Збагачена дпк композиція омега-3 поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти

Реферат: Винахід стосується ДПК-збагаченої фармацевтичної композиції поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти, терапевтичного способу її застосування. UA 114615 C2 (12) UA 114615 C2 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Згідно з Кодексом Сполучених Штатів (розділ 35; § 119(e)), ця заявка вказує на пріоритет нижченаведених попередніх заявок: U.S. Provisional Application №№. 61/583,796, поданої 6.01.2012; 61/664,047, поданої 25.06.2012; 61/669,940, поданої 10.07.2012; 61/680,622, поданої 7.08.2012; 61/710,517, поданої 5.09.2012 та 61/713,388, поданої 12.09. 2012, повний зміст яких включено сюди шляхом посилання. На даний час, розробку фармацевтичних композицій, збагачених омега-3 ("ω-3" або "n-3") поліненасиченими жирними кислотами ("ПНЖК") здійснюють з метою лікування різних клінічних показань. Ці продукти, які отримують з природних джерел, зазвичай з риб'ячого жиру, являють собою гетерогенні композиції та містять різні види омега-3 ПНЖК, омега-6 ПНЖК та інші мінорні компоненти, в тому числі мононенасичені та насичені жирні кислоти. Спостережені клінічні ефекти звичайно мають відношення до композиції в цілому, хоча, як вважається, значну частину спостережуваного клінічного ефекту надають найбільш поширені види ПНЖК у композиції, якими зазвичай є ЕПК та ДГК. Через гетерогенність цих композицій, визначено, що ці продукти містять певні обов’язкові види поліненасичених жирних кислот, кожен з яких знаходиться в межах певного відсоткового діапазону допуску. Крім того, композиції додатково є визначеними для обмеження певних небажаних компонентів, як природного походження, як-то деяких забруднювачів навколишнього середовища, так і тих, які потенційно можна отримати шляхом переробки. Оптимальна композиція швидше за все, буде трохи відрізнятися у залежності від призначених клінічних показань, хоча навіть для першого затвердженого клінічного призначення, як-то лікування важкої форми гіпертригліцеридемії (TГ (рівень тригліцеридів в крові) > 500 мг/дл), оптимальна композиція досі не є визначеною. Отже, попередньо затверджена фармацевтична композиція для лікування важкої форми гіпертригліцеридемії містить певні види омега-3 ПНЖК, як-то ейкозапентаєнову кислоту ("ЕПК") та докозагексаєнову кислоту ("ДГК") у вигляді етилових естерів у ваговому відсотковому співвідношенні приблизно 46:38 (ЕПК:ДГК) зі спільним відсотковим вмістом ЕПК та ДГК, який дорівнює приблизно 84% від всіх видів ПНЖК у композиції. На відміну від цього, нещодавно ® затверджений для лікування деяких клінічних симптомів продукт Vascepa (раніше відомий, як AMR101) являє собою ЕПК з >96% чистоти у формі етилового естеру та істотно є позбавленим ДГК. Нутрицевтичний продукт, який під назвою OMAX3 є у продажу у вигляді харчової добавки та частково сприяє зниженню рівнів тригліцеридів містить ЕПК та ДГК у формі етилового естеру у ваговому співвідношенні біля 4.1:1 та містить більш, ніж 84% ЕПК та ДГК за вагою та більш, ніж 90% омега-3 жирних кислот за вагою. Ці великі відмінності у складі відображають невизначеність відносно оптимального складу для цих клінічних показань. Ця невизначеність частково виникає завдяки конкуруванню між різними клінічними цілями. Наприклад, відомо, що омега-3 ПНЖК ДГК є більш ефективними, ніж ЕПК при застосуванні у зниженні сироваткових тригліцеридів, але також відомо, що вони мають більшу тенденцію до збільшення рівнів ліпопротеїнів низької щільності (ЛПНЩ) (Mori et al., Am. J. Clin. Nutr. 71:1085– 94 (2000), Grimsgaard et al., Am. J. Clin. Nutr. 66:649 –59 (1997). Вважається, що підвищення рівнів ЛПНЩ є клінічно несприятливим для пацієнтів з підвищенім ризиком виникнення серцевосудинних захворювань. Хоча зменшення агрегації тромбоцитів та тромбогенезу, викликане омега-3 ПНЖК часто є клінічно бажаним явищем, можливе збільшення часу кровотечі спонукало деяких вчених запропонувати додавання певної кількості видів омега-6 ПНЖК, арахідонової кислоти ("AК") до фармацевтичних композицій, багатих на омега-3 ПНЖК. Див. патентну заявку США №. 2010/0160435, опубліковану через 18 місяців після дати пріоритету. Важкість визначення оптимальної композиції також частково існує завдяки ферментативним взаємоперетворенням серед певних видів омега-3 ПНЖК та через конкурування між поліненасиченими жирними кислотами омега-3 та омега-6 за ферменти спільного користування у їх відповідних шляхах біосинтезу з середньоланцюгових харчових ПНЖК (Див. Фіг. 1). Додатковою проблемою у розробці оптимальної композиції є мінливість у біодоступності композицій ПНЖК, призначених для перорального введення. Відомо, що поглинання речовин ПНЖК у вигляді етилових естерів, наприклад, залежить від присутності ліпази підшлункової залози, вивільнення якої виникає у відповідь на поглинання жирів, отже поглинання ПНЖК у вигляді етилових естерів у цьому разі є неефективним та є предметом істотної мінливості як між суб’єктами, так і у будь-якому окремому суб’єкті та залежить від харчового споживання жиру. Див. Lawson et al., "Human absorption of fish oil fatty acids as triacylglycerols, free acids, or ethyl esters, " Biochem Biophys Res Commun. 152:328-35 (1988); Lawson et al., Biochem Biophys Res Commun. 156:960-3 (1988). Особливо поглинання зменшується у суб’єктів з дієтою з низьким 1 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 вмістом жирів, дієтою, запропонованою для суб'єктів з підвищеним рівнем тригліцеридів в сироватці або для суб'єктів з серцево-судинними захворюваннями. Процес очищення будь-якої особливо бажаної фармацевтичної композиції ПНЖК є призначеним для отримання кінцевого продукту, який має у своєму складі певні обов’язкові компоненти жирних кислот у межах попередньо визначених відсоткових діапазонів допустимих значень та для обмеження певних небажаних компонентів до рівнів, які будуть нижчими певних попередньо визначених допустимих меж, а також повинен мати достатній вихід продукції для того, що щоб зробити цей процес економічно обґрунтованим та екологічно збалансованим. Відмінності у складі бажаної кінцевої композиції також вимагають появу відмінностей у процесі очищення. Різні відомі етапи процесу являють собою компроміси, призначені для специфічного пристосування композиції та оптимізування труднощів процесу очищення. Наприклад, комплексоутворення включень сечовини (утворення клатратів) у присутності етанолу часто застосовують для видалення насичених та мононенасичених жирних кислот з довгими ланцюгами, тим самим підвищуючи відносну частку бажаних омега-3 поліненасичених жирних кислот з довгими ланцюгами у отриманій композиції. Занадто мало сечовини зменшує збагачення композиції довголанцюговими омега-3 ПНЖК, а надлишок сечовини може призвести до накопичування небажаних компонентів та також потенційно може привести (при будь-якій вибраній температурі та при будь-якому часу проведення реакції) до збільшення продукування етілкарбамату, який є канцерогеном, кількість якого знаходиться неприпустимо вищою певних визначених обмежень. З іншого боку, існуючі альтернативи комплексоутворенню сечовини стикаються з іншими труднощами. Отже, залишається потреба у отриманні покращених фармацевтичних композицій, багатих на омега-3 поліненасичені жирні кислоти, особливо призначених для лікування гіпертригліцеридемії та змішаних дисліпідемій. Також існує необхідність покращення процесів очищення таких композицій з риб’ячого жиру. У першому аспекті, заявленим винаходом передбачені ДПК-збагачені фармацевтичні композиції омега-3 поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти. Збагачення вмісту ДПК було ненавмисним та несподіваним наслідком виробничого процесу у промислових масштабах. Було показано, що ці ДПК-збагачені фармацевтичні композиції мають виняткову фармакологічну та клінічну ефективність при застосуванні в експериментах in vitro та у клінічних випробуваннях на людях. Відповідно, інший аспект заявленого винаходу стосується способів лікування. У одній серії таких втілень, передбачені способи лікування тяжкої гіпертригліцеридемії (TG > 500 мг/дл). У інших серіях таких втілень, передбачені способи лікування гіпертригліцеридемії (200 мг/дл- 500 мг/дл) шляхом додаткового введення статину та описаних тут фармацевтичних композицій. Додаткові способи лікування охоплюють, серед іншого, лікувальні заходи для покращення співвідношень ЕПК:АК у плазмі крові, лікувальні заходи для зниження рівнів аполіпопротеїну С3 (апоCIII) та лікувальні заходи для скорочення або запобігання стійкості до інгібіторів агрегації тромбоцитів. Також винаходом передбачені способи отримання фармацевтичних композицій в промислових масштабах, в тому числі способи, які, зокрема, полягають у операції комплексоутворення сечовини, під час якої композиційно-обмежені партії трансестерифікованої проміжної сировини піддають дії зазначеної операції комплексоутворення сечовини з застосуванням кількостей сечовини, які знаходяться у межах, визначених новим алгоритмом процесу. 1. Стислий опис фігур. У Фіг. 1 наведені відомі шляхи біосинтезу омега-3 та омега-6 поліненасичених жирних кислот з довгими ланцюгами з незамінних жирних кислот з ланцюгами проміжної (середньої) довжини. У Фіг. 2 наведено схему зразкового процесу отримання проміжної сировини етилових естерів ПНЖК. У Фіг. 3A наведено графік середнього відносного очищення класів жирних кислот шляхом застосування операції комплексоутворення сечовини, яка полягає у додаванні алгоритмічно – визначених кількостей сечовини до композиційно – визначеної проміжної сировини у вигляді етилових естерів ПНЖК. Фіг. 3B ілюструє середнє диференційне очищення окремих видів омега-3 та омега-6 етилових естерів ПНЖК при додаванні алгоритмічно – визначених кількостей сечовини до композиційно – визначеної проміжної сировини у вигляді етилових естерів ПНЖК. 2 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У Фіг. 4 наведено схему лікування, яка ілюструє додатково описані у Прикладі 7 клінічні дослідження ECLIPSE. У Фіг. 5 наведено порівняння біодоступності загальної кількості ЕПК+ДГК (змінення узгоджено з показниками першоначального рівня) після введення одиничної дози (4 г) ® препарату Lovaza протягом періодів харчування з низьким та високим вмістом жиру. У Фіг. 6 наведено порівняння біодоступності загальної кількості ЕПК+ДГК (змінення узгоджено з показниками першоначального рівня) після введення одиничної дози (4 г) ® ® препарату Lovaza ("EE-FA") або препарату Epanova , як-то ДПК-збагаченої композиції омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти ("FFA") протягом періоду споживання їжі з високим вмістом жиру. У Фіг. 7 наведено порівняння загальних концентрацій ЕПК+ДГК (змінення узгоджено з ® показниками першоначального рівня) після введення одиничної дози (4 г) препарату Lovaza ® або Epanova протягом періоду споживання їжі з низьким вмістом жиру. У Фіг. 8 наведено порівняння загальних концентрацій ЕПК у плазмі крові (змінення узгоджено з показниками першоначального рівня) після введення одиничної дози (4 г) ® ® препарату Lovaza або Epanova протягом періоду споживання їжі з низьким вмістом жиру. У Фіг. 9 наведено порівняння загальних концентрацій ДГК (змінення узгоджено з ® показниками першоначального рівня) після введення одиничної дози (4 г) препарату Lovaza ® або Epanova протягом періоду споживання їжі з низьким вмістом жиру. У Фіг. 10A та 10B наведені показники AUC0-t для окремих суб’єктів протягом періодів споживання їжі з низьким та з високим вмістом жиру, наведені у вигляді відсоткового співвідношення значення (%) AUC0-t,отриманого протягом періоду споживання їжі з низьким вмістом жиру до значення AUC0-t, отриманого протягом періоду споживання їжі з високим вмістом жиру. Негативні співвідношення не нанесені на графік. У Фіг. 11 наведено схему 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності, додатково описаних у Прикладі 8 (вісь часу нанесена без дотримання масштабу). У Фіг. 12A наведено графік середніх неузгоджених загальних концентрацій ЕПК+ДГК у ® залежності від часу (лінійна шкала) для застосування препарату Lovaza порівняно з ® застосуванням препарату Epanova у 14 – денному порівняльному дослідженні біодоступності , додатково описаному у Прикладі 8. У Фіг. 12B наведено гістограму, яка демонструє різницю у нескоригованій комбінації ЕПК+ДГК (нМ/мл) для пунктів, охоплених дужками у Фіг. 12A. У Фіг. 13 наведено графік середніх та узгоджених з початковими даними загальних концентрацій ЕПК+ДГК у плазмі крові у залежності від часу (лінійна шкала) для застосування ® ® препарату Lovaza у порівнянні з застосуванням препаратом Epanova протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності. У Фіг. 14A наведено гістограму, у якої у графічному вигляді зображено зростання неузгоджених рівнів ЕПК+ДГК у крові, починаючи з початкового рівня та закінчуючи досягненням ® ® стабільного стану. Дані наведені для груп, які вживали препарати Lovaza та Epanova протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності. У Фіг. 14B наведено гістограму, у якої у графічному вигляді зображено зростання неузгоджених значень Cavg для ЕПК+ДГК, починаючи з початкового рівня та закінчуючи ® досягненням стабільного стану. Дані наведені для груп, які вживали препарати Lovaza та ® Epanova протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності. [0032] У Фіг. 15A наведено гістограму, у якої у графічному вигляді зображено зростання загальних рівнів ДГК у крові, починаючи з початкового рівня та закінчуючи досягненням стабільного стану. Дані наведені для груп, які вживали препарати Lovaza® та Epanova® протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності. У Фіг. 15B наведено гістограму, у якої у графічному вигляді зображено зростання рівнів Cavg для ДГК, починаючи з початкового рівня та закінчуючи досягненням стабільного стану. Дані для ® групи, яка вживала препарат Epanova порівняно з даними для групи, яка вживала препарат ® Lovaza (все отримано протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності). У Фіг. 16A наведено гістограму, у якої у графічному вигляді зображено зростання загальних рівнів ЕПК у крові, починаючи з початкового рівня та закінчуючи досягненням стабільного стану. Дані наведені для груп, які вживали препарати Lovaza® та Epanova® протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності. У Фіг. 16B у графічному вигляді зображено зростання рівнів Cavg для ЕПК, починаючи з початкового рівня та закінчуючи досягненням стабільного стану для груп, які вживали препарати Lovaza® та Epanova® протягом 14 – денних порівняльних досліджень біодоступності. У Фіг. 17 наведено схему лікування, яка ілюструє додатково описані у Прикладі 10 клінічні дослідження EVOLVE. 