югований кінський естроген і/або гестаген, при необхідності вітамін В6 і/або вітамін В2, а також фармацевтично прийнятних допоміжних речовин і носіїв при відсутності вітаміну В12, для одержання лікарського засобу для тривалого зменшення ризику виникнення захворювань і вроджених пороків розвитку, викликаних дефіцитом фолату, протягом щонайменше 6-10 тижнів після закінчення попереднього тривалого регулярного прийому цього лікарського засобу. 23. Застосування за п. 22, що відрізняється тим, що попередній тривалий регулярний прийом становить щонайменше 30 тижнів. 24. Застосування за одним з пунктів 22 або 23, причому гестаген вибирають із групи, що включає левоноргестрел, норгестимат, норетистерон, дигідрогестерон, дроспіренон, 3-бетагідроксидезогестрел, 3-кетодезогестрел (=етоногестрел), 17-деацетилноргестимат, 19норпрогестерон, ацетоксипрегненолон, алілестренол, амгестон, хлормадинон, ципротерон, демегестон, дезогестрел, дієногест, дигідрогестерон, диметистерон, етистерон, етинодіолдіацетат, фторгестронацетат, гастринон, гестоден, гестринон, гідроксиметилпрогестерон, гідроксипрогестерон, лінестренол (=ліноестренол), мецирогестон, медроксипрогестерон, мегестрол, меленгестрол, номегестрол, норетиндрон (=норетистерон), норетинодрель, норгестрел (включаючи d-норгестрел і dl-норгестрел), норгестриєнон, норметистерон, прогестерон, квінгестанол, (17альфа)-17-гідрокси11-метилен-19-норпрегна-4,15-дієн-20-ин-3-он, тиболон, тримегестрон, алгестон-ацетофенід, несторон, промегестрон, складний ефір 17гідроксипрогестерону, 19-нор-17гідроксипрогестерон, 17альфа-етинілтестостерон, 17альфа-етиніл-19-нортестостерон, d-17бетаацетокси-13бета-етил-17альфа-етинілгон-4-ен-3оноксим або розкриті в WO 00/66570 сполуки, зокрема танапрогет. 25. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику виникнення дефектів нервової трубки. 26. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику виникнення пороків серця, зокрема дефектів міжшлуночкової перегородки. 27. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику виникнення пороків розвитку сечовивідних шляхів (урогенітальних дефектів). 28. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику виникнення заячої губи, вовчої пащі й розщеплення піднебіння. 29. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику спонтанних абортів. 30. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику виникнення злоякісних захворювань, зокрема раку грудей або раку прямої кишки. 31. Застосування за п. 23 або 24 для зменшення ризику виникнення захворювань серця й кровообігу. 5 92491 6 32. Застосування 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату, дроспіренону й етинілестрадіолу за будь-яким з пп. від 25 до 31. 33. Застосування 451 мкг солі кальцію 5-метил(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти, 3 мг дроспіренону й 20 мкг етинілестрадіолу за пп. від 25 до 31. 34. Застосування 451 мкг солі кальцію 5-метил(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти, 3 мг дроспіренону й 30 мкг етинілестрадіолу за пп. від 25 до 31. 35. Застосування за пп. 22 або 23, що відрізняється тим, що попередній прийом 5-метил-(6S)тетрагідрофолату відбувається щонайменше в лікарській формі вповільненої дії. 36. Набір за п. 16, що містить 21 щоденну дозувальну одиницю, що містить лікарський засіб за п. 14, і 7 щоденних дозувальних одиниць, що містять 5метил-(6S)-тетрагідрофолат. 37. Набір за п. 16, що містить 24 щоденні дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб за п. 14, і 4 щоденні дозувальні одиниці, що містять 5-метил(6S)-тетрагідрофолат. 38. Набір за п. 16, що містить 21 щоденну дозувальну одиницю, що містить лікарський засіб за п. 15, і 7 щоденних дозувальних одиниць, що містять 5метил-(6S)-тетрагідрофолат. 39. Спосіб одержання лікарського засобу за одним з пунктів від 1 до 15, що відрізняється тим, що 5метил-(6S)-тетрагідрофолат домішують тільки після гранулювання. 40. Спосіб за п. 39, що відрізняється тим, що як сполучну речовину використовують гідроксипропілцелюлозу з низьким ступенем заміщення. 41. Набір за п. 16, що містить більш ніж 28 щоденних дозувальних одиниць, причому щонайменше 28 щоденних дозувальних одиниць містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15 і причому щонайменше одна щоденна дозувальна одиниця містить 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат, і причому дозувальні одиниці розташовані таким чином, що спочатку варто приймати дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15 дози, й потім тільки дозувальні одиниці, що містять 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат. 42. Набір за п. 41, у якому кількість дозувальних одиниць, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15, становить 28 плюс 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27 або ціле кратне 28 плюс 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27 і в якому кількість щоденних дозувальних одиниць, що містять тільки 5-метил(6S)-тетрагідрофолат, становить 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1. 43. Набір за п. 42, у якому кратне число становить 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 або 12. 44. Набір, що містить більше ніж 28 щоденних дозувальних одиниць, причому щонайменше 28 щоденних дозувальних одиниць містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15 і причому щонайменше одна щоденна дозувальна одиниця являє собою плацебо або пустушку, і причому дозувальні одиниці розташовані таким чином, що спочатку варто приймати дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15. 45. Набір за п. 44, у якому кількість дозувальних одиниць, що містять лікарський засіб за одним з пунктів від 1 до 15, становить 28 плюс 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27 або ціле кратне 28 плюс 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27 і причому кількість плацебо або пустушок становить 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1. 46. Набір за п. 45, у якому кратне число становить 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 або 12. 47. Набір за одним з пунктів від 41 до 46, у якому дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб, містять лікарський засіб за п. 14. 48. Набір за одним з пунктів від 41 до 46, у якому дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб, містять лікарський засіб за п. 15. Даний винахід відноситься до фармацевтичної композиції, що містить гестагени, естрогени і 5метил-(6S)-тетрагідрофолат, що може застосовуватися в якості перорального контрацептиву й при цьому запобігати захворюванням викликаним дефіцитом фолату й порокам розвитку, при цьому не приховуючи симптомів дефіциту вітаміну В12. Фармацевтичні компанії, що працюють в галузі контролю народжуваності, постійно прагнуть поліпшити існуючі контрацептивні препарати. Сюди відносяться не тільки підвищення контрацептивної надійності внаслідок розробки нових речовин і поліпшена зручність у застосуванні. Крім того, є також намір розробити інноваційні композиції для комбінації контрацепції й профілактики захворювань. Певна кількість захворювань розглядається як пов'язані з дефіцитом фолату. Таким чином, застосування фолатів, наприклад, у формі фолієвої кислоти, може мінімізувати ризик захворювань серця й кровообігу, а також певних злоякісних за хворювань (таких як, наприклад, рак грудей і рак прямої кишки). Порушення розвитку ще не народжених немовлят є особливо серйозними наслідками дефіциту фолату в жінок дітородного віку. Таким чином, жінки з низькими рівнем фолату, в порівнянні з жінками з досить високими рівнями фолату, мають підвищений ризик народити дітей, які страждають уродженими пороками розвитку, такими як дефект нервової трубки, дефект міжшлуночкової перегородки й урогенітальні дефекти. Дефекти нервової трубки є уродженими пороками центральної нервової системи, що зустрічаються найчастіше. Вони виникають через неповне закриття нервової трубки, наприклад, у період із третього по четвертий тиждень ембріонального розвитку. До дефектів нервової трубки відносяться ущелина хребта (Spina bifida) (частково з менінгоцеле або менінгомієлоцеле), енцефалоцеле або аненцефалії які характеризуються частковою або 7 повною відсутністю ділянок головного мозку. Діти з аненцефалією практично не здатні до існування. Spina bifida характеризується неповним закриттям хребетної дуги. Цей дефект залежно від виду ураження приводить до довічних обмежень у формі різних чуттєвих, а також і рухових порушень, наприклад, дві третини дітей і дорослих внаслідок паралічу м'язів є залежними від інвалідного візка Лікування здійснюється за допомогою закриття дефекту, накладення шунта для відведення ліквору й тривалої ортопедичної й неврологічної реабілітації. Витрати, що йдуть на медичне лікування, у середньому складають 500000€ на дитину. Щорічно в усьому світі народжується приблизно 250000 немовлят з дефектами нервової трубки У Німеччині й США це число становить приблизно 1-2 уражених на 1000 немовлят У Німеччині щорічно живими народжуються приблизно 500 дітей з дефектами нервової трубки, у випадку інших 500 вагітностей відбувається її переривання на основі пренатальної ультразвукової діагностики. Досить високий рівень фолату до моменту зачаття й у першій фазі вагітності знижують виникнення дефектів нервової трубки Взагалі вважається, що рівень фолату в еритроцитах щонайменше в 906нмоль/л є бажаним для скорочення поширеності дефектів нервової трубки Відомо, що своєчасний периконцепцюнальний прийом фолієвої кислоти може знизити приблизно на 50 - 70% виникнення дефектів нервової трубки. Збагачення продуктів фолієвої кислотою, що практикується в США, вже чітко зменшило частоту випадків дефектів нервової трубки, у Канаді й Чилі навіть більш ніж на 50%. Як добровільне збагачення продуктів, наприклад, у Німеччині, так і прийом препаратів фолієвої кислоти не охоплює в достатній мері всіх жінок дітородного віку. 3 одного боку багато жінок не усвідомлюють небезпеки, пов'язаної з дефектами нервової трубки і не знають про можливості мінімізувати відповідний ризик прийомом фолієвої кислоти. Таким чином, у багатьох країнах периконцепцюнально препарати фолієвої кислоти приймають набагато менше ніж 10% жінок. 3 іншого боку, незважаючи на сучасні й все більш прості застосовувані методи попередження вагітності, велика кількість вагітностей є незапланованими - у США приблизно до 50% (Inst. of Medicine в 1998, NEJM 2004)-, так що усвідомлений прийом препаратів фолієвої кислоти перед зачаттям із самого початку виключений. Виходячи із цього, наприклад, у США приблизно 5 - 8% жінок приймають пероральні контрацептиви не регулярно. Тому в основу патенту US 6,190,693 (Kafnssen et al) було покладене завдання за допомогою фолієвої кислоти попереджати виліковні захворювання в жінок що приймають пероральні контрацептиви. Кафрисен вирішив це завдання шляхом додавання фолієвої кислоти в пероральний контрацептив. Він розкрив метод введення фолієвої кислоти при застосуванні фармацевтичної композиції, що містить як розповсюджені протизаплідні діючі речовини, так і фолієву кислоту. 92491 8 Проте, додавання фолієвої кислоти в пероральні контрацептиви містить у собі серйозний ризик для здоров'я, тому що можуть бути приховані ранні, ще виліковні, симптоми дефіциту вітаміну В12, такі як, наприклад, мегалобластична анемія. Викликані дефіцитом вітаміну В12 гематологічні симптоми можна настільки добре лікувати за допомогою додаткової дози фолату, що недолік вітаміну В12 зовсім не виявляється або виявляється тільки дуже важко, і тому потім не діагностується. Однак, нейропсихіатричні симптоми, такі як, наприклад, парестезія й атаксія залишаються не виліковними й можуть необоротно погіршуватися. Тому в основі патентної заявки WO 03/070255 (Coelingh Bennink) лежало завдання уникнути ризик для здоров'я, що виникає внаслідок приховування симптомів дефіциту вітаміну В12 у жінок, що приймають пероральний контрацептив, що містить фолієву кислоту. Coelingh Bennink вирішує це завдання шляхом додавання до перорального контрацептиву вітаміну В12. Він являє собою набір для пероральної гормональної контрацепції, що містить естрогени й/або гестагени, тетрагідрофолат і обов'язково вітамін В12. Наступною проблемою при застосуванні