3 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У Фіг. 18 більш детально підсумовано схему досліджень EVOLVE з додатковим визначенням строків проведення візитів у цих дослідженнях. У Фіг. 19 наведено розташування суб’єктів у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 20A - 20D зображені усереднені рівні сполук ЕПК (Фіг. 20A), ДГК (Фіг. 20B), ДПК (Фіг. 20C) та АК (Фіг. 20D) у плазмі крові (наведені у мкг/мл) на початок та на закінчення лікування ("EOT") для кожної з досліджуваних груп у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 20E наведено порівняння описаних у Прикладі 7 середніх значень рівнів EOT ЕПК на початок досліджень ECLIPSE, 14 – денних досліджень біодоступності , описаних у Прикладі 8, досліджень статинової міжлікової взаємодії ("Statin DDI"), описаних у Прикладі 11, кожної експериментальної групи, а також контрольної групи, які брали участь у описаних у Прикладі 10 дослідженнях EVOLVE та значень, отриманих з повідомлених раніше у науковій літературі результатів незалежних досліджень JELIS ("JELIS"), у яких були застосовані різні омега-3 композиції. У Фіг. 21A - 21D наведено графічне зображення медіанних рівнів сполук ЕПК (Фіг. 21A), ДГК (Фіг. 21B), ДПК (Фіг. 21C) та АК (Фіг. 21D) у плазмі крові (наведені у мкг/мл) на початок та на закінчення лікування ("EOT") у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 22A та 22B у графічному вигляд наведені змінення абсолютних рівнів сполук АК, ДГК, ЕПК та ДПК у плазмі крові (наведені у мкг/мл) від початку до закінчення досліджень EVOLVE для кожної досліджуваної групи. У Фіг. 22A зображено середні змінення; у Фіг. 22B – медіанні змінення. У Фіг. 23A у графічному вигляд наведені середні змінення від початку до закінчення досліджень, наведені у відсотковому вигляді від значення на початок досліджень для сполук АК, ДГК, ЕПК та ДПК для кожної досліджуваної групи, яка брала участь у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 23B у графічному вигляд наведено медіанний відсоток змінення від початку до закінчення лікування . У Фіг. 24A - 24I у графічному вигляд наведені середні значення рівнів тригліцеридів, (Фіг. 24A), холестерину ліпопротеїнів не високої щільності (іХС-неЛПВЩ) (Фіг. 24B), холестерину ліпопротеїнів високої щільності (ХС-ЛПВЩ) (Фіг. 24C), холестерину ліпопротеїнів дуже низької щільності (ХС-ЛПДНЩ) (Фіг. 24D), холестерину ліпопротеїнів низької щільності (ХС-ЛПНЩ) (Фіг. 24E), аполіпопротеїну В (апоВ) (Фіг. 24F), аполіпопротеїну СІІІ (апоCIII) (Фіг. 24G), ремнантних ліпопротеїнів (РЛП) (Фіг. 24H) та ліпопротеїн-асоційованої фосфоліпази А2 (ЛП-ФЛА2) (Фіг. 24I) у плазмі крові від початку до закінчення лікування (наведені у мг/дл, за виключенням даних для ЛП-ФЛА2, наведених у нг/мл) у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 25A - 25I у графічному вигляд наведені медіанні значення рівнів тригліцеридів (Фіг. 25A), ХС-неЛПВЩ (Фіг. 25B), ХС-ЛПВЩ (Фіг. 25C), ХС-ЛПДНЩ (Фіг. 25D), ХС-ЛПНЩ (Фіг. 25E), апоВ (Фіг. 25F), апоCIII (Фіг. 25G), РЛП (Фіг. 25H), ЛП-ФЛА2(Фіг. 25I) у плазмі крові від початку до закінчення лікування (наведені у мг/дл, за виключенням даних для ЛП-ФЛА2, наведених у нг/мл) у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 26A та 26B у графічному вигляд наведені змінення абсолютних рівнів тригліцеридів ("TГ"), ХС-неЛПВЩ, ХС-ЛПВЩ, ХС-ЛПДНЩ та ХС-ЛПНЩ у плазмі крові від початку до закінчення лікування (наведені у мг/дл) для кожної досліджуваної групи у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 26A зображено середні змінення; у Фіг. 26B – медіанні змінення. У Фіг. 27 у графічному вигляд наведено відсоток суб’єктів у дослідженнях EVOLVE, наведений на осі Y, для яких рівень тригліцеридів було знижено на вказаний відсоток, ® наведений на осі Х для дози препарату Epanova у 2 г. та 4 г. У Фіг. 28A у графічному вигляді наведені середні змінення від початку до закінчення досліджень, наведені у відсотковому вигляді від значення на початок досліджень для TГ, ХСнеЛПВЩ, ХС-ЛПВЩ, ХС-ЛПДНЩ, ХС-ЛПНЩ, апоВ, апoCIII, ЛП-ФЛА2 та РЛП для кожної досліджуваної групи, яка брала участь у дослідженнях EVOLVЕ. У Фіг. 28B у графічному вигляд наведено медіанний відсоток змінення від початку до закінчення лікування. У Фіг. 29 у графічному вигляд наведена швидкість змінення (абсолютне значення) медіанного відсоткового змінення рівнів сполук ЕПК, ДГК, ДПК, AК, TГ, ХС-неЛПВЩ та ХСЛПВЩ у плазмі крові від початку лікування у дослідженнях EVOLVE з застосуванням 2 – 4 г. доз ® препарату Epanova . Фіг. 30 ілюструє порівняльні дані відносно рівнів тригліцеридів (TГ), отримані для препарату ® Epanova у дослідженнях EVOLVE та дані, повідомлені іншими вченими для препарату AMR101 (Vascepa) у зазначених дозах. Фіг. 31 ілюструє порівняльні дані відносно різних параметрів ліпідів у крові, отримані для ® препарату Epanova у дослідженнях EVOLVE та для препарату AMR-101 (Vascepa) Дані відносно препарату AMR-101 були повідомлені іншими вченими. (*) вказує на значення p 4 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. Фіг. 32. ілюструє порівняльні дані відносно різних параметрів ліпідів у крові, отримані для ® препарату Epanova з застосуванням дози у 2 г та 4 г., як визначено у дослідженнях EVOLVE та ® отримані для препарату Lovaza з застосуванням дози у 4 г. Дані, отримані для препарату ® Lovaza були повідомлені іншими вченими. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. Фіг. 33 ілюструє порівняльні дані відносно рівнів тригліцеридів (ТГ), отримані для препарату ® Epanova з застосуванням доз у 2 г та 4 г. згідно з оцінками, здійсненими у дослідженнях ® EVOLVE та отримані для препарату Lovaza з застосуванням дози у 4 г. (повідомлено іншими вченими). Верхні індекси вказують на дані, отримані з (1) дослідження EVOLVE, (2) мета-аналізу ® від Lovaza New Drug Application ("NDA") (3) інструкції по застосуванню затвердженого FDA (Управлінням з санітарного нагляду за якістю харчових продуктів та медикаментів (США)) ® препарату Lovaza та (4) досліджень Takeda. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 34 у графічному вигляді зображена кореляція між відсотковим зміненням ЛПНЩ та відсотковим зміненням апоСІІІ, отримана у дослідженнях EVOLVE. У Фіг. 35 у графічному вигляді наведено отримане за допомогою способу найменших квадратів (LS) середнє відсоткове змінення від початку досліджень для підгрупи суб’єктів досліджень EVOLVE, які мали рівні тригліцеридів на початку досліджень, які були вищими ніж або дорівнювали 750 мг/дл. для зазначених досліджуваних груп, які брали участь у дослідженнях EVOLVE та додатково описані у Прикладі 10. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 36 у графічному вигляді наведено отримане за допомогою способу найменших квадратів (LS) середнє відсоткове змінення від початку досліджень для підгрупи суб’єктів, які хворіли на цукровий діабет другого типу статином у зазначених досліджуваних групах, які брали участь у дослідженнях EVOLVE, які додатково описані у Прикладі 10(*) вказує на значення p величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 37 у графічному вигляді наведено отримане за допомогою способу найменших квадратів (LS) середнє відсоткове змінення від початку досліджень для підгрупи суб’єктів, які були піддані супутній терапії зі статином у зазначених досліджуваних групах, які брали участь у дослідженнях EVOLVE, які додатково описані у Прикладі 10 (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 38 у графічному вигляді наведено отримане за допомогою способу найменших квадратів (LS) середнє відсоткове змінення відносно контролю для тригліцеридів ("TГ"), ХСнеЛПВЩ, ХС-ЛПВЩ, ХС-ЛПНЩ, ЗХС (загального рівня холестерину), ХС-ЛПДНЩ та TC/ХСЛПВЩ порівняно з результатами суб’єктів, які брали участь у дослідженнях EVOLVE, описаних у Прикладі 10, які або отримували (STATIN) або не отримували (NON- STATIN) терапію зі ® статином разом з введенням дози (2 г.) препарату Epanova . (*) вказує на значення p величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 39 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування, обчислене для TГ, ХС-неЛПВЩ, ХС-ЛПВЩ, ХС-ЛПНЩ, TC, ХС-ЛПДНЩ та ЗХC/ХС-ЛПВЩ для підгрупи суб’єктів, які були піддані супутній терапії зі статином у зазначених досліджуваних групах, які брали участь у дослідженнях EVOLVE, які додатково описані у Прикладі 10. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 40 наведено схему лікування, яка ілюструє додатково описані у Прикладі 12 дослідження ESPRIT. У Фіг. 41 наведено розташування суб’єктів у дослідженнях ESPRIT. У Фіг. 42A та 42B у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування, обчислене за допомогою способу найменших квадратів (LS) для ЕПК (Фіг. 42A) та ДГК (Фіг. 42B) у додатково описаних у Прикладі 12 дослідженнях ESPRIT. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. 5 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У Фіг.43 у графічному вигляді наведено середнє відсоткове змінення від початку лікування, обчислене за допомогою способу найменших квадратів (LS) для TГ, ХС-неЛПВЩ та ХС-ЛПВЩ у додатково описаних у Прикладі 12 дослідженнях ESPRIT. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.001. У Фіг.44 у графічному вигляді наведено середнє відсоткове змінення від початку лікування, обчислене за допомогою способу найменших квадратів (LS) апоВ, ХС-ЛПНЩ, ХС-ЛПДНЩ та ЗХC/ХС-ЛПВЩ у додатково описаних у Прикладі 12 дослідженнях ESPRIT. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг.45 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення тригліцеридів (ТГ) від початку лікування у суб’єктів, які приймали участь у дослідженнях ESPRIT та були розподілені на тертилі по рівням тригліцеридів на початок досліджень. У Фіг.46 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення не-ЛПВЩ-холестерину (ХС-неЛПВЩ) від початку лікування у суб’єктів, які приймали участь у дослідженнях ESPRIT та були розподілені на тертилі по рівням ХС-неЛПВЩ на початок досліджень. У Фіг.47 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення ЛПНЩ-холестерину (ХС-ЛПНЩ) від початку лікування у суб’єктів, які приймали участь у дослідженнях ESPRIT та були розподілені на тертилі по рівням ХС-ЛПНЩ на початок досліджень. У Фіг.48 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування для ТГ для кожної досліджуваної групи у дослідженнях ESPRIT з суб’єктами, розподіленими на групи в залежності від тотожності статину, застосованого у супутній терапії. У Фіг.49 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування для ТГ для кожної досліджуваної групи у дослідженнях ESPRIT з суб’єктами, розподіленими на групи в залежності від низької та високої ефективності супутньої статинової терапії. У Фіг.50 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування для не-ЛПВЩ-холестерину для кожної досліджуваної групи у дослідженнях ESPRIT з суб’єктами, розподіленими на групи в залежності від низької та високої ефективності супутньої статинової терапії. У Фіг.51 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування для ХС-ЛПНЩ для кожної досліджуваної групи у дослідженнях ESPRIT з суб’єктами, розподіленими на дві групи в залежності від низької та високої ефективності супутньої статинової терапії. У Фіг. 52 у графічному вигляді наведено медіанне відсоткове змінення від початку лікування для ТГ з суб’єктами у кожній експериментальній групі досліджень ESPRIT, розподіленими на три в залежності від високого вмісту ТГ або високого вмісту ЕПК на початок досліджень або від застосування супутньої розувастатинової терапії. У Фіг. 53 у графічному вигляді наведено обчислене з застосуванням способу найменших квадратів середнє відсоткове змінення розподілу часток за розмірами від початку лікування для часток ХС-ЛПДНЩ, розподілених на групи за розміром у дослідженнях ESPRIT. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг. 54 у графічному вигляді наведено обчислене з застосуванням способу найменших квадратів середнє відсоткове змінення розподілу часток за розмірами від початку лікування для часток ЛПНЩ, розподілених на групи за розміром для кожної досліджуваної групи у дослідженнях ESPRIT. (*) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0.05, (**) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,01 та (***) вказує на значення p - величини, яке є меншим, ніж 0,001. У Фіг.55 у графічному вигляді наведено обчислене з застосуванням способу найменших квадратів медіанне відсоткове змінення розміру частинок ЛПНЩ з суб’єктами, розподіленими на три групи в залежності від рівнів тригліцеридів, обчислених в кінці досліджень ESPRIT. У Фіг.56A наведені рівні арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові (у мкг/мл) на початок лікування для суб’єктів у клінічних дослідженнях, більш докладно описаних у Прикладі 11, розподілених по групам згідно за генотипу поруч з однонуклеотидним поліморфізмом rs174546. У Фіг 56B зображені відсоткові змінення від моменту початку досліджень рівнів арахідонової ® кислоти (АК) у плазмі крові на 15 добу лікування препаратом Epanova , розподілених по групам згідно за генотипом поруч з однонуклеотидним поліморфізмом rs174546. Міжквартильний діапазон позначено коробчастою діаграмою, медіана позначена горизонтальною лінією всередині коробчастої міжквартильної діаграми та середнє значення позначено ромбом. Аномальні результати позначені у вигляді незаштрихованих кіл. "Вуса" на діаграмі 6 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 продовжуються до мінімального та максимального значення, яке не є аномальним. Показник 1 стосується суб’єктів, які мають основний алель у гомозиготному стані; показник 3 стосується суб’єктів, які мають мінорний алель у гомозиготному стані та показник 2 має відношення до гетерозигот. Комплексоутворення включень сечовини (утворення клатратів) є стандартною операцією, яку часто застосовують у очищенні риб'ячого жиру для видалення насичених та мононенасичених жирних кислот з довгими ланцюгами, що таким чином веде до збагачення отриманої композиції бажаними омега-3 поліненасиченими жирними кислотами з довгими ланцюгами. Однак, незважаючи на тривалий термін застосування та дослідження, призначені для аналізу ефектів різних фізико-хімічних параметрів процесу, ступінь, до якого комплексоутворення сечовини веде до збагачення окремими видами поліненасичених жирних кислот з довгими ланцюгами залишається непередбачуваним. Ця залишкова непередбачуваність у процедурі комплексоутворення сечовини у поєднанні з потенційною можливістю утворювати неприпустимо високі рівні етилкарбамату, які будуть вимагати додаткової обробки раніше свідчили на користь нехтування комплексоутворенням сечовини у процесі очищення у комерційних масштабах, який застосовують для отримання композицій омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти з фармацевтичним ступенем чистоти та певними бажаними композиційними характеристиками. Однак, як було додатково описано у Прикладі 1, після перших спроб розробки вільного від сечовини процесу виробництва у промисловому масштабі стало ясним, що подібні процеси будуть неспроможні до надійного отримання партії композиції, яка буде задовольняти бажаним потребам. Відповідно до цього були проведені пошуки прийнятного способу застосування комплексоутворення сечовини та було знайдено, що при застосуванні жорсткого композиційного контролю видів ПНЖК у проміжній партії сировини у формі етилового естеру у поєднанні з застосуванням алгоритмічно-визначеної кількості сечовини можна легко отримати партії, які відповідають необхідним вимогам без перевищення прийнятних обмежень концентрації етилкарбамату. Як описано у Прикладі 2, шляхом застосуванням операції комплексоутворення сечовини було отримано чотири зразкові серійні партії поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти. До проміжної сировини у формі етилового естеру вжили заходи жорсткого композиційного контролю з застосуванням тільки таких партій, у яких зазначені види поліненасичених жирних кислот знаходилися у межах, визначених алгоритмом обчислення сечовини. Було визначено, що всі чотири серійні партії фармацевтичної композиції задовольняють бажаним вимогам для композиції. Як очікувалося, операція комплексоутворення сечовини істотно зменшила відсотковий вміст насичених жирних кислот та мононенасичених жирних кислот у отриманій композиції, тим самим істотно збагативши її поліненасиченими жирними кислотами (див. Фіг. 3A.). Проте неочікувано було відкрито, що отримання комплексоутворення сечовини з застосуванням кількостей сечовини, які попадали у визначені алгоритмічним чином межі також супроводжувалося іншими ефектами, які полягали у збагаченні окремими видами омега-3 та омега-6 поліненасичених жирних кислот. Як описано вище у Прикладі 3, було відкрито збагачення омега-3 докозапентаєновою кислотою, ДПК (C22:5 n-3), тоді як розповсюдженість відповідного виду омега-6 кислоти з ідентичною довжиною ланцюга та ступенем ненасиченості, як-то докозапентаєнової кислоти (C22:5 n-6), навпаки, скоротилося. Дивергентна дія комплексоутворення сечовини на збагачення цими двома ізомерами у поєднанні з відмінностями їх відповідних концентрацій у проміжній сировині у формі етилового естеру веде до появи різниці їх концентрацій у логарифмічному порядку та зрештою веде до появи фармацевтичної композиції ("API") у формі вільної кислоти. Також були отримані додаткові серійні партії та, як описано у Прикладі 4, композиційний аналіз 10 партій АФІ показав наявність спроможних до відтворення підвищених рівнів ДПК у кінцевій композиції. Як описано у Прикладі 5, композиційний аналіз 21 партії, отриманої з застосуванням комплексоутворення сечовини показав спроможну до відтворення 10-разову різницю у концентрації видів омега-3, ДПК, порівняно з її омега-6 ізомером, докозапентаєновою кислотою (C22:5 n-6). Маючи середню концентрацію у зазначених 21 партії продукції, яка дорівнювала 4.44% (a/a), ДПК є третім найбільш поширеним видом поліненасичених жирних кислот у композиції API, поступаючись лише ЕПК та ДГК. На цьому рівні концентрація ДПК є також приблизно у десять разів більшою, ніж концентрація ДПК у отриманої раніше фармацевтичної композиції омега-3 7 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти під назвою purEPA™, у якої, як було повідомлено, рівень ДПК сягав 0,5%. Див. Belluzzi et al., Dig. Dis. Sci. 39(12): 2589-2594 (1994). Хоча ДПК є проміжним продуктом шляху біосинтезу від ЕПК до ДГК (див. Фіг. 1), про її специфічні біологічні ефекти неочікувано мало що відомо. Для прояснення потенційного внеску ДПК у клінічну ефективність фармацевтичної композиції були проведені експерименти по визначення профілю генної експресії з застосуванням клітин гепатокарциноми HepG2. Як додатково описано у Прикладі 6, дія ДПК на експресію генів клітин печінки передбачає більш велику клінічну ефективність ДПК-збагачених композицій. Експерименти по визначення профілю генної експресії показали. що ДПК має значну біологічну активність у прийнятних концентраціях in vitro. Ці ефекти значно відрізняються від подібних, які спостерігали відносно ЕПК та ДГК. Була також відмічена здатність ДПК у відповідній концентрації впливати на експресію генів у численних метаболічних шляхах, в тому числі на експресію генів, які, як відомо відповідають за наявність клінічних ефектів омега-3 поліненасичених жирних кислот, як-то генів, які приймають участь у метаболізмі ліпідів, у серцево-судинній фізіології та генів, які пов'язані з запаленнями. Також передбачено появу значних ефектів другого порядку, враховуючи спостережені зміни в експресії генів, які кодують білки, які самі по собі впливають на експресію генів та генів, які впливають на посттранскрипційну модифікацію. Специфічні ефекти, спрямовані до експресії деяких генів, які беруть участь у метаболізмі ліпідів наводять на думку про те, що ДПК у аналогічній концентрації in vivo повинна також сприяти поліпшенню різних відповідних клінічних параметрів ліпідів. Зокрема, спостережене кероване ДПК підвищення експресії ACADSB, гена короткого/розгалуженого ланцюга ацил-CoA дегідрогенази передбачає появу знижених рівнів сироваткових тригліцеридів; кероване ДПК зниження експресії гена HMGCR, аналогічне пригніченню статином закодованого ферменту HMG-CoA-редуктази, як передбачають, призведе до бажаного зниження загального співвідношення холестерину до ЛПВЩ; кероване ДПК зниження експресії гена SQLE є етапом обмеження швидкості у синтезі стеролу та аналогічним чином передбачає зменшення загальних рівнів холестерину. Експерименти по визначення профілю генної експресії також показали наявність дозового порогу для дії ДПК. Досліджені більш низькі концентрації, вибрані, щоб імітувати знижену у десять разів концентрацію ДПК у попередньо отриманому препараті purEPA™, який містить омега-3 у формі вільної кислоти впливають на експресію генів у 10 разів менше, ніж найвища концентрація ДПК, вибрана для імітації впливу, очікуваного від описаних тут фармацевтичних композицій, демонструючи те, що знижена концентрація ДПК надає підпорогового впливу та, як очікується, зможе надати субтерапевтичну дозу in vivo. Клінічні дослідження на людях підтверджують наявність виняткової клінічної ефективності ДПК - збагаченої фармацевтичної композиції омега-3 поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти. У Прикладі 7 наведені результати відкритих, однодозових, рандомізованих чотирьохбічних перехресних клінічних досліджень ECLIPSE, у яких порівнювали біодоступність 4 г дози препарату Lovaza® з біолодоступністю 4 г дози препарату описаної тут збагаченої ДПК фармацевтичної композиції омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти у (далі позначено, як препарат " Epanova® ") в умовах харчового статусу з високим та низьким вмістом жиру. Згідно за затвердженої FDA (Управлінням з санітарного нагляду за якістю харчових продуктів та медикаментів (США)) маркою продукту, кожна капсула препарату Lovaza® (1г) містить принаймні 900 мг етилових естерів омега-3 жирних кислот, отриманих з риб’ячих жирів, переважним чином у вигляді комбінації етилових естерів ейкозапентаєнової кислоти (EПК приблизно 465 мг) та докозагексаєнової кислоти (ДГК - приблизно 375 мг). Застосована у дослідженнях партія препарату Epanova® містила 57,3% (a/a) ЕПК, 19,6% (a/a) ДГК та 6,2% (a/a) ДПК, де кожен з інгредієнтів по суті знаходився у формі вільної кислоти. Узгоджені з показниками першоначального рівня змінення загального (ЕПК+ДГК) та окремих (ЕПК та ДГК) профілів поглинання (AUC) при застосуванні препарату Epanova® (омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти) були значно вищими, ніж при застосуванні препарату Lovaza® (етилових естерів омега-3-ПНЖК) протягом періоду споживання їжі з високим вмістом жирів та різко покращуються протягом періоду споживання їжі з низьким вмістом жирів. Крім того, існує глибокий вплив вмісту жиру у їжі на біодоступність препарату Lovaza®, тоді як біодоступність препарату Epanova® було набагато більш передбачуваною виключно через більш помірний вплив їжі. Найкращий рівень незалежної від жиру біодоступності препарату Epanova® у порівнянні з препаратом Lovaza® є клінічно важливим явищем з точки зору рекомендації NCEP ATP III (III 8 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 доповіді групи експертів з лікування дорослих у межах національної освітньої програми з холестерину у США) стосовно того, щоб пацієнти з гіпертригліцеридемією та дисліпідемією в процесі допоміжної терапії дотримувалися нізькожировой дієти.. У Прикладі 8 наведені результати 14-денних досліджень біодоступності, які показали, що спостережене у однодозових дослідженнях ECLIPSE зростання біодоступності підтримується, навіть посилюючись, протягом більш, ніж двох тижнів після введення дози препарату. На додачу до цього, специфічні до суб’єкту розділені дані демонструють, що суб’єкт з меншою відповіддю до препарату Epanova® все ж має більш високе значення Cmax ЕПК+ДГК на 14 день досліджень, ніж суб’єкт з кращою відповіддю до препарату Lovaza®. У Прикладі 10 наведені результати 12-тижневих, подвійних сліпих, контрольованих за допомогою оливкової олії досліджень EVOLVE, у яких приймали участь пацієнти, вибрані на основі наявності у них високих рівнів тригліцеридів, які знаходилися у діапазоні у 500–2,000 мг/дл (важка гіпертригліцеридемія). Головним очікуваним результатом досліджень був відсоток змінення рівнів тригліцериду у плазмі крові від моменту початку досліджень до кінця лікування ("EOT"). Другорядним очікуваним результатом досліджень був відсоток змінення кількості неЛПВЩ-холестерину у плазмі крові від початку до закінчення лікування. ® Як можна побачити у Фіг. 20 - 23, 12 - тижневе лікування з препаратом Epanova спричинило появу різких підвищень рівнів ЕПК, ДГК та ДПК у плазмі крові. Підвищення рівнів ЕПК, ДГК та ДПК у плазмі крові супроводжувалося значними скороченнями кількості АК (арахідонової кислоти) у плазмі крові. Застосування схеми дозування з введенням 4 г препарату призвело до середнього скорочення на 18%, медіанного скорочення на 25,9% та середнього скорочення, виміряного способом найменших квадратів на 23.2%. Ці зменшення рівнів арахідонової кислоти у плазмі крові спостерігали незважаючи на введення екзогенної арахідонової кислоти, кількість якої у застосованої у цих дослідженнях партії ® препарату Epanova дорівнювала 2,446% (a/a). Зростання рівнів ЕПК у плазмі крові разом з супутнім зменшенням рівнів АК у плазмі крові спричинює значне покращення співвідношення ЕПК/АК від приблизно 0,10 на початку досліджень до приблизно 0,67 (середнє значення) та 0,62 (медіанне значення) в кінці лікування ("EOT") з дозою у 4 г. Біло повідомлено, що співвідношення ЕПК/АК є незалежним чинником ризику виникнення коронарного атеросклерозу (див. Nakamua & Maegawa, Endocrine Abstracts (2012) 29 OC19.1) з нижчими співвідношеннями, пов'язаними з прогресуванням коронарного атеросклерозу у пацієнтів з ішемічною хворобою серця, які отримували терапію статинами (Nozue et al., Am J Cardiol. 2013 Jan 1;111(1):6-1 (ePub ahead of print). ® Крім того, лікування препаратом Epanova веде до суттєвих зменшень рівнів триглцеридів ( див. FIGS. 26A та 26B), до зменшень рівнів не-ЛПВЩ-холестерину та ХС-ЛПДНЩ та до зростання рівнів ХС-ЛПВЩ. Також спостерігали зростання рівнів ХС-ЛПНЩ, однак слід зауважити, що це могло бути досягнуто за рахунок підвищення розміру частинок ЛПНЩ під час лікування (більш детальне обговорення див. у Прикладі 12). ® Дослідження EVOLVE також показали, що завдяки лікуванню препаратом Epanova було досягнуто значне зменшення рівнів аполіпопротеїну CIII (апоCIII). Було знайдено, що підвищений рівень апоCIII є незалежним показником ризику виникнення серцево-судинних хвороб (CHD), у той час як генетично зменшені рівні апоCIII пов’язують з захистом від CHD та зі збільшенням тривалості життя. ® Надзвичайно висока біодоступність омега-3 ПНЖК у препараті Epanova виявила спочатку невідомі та неочікувані відмінності у фармакокінетичній відповіді серед різних видами ПНЖК. У Фіг. 29 у графічному вигляді наведена швидкість змінення медіанного відсоткового змінення рівнів ЕПК, ДГК, ДПК, АК, TГ, ХС-неЛПВЩ та ХС-ЛПВЩ (абсолютне значення) у плазмі ® крові від початку лікування у залежності від застосування 2 г та 4 г доз препарату Epanova . При незначному підвищенні рівнів ДГК та ДПК у плазмі крові після подвоєння дози препарату ® Epanova з 2 до 4 г/добу або при відсутності такого підвищення, швидкість змінення (нахил) медіанного відсоткового змінення від початку лікування була майже нульовою та можна було передбачити слабке додаткове підвищення рівнів ДГК та ДПК у плазмі крові за умови додаткового підвищення дози. Подібну зупинку росту відповіді також можна побачити при дослідженні рівнів тригліцеридів, ХС-ЛПВЩ та ХС-неЛПВЩ (дані не представлено). На відміну від цього, швидкість змінення для ЕПК залишається високою, з ухилом у 0.59; також очікується отримання додаткового підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові шляхом ® підвищення дозування Epanova до дози, більшої, ніж 4 г/добу. Найважливим є те, що швидкість ® змінення (зниження) рівнів АК після подвоєння дози препарату Epanova з 2 до 4 г/добу навіть перевищує подібну швидкість для ЕПК. Очікується також отримати додаткові зменшення рівнів ® АК у плазмі крові шляхом підвищення дозування Epanova до дози, більшої, ніж 4 г/добу. Отже, 9 UA 114615 C2 ® 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 препарат Epanova проявляє безпрецедентну ефективність у здатності до підвищення рівнів ЕПК, зниження рівнів АК та покращення співвідношення ЕПК:АК. Як видно з Фіг. 38, підгрупа суб’єктів, яка приймала 2 г препарату у дослідженнях EVOLVE, яка також отримувала супутню статинову терапію показала підвищені порівняно з контролем значення відсоткових змінень (середня різниця, обчислена за допомогою способу найменших квадратів) для TГ, ХС-неЛПВЩ, ХС-ЛПВЩ, ХС-ЛПНЩ, TC, ХС-ЛПДНЩ та TC/ХС-ЛПВЩ при порівнянні