препаратів фолієвої кислоти й тетрагідрофолату - які не містять 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат - є те, що приблизно в 55% кавказького населення присутня змішана спадковість і приблизно в 10 - 15% зустрічається гомозиготний поліморфізм метилентетрагідрофолат редуктази (MTHFR С677Т). Цей поліморфізм приводить до зниженої активності метилентетрагідрофолат редуктази, так що уражені жінки не можуть у достатній мері метаболізувати запропонований фолат і тетрагідрофолат в активний в організмі 5-метил-(6S)тетрагідрофолат. Цей поліморфізм є визнаним чинником ризику захворювань викликаних дефіцитом фолату, зокрема, стосовно дефектів нервової трубки. У якості наступної додаткової ускладнюючої проблеми є те, що фолієва кислота не є речовиною, що міститься природно в продуктах харчування. Для біологічної ефективності, при обміні речовин вона повинна бути перетворена ферментом дигідрофолатредуктази в 7,8-дигідрофолат і (6S)-тетрагідрофолат. Метаболічна здатність, зокрема, перший крок активізації, для перетворення провітаміну фолієвої кислоти в її активні відновлені форми є обмеженою й до того ж сильно відрізняється від одного індивіду до іншого індивіду. Тому що фермент дигідрофолатредуктази при метаболізмі метафоліну не має ніякого значення, то взаємодія між ліками, які інгібують дипдрофолатредуктазу, такі як, наприклад, метотрексат, і дипдрофолатредуктазой не спостерігається Для того щоб також забезпечити в достатній мірі фолатом жінок, які страждають від дефіциту метилентетрапдрофолат редуктази, у документі ЕР 0 898 965 (Muller et al) пропонується застосування 5-метил-(6S)-тетрапдрофолієвоі кислоти або відповідної фармацевтично прийнятної солі у вигляді харчової добавки або у вигляді компонента ліків У тому числі ЕР 1 044 975 А1 розкриває ста 9 більну кристалічну сіль 5-метил-(6S)тетрапдрофолієвої кислоти й спосіб її одержання. Відомо, що більша частина вагітностей наступає незабаром після припинення прийому протизаплідних засобів (Farrow et al, Human Reproduction Vol 17, No, 10, cc 2 754 - 2 761, 2002). При нерегулярному й ненадійному застосуванні навіть під час прийому може наступити вагітність. Також відомо, що людина навіть після закінчення додаткового прийому фолату може мати із цього користь ще приблизно в наступних 90 днів (FDA Advisory Committee for Reproductive Health Drugs (ACRHD) The public health issues, including the safety and Potential clinical benefit, associated with combining folic acid and in oral contraceptive into a single combination product 15 Dezember 2003, Summary Minutes, питання 4). Проте передумовою цьому є те, що фолієва кислота приймалася додатково до нормального харчування в досить довгий попередній період у досить високій кількості. Цей так званий ефект депо в тканинах є очевидним завдяки підвищеному рівню фолату в еритроцитах. Далі відомо, що низький рівень фолату й високий рівень гомоцистеїну асоціюються з багаторазовими спонтанними абортами (Merlen et al, Obstet et Gynecol В 2000, 95 cc 519-524). В основу даного винаходу покладене завдання створити пероральний контрацептив, що може запобігати захворюванням, викликаним дефіцитом фолату однак при цьому він не в змозі приховувати симптоми дефіциту вітаміну В12. Далі в основу винаходу покладене завдання розкрити режим прийому, що гарантував би, що жінка, яка приймає фармацевтичну композицію відповідно до винаходу, ще протягом певного часу після припинення прийому надійно захищена від захворювань, викликаних дефіцитом фолату, або пороків розвитку плоду, особливо, від дефектів нервової трубки. І те й інше має силу також у випадку наявного в приймаючої жінки гомо- або гетерозиготного поліморфізму метилентетрапдрофолат редуктази, що перешкоджає прийнятності фолієвої кислоти організмом і разом з тим м біологічної активності для запобігання дефектів нервової трубки. Відповідно до винаходу завдання вирішується за допомогою фармацевтичної композиції, що містить один або декілька гестагенів і/або естрогенів і 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат, а також фармацевтично прийнятні допоміжні речовини й носії. У порівнянні з WO 03/070 255 в основі даного винаходу лежить несподіване відкриття того, що лікування й попередження захворювань викликаних дефіцитом фолату є також можливим не приховуючи при цьому симптоми дефіциту вітаміну В12 за допомогою прийому тільки 5-метил-(6S)тетрагідрофолату. Тому більше не потрібне додавання вітаміну В12 для того, щоб уникнути ризиків для здоров'я, описаних в WO 03/070255 Незважаючи на прийом 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату лікар може діагностувати недолік вітаміну В12 і при необхідності призначити лікування. У випадку існуючого дефіциту вітаміну В12, звичайно ж, вітамін В12 може вводитися додатково. Також при необхідності можливе додавання інших 92491 10 вітамінів, таких, наприклад, як вітамін В6 або вітамін В2. В основі винаходу в порівнянні з WO 03/070255 лежить несподіване відкриття того, що, не дивлячись на прийом фолатів або інших тетрагідрофолатів, тільки застосування 5-метил-(6S)тетрагідрофолату в контрацептиві, також у випадку наявного гомо- або гетерозиготного поліморфізму метилентетрагідрофолат редуктази, здійснює необмежену й достатню прийнятність компонентів фолату організмом і разом з тим їх біологічну активність для запобігання уроджених пороків розвитку, викликаних дефіцитом фолату. 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат синтезується в процесі метаболізму (див. фігуру 1) з 5,10метилен-(6R)-тетрагідрофолату. Ця біохімічна реакція каталізується ферментом метилентетрагідрофолат редуктаза (MTHFR), для якого відомі різні генетичні мутації, які частково проявляються в обмеженій біологічній активності (MTHFR C677T поліморфізм). 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат у наступній стадії, що каталізується ферментом метіонінсинтази (MS), перетворюється в тетрагідрофолат. При цьому відбувається перенос 5метильної групи 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату на амінокислоту гомоцистеїн (Нсу), що при цьому перетворюється в амінокислоту метіонін (Met). Ця залежна від вітаміну В12 реакція при метаболізмі гомоцистеїну позначається також як реметилювання гомоцистеїну. 