їх з суб’єктами які приймали 2 г препарату та не отримували супутньої статинової терапії. Суб’єкти, які отримували супутню статинову терапію показали наявність дозозалежної ® відповіді до препарату Epanova та це можна побачити у наведених у Фіг. 39 порівняльних ® даних суб’єктів, які приймали 2 г та 4 г препарату Epanova У Прикладі 12 описано проведення клінічних досліджень ESPRIT, які проводили з метою дослідження пацієнтів зі статиновою терапією на початку досліджень, які мали рівні тригліцеридів у межах 200-500 мг/дл, що були меншими, ніж рівні тригліцеридів у пацієнтів з тяжкою гіпертригліцеридемією, які приймали участь у описаних у Прикладі 10 дослідженнях EVOLVE. Також дослідники спостерігали дозозалежні зменшення тригліцеридів, зменшення рівнів ХС-неЛПВЩ та підвищення рівнів ХС-ЛПВЩ при порівнянні з плацебо (оливкова олія) (див. Фіг. 43). Крім того, дослідники спостерігали також дозозалежні зменшення ХС-ЛПДНЩ та TC/ХСЛПВЩ (див. Фіг. 44). Разом ці результати (підсумки наведені у Фіг. 42 - 44) демонструють ® ефективність препарату Epanova у якості додатку до статинової терапії у пацієнтів з рівнем тригліцеридів у межах 200 -500 мг/дл. ® Фіг. 45 - 52 ілюструють ефективність препарату Epanova у якості додатку до високоефективних та до низькоефективних статинів у пацієнтів з різним станом на початку досліджень. Як видно з Фіг. 48, зменшення рівнів тригліцеридів спостерігали у пацієнтів, які отримували супутню терапію з застосуванням росувастатину, аторвастатину та симвастатину. Як показано у Фіг. 49 -51, статистично значущу дію, спрямовану на рівні тригліцеридів, ХСнеЛПВЩ та ХС-ЛПНЩ спостерігали незалежно від низької або високої ефективності спільно введених статинів. Відповідно, у першому аспекті, винаходом передбачені покращені композиції поліненасичених жирних кислот ("ПНЖК") у формі вільної кислоти. У різних втіленнях, композиція є фармацевтичною композицією, прийнятною для перорального введення. У різних втіленнях, композиція є нутрицевтичною композицією, прийнятною для перорального введення. Зазначена композиція також містить багато видів омега-3 ПНЖК кислот, кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. Зазначена композиція також містить ейкозапентаєнову кислоту (C20:5 n-3) ("ЕПК", також відома, як тимнодонова кислота), докозагексаєнову кислоту (C22:6 n-3) ("ДГК", також відома, як цервонова кислота) та докозапентаєнову кислоту (C22:5 n-3) (" ДПК ", також відома, як клуподонова кислота), кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. Зазначена композиція також містить ЕПК у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх жирних кислот у композиції та дорівнює принаймні біля 45% (" 45% (a/a) "). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК у кількості принаймні біля 46% (a/a) 47% (a/a), 48% (a/a), 49% (a/a) або принаймні біля 50% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить ЕПК у кількості принаймні біля 51% (a/a), принаймні біля 52% (a/a), принаймні біля 53% (a/a), принаймні біля 54% (a/a), принаймні біля 55% (a/a), принаймні біля 56% (a/a), принаймні біля 57% (a/a), принаймні біля 58% (a/a), навіть принаймні біля 59% (a/a), принаймні біля 60% (a/a), принаймні біля 61% (a/a), 62% (a/a), 63% (a/a), 64% (a/a) або 65% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить ЕПК у кількості біля 45 - 65% (a/a). У окремих втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 50 - 60% (a/a). У різних втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 52 - 58.0 % (a/a). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55% - 56% (a/a). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за вагою всіх жирних кислот у композиції (" % за вагою ") та дорівнює біля 50% - 60 % (за вагою). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55% (за вагою). Зазначена композиція також містить ДГК у кількості принаймні біля 13% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ДГК у кількості принаймні біля 14% (a/a), принаймні біля 15% (a/a), принаймні біля 16% (a/a), принаймні біля 17% (a/a), принаймні біля 18% (a/a), принаймні біля 19% (a/a) або принаймні біля 20% (a/a). У вибраних втіленнях, композиція містить ДГК у кількості принаймні біля 21% (a/a), принаймні біля 22% (a/a), принаймні біля 23% (a/a), принаймні біля 24% (a/a), навіть принаймні біля 25% (a/a). 10 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У різних втіленнях, композиція містить ДГК у кількості біля 13% - 25 % (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 15% - 25% (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 17% - 23 % (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 19% - 20% (a/a). У різних втіленнях, композиція s міст ДГК у кількості біля 15% - 25% (за вагою). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 17% - 23% (за вагою). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 20% (за вагою). Зазначена композиція містить ДПК у кількості принаймні біля 1% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ДПК у кількості принаймні приблизно 1.5% (a/a), 2% (a/a), 2.5% (a/a), 3% (a/a), 3.5% (a/a), 4% (a/a), 4.5% (a/a), навіть принаймні біля 5% (a/a). У вибраних втіленнях, композиція містить ДПК у кількості принаймні біля 6% (a/a), принаймні біля 7% (a/a), принаймні біля 8% (a/a) або принаймні біля 9% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ДПК у кількості біля 1% - 8% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить ДПК у кількості біля 2% - 7% (a/a). У вибраних втіленнях, композиція містить ДПК у кількості біля 3% - 6% (a/a). У окремих втіленнях, композиція містить ДПК у кількості біля 4% - 5% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ДПК, обчислену у вигляді відсотка за вагою всіх жирних кислот у композиції, у кількості, не меншій, ніж біля 1% (за вагою). У різних втіленнях, композиція містить ДПК у кількості біля 1% - 8% (за вагою). У окремих втіленнях, композиція містить ДПК у кількості, яка не перевищує біля 10% (за вагою). Зазначена композиція містить ЕПК та ДГК у загальній кількості принаймні біля 60% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК та ДГК у загальній кількості принаймні біля 61% (a/a), 62% (a/a), 63% (a/a), 64% (a/a), 65% (a/a), 66% (a/a), 67% (a/a), 68% (a/a), 69% (a/a) або принаймні біля 70% (a/a). У окремих втіленнях, композиція містить ЕПК та ДГК у загальній кількості принаймні біля 71% (a/a), 72% (a/a), 73% (a/a), 74% (a/a), 75% (a/a), 76% (a/a), 77% (a/a), 78% (a/a), 79% (a/a), навіть принаймні біля 80% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить ЕПК та ДГК у загальній кількості принаймні біля 81% (a/a), 82% (a/a), принаймні біля 83% (a/a), 84% (a/a), навіть принаймні біля 85% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК та ДГК у кількості біля 70,0 % - 80,0% (за вагою). У деяких втіленнях, композиція містить біля 75% (за вагою) ЕПК + ДГК. Зазначена композиція містить ЕПК, ДГК та ДПК у загальній кількості принаймні біля 61% (a/a). У типових втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК та ДПК у загальній кількості принаймні біля 62% (a/a), 63% (a/a), 64% (a/a), 65% (a/a), 66% (a/a), принаймні біля 67% (a/a), принаймні біля 68% (a/a), принаймні біля 69% (a/a) або принаймні біля 70% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК та ДПК у загальній кількості принаймні біля 71% (a/a), 72% (a/a), 73% (a/a), 74% (a/a), 75% (a/a), 76% (a/a), 77% (a/a), 78% (a/a), 79% (a/a), 80% (a/a), навіть принаймні біля 81% (a/a), 82% (a/a), 83% (a/a), 84% (a/a), 85% (a/a), 86% (a/a), 87% (a/a), навіть принаймні біля 88% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК та ДПК у загальній кількості біля 70% - 90% (a/a). У окремих серіях втілень, ЕПК є присутньою у кількості біля 55% - 56% (a/a); ДГК є присутньою у кількості біля 19% - 20% (a/a); та ДПК є присутньою у кількості біля 4% - 5 % (a/a). У деяких втіленнях, композиція додатково містить один або декілька видів омега-3 поліненасичених жирних кислот, вибраних з групи, яка охоплює: α- ліноленову кислоту (C18:3 n-3), мороктову кислоту (C18:4 n-3, також відому, як стеаридонова кислота), ейкозатрієнову кислоту (C20:3 n-3), ейкозатетраєнову кислоту (C20:4 n-3) та хенейкозапентаєнову кислоту (C21:5 n-3). У окремих втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК, ДПК та мороктову кислоту, кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. У різних втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК, ДПК, мороктову кислоту та хенейкозапентаєнову кислоту, кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. У особливих втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК, ДПК, мороктову кислоту, хенейкозапентаєнову кислоту та ейкозатетраєнову кислоту, кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. У вибраних втіленнях, композиція містить ЕПК, ДГК, ДПК, α-ліноленову кислоту (C18:3 n-3), мороктову кислоту у (C18:4 n-3), ейкозатрієнову кислоту (C20:3 n-3), ейкозатетраєнову кислоту (C20:4 n-3) та хенейкозапентаєнову кислоту у (C21:5 n-3). У різних втіленнях, загальний вміст омега-3 жирних кислот визначено у вигляді сумарного вмісту альфа-ліноленової кислоти (C18:3 n-3), мороктової кислоти (C18:4 n-3), ейкозатрієнової кислоти (C20:3 n-3), ейкозатетраєнової кислоти (C20:4 n-3), ейкозапентаєнової кислоти (EПК) (C20:5 n-3), хенейкозапентаєнової кислоти (C21:5 n-3), докозапентаєнової кислоти (C22:5 n-3) та 11 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 докозагексаєнової кислоти (ДГК) (C22:6 n-3) та складає 80% - 95% (a/a) від вмісту всіх жирних кислот у композиції. У різних втіленнях, загальний вміст омега-3 жирних кислот складає 80 – 95% (за вагою) від вмісту всіх жирних кислот у композиції. У різних втіленнях, композиція додатково містить один або декілька видів омега-6 ПНЖК, кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. У деяких втіленнях, композиція містить один або декілька видів омега-6 ПНЖК, вибраних з групи, яка охоплює лінолеву кислоту (C18:2 n-6), гамма- ліноленова кислота у (C18:3 n-6), ейкозадіенову кислоту (C20:2 n-6), дигомо- гамма-ліноленову кислоту (C20:3 n-6) (" ДГЛК "), арахідонову кислоту (C20:4 n-6) ("AК ") та докозапентаєнову кислоту (C22:5 n-6, також відому, як осбондова кислота). У окремих втіленнях, композиція містить лінолеву кислоту (C18:2 n-6), гамма- ліноленова кислота у (C18:3 n-6), ейкозадіенову кислоту (C20:2 n-6), дигомо- гамма- ліноленова кислота у (C20:3 n-6) (" ДГЛК "), арахідонову кислоту (C20:4 n-6) (" AA ") та докозапентаєнову кислоту (C22:5 n-6), кожна з яких істотним чином знаходиться у формі вільної кислоти. У різних втіленнях, АК (арахідонова кислота) є присутньою у кількості не більш, ніж біля 5% (a/a) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У деяких втіленнях, АК містить не більш, ніж біля 4.5% (a/a) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У окремих втіленнях, АК є присутньою у кількості не більш, ніж біля 4% (a/a) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У деяких втіленнях, АК є присутньою у кількості не більш, ніж біля 5% (за вагою) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У деяких втіленнях, АК містить не більш, ніж біля 4,5% (за вагою) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У окремих втіленнях, АК є присутньою у кількості не більш, ніж біля 4% (за вагою) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У деяких втіленнях, загальний вміст омега-6 поліненасичених жирних кислот визначено у вигляді сумарного вмісту лінолевої кислоти (C18:2 n-6), гамма-ліноленової кислоти (C18:3 n-6), ейкозадіенової кислоти (C20:2 n-6), дигомо-гамма-ліноленової кислоти (C20:3 n-6), арахідонової кислоти (C20:4 n-6) та докозапентаєнової кислоти (C22:5 n-6) та складає не більш, ніж біля 10% (a/a) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У деяких втіленнях, загальний вміст омега-6 поліненасичених жирних кислот визначено у вигляді сумарного вмісту лінолевої кислоти (C18:2 n-6), гамма-ліноленової кислоти (C18:3 n-6), ейкозадіенової кислоти (C20:2 n-6), дигомо- гамма- ліноленової кислоти (C20:3 n-6), арахідонової кислоти (C20:4 n-6) та докозапентаєнової кислоти (C22:5 n-6) та складає не більш, ніж біля 10% (за вагою) від загальної кількості жирних кислот у композиції. У специфічних втіленнях, композицію задано Таблицею 11 з кожним визначеним у неї видом ПНЖК, який знаходиться у межах від біля -3SD (SD – стандартне відхилення) до +3 SD відповідно переліченого середнього значення. У деяких втіленнях, кожен визначений у них вид ПНЖК знаходиться у межах від біля -2SD до +2SD відповідно переліченого середнього значення. У деяких втіленнях, кожен з видів знаходиться у межах від біля -1SD до +1SD відповідно переліченого середнього значення. У специфічних втіленнях, композицію задано Таблицею 13 з кожним визначеним у неї видом ПНЖК, який знаходиться у межах від біля -3SD до +3SD відповідно переліченого середнього значення. У деяких втіленнях, кожен визначений у них вид ПНЖК знаходиться у межах від біля 2SD до +2SD відповідно переліченого середнього значення. У деяких втіленнях, кожен з видів знаходиться у межах від біля -1SD до +1SD відповідно переліченого середнього значення. У деяких втіленнях, поліненасичені жирні кислоти, які відрізняються від омега-3 та омега-6 поліненасичених жирних кислот є присутніми у кількості не більш, ніж біля 5% (a/a). У деяких втіленнях, поліненасичені жирні кислоти, які відрізняються від омега-3 та омега-6 поліненасичених жирних кислот є присутніми у кількості не більш, ніж біля 5% (за вагою). У різних втіленнях, принаймні 90% кожної сукупності видів омега-3 ПНЖК у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У деяких втіленнях, принаймні 91%, принаймні 92%, принаймні 93%, принаймні 94%, принаймні 95%, принаймні 96%, принаймні 97%, принаймні 98%, навіть принаймні 99% кожного виду омега-3 ПНЖК у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У зразкових втіленнях, принаймні 90% загального вмісту омега-3 поліненасичених жирних кислот у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У деяких втіленнях, принаймні 91%, принаймні 92%, принаймні 93%, принаймні 94%, принаймні 95%, принаймні 96%, принаймні 97%, принаймні 98%, навіть принаймні 99% загального вмісту омега3 поліненасичених жирних кислот у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У різних втіленнях, принаймні 90% кожної сукупності видів омега-6 ПНЖК у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У деяких втіленнях, принаймні 91%, принаймні 92%, 12 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 принаймні 93%, принаймні 94%, принаймні 95%, принаймні 96%, принаймні 97%, принаймні 98%, навіть принаймні 99% кожного виду омега-6 ПНЖК у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У зразкових втіленнях, принаймні 90% загального вмісту омега-6 поліненасичених жирних кислот у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У різних втіленнях, принаймні 90% загального вмісту поліненасичених жирних кислот у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У деяких втіленнях, принаймні 91%, принаймні 92%, принаймні 93%, принаймні 94%, принаймні 95%, принаймні 96%, принаймні 97%, принаймні 98%, навіть принаймні 99% загального вмісту поліненасичених жирних кислот у композиції знаходиться у формі вільної кислоти. У типових втіленнях, композиція містить, не більш, ніж біля 3,0% (a/a) насичених жирних кислот та не більш, ніж біля 5,0% (a/a) мононенасичених жирних кислот. У різних втіленнях, композиція містить не більш, ніж біля 3,0% (за вагою) насичених жирних кислот та не більш, ніж біля 5,0% (за вагою) мононенасичених жирних кислот. У типових втіленнях, композиція містить додатковий антиоксидант. У деяких втіленнях, антиоксидант є бутильованим гідроксіанізолом (BHA). У деяких втіленнях, антиоксидант є альфа-токоферолом. У деяких втіленнях, альфа-токоферол є присутнім у кількості біля 0,20 – 0,40% (за вагою). У різних втіленнях, альфа-токоферол є присутньою у кількості біля 0,25 – 0,35% (за вагою). У окремих втіленнях, альфа-токоферол є присутньою у кількості біля 0,27 – 0,33% (за вагою). У типових втіленнях, композиція містить не більш, ніж біля 0,1 частинок на мільйон етилкарбамату. У деяких втіленнях, композиція містить не більш, ніж 0,1 частинок на мільйон етилкарбамату. У різних втіленнях, композиція містить менш, ніж 0,1 частинок на мільйон етилкарбамату. У певних додаткових втіленнях, композиція містить ЕПК у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх жирних кислот у композиції та дорівнює принаймні біля 45,0 – 65,0% (a/a). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 50,0 – 60,0 % (a/a). У різних втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 52,0 – 58,0 % (a/a). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55,0% (a/a). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55,0 – 58,4 % (a/a). У різних втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55,6 – 57,9 % (a/a). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 56,7% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК, у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за вагою всіх жирних кислот у композиції, у кількості біля 50,0 – 60,0% (за вагою). У деяких втіленнях, ЕПК є присутньою у кількості біля 55% (за вагою). У певних додаткових втіленнях, композиція містить ДГК у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх жирних кислот у композиції та дорівнює принаймні біля 13,0 – 25,0 % (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 15,0 – 23,0% (a/a). У різних втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 17,0 – 21,0% (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 19,0 – 20,0% (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 17,7 – 22,2% (a/a). У різних втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 18,4 – 21,4% (a/a). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 19,9% (a/a). У різних втіленнях, композиції містять ДГК, обчислену у вигляді відсотка за вагою всіх жирних кислот у композиції, у кількості біля 15,0 – 25,0% (за вагою). У деяких втіленнях, ДГК є присутньою у кількості біля 20,0% (за вагою). У різних додаткових втіленнях, композиція містить ЕПК та ДГК у загальній кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх жирних кислот у композиції та дорівнює принаймні біля 67,0 – 81,0 % (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить загальну кількість ЕПК та ДГК біля 69,0 – 79,0% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить загальну кількість ЕПК + ДГК біля 71,0 – 77,0% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить загальну кількість ЕПК+ДГК біля 74,0 – 75,0% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить ЕПК+ДГК у загальній кількості, обчисленій у вигляді відсотка за вагою всіх жирних кислот у композиції у кількості біля 70,0-80,0% (за вагою). У деяких втіленнях, композиція містить біля 75,0% (за вагою) ЕПК + ДГК. У тих додаткових втіленнях, які додатково містять α- ліноленову кислоту (C18:3 n-3), αліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,07 – 1,10% (a/a). У деяких втіленнях, αліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,24 – 0,91% (a/a). У різних втіленнях, α 13 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,40 – 0,80 % (a/a). У деяких втіленнях, αліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,50 – 0,600% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять мороктову кислоту (C18:4 n-3), мороктова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 7,90% (a/a). У деяких втіленнях, мороктова кислота є присутньою у кількості біля 0,25 – 6,40% (a/a). У деяких втіленнях, мороктова кислота є присутньою у кількості біля 1,70% - біля 4,90% (a/a). У окремих втіленнях, мороктова кислота є присутньою у кількості біля 3,25% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять ейкозатрієнову кислоту (C20:3 n-3), ейкозатрієнова кислота є присутньою у кількості біля 0,75 – 3,50% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозатрієнова кислота є присутньою у кількості біля 1,20 – 3,00% (a/a). У різних втіленнях, ейкозатрієнова кислота є присутньою у кількості біля 1,60 – 2,60% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозатрієнова кислота є присутньою у кількості біля 2,10% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять ейкозатетраєнову кислоту (C20:4 n-3), ейкозатетраєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 0,40% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозатетраєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 0,30% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозатетраєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,03 – 0,22% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозатетраєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,12% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять хенейкозапентаєнову кислоту (C21:5 n-3), хенейкозапентаєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 4,10% (a/a). У деяких втіленнях, хенейкозапентаєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 3,20% (a/a). У окремих втіленнях, хенейкозапентаєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,60 – 2,35% (a/a). У різних втіленнях, хенейкозапентаєнова кислота є присутньою у кількості біля 1,50% (a/a). У різних додаткових втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 0,90 – 7,60% (a/a). У різних втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 2,00 – 6,50% (a/a). У деяких втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 3,10 – 5,40% (a/a). У різних втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 4,25% (a/a). У різних додаткових втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 2,13 – 8,48% (a/a). У деяких втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 3,19 – 7,42% (a/a). У деяких втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 4,25 – 6,37% (a/a). У різних втіленнях, ДПК є присутньою у кількості біля 5,31% (a/a). У різних втіленнях, загальна кількість омега-3 жирних кислот складає біля 80,0 - 95% (за вагою) всіх жирних кислот у фармацевтичній композиції. У додаткових втіленнях, які містять ДГЛК (дигомо- гамма- ліноленову кислоту), ДГЛК є присутньою у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх жирних кислот у композиції та дорівнює принаймні біля 0,01 – 4,40% (a/a). У деяких втіленнях, ДГЛК є присутньою у кількості біля 0,01 – 3,30% (a/a). У деяких втіленнях, ДГЛК є присутньою у кількості біля 0,01 – 2,20% (a/a). У деяких втіленнях, ДГЛК є присутньою у кількості біля 1,10% (a/a). У деяких втіленнях, ДГЛК є присутньою у кількості біля 0,28 – 0,61% (a/a). У деяких втіленнях, ДГЛК є присутньою у кількості біля 0,33 – 0,56% (a/a). У деяких втіленнях, ДГЛК є присутньою у кількості біля 0,44% (a/a). У додаткових втіленнях, які містять АК (арахідонову кислоту), АК є присутньою у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх жирних кислот у композиції та дорівнює принаймні біля 0.01 - 6.90% (a/a). У різних втіленнях, АК є присутньою у кількості біля 0,01 – 5,40% (a/a). У деяких втіленнях, АК є присутньою у кількості біля 0,70 – 3,80% (a/a). У різних втіленнях, АК є присутньою у кількості біля 2,25% (a/a). У різних втіленнях, АК є присутньою у кількості біля 1,41 – 4,87% (a/a). У деяких втіленнях, АК є присутньою у кількості біля 1,99 – 4,30% (a/a). У різних втіленнях, АК є присутньою у кількості біля 2,57 – 3,72% (a/a). У різних втіленнях, композиція містить АК у кількості, яка не перевищує приблизно 4,5% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить АК у кількості, яка не перевищує приблизно 3,14% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять лінолеву кислоту (C18:2 n-6), лінолева кислота є присутньою у кількості біля 0,25% - біля 1,30 % (a/a). У деяких втіленнях, лінолева кислота є присутньою у кількості біля 0,40% - 1,20% (a/a). У різних втіленнях, лінолева кислота є присутньою у кількості біля 0,60% - біля 0,95% (a/a). У окремих втіленнях, лінолева кислота є присутньою у кількості біля 0,80% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять гамма-ліноленову кислоту (C18:3 n-6), гамма- ліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 0,65% (a/a). У різних втіленнях, 14 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 гамма- ліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,03 – 0,51% (a/a). У деяких втіленнях, гамма-ліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,15 – 0,40% (a/a). У деяких втіленнях, гамма- ліноленова кислота є присутньою у кількості біля 0,27% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять ейкозадіенову кислоту (C20:2 n-6), ейкозадіенова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 0,30 (a/a). У різних втіленнях, ейкозадіенова кислота є присутньою у кількості біля 0,04 – 0,24% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозадіенова кислота є присутньою у кількості біля 0,09 – 0,20% (a/a). У деяких втіленнях, ейкозадіенова кислота є присутньою у кількості біля 0,14% (a/a). У тих додаткових втіленнях, які додатково містять докозапентаєнову кислоту (C22:5 n-6), докозапентаєнова кислота є присутньою у кількості біля 0,01 – 0,95% (a/a). У різних втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,01 – 1,05% (a/a). У деяких втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,05 – 0,71% (a/a). У деяких втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,01 – 0,48% (a/a). У окремих втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,24% (a/a). У деяких втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,01 – 1,19% (a/a). У деяких втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,16 – 0,98% (a/a). У окремих втіленнях, докозапентаєнова кислота (C22:5 n-6) є присутньою у кількості біля 0,57% (a/a). У деяких втіленнях, композиція містить не більш, ніж біля 10,0% (a/a) загальної кількості омега-6 жирних кислот. У типових варіантах серед цих додаткових втілень, композиція містить не більш, ніж біля 3,0% (a/a) насичених жирних кислот, не більш, ніж біля 5,0% (a/a) мононенасичених жирних кислот та не більш, ніж біля 0,1 частинок на мільйон етилкарбамату. У деяких втіленнях, композиція містить не більш, ніж 0,1 частинок на мільйон етилкарбамату. У різних втіленнях, композиція містить менш, ніж 0,1 частинок на мільйон етилкарбамату. У іншому аспекті, описана вище фармацевтична або нутрицевтична композиція ДПКзбагачених омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти є належним чином запакованою у вигляді стандартних лікарських форм для перорального введення. У окремих втіленнях, лікарською формою є капсула. У деяких втіленнях, лікарською формою є желатинова капсула. У окремих втіленнях, желатинова капсула є твердою желатиновою капсулою. У інших втіленнях, лікарською формою є м’яка желатинова капсула. У різних втіленнях, капсула містить желатин типу A. У деяких втіленнях, капсула містить желатин типу A та типу B. Джерела колагену для виробництва желатину типу A або типу B охоплюють, але без обмеження, корів, свиней та рибу. У різних втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить достатню кількість свинячого желатину типу А, завдяки чому така капсула розчинюється у очищеній воді при 37°C протягом не більш, ніж 30 хв. після принаймні трьохмісячного зберігання при 40°C. У деяких втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить достатню кількість свинячого желатину типу А, завдяки чому така капсула розчинюється у очищеній воді при 37°C протягом не більш, ніж 30 хв. після принаймні шестимісячного зберігання при 40°C. У деяких втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить достатню кількість свинячого желатину типу А, завдяки чому така капсула розчинюється у очищеній воді при 37°C протягом не більш, ніж 30 хв. після принаймні дванадцятимісячного зберігання при 40°C. У різних втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить достатню кількість свинячого желатину типу А, завдяки чому така капсула розчинюється у очищеній воді при 37°C протягом не більш, ніж 30 хв. після принаймні трьохмісячного зберігання при 30°C. У деяких втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить достатню кількість свинячого желатину типу А, завдяки чому така капсула розчинюється у очищеній воді при 37°C протягом не більш, ніж 30 хв. після принаймні шестимісячного зберігання при 30°C. У деяких втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить достатню кількість свинячого желатину типу А, завдяки чому така капсула розчинюється у очищеній воді при 37°C протягом не більш, ніж 30 хв. після принаймні дванадцятимісячного зберігання при 30°C. У деяких втіленнях, капсулою є м’яка желатинова капсула, яка містить суміш свинячого желатину типу А та типу B. У різних подібних втіленнях, принаймні 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40% та навіть принаймні біля 50% (у ваговому співвідношенні) желатину є свинячим желатином типу А. У вибраних втіленнях, принаймні біля 55%, 60%, 65%, 70%, 75% (у ваговому співвідношенні) желатину є свинячим желатином типу А. У окремих втіленнях, принаймні 80%, 85%, 90%, навіть 95% (у ваговому співвідношенні) желатину є свинячим