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат у групі відновлених фолатів займає особливе положення, тому що 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат може перетворюватися в тетрагідрофолат тільки внаслідок реакції реметилювання гомоцистеїну. Тетрагідрофолат є власною несучою молекулою для одновуглецевих фрагментів різних ступенів окислювання. В обміні речовин 5-метил-(6S)тетрагідрофолат може синтезуватися тільки з 5,10-метилен-(6R)-тетрагідрофолату й тільки за допомогою перетворення в тетрагідрофолат метаболизується далі. Перша ферментна реакція (MTHFR) при фізіологічних умовах є не оборотною, друга ферментна реакція (MS) залежить від вітаміну В12, це значить, що при дефіциті вітаміну В12 акумулюється 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат і далі не може розщеплюватися. Цей феномен відомий також під назвою пастка для метилу (methyl trap). Тільки 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат, а не всі інші окислені й відновлені фолати, такі як фолієва кислота, 7,8-дигідрофолат, (6S)тетрагідрофолат, 5-форміл-(6S)-тетрагідрофолат, 10-форміл-(6R)-тетрагідрофолат, 5,10-метеніл(6R)-тетрагідрофолат, 5,10-метилен-(6R)тетрагідрофолат, 5-форміміно-(6S)тетрагідрофолат, має цю особливу властивість. 5метил-(6S)-тетрагідрофолат є єдиним природно зустрічається фолатом, що не приховує недолік вітаміну В12. Це має особливе значення при застосуванні 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату в комбінації з пероральними контрацептивами і є об'єктом даного винаходу. У якості гестагенів у фармацевтичній композиції відповідно до винаходу можуть застосовуватися наступні речовини: левоноргестрел, норгестимат, норетістерон, дигідрогестерон, дроспіренон, 3-бета-гідроксидезогестрел, 3-кетодезогестрел (= 11 етоногестрел), 17-деацетилноргестимат, 19норпрогестерон, ацетоксипрегненолон, алілестренол, амгестон, хлормадинон, ципротерон, демегестон, дезогестрел, дієногест, дигідрогестерон, диметистерон, етистерон, етинодіолдиацетат, флурогестонацетат, гастринон, гестоден, гестринон, гідроксиметил прогестерон, гідроксипрогестерон, лінестренол (= ліноестренол), мецирогестон, медроксипрогестерон, мегестрол, меленгестрол, номегестрол, норетіндрон (= норетістерон), норетинодрел, норгестрел (включаючи d-норгестрел і dl-норгестрел), норгестрієнон, норметистерон, прогестерон, квінгестанол, (17альфа)-17-гідрокси11-метилен-19-норпрегна-4,15-дієн-20-ин-3-он, тіболон, тримегестрон, алгестон ацетофенід, несторон, промегестрон, складний ефір 17гідроксипрогестерону, 19-нор17гідроксипрогестерон, 17альфа-етинілтестостерон, 17альфа-етиніл-19-нор-тестостерон, d-17бета-ацетокси-13бета-етил-17альфаетинілгон-4-ен-3-оноксим або сполуки розкриті в WO 00/66570, особливо танапрогет. Кращими є левоноргестрел, норгестимат, норетістерон, дроспіренон, дигідрогестерон. Особливо переважний дроспіренон. У якості естрогенів придатні етинілестрадіол, местранол, квінестранол, естрадіол, естрон, естран, естріол, естетрол і кон'юговані кінські естрогени. При цьому перважними є етинілестрадіол, естрадіол і местранол, особливо переважний етинілестрадіол. Відповідно до винаходу застосовувані кількості відповідних гестагенів і/або естрогенів як правило відповідають відомим кількостям у контрацептивах. Наприклад, для зазначених нижче гестагенів звичайно вони становлять: дроспіренон 0,5-5 мг левоноргестрел 30 - 250 мкг норгестимат 180 - 250 мкг норетістеронацетат 0,5-1 мг ципротеронацетат 1 - 2 мг дезогестрел 20-150 мкг дієногест 2 - 3 мг гестоден 60 - 75 мкг тіболон 2,5 мг Згідно з даним винаходом переважна кількість щоденного прийому, наприклад, дроспіренону становить від 0,5 до 5мг, особливо переважно 3мг. Застосовувані відповідно до винаходу кількість естрогену для зазначених нижче естрогенів становить приблизно: етинілестрадіол 10 - 50 мкг естрадіол 1 - 4 мг местранол 50 мкг Згідно з даним винаходом переважна кількість щоденного прийому, наприклад, етинілестрадіолу становить від 10 до 50мкг, особливо переважно від 10 до 30мкг, винятково особливо переважно від 20 до 30мкг. У якості 5-метил-(6S)-тетрагідрофолатів у формі відповідно до винаходу зазначені вільна кислотна форма, а також фармацевтично прийнятні солі й модифікації 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти (N-[4-[[(2-аміно 92491 12 1,4,5,6,7,8-гексагідро-4-оксо-5-метил-(6S)птеридиніл)метил]аміно]бензоїл]-L-глутамінова кислота). Фармацевтично прийнятні солі повинні бути як фармакологічно, так і фармацевтично сумісними. Такими фармакологічно й фармацевтично прийнятними солями можуть бути солі лужних або лужноземельних металів, переважно солі натрію, калію, магнію або кальцію. Особливо переважною є сіль кальцію. Застосовувана кількість, наприклад, особливо переважної відповідно до винаходу солі кальцію 5метил-(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти (метафолін) становить від 0,1 до 10мг, переважно від 0,4 до 1мг, особливо переважно 451мкг (відповідає 400мкг фолієвої кислоти або 416мкг 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти). Як модифікацію 5-метил-(6S)тетрагідрофолату переважно використають кристалічні модифікації згідно з ЕР 1 044 975. При необхідності може міститися вітамін В6 або вітамін В2. Проте, для здійснення винаходу відповідне додавання не потрібно. Вітамін В6 може застосовуватися в дозі від 1мг до 5мг, переважно при нормально дозованому застосуванні від 1мг до 3мг у день. Вітамін В2 може застосовуватися в дозі від 1мг до 5мг, переважно при нормально дозованому застосуванні від 1мг до 2мг у день і при високо дозованому застосуванні від 2 до 5мг у день. При цьому контрацептивно діючими речовинами є гестагени й/або естрогени. 5-метил-(6S)тетрагідрофолат додається як вітамін, щоб запобігати захворюванням, викликаним дефіцитом фолату й порокам розвитку, однак при цьому не приховуючи симптоми можливо наявного дефіциту вітаміну В12. Також додатково мають користь із 5метил-(6S)-тетрагідрофолату ті жінки, які на основі зменшеної ферментної активності MTHFR (MTHFR C677T поліморфізм) можуть досить обмежено метаболізувати фолієву кислоту, а також і відновлені фолати. У переважному варіанті даного винаходу кількість щоденного прийому дроспіренону становить від 0,5 до 5мг, переважно 3мг, етинілестрадіолу від 10 до 50мкг, переважно від 10 до 30мкг, особливо переважно від 20 до 30мкг. Сіль кальцію 5метил-(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти в цьому переважному варіанті даного винаходу міститься в кількості від 0,1 до 10мг, переважно від 0,4 до 1мг, особливо переважно 451мкг (відповідає 400мкг фолієвої кислоти). Приготування фармацевтичних препаратів на основі нової фармацевтичної композиції відбувається відомим способом, при якому обробляють діючі речовини із застосовуваними в галенових препаратах носіями, наповнювачами, речовинами, що сприяють розпаду, зв'язувальними речовинами, стабілізаторами вологості, речовинами, що надають слизькість, абсорбентами, розріджувачами, покрашувачами смаку, барвниками й переводять у бажані форми застосування, включаючи лікарські форми вповільненої дії. У лікарському засобі відповідно до винаходу можуть бути присутніми естроген і гестаген, а та 13 92491 кож 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат у загальних дозувальних одиницях. З одного боку естроген з гестагеном, а також 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат з іншого боку, можуть бути приготовлені в окремі дозувальні одиниці. Як вітамін В12, так і 5-метил-(6S)тетрагідрофолат є нестабільними відносно кисню й вологості повітря. При спробі приготувати один з одним етинілестрадіол і вітамін В12 була встановлена взаємна несумісність цих обох речовин. Виміри несумісності між передбаченими компонентами препарату проводилися за допомогою термоаналітичного методу (DSC, Differential 14 Scanning Calorimetry). При цьому несумісність може бути розпізнана за допомогою незначних ентальпії плавлення й температур плавлення. Вони викликані, наприклад, зменшеним вмістом кристалічної речовини й збільшенням домішок. При визначенні були досліджені бінарні суміші допоміжних або діючих речовин щоразу і вітаміном В12 і перевіряли сумісність під впливом різних газів і температур. При описаних дослідженнях вітамін В12 показував сильну взаємодію з етинілестрадіолом. Результати вимірів несумісності наведені в таблиці 1. Таблиця 1 Підсумки дослідження сумісності Речовина Дроспіренон Етинілестрадіол Етинілестрадіол циклодекстриновий комплекс Сумісність + --( + Характер сумісності переважно добре сильна взаємодія переважно добре нижче 60 С переважно добре нижче 60 С Лактоза + Кукурудзяний крохмаль ++ добре нижче 60 С Модифікований крохмаль ++ добре нижче 60 С кукурудзяний Полівінілпіролідон Стеарат магнію + ++/ переважно добре нижче 60 С нейтрально, добре нижче 60 С Гідроксипропілметилцелюлоза ++ добре нижче 60 С Гідроксипропілцелюлоза ++ добре нижче 60 С Мальтодекстрин +/- нейтрально, добре нижче 60 С Поліетиленгліколь 6000 взаємодія з вологістю Лакова суміш + переважно добре нижче 60 С Коментарі О2 чутливий сильно чутливий О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий, чутливий вологи О2 чутливий,чутливий до логи О2 чутливий чутливий до логи О2 чутливий,чутливий до логи О2 чутливий,чутливий до логи до до до до до до до вововово Пояснення: ++ гарна сумісність, очікувана нижче зазначеної температури + сумісність нижче зазначеної температури ++/- нейтральна сумісність, можлива гарна сумісність нижче зазначеної температури +/-- нейтральна сумісність, що здається сумісною нижче зазначеної температури -(---) (сильна) взаємодія, несумісне Полівінілпіролідон (PVP) є особливо придатним через його зволожуючі властивості для гормональних препаратів (Moneghini et al., Int J Pharm 175, 1998, 177 - 183). Проте препарат 5-метил(6S)-тетрагідрофолату з PVP прискорює розпад 5метил-(6S)-тетрагідрофолату (порівн. таблиці 2 і 3; спосіб 3). Наступним завданням, що лежить в основі даної заявки, і яка вирішується за допомогою даного винаходу, є створення можливості одержати стабільний препарат етинілестрадіолу в присутності 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату й при необхідності вітаміну В12. Несподівано було виявлено, що несумісність між етинілестрадюлом і вітаміном В12 може бути відвернена за допомогою того, що етинілестрадюл при приготуванні препарату застосовується у вигляді етинілестрадіол-бета-циклодекстринового комплексу (етинілестрадіол у вигляді рциклодекстрин-клатрату; одержання порівн. WO 02/49 675). Відповідні препарати відповідно до винаходу описані в прикладі виконання 1 (порівн. композиція А, В і D). Крім того, вони містять суміш із кукурудзяного крохмалю й модифікованого кукурудзяного крох 15 92491 малю (Starch). Крохмаль складається з амілози й амілопектину. Обидва є полісахаридами на основі одиниць а-глюкози. Замість кукурудзяного крохмалю у фармацевтичних препаратах можуть також використатися, наприклад, рисовий крохмаль, картопляний крохмаль або пшеничний крохмаль Крохмаль замочують, суспендують або розчиняють як єднальну рідину або тверду речовину. Він може бути не модифікованим або модифікованим частково. Переважно застосовуваний відповідно до винаходу кукурудзяний крохмаль має емпіричну формулу (С6Н10О5)n з n=300-1000. Його молекулярна вага становить 50,000 -160,000. Застосовуваний у фармацевтичних препаратах крохмаль з одного боку служить тільки як чистий наповнювач. З іншого боку він застосовується як єднальна речовина. Відповідно до винаходу застосовують 1 - 5%, переважно 1,8 - 3% маси таблетки як єднальну речовину у вигляді кукурудзяного крохмалю. Поряд з кукурудзяним крохмалем як єднальні речовини можуть застосовуватися крохмаль, сполуки крохмалю, наприклад, мальтодекстрин або похідні целюлози, такі як, наприклад, карбоксилметилцелюлоза, етилцелюлоза, гідроксипропілцелюлоза, гідроксипропілметилцелюлоза або метилцелюлоза. Відповідно до винаходу переважно застосовують похідні целюлози з низьким ступенем заміщення. Вони мають в'язкість від 1 до 20мПа.с в 2-процентному водяному розчині. Відповідно до винаходу переважні похідні з в'язкістю 16 від 2 до 20мПа.