желатином типу А. 15 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 У різних втіленнях, капсула є м’якою желатиновою капсулою, желатиновий вміст якої головним чином є свинячим желатином типу А. У деяких втіленнях, капсула є зменшеною капсулою зі структурованого желатину, як-то капсули, описані у патенті U.S. Pat. No. 7,485,323, повний зміст якого включено сюди шляхом посилання. У деяких втіленнях, капсула містить сукцинілований желатин. У різних втіленнях, капсули зроблені з речовин, які не є побічними продуктами тваринного походження, як-то агар-агар, карагенан, пектин, конжак, гуарова камедь, харчовий крохмаль, модифікований кукурудзяний крохмаль, картопляний крохмаль та тапіока. Джерела матеріалів нетваринного походження, які можуть бути застосовані для отримання капсул, корисних для застосування у вигляді описаних тут стандартних лікарських форм для перорального введення також описані у патентній публікації U.S. Patent Publication No. 2011/0117180, включеної сюди ® шляхом посилання. У деяких втіленнях застосовано капсули Vegicaps (Catalent). У деяких втіленнях капсулярних стандартних лікарських форм для перорального введення капсула є позбавленою оболонки. У інших втіленнях капсулярних стандартних лікарських форм капсула має оболонку. У певних втіленнях капсул з оболонкою, композиція жирних кислот вивільнюється в залежності від часу. У різних втіленнях, суттєве вивільнення композиції ПНЖК є відсутнім протягом принаймні 30 хв. після перорального прийому. У деяких втіленнях, суттєве вивільнення композиції ПНЖК є відсутнім протягом принаймні 30 хв. після перорального прийому при перевірці вивільнення in vitro. У деяких втіленнях, протягом перших 30 хв. після перорального прийому при перевірці вивільнення in vitro вивільнюється не більш, ніж біля 20% композиції ПНЖК. У вибраних втіленнях, протягом перших 30 хв. після перорального прийому при перевірці вивільнення in vitro вивільнюється не більш, ніж біля 25%, не більш, ніж біля 30%, навіть не більш, ніж біля 35% композиції ПНЖК. У окремих втіленнях, властивості вивільнення in vitro оцінюють згідно за процедурами, описаними у попередній заявці на патент під назвою " Method of release testing for omega-3 polyunsaturated fatty acids " by Bharat Mehta; Рrovisional patent application no. 61/749,124, подана 04.01.2013, суть та повний зміст якої включено сюди шляхом посилання. У окремих втіленнях, значні кількості ПНЖК вивільнюються протягом біля 60 хв. після перорального прийому. У деяких втіленнях, значні кількості ПНЖК вивільнюються протягом біля 60 хв. при перевірці in vitro. У вибраних втіленнях, принаймні біля 40% композиції ПНЖК вивільнюється протягом біля 60 хв. при перевірці in vitro. У різних втіленнях, принаймні біля 45%, 50%, 55%, 60%, навіть принаймні біля 65% композиції ПНЖК вивільнюється протягом біля 60 хв. при перевірці in vitro. У окремих втіленнях, оцінку властивостей вивільнення in vitro проводили відповідно за процедурами, описаними у попередній заявці на патент під назвою " Method of release testing for omega-3 polyunsaturated fatty acids " by Bharat Mehta; Рrovisional patent application no. 61/749,124, подана 04.01.2013, суть та повний зміст якої включено сюди шляхом посилання. У деяких втіленнях, капсули є покритими оболонкою, як описано у патентах США U.S. Pat. Nos. 5,792,795 та 5,948,818, суть яких також включено сюди шляхом посилання. У різних втіленнях, які стосуються оболонки, такою оболонкою є полімер (сополімер етилакрилату та метилакрилату). У деяких втіленнях, оболонкою є сополімер Eudragit NE 30-D (Evonik Industries AG), з середньою молекулярною масою біля 800,000. У інших втіленнях покритих оболонкою капсул, капсула є покритою кишковорозчинною оболонкою, яка захищає капсулу від розчинення або розпаду у шлунку, але розчинюється при значеннях pH, характерних для тонкого кишечнику. У різних втіленнях, одинична лікарська форма для перорального введення містить 100 2000 мг композиції ПНЖК. У деяких втіленнях, лікарська форма для перорального введення містить біля 250 мг композиції ПНЖК. У деяких втіленнях, лікарська форма для перорального введення містить біля 500 мг композиції ПНЖК. У деяких втіленнях, лікарська форма для перорального введення містить біля 750 мг композиції ПНЖК. У деяких втіленнях, лікарська форма для перорального введення містить біля 1000 мг композиції ПНЖК. У інших втіленнях, лікарська форма для перорального введення містить біля 1500 мг композиції ПНЖК. У деяких втіленнях, одинична лікарська форма містить нецілі вагові кількості композиції ПНЖК у межах 100 - 2000 мг. У іншому аспекті, багато описаних вище стандартних лікарських форм можуть бути корисним чином разом запаковані у набір дозування з метою покращення зручності та комплаетності (дотримання вимог лікування) пацієнта. 16 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У деяких втіленнях, набором дозування є пляшка. У інших втіленнях, багато лікарських форм запаковано у блістерні пакети та багато таких блістерних пакетів вибірково може бути запаковано разом у коробці або у іншому контейнері. Звичайно, при застосуванні пакування у вигляді пляшки або одного або декількох блістерних пакетів, більшість стандартних лікарських форм є достатніми для 30 –денного, 60 –денного або 90 –денного прийому потрібної дози препарату. Отже, у вибраних втіленнях, одинична лікарська форма являє собою капсулу, яка містить приблизно один грам фармацевтичної композиції, як описано вище та набір дозування містить 30, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 270 або 300 таких капсул. У різних втіленнях, пакування багатьох стандартних лікарських форм здійснюють у інертному газі, як-то азот або у благородному газі або у вакуумі. У іншому аспекті передбачені способи лікування. У перших серіях втілень лікування, передбачені способи лікування важкої форми гіпертригліцеридемії (> 500 мг/дл), які полягають у пероральному введенні пацієнту, який перед початком лікування мав рівні тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові, які сягали ≥500 мг/дл, фармацевтичної композиції, описаної у Розділі 5.2 вище у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові до значень, які знаходяться нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У типових втіленнях, кожну дозу фармацевтичної композиції вводять у вигляді однієї або кількох стандартних лікарських форм, описаних у Розділі 5.3 вище. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові до значення, яке буде нижче рівнів, спостережених перед початком лікування принаймні на 5%, 6%, 7%, 8% або принаймні на 9%. У деяких втіленнях, композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові до значення, яке буде нижче рівнів, спостережених перед початком лікування принаймні на 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18% або 19%. У окремих втіленнях, композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові до значення, яке буде нижче рівнів, спостережених перед початком лікування принаймні на 20%. У різних втіленнях, композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові до значення, яке буде нижче рівнів, спостережених перед початком лікування принаймні на 25%, 30%, 35%, 40%, 45% та навіть принаймні на 50%. У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові принаймні до концентрації біля 50 мг/дл, 60 мг/дл, 70 мг/дл, 80 мг/дл, 90 мг/дл, навіть до принаймні біля 100 мг/дл. У деяких втіленнях, композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі принаймні до концентрації біля 110 мг/дл, 120 мг/дл, 130 мг/дл, 140 мг/дл, навіть принаймні біля 150 мг/дл. У особливих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові принаймні до концентрації біля 160 мг/дл, 170 мг/дл, 180 мг/дл, навіть принаймні біля 190 мг/дл або 200 мг/дл. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів не-ЛПВЩ-холестерину до принаймні біля 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9% та навіть 10% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЛПВЩ-холестерину до принаймні біля 1% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЛПВЩ-холестерину до принаймні біля 2%, 3%, 4%, навіть до принаймні біля 5%, 6%, 7%, 8%, 9% або 10% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення співвідношення загального холестерину до ЛПВЩ-холестерину ("TC/HDL") до принаймні біля 1% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення співвідношення TC/HDL до принаймні біля 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, навіть до принаймні біля 9% або 10% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу ефективного для зниження рівнів ХС-ЛПДНЩ до принаймні біля 5%, 6%, 7%, 8%, 9% або до принаймні біля 10% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження 17 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 рівнів ХС-ЛПДНЩ до принаймні біля 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, навіть до принаймні біля 18%, 19% або 20% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів ХС-ЛПДНЩ до принаймні біля 21%, 22%, 23%, 24%, навіть до принаймні біля 25% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів апоCIII. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів апоCIII до принаймні біля 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, навіть до принаймні біля 8%, 9% або 10% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЕПК у плазмі крові принаймні на 100% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, для підвищення рівнів ЕПК у плазмі крові принаймні на 200%, 250%, 300%, навіть до принаймні біля 350%, 400%, 450% або до принаймні біля 500% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У вибраних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЕПК у плазмі крові до принаймні біля 550%, 600%, 650%, навіть до принаймні біля 700% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові до принаймні біля 50% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові до принаймні біля 55%, 60%, 65%, 70%, навіть до принаймні біля 75%, 80%, 85% або 90% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові до принаймні біля 50% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові до принаймні біля 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, навіть до принаймні біля 80%, 85%, 90%, 95% або на 100% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У вибраних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові до принаймні біля 110%, 120%, навіть до принаймні біля 125% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові до принаймні біля 5% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові до принаймні біля 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, навіть до принаймні біля 11%, 12%, 13%, 14%, навіть до принаймні біля 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% або 21%, 22%, 23%, 24%, навіть до принаймні біля 25% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові принаймні до біля 25 мкг/мл. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів АК у плазмі крові принаймні до концентрації біля 50 мкг/мл, 55 мкг/мл, 60 мкг/мл, 65 мкг/мл, навіть принаймні до концентрації біля 70 мкг/мл, 75 мкг/мл, 80 мкг/мл, 85 мкг/мл, 90 мкг/мл, навіть принаймні до концентрації біля 95 мкг/мл або 100 мкг/мл. У деяких втіленнях, ефективна кількість дорівнює принаймні біля 2 г/добу. У різних втіленнях, ефективна кількість дорівнює принаймні біля 3 г/добу. У окремих втіленнях, ефективна кількість дорівнює принаймні біля 4 г/добу. У типових втіленнях, ефективна кількість дорівнює біля 2 г/добу. У деяких втіленнях, ефективна кількість дорівнює біля 4 г/добу. У типових втіленнях, фармацевтичну композицію вводять протягом принаймні 30 днів. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять протягом принаймні 60 днів. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять протягом принаймні 90 днів, 120 днів, 180 днів, 240 днів або принаймні 360 днів. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять протягом невизначеного часу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять щоденно. У інших втіленнях, фармацевтичну композицію вводять через день. 18 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У окремих втіленнях, щоденну дозу фармацевтичної композиції вводять у вигляді одиничної щоденної дози. У інших втіленнях, фармацевтичну композицію вводять роздільними дозами, у вигляді щоденної дози, розділеної на два введення, три введення або навіть чотири введення протягом щоденного курсу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять з їжею. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять з їжею з низьким вмістом жирів. У інших втіленнях, фармацевтичну композицію вводять без їжі. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять натщесерце. У деяких втіленнях, способи додатково полягають у введенні статину. У окремих втіленнях, статин є вибраним з групи, яка охоплює правастатин, ловастатин, симвастатин, аторвастатин, флувастатин, розувастатин, тенівастатин та пітавастатин. У інших серіях втілень лікування, передбачені способи лікування пацієнтів, які перед початком лікування мали рівні тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові біля 200 - 500 мг/дл. У деяких втіленнях, такі пацієнти вже приймають терапевтичне лікування статином; у таких пацієнтів рівні тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові перед початком лікування вимірюють під час лікування статином, перед введенням описаних у Розділі 5.2 вище фармацевтичних композицій. Спосіб полягає у пероральному введенні ефективної кількості статину та у додатковому введенні описаної тут у Розділі 5.2 фармацевтичної композиції, пероральним шляхом, у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові нижче рівнів, виміряних перед лікуванням описаною тут фармацевтичною композицією. Не існує потрібності у одночасному введенні описаної у Розділі 5.2 фармацевтичної композиції та статину, а також у застосуванні однакового плану дозування або навіть у застосуванні зазначених препаратів у ті ж саме дні. Досить того, щоб ці два засоби вводити в достатній близькості у часі, щоб пацієнт отримував терапевтичний ефект одночасно від обох з них. У деяких втіленнях, описану у Розділі 5.2 фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові на принаймні біля 5% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів тригліцеридів у сироватці або у плазмі крові на принаймні біля 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, навіть на принаймні біля 16%, 17%, 18%, 19% або на принаймні біля 20% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, описану тут у Розділі 5.2 фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів не-ЛПВЩ-холестерину на принаймні біля 1%, на принаймні біля 2%, на принаймні біля 3%, 4%, 5%, навіть на принаймні біля 7%, 8%, 9% або на принаймні біля 10% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У серіях втілень, описану тут у Розділі 5.2 фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЛПВЩ-холестерину на принаймні біля 1%, 2%, 3% (або ще більше) вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові на принаймні 100% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові на принаймні біля 200%, 250%, 300%, навіть на принаймні біля 350%, 400%, 450% або на принаймні біля 500% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У вибраних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять протягом часу та у кількості, ефективної для підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові на принаймні біля 550%, 600%, 650%, навіть на принаймні біля 700% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові на принаймні біля 50% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові на принаймні біля 55%, 60%, 65%, 70%, навіть на принаймні біля 75%, 80%, 85% або 90% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів DРA у плазмі крові на принаймні біля 50% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів DРA у плазмі крові на принаймні біля 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, навіть на принаймні біля 80%, 85%, 90%, 95% або 19 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 100% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У вибраних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів DРA у плазмі крові на принаймні біля 110%, 120%, навіть на принаймні біля 125% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові на принаймні біля 5% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК) на принаймні біля 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, навіть на принаймні біля 11%, 12%, 13%, 14%, навіть на принаймні біля 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% або 21%, 22%, 23%, 24% навіть на принаймні біля 25% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для скорочення концентрації арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові на принаймні біля 25 мкг/мл. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові на принаймні біля 50 мкг/мл, 55 мкг/мл, 60 мкг/мл, 65 мкг/мл, навіть на принаймні біля 70 мкг/мл, 75 мкг/мл, 80 мкг/мл, 85 мкг/мл, 90 мкг/мл, навіть на принаймні біля 95 мкг/мл або 100 мкг/мл. У різних втіленнях, описану тут у Розділі 5.2 фармацевтичну композицію вводять у вигляді стандартних лікарських форм, як описано у Розділі 5.3 вище. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні біля 1 г/добу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні приблизно 2 г/добу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні приблизно 3 г/добу. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні біля 4 г/добу. У типових втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості біля 2 г/добу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості біля 3 г/добу або біля 4 г/добу. Також передбачені способи збільшення співвідношення ЕПК:АК без урахування рівнів тригліцеридів у плазмі крові пацієнтів перед початком лікування. Зазначені способи полягають у введенні описаної тут у Розділі 5.2 фармацевтичної композиції пацієнту, співвідношення ЕПК:АК якого є нижчим, ніж приблизно 0.25, у кількості та протягом часу, ефективних для для підвищення співвідношення ЕПК:АК пацієнтів до принаймні біля 0.25. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення співвідношення ЕПК:АК пацієнтів до принаймні біля 0.3, до принаймні біля 0.35, до принаймні біля 0.40, до принаймні біля 0.45, до принаймні біля 0.50, навіть до рівня принаймні біля 0.55, 0.60, 0.61, 0.62, 0.63, 0.64 або 0.65. У деяких втіленнях, спосіб полягає у введенн фармацевтичної композиції у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові принаймні на 100% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові принаймні на біля 200%, 250%, 300%, принаймні біля 350%, 400%, 450% або принаймні на біля 500% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У вибраних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять протягом часу та у кількості, ефективної для підвищення рівнів ЕРА у плазмі крові принаймні на біля 550%, 600%, 650%, навіть принаймні на біля 700% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові принаймні на біля 50% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів ДГК у плазмі крові принаймні на біля 55%, 60%, 65%, 70%, навіть принаймні на біля 75%, 80%, 85% або 90% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів DРA у плазмі крові принаймні на біля 50% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів DРA у плазмі крові принаймні на біля 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, навіть принаймні на біля 80%, 85%, 90%, 95% або 100% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. У вибраних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для підвищення рівнів DРA у плазмі крові принаймні на біля 110%, 120%, навіть принаймні на біля 125% вище рівнів, спостережених перед початком лікування. 20 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 У серіях втілень, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК)у плазмі крові принаймні біля 5% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення концентрації арахідонової кислоти (АК) принаймні на біля 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, навіть принаймні на біля 11%, 12%, 13%, 14%, навіть принаймні на біля 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% або 21%, 22%, 23%, 24% навіть принаймні на біля 25% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження концентрації арахідонової кислоти (АК) у плазмі крові принаймні до біля 25 мкг/мл. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів АК у плазмі крові принаймні до біля 50 мкг/мл, 55 мкг/мл, 60 мкг/мл, 65 мкг/мл, навіть принаймні до біля 70 мкг/мл, 75 мкг/мл, 80 мкг/мл, 85 мкг/мл, 90 мкг/мл, навіть принаймні до біля 95 мкг/мл або 100 мкг/мл. У різних втіленнях, описану тут у Розділі 5.2 фармацевтичну композицію вводять у вигляді стандартних лікарських форм, як описано вище у Розділі 5.3. У різних втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні приблизно 1 г/добу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні приблизно 2 г/добу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні приблизно 3 г/добу. У окремих втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості принаймні приблизно 4 г/добу. У типових втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості біля 2 г/добу. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості біля 3 г/добу або біля 4 г/добу. Також передбачені способи підвищення рівнів апоCIII у плазмі крові або у сироватці пацієнтів без урахування рівнів тригліцеридів у плазмі крові пацієнтів перед початком лікування. Зазначені способи полягають у введенні описаної тут у Розділі 5.2 фармацевтичної композиції пацієнту, який потребує зменшення рівнів апоСІІІ у кількості та протягом часу, ефективних для зменшення рівнів апоCIII у плазмі крові або у сироватці пацієнтів. У типових втіленнях, пацієнт має ризик виникнення серцево-судинного захворювання. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію вводять у кількості та протягом часу, ефективних для зниження рівнів апоCIII принаймні на біля 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, навіть принаймні на біля 8%, 9% або 10% нижче рівнів, спостережених перед початком лікування. У іншому аспекті, описані тут фармацевтичні композиції застосовують для лікування інших розладів, в тому числі одного або кількох видів неалкогольного стеатогепатиту (NASH), гіперліпопротеїнемії, в тому числі гіперліпопротеїнемії III типу та метаболічного синдрому Х. У деяких втіленнях, фармацевтичну композицію застосовують для зменшення стійкості до інгібіторів агрегації тромбоцитів, як-то препарату плавікс, включаючи її застосування у способах, описаних у патентній заявці U.S. Patent Application No. 13/620,312, суть та повний зміст якої включено сюди шляхом посилання. У іншому аспекті, презентовано покращений процес переробки риб'ячого жиру у фармацевтичні композиції, які містять ПНЖК у формі вільної кислоти та особливо процес переробки риб'ячого жиру у фармацевтичні композиції, описані тут у Розділі 5.2. Проміжну сировину отримують шляхом переестерифікації риб'ячого жиру, отриманого, наприклад, з риб родин Engraulidae, Clupeidae та Scombridae за допомогою стандартних відомих у цій галузі способів з параметрами процесу, відрегульованими для отримання композиції, яка буде знаходитися у межах прийнятних відхилень, описаних безпосередньо нижче у Розділі 5.6.2. Прийнятні стандартні операції процесу описані, наприклад, у патентах США U.S. Pat. Nos. 5,656,667; 5,719,302; 5,945,318; 6,204,401; 6,518,049; 6,528,669; 7,491,522; 7,550,613; 7,678,930; 7,718,698; 7,732,488;. 5,472,705; 5,750,572; 5,776,978; 5,869,714; 7,541,480; 7,553,870; 7,619,002, включених сюди шляхом посилання. У зразковому процес, з риби (наприклад, анчоус, сардини, скумбрія та менхаден) екстрагують необроблений жир у вигляді тригліцеридів, якій потім піддають лужному очищенню, наприклад, з застосуванням гідроксиду натрію, деіонізують, освітлюють та висушують. Потім отримані ПНЖК шляхом переестерифікації перетворюють на естери, як-то на метилові або етилові естери. Переестерифікація може бути здійснена, наприклад, шляхом етанолізу у присутності етанолу та етоксиду натрію з отриманням етилових естерів. За переестерифікацією слідує щонайменш одна дистиляція, звичайно декілька дистиляцій. 21 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 У іншому зразковому процесі тригліцеридний жир піддають лужному очищенню, дезодорують, піддають переестерифікації з етанолом, як-то шляхом етанолізу у присутності етанолу та етоксиду натрію, а потім піддають фракційній перегонці у один або кілька етапів. У Фіг. 2 наведено схему зразкового процесу отримання проміжної сировини. У цьому процесі, рибу відварюють у воді та отриману суміш рідких та твердих компонентів центрифугують для видалення водної фази. Позосталу від попереднього етапу обробки фракцію жирів обробляють лугом для нейтралізування присутності будь - якої жирної кислоти, після чого її промивають водою. Після цього, оброблений лугом риб’ячий жир у тригліцеридній формі дезодорують та зменшують у ньому кількість забруднювачів навколишнього середовища шляхом, наприклад, дистиляції. Підсушений дезодорований риб’ячий жир потім перетворюють на його форму у вигляді етилового ефіру шляхом застосування реакції з етанолом, каталізованої етоксидом натрію. Після завершення реакції, надлишковий етанол вилучають шляхом дистиляції та етилові ефіри промивають спочатку розчином лимонної кислоти, а потім водою. Етилові естери у цьому зразковому процесі піддають дистиляції для досягнення потрібної концентрації етилового естеру-EPA (EПК-EE) та етилового естеру-ДГК (ДГК-EE) для їх застосування у якості проміжної сировини. У деяких втіленнях здійснюють багато таких дистиляцій. Точні застосовані умови коригують у залежності від першоначальної композиції етилового естеру з метою досягнення потрібної концентрації EПК-EE та ДГК-EE для проміжної сировини, які детально наведено безпосередньо нижче у Розділі 5.6.2. Альтернативи операціям цього процесу добре відомі та можуть бути застосовані по мірі необхідності до тих пір, доки отримана композиція проміжної сировини не буде знаходитися у межах прийнятних відхилень, описаних безпосередньо нижче у Розділі 5.6.2. Композиція проміжної сировини містить багато видів омега-3 ПНЖК, кожен з яких по суті існує у формі етилового естеру. Композиція проміжної сировини також містить кислоти ЕПК, ДГК та ДПК, кожна з яких по суті існує у формі етилового естеру. У різних втіленнях, композиція проміжної сировини містить етиловий естер-ЕPA (EПК-EE), ДГК-EE та ДПК-EE у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції, які знаходяться у діапазоні від -3SD до +3SD відносно середніх значень, відповідно перерахованих у Таблиці 9. У деяких втіленнях, кожна зі сполук EПК-EE, ДГК-EE та ДПК-EE знаходиться у межах від -2SD до +2SD відносно відповідно перерахованих середніх значень. У деяких втіленнях, кожна зі сполук EПК-EE, ДГК-EE та ДПК-EE знаходиться у межах від -1SD до +1SD відносно відповідно перерахованих середніх значень. У деяких втіленнях, композиція проміжної сировини містить сполуки EПК-EE, ДГК-EE та ДПК-EE в межах своїх встановлених мінімальних та максимальних відсоткових площин серед партій, описаних у Таблиці 8. У деяких втіленнях, композиція додатково містить одну або декілька омега-3 поліненасичених жирних кислот, кожна з яких істотно знаходиться у формі етилового естеру, вибраних з групи, яка охоплює: α-ліноленову кислоту (C18:3 n-3), мороктову кислоту у (C18:4 n3), ейкозатрієнову кислоту (C20:3 n-3), ейкозатетраєнову кислоту (C20:4 n-3) та хенейкозапентаєнову кислоту у (C21:5 n-3). У різних втіленнях, якщо є присутнім один або декілька додаткових видів омега-3-EE, то він є присутнім у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції, які підпадають до діапазону від -3SD до +3 SD відносно відповідно перерахованих у Таблиці 9 середніх значень. У деяких втіленнях, кожен вид знаходиться у межах від -2SD до +2 SD відносно відповідно перерахованих середніх значень. У деяких втіленнях, кожен вид підпадає у діапазон від -1SD до +1SD відносно відповідно перерахованих середніх значень. У деяких втіленнях, якщо є присутнім один або декілька додаткових видів омега-3-EE, то він є присутнім у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції, які підпадають до діапазону в межах своїх встановлених мінімальних та максимальних відсоткових площин серед партій, описаних у Таблиці 8. У деяких втіленнях, композиція проміжної сировини також містить принаймні один вид омега-6 ПНЖК. У різних втіленнях, композиція містить етилові естери однієї або декількох омега-6 поліненасичених жирних кислот, вибраних з групи, яка охоплює лінолеву кислоту (C18:2 n-6), гамма-ліноленову кислоту (C18:3 n-6), ейкозадіенову кислоту (C20:3 n-6), дигомо- гаммаліноленову кислоту ("ДГЛК") (C20:3 n-6), арахідонову кислоту (C20:4 n-6) ("AA") та докозапентаєнову кислоту (C22:5 n-6). Кожен вид омега-6 ПНЖК по суті існує у формі етилового естеру. 