с, особливо переважні з в'язкістю від 3 до 6мПа.с. У переважному препараті відповідно до винаходу частина застосовуваного кукурудзяного крохмалю може бути заміщена гідроксипропілцелюлозою (НРС) з низьким ступенем заміщення в концентрації від 0,5 - 5% (мас/мас), переважно 1 3% (мас/мас), особливо переважно 2% (мас/мас). Гідроксипропілцелюлоза з низьким ступенем заміщення є такою, коли не менш ніж 5% і не більш ніж 16% її гідроксильних груп є естерифікованими або етерифікованими. У таблиці 2 представлений вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату в одній таблетці в % щодо заданого вмісту в 100% залежно від застосовуваної єднальної речовини безпосередньо після одержання. Представлений вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату було встановлено в ході тесту на однорідність складу (Content Uniformity Test). Одержання досліджуваного складу (спосіб 2) відбувалося шляхом змішування компонентів, гранулювання із застосовуваною як сполучна речовина частиною кукурудзяного крохмалю, домішування 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату після закінчення процесу грануляції, повторного змішування й таблетування. У порівнянні із цим до складу відповідно до процесу 3 замість кукурудзяного крохмалю додавали полівінілпіролідон. Вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату в отриманому складі відповідно до способу 3 є нижчим. Таблиця 2 Вміст метафоліну залежно від зв'язувальної речовини безпосередньо після одержання Середнє значення Вміст метафоліну домішування, PVP (спосіб 3) 90,5% У таблиці 3 вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату представлений залежно від застосовуваної зв'язувальної речовини після одномісячного зберігання при певних температурах і вологості повітря. У таблиці 2 помітна тенденція, що Вміст метафоліну домішування, кукурудзяний крохмаль (спосіб 2) 96,1% приготовлений з PVP 5-метил-(6S)тетрагідрофолат є більш нестабільним, підтверджується, зокрема, при умовах зберігання в 40 С і 75% відносної вологості повітря (r). Таблиця 3 Вміст метафоліну залежно від зв'язувальної речовини після зберігання Відкриті віали 25 С / 60% r домі40 С / 75% r домі25 С / 60% r домішу40 С / 75% r домішушування кукурузний шування кукурузний вання PVP (спосіб 3) вання PVP (спосіб 3) крохмаль (спосіб 2) крохмаль (спосіб 2) 89,5% 92,1% 37,7% 67,7% Одержання препарату для перорального застосування відбувається звичайно за допомогою гранулювання, таблетування й нанесення плівки. Однак, 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат через його схильність до окислювання й поглинання вологи розпадається вже під час грануляції. Однак особливо незвичайним є подальший розпад 5-метил(6S)-тетрагідрофолату при зберіганні. У препараті, у якому - як правило - усе компоненти лікарського засобу, включаючи 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат, спочатку змішують і тільки після цього гранулю ють, після закінчення часу зберігання протягом одного місяця при 40 С і 75% відносної вологості повітря в закритих віалах одержують тільки лише залишок рівний майже 60% (порівн. таблицю 5) спочатку використовуваного 5-метил-(6S)тетрагідрофолату. Втрати під час процесу гранулювання можуть бути зменшені, якщо 5-метил(6S)-тетрагідрофолат домішують тільки після закінчення процесу гранулювання. Суха домішка під час одержання веде до стабілізації 5-метил-(6S)тетрагідрофолату. Однак більше того, несподівано 17 92491 було виявлено, що це сприяє також і подальшій стабілізації під час зберігання. Вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату, в отриманому за допомогою наступного домішування препараті, при рівному періоді й при ідентичних умовах зберігання становить вище 90% (порівн. таблицю 5). Таблиця 4 показує вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату в одній таблетці в % залежно від застосовуваного способу одержання безпосередньо після одержання. Розходження між спосо 18 бом 1 і способом 2 полягає в тимчасовому інтервалі, у якому додавали 5-метил-(6S)тетрагідрофолат при одержанні досліджуваних таблеток. У способі 1 5-метил-(6S)тетрапдрофолат знаходився у суміші вже при грануляції у той час як у способі 2 його домішували тільки після закінчення грануляції Вміст 5-метил(6S)-тетрагідрофолату в отриманому відповідно до способу 1 препараті є чітко меншим. Таблиця 4 вміст метафоліну одержання залежно від способу одержання безпосередньо після Середнє значення Коефіцієнт розподілу Вміст метафоліну грануляція (спосіб 1) 88,5 6,1 Таблиця 5 показує вміст 5-метил-(6S)тетрагідрофолату залежно від застосовуваного способу одержання після одномісячного зберігання при певних температурах і вологості повітря. У таблиці 4 помітна тенденція, що доданий ще до Вміст метафоліну домішування (спосіб 2) 96,1% 2,5 гранулювання 5-метил-(6S)-тетрапдрофолат є більше нестабільним, підтверджується, зокрема, при умовах зберігання в 40 С і 75% відносної вологості повітря (r). Таблиця 5 Вміст метафоліну залежно від способу одержання після зберігання Відкриті віали Закриті віали 25 С / 60% r грануляція (спосіб 1) 63,2% 74,5% 25 С / 60% r домішування (спосіб 2) 92,1% 92,5% Відомо, що в сухій домішці вивільнення відбувається більш повільно, ніж у випадку грануляції. Проте несподівано було встановлено, що суха домішка 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату не сповільнює вивільнення, а навіть прискорює його. До того ж таблетки досліджувалися в експерименті на 40 С / 75% r грану- 40 С / 75% r домішуляція вання (спосіб 1) (спосіб 2) 43,4% 67,7% 58,9% 90,1% розчинення in-vitro (In-vitro-Dissolution) за допомогою апаратури USP-paddle при 50об/хв і 37 С в 0,03-процентному водяному розчині аскорбінової кислоти. Таблиця 6 показує результати експерименту In-vitro-Dissolution. Таблиця 6 Розчинення в % Час [хв] 0 10 15 30 45 60 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат спосіб 1 роз- 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат спосіб 2 розчинення [%] чинення[%] 0 0 59,2 81,4 66,8 89,3 73,1 91,3 76,7 91,1 75,8 91,2 19 Регулярний прийом фармацевтичної композиції відповідно до винаходу з особливо переважною дозою 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти на добу приводить до підвищення концентрацій фолату в сироватці й еритроцитах до досягнення динамічної рівноваги (steady state). Відповідна інвазійна кінетика фолату в еритроцити описується періодом напіврозпаду від 6 до 10 тижнів. На основі цього періоду напіврозпаду досягнення приблизно 97% фолату в еритроцитах рівня steady state варто очікувати після приблизно 5 періодів напіврозпаду (відповідно приблизно від 30 до 50 тижнів). При тривалому, щоденному прийомі фармацевтичної композиції відповідно до винаходу рівень фолату в еритроцитах залишаються в межах steady state концентрації. Після припинення прийому фармацевтичної композиції відповідно до винаходу рівень фолату в еритроцитах повільно знижується з періодом напіврозпаду також приблизно від 6 до 10 тижнів. Внаслідок цього рівень фолату в еритроцитах без подальшого, тривалого прийому фармацевтичної композиції відповідно до винаходу протягом декількох тижнів, залишається в межах вище межі 906нмоль/л, що взагалі вважається достатнім для зниження дефектів нервової трубки. Тому препарат відповідно до винаходу гарантує зниження ризику захворювань викликаних дефіцитом фолату й уроджених пороків розвитку, причиною яких також є недолік фолату, також після закінчення більше довгострокового прийому лікарського засобу («пілі») відповідно до винаходу. Також об'єктом винаходу є застосування 5метил-(6S)-тетрагідрофолату, одного або декількох естрогенів і/або гестагенів, а також при необхідності вітаміну В6 і/або вітаміну В2, а також фармацевтично прийнятних допоміжних речовин і носіїв для одержання лікарського засобу для зниження ризику захворювань і уроджених пороків розвитку викликаних дефіцитом фолату щонайменше протягом 8 тижнів після закінчення попереднього довгострокового й тривалого прийому цього лікарського засобу. 92491 20 Також об'єктом винаходу є набір, що містить щонайменше 20 щоденних дозувальних одиниць, які містять лікарський засіб відповідно до винаходу й щонайменше одну щоденну дозувальну одиницю, що містить 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат а також необов'язково вітамін В12 вітамін В6 і/або вітамін В2, причому кількість всіх дозувальних одиниць, що містяться в наборі, становлять щонайменше 28 і дозувальні одиниці розташовані таким чином, що спочатку приймають дозувальні одиниці, що містять лікарський засіб відповідно до винаходу й потім дозувальні одиниці, що не містять ні гестаген, ні естроген У випадку згаданих першими, лікарський засіб відповідно до винаходу, що містить щонайменше 20 щоденних дозувальних одиниць, також можливо приготувати 5-метил(6S)-тетрапдрофолат роздільно й розташовувати як додаткові дозувальні одиниці окремо таким чином, щоб із цього розташування виходив загальний прийом обох дозувальних одиниць Інші форми здійснення різних наборів відповідно до винаходу представлені в пунктах від 18 до 22, 38, 39 і 40. Зокрема, також можливо приймати лікарський засіб відповідно до винаходу в так званому «тривалому режимі» відповідно до пунктів від 43 до 50. Під цим розуміється безперервний, більш тривалий, ніж 28-денний, прийом лікарського засобу, причому подовжений цикл застосування доповнюється від 1 до 7-денним прийомом дозувальних одиниць, що містять винятково 5-метил-(6S)тетрапдрофолат або прийомом від 1 до 7 плацебо (дозувальні одиниці активна діюча речовина) або від 1 до 7 пустушок (не приймаючи взагалі дозувальні одиниці). Наступні приклади служать для більш детального пояснення об'єктів винаходу при цьому не обмежують їх. Приклад 1: Композиція таблеток (80мг) відповідно до винаходу може бути взята з таблиці 7 21 92491 22 Таблиця 7 Композиція таблеток відповідно до винаходу Речовина, що міститься Композиція Дроспіренон Зтинілестрадюл* Метафолін Вітамін В12 Лактоза моногідрат Кукурудзяний крохмаль Кукурудзяний крохмаль ** Модифікований кукурудзяний крохмаль Магнію стеарат Кількість А 3 мг 0,03 мг 0,451 мг до 80 мг 16,40 мг 2 мг *** В 3 мг 0,02 мг 0,451 мг до 80 мг 16 40 мг 2 мг *** С 0,451 мг до 80 мг 16 40 мг 2 мг *** D 3 мг 0,03 мг 0,451 мг 0,1 мг до 80 мг 16 40 мг 2 мг *** 9,60 мг 0,80 мг 9,60 мг 0,80 мг 9,60 мг 0,80 мг 9,60 мг 0,80 мг * при необхідності у вигляді етинілестрадюл-бета-циклодекстринового комплексу, при цьому вказівка кількості відноситься до простого етинілестрадюлу. У випадку застосування етинілестрадюл-бетациклодекстринового комплексу необхідно використати, наприклад, десятикратну кількість. Вміст етинілестрадюлу в ( -циклодекстриновом комплексі становить приблизно від 9,5 до 12,5% (порівн. WO02/49675) ** позначена ** частина кукурудзяного крохмалю може бути замінена альтернативною зв'язувальною речовиною такою як, наприклад, 1,6мг гідроксипропілцелюлози з низьким ступенем заміщення *** кількість застосовуваного як сполучна речовина кукурудзяного крохмалю** може становити, наприклад, також 1,8мг Одержання перорального препарату відбувається шляхом змішування зазначених вище компонентів, гранулювання з застосовуваною як зв'язувальна речовина частиною кукурудзяного крохмалю, додавання солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвоі кислоти після закінчення процесу грануляції, повторного змішування, таблетування й нанесення плівки Приклад 2: 80 здорових молодих жінок дітородного віку з інтервалом в 8 тижнів здають кров і в них визначають рівень фолату в еритроцитах за допомогою затвердженого мікробіологічного, імунологічного або інструментального методу (наприклад, HPLC, LC-MS/MS) або придатної комбінації цих методів. Через 8 тижнів після першого узяття крові (скринінгова фаза) протягом 40 тижнів видають: щодня 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти або альтернативно: протягом відповідно першого 21 дня кожного циклу вводять одночасно 3мг дроспіренону, 30мкг етинілестрадіолу й 451мкг солі кальцію 5-метил(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти (таблетка відповідно до композиції А відповідно до приклада здійснення 1). У безпосередньо наступній фазі триває прийом 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти протягом 7 днів (композиція С). У наступний 21 день (другий цикл) вводять 3мг дроспіренону, 30мкг етинілестрадіолу й 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвоі кислоти (композиція А) і в наступних 7 днів тільки 451мкг солі кальцію 5-метил(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти (композиція С) і так далі (фаза призначення лікарського засобу). Через 48 тижнів 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат більше не вводиться. Альтернативно можуть уводитися дроспіренон і етинілестрадіол протягом подальших 40 тижнів або також можуть бути припинені. Останнє узяття крові відбувається через 88 тижнів. Відсоток вибування через довгостроковий характер дослідження може становити до 50%. Приклад 3: 80 здорових молодих жінок дітородного віку протягом 8 тижнів здають кров і в них визначають рівень фолату в еритроцитах за допомогою затвердженого мікробіологічного, імунологічного або інструментального методу (наприклад, HPLC, LCMS/MS) або придатної комбінації цих методів. Через 8 тижнів після першої здачі крові протягом 40 тижнів у кожні перші 24 дня кожного циклу одночасно вводять 3мг дроспіренону, 20мкг етинілестрадіолу й 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти (композиція В). В У безпосередньо наступній фазі прийом 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти триває протягом 7 днів (композиція С). На наступний 21 день (другий цикл) повторюють введення 3мг дроспіренону, 20мкг етинілестрадіолу й 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти (композиція В) і протягом наступних 7 днів тільки 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти (композиція С) і так далі. Через 48 тижнів 5-метил-(6S)-тетрагідрофолат більше не вводиться, у той час як дроспіренон і етинілестрадіол продовжує вводитися протягом наступних 40 тижнів або також припиняється. Останній забір крові відбувається через 88 тижнів. Відсоток вибування через довгостроковий характер дослідження може становити до 50%. Вихідне значення рівня фолату в еритроцитах осіб, що проходять випробування, залежно від гастрономічних звичок становить приблизно від 500 до 700нмоль/л, однак у кожному разі нижче 906нмоль/л. Це значення підвищується протягом наступних днів при незмінних гастрономічних звичках із застосуванням фармацевтичної композиції 23 відповідно до винаходу й уже через від 6 до 8 тижнів - отже після другого циклу -досягає значення приблизно в 906нмоль/л. Після тривалого прийому принаймні в 30 тижнів (відповідно до п'ятикратного значення нижньої межі періоду напіврозпаду) при незмінних гастрономічних звичках рівень фолату в еритроцитах досягає приблизно від 1200 до 1600нмоль/л (steady state). Після закінчення застосування 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату рівень фолату в еритроцитах безупинно падає. Виходячи із середньої steady state концентрації в 1400нмоль/л при незмінних гастрономічних звичках відбувається зниження рівня фолату в еритроцитах в 906нмоль/л і разом з тим загальної достатньої мінімальної концентрації в еритроцитах для запобігання дефектів нервової трубки очевидно з одинадцятого по тринадцятий тиждень після припинення прийому фармацевтичної композиції відповідно до винаходу. Приклад 4: Тривале дослідження фолату 180 здорових молодих жінок дітородного віку (половина з яких одержують харчування, збагачене фолієвою кислотою) здають із інтервалом в 2 тижні кров і їх рівень фолату в еритроцитах визначають за допомогою затвердженого мікробіологічного, імунологічного або інструментального (наприклад, HPLC, LC-MS/MS) методу або придатної комбінації цих методів. Через 8 тижнів після першого узяття крові першій групі з 90 жінок протягом 24 тижнів уводять протягом відповідно першого 21 дня кожного циклу одночасно 3мг дроспіренону, 30мкг етинілестрадіолу й 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)тетрагідрофолієвої кислоти. У безпосередньо наступній фазі прийом 451мкг солі кальцію 5-метил(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти триває протягом 7 днів. Протягом наступного 21 дня (другий цикл) 3мг дроспіренону, 30мкг етинілестрадіолу й 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)-тетрагідрофолієвої кис 92491 24 лоти й у наступних 7 днів тільки 451мкг солі кальцію 5-метил-(6S)-тетрагідрофолієвої кислоти й так далі (фаза призначення лікарського засобу). Як контрольній групі, групі з 90 жінок видають за рівною схемою прийому 3мг дроспіренону, 30мкг етинілестрадіолу й 400мкг фолієвої кислоти. Останнє узяття крові відбувається в обох випадках через 24 тижні. Сюди приєднується час наступного спостереження у 20 тижнів, протягом 20 тижнів приймається протизаплідний препарат Yasmin®, тобто протягом відповідно першого 21 дня кожного циклу одночасно вводиться 3мг дроспіренону й 30мкг етинілестрадіолу; безпосередньо потім протягом 7 днів ніяка діюча речовина не вводиться (плацебо або ніякого введення). Відсоток вибування може становити до 30%. Вихідне значення рівня фолату в еритроцитах осіб, що проходять випробування, становить нижче 906нмоль/л. Це значення підвищується при гастрономічних звичках, що залишаються постійними, із застосуванням фармацевтичної композиції відповідно до винаходу протягом наступних днів і в більшості жінок уже через від 6 до 8 тижнів досягає значення приблизно в 906нмоль/л. Після тривалого прийому до плину 24 тижнів при гастрономічних звичках, що залишаються постійними, в обох групах досягається один рівень фолату в еритроцитах, що показує еквівалентність між обома групами, що проходять лікування (критерій біоеквівалентності 80-125%). Після закінчення прийому 5-метил-(6S)-тетрагідрофолату рівень фолату в еритроцитах безупинно падає. Це визначається, коли рівень фолату в еритроцитах не використає визнаний поріг в 906нмоль/л, що взагалі вважається достатнім для запобігання дефектів нервової трубки. Більшість жінок у першій групі навіть через 3 місяці після закінчення прийому має такий достатній рівень фолату в еритроцитах. 25 Комп’ютерна верстка А. Крижанівський 92491 Підписне 26 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601