22 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У різних втіленнях, якщо є присутнім один або декілька додаткових видів омега-6-EE, то він є присутнім у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції, які підпадають до діапазону від -3SD до +3SD відносно відповідно перерахованих у Таблиці 9 середніх значень. У деяких втіленнях, кожен вид знаходиться у межах від -2SD до +2SD відносно відповідно перерахованих середніх значень. У деяких втіленнях, кожен вид підпадає у діапазон від -1SD до +1SD відносно відповідно перерахованих середніх значень. У деяких втіленнях, якщо є присутнім один або декілька додаткових видів омега-3-EE, то він є присутнім у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції, які підпадають до діапазону в межах своїх встановлених мінімальних та максимальних відсоткових площин серед партій, описаних у Таблиці 8. У різних додаткових втіленнях, композиція проміжної сировини містить етиловий естер-ЕПК (EПК-EE) у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції, яка дорівнює біля 45.0 - 53.0% (a/a). У деяких втіленнях, EПК-EE є присутнім у кількості біля 48.40 50.04% (a/a). У різних втіленнях, EПК-EE є присутнім у кількості біля 48.67 - 49.77% (a/a). У деяких втіленнях, композиція проміжної сировини містить EПК-EE у кількості біля 48.95 - 49.49% (a/a). У деяких втіленнях, композиція проміжної сировини містить EПК-EE у кількості біля 49.22% (a/a). У різних втіленнях, EПК-EE є присутнім у кількості біля 44.20 - 46.92% (a/a). У деяких втіленнях, EПК-EE є присутнім у кількості біля 45.56% (a/a). У різних втіленнях, EПК-EE є присутнім у кількості біля 425 – 460 мг/г. У різних додаткових втіленнях, композиція проміжної сировини містить етиловий естер-ДГК (ДГК-EE) у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції та дорівнює біля 13.0 - 20.0% (a/a). У різних втіленнях, ДГК-EE є присутнім у кількості біля 16.43 18.28% (a/a). У різних втіленнях, сировина містить ДГК-EE у кількості біля 16.74 - 17.98% (a/a). У деяких втіленнях, композиція проміжної сировини містить ДГК-EE у кількості біля 17.05 % - біля 17.67% (a/a). У деяких втіленнях, проміжна сировина містить ДГК-EE у кількості біля 17.4% (a/a). У деяких втіленнях, проміжна сировина містить ДГК у кількості біля 14.77% (a/a) - 17.87% (a/a). У деяких втіленнях, проміжна сировина містить ДГК у кількості біля 16.32% (a/a). У деяких втіленнях, проміжна сировина містить ДГК у кількості 150 – 170 мг/г. У різних додаткових втіленнях, ДПК-EE є присутнім у кількості біля 4.10 - 6.74 % (a/a). У деяких втіленнях, ДПК-EE є присутнім у кількості біля 4.54 - 6.30% (a/a). У різних втіленнях, ДПК-EE є присутнім у кількості біля 4.98 - 5.86% (a/a). У деяких втіленнях, ДПК-EE є присутнім у кількості біля 5.42% (a/a). У різних втіленнях, ДПК-EE є присутнім у кількості біля 0.41 - 0.70% (a/a). У деяких втіленнях, ДПК-EE є присутнім у кількості біля 0.56% (a/a). У різних втіленнях, композиція проміжної сировини додатково містить етиловий естер арахідонової кислоти (AК-EE) (C20:4 n-6). У різних втіленнях, AК-EE є присутнім у кількості біля 1.72 - 2.81% (a/a). У деяких втіленнях, AК-EE є присутнім у кількості біля 1.9 - 2.63% (a/a). У різних втіленнях, AК-EE є присутнім у кількості біля 2.09 - 2.45% (a/a). У деяких втіленнях, AК-EE є присутнім у кількості біля 2.27% (a/a). У деяких втіленнях, AК-EE є присутнім у кількості, не більшій, ніж 3.0% (a/a). У деяких втіленнях, AК-EE є присутнім у кількості, не більшій, ніж 4.0% (a/a). У тих втіленнях проміжної сировини, які додатково містять етиловий естер α- ліноленової кислоти, він, у деяких втіленнях, знаходиться у кількості біля 0.3 - 0.45% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер α- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.4% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер α- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.24% (a/a) – 0.62% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер α- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.43% (a/a). У деяких з цих втілень проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер мороктової кислоти (C18:4 n-3), він є присутнім у кількості, обчисленій у вигляді відсотка за площиною на хроматограмі, отриманій після проведення газової хроматографії всіх етилових естерів жирних кислот у композиції та дорівнює біля 0.60 - 2.03% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер мороктової кислоти є присутнім у кількості біля 0.84 - 1.80% (a/a). У різних втіленнях, етиловий естер мороктової кислоти є присутнім у кількості біля 1.10 - 1.60% (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер мороктової кислоти є присутнім у кількості біля 1.32 % (a/a). 23 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У різних втіленнях, етиловий естер мороктової кислоти є присутнім у кількості біля 0.64% 1.93% (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер мороктової кислоти є присутнім у кількості біля 1.28 % (a/a). У різних таких втіленнях проміжної сировини вони додатково містять етиловий естер ейкозатрієнової кислоти (C20:3 n-3), який є присутнім у кількості, меншій, ніж біля 0.1% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозатрієнової кислоти є присутнім у кількості, меншій, ніж біля 0.4% (a/a). У деяких втіленнях проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер ейкозатетраєнової кислоти (C20:4 n-3), він є присутнім у кількості біля 1.57 - 2.10% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозатетраєнової кислоти є присутнім у кількості біля 1.66 2.02% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозатетраєнової кислоти є присутнім у кількості біля 1.75 - 1.93% (a/a). У особливих втіленнях, етиловий естер ейкозатетраєнової кислоти є присутнім у кількості біля 1.84% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозатетраєнової кислоти є присутнім у кількості біля 1.42 - 2.49% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозатетраєнової кислоти є присутнім у кількості біля 1.95% (a/a). У різних втіленнях проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер хенейкозапентаєнової кислоти (C21:5 n-3), він є присутнім у кількості біля 2.25 - 2.36% (a/a). У різних втіленнях, етиловий естер хенейкозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 2.27 - 2.34% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер хенейкозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 2.29 - 2.32 % (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер хенейкозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 2.31% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер хенейкозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 1.42 - 2.76 % (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер хенейкозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 2.09% (a/a). У серіях втілень проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер омега-6 ПНЖК, яка є лінолевою кислотою (C18:2 n-6), етиловий естер лінолевої кислоти є присутнім у кількості біля 0.53 - 0.56% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер лінолевої кислоти є присутнім у кількості біля 0.53 - 0.55% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер лінолевої кислоти є присутнім у кількості біля 0.54 - 0.55% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер лінолевої кислоти є присутнім у кількості біля 0.54% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер лінолевої кислоти є присутнім у кількості біля 0.38 0.83% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер лінолевої кислоти є присутнім у кількості біля 0.60% (a/a). У втіленнях проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер гамма- ліноленової кислоти (C18:3 n-6), цей етиловий естер гамма-ліноленової кислоти у зразкових втіленнях є присутнім у кількості, меншій, ніж 0.1% (a/a). У втіленнях проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер гамма-ліноленової кислоти (C18:3 n-6), він є присутнім у кількості, меншій, ніж 0.4% (a/a). У різних зразкових втіленнях проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер ейкозадіенової кислоти (C20:2 n-6), етиловий естер ейкозадіенової кислоти є присутнім у кількості біля 0.00 - 0.63% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозадіенової кислоти є присутнім у кількості біля 0.00 - 0.45% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозадіенової кислоти є присутнім у кількості біля 0.00 - 0.27% (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер ейкозадіенової кислоти є присутнім у кількості біля 0.09% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер ейкозадіенової кислоти є присутнім у кількості біля 0.00 - 0.54% (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер ейкозадіенової кислоти є присутнім у кількості біля 0.25% (a/a). У багатьох втіленнях проміжної сировини, яка додатково містить етиловий естер дигомогамма- ліноленової кислоти (C20:3 n-6), він є присутнім у кількості біля 0.35 - 0.68% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер дигомо- гамма- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.41 - 0.63% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер дигомо- гамма- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.46 - 0.57% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер дигомо- гамма- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.26 - 0.55% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер дигомо- гамма- ліноленової кислоти є присутнім у кількості біля 0.40% (a/a). Певні додаткові втілення проміжної сировини також додатково містять докозапентаєнову кислоту (C22:5 n-6) у формі етилового естеру. У багатьох таких втіленнях, етиловий естер докозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 0.54 - 0.80% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер докозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 0.59% - 0.76% (a/a). У 24 UA 114615 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 різних втіленнях, етиловий естер докозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 0.63% 0.72% (a/a). У окремих втіленнях, етиловий естер докозапентаєнової кислоти є присутнім у кількості біля 0.67% (a/a). У деяких втіленнях, етиловий естер докозапентаєнової кислоти (C22:5 n-6) є присутнім у кількості біля 1.45% - 7.21% (a/a). У деяких втіленнях, тиловий естер докозапентаєнової кислоти (C22:5 n-6) є присутнім у кількості біля 4.33% (a/a). Проміжну переестерифіковану сировину, яка мала склад, подібний до визначеного вище, піддали комплексоутворенню зі включенням сечовини. У типових втіленнях, кількість застосованої для комплексоутворення сечовини знаходиться у межах алгоритмічно визначеного діапазону. Отже, у іншому аспекті, передбачено покращений процес очищення риб’ячого жиру для отримання фармацевтичних композицій, які містять ПНЖК у формі вільної кислоти, особливо очищення риб’ячого жиру для отримання описаних тут фармацевтичних композицій. Покращення полягає у застосуванні проміжної сировини переестерифікованого риб’ячого жиру, яка містить етилові ефіри різних видів омега-3 та омега-6 ПНЖК у визначених відсоткових межах для операції комплексоутворення зі включенням сечовини, у якої застосована для комплексоутворення кількість сечовини знаходиться у межах, обчислених відповідно за (i) Формулою I(a) або (ii) відповідно за Формулою I(b) або (iii) відповідно за обома формулами I(a) та I(b) та з кількістю сечовини, встановленій у вигляді значення, що знаходиться у встановлених межах, включаючи результати за Формулою I(a) та I(b), як-то їх середні значення, з застосуванням наступних формул: [Сечовина] = F збагачення-ДГК * ( (ДГКмішень – ДГК-EEзавантаження)/ДГК-EEзавантаження)) (Ia) [Сечовина] = F збагачення -ЕПК * ((EPAмішень – EПК-EEзавантаження)/EПК-EEзавантаження)) (Ib). Значення ДГК мішені та ЕПК мішені вибрано на основі бажаної кінцевої композиції. Фактори збагачення (F збагачення-ДГК та F збагачення-EПК) можуть бути однаковими або різними. У типовому втіленні, F збагачення-ДГК та F збагачення-EПК можуть бути однаковими зі значенням біля 100/0.34 або біля 300. Застосовуючи алгоритмічно визначену кількість сечовини, комплексоутворення здійснювали згідно зі стандартними способами, див., наприклад, патенти США U.S. Pat. №№ 4,377,526; 5,106,542; 5,243,046; 5,679,809; 5,945,318; 6,528,669; 6,664,405; 7,541,480; 7,709,668; та 8,003,813, зміст яких включено сюди шляхом посилання. У зразковому втіленні, проміжну сировину змішують з розчином сечовини у етанолі та комплексоутворення відбувається при 60°C – 80°C, після чого суміш охолоджують, а потім фільтрують або піддають центрифугуванню для видалення комплексів сечовини. Етанол видаляють шляхом дистиляції та жирні кислоти потім промивають кілька разів водою. Після вилучення комплексів сечовини, естери ПНЖК, які не увійшли до складу комплексів гідролізують до вільних жирних кислот шляхом застосування стандартних способів. Потім композицію додатково очищують шляхом дистиляції або перед або після гідролізу та наприкінці додатково також застосовують ще одну або декілька наступних стандартних операцій, як-то очищення з застосуванням активованого вугілля, хроматографічне очищення, видалення розчинника, відбілювання, наприклад, відбілювання за допомогою глини та екстрагування надкритичними розчинниками. Також до композиції додають антиоксиданти, як-то BHA (бутилоксианізол) або α-токоферол. Приклади. Приклад 1: Комплексоутворення сечовини, потрібне для надійного отримання композицій омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти, які відповідають вимогам специфікації. Комплексоутворення зі включенням сечовини (cклатрація) є стандартною операцією, яку часто застосовують у процесі очищення риб’ячого жиру для видалення насичених та мононенасичених жирних кислот з довгими ланцюгами, забезпечуючи таким чином збагачення отриманої композиції бажаними омега-3 поліненасиченими жирними кислотами з довгими ланцюгами. Однак, незважаючи на довгий час застосування (див., наприклад, U.S. Pat. No. 4,377,526) та дослідження, призначені для опису ефектів різних фізико-хімічних параметрів процесу (див., наприклад, Hayes et al., "Triangular Phase Diagrams To Predict The Fractionation Of Free Fatty Acid Mixtures Via Urea Complex Formation," Separation Sci. Technol. 36(1):45–58 (2001) and Hayes, “Purification of free Fatty Acids via Urea Inclusion Compounds,” in Handbook of Functional Lipids (Taylor & Francis Group) (2005)), ступінь, до якого комплексоутворення сечовини веде до збагачення окремими видами поліненасичених жирних кислот з довгими ланцюгами, в тому числі видами омега-3 та омега-6 ПНЖК, залишається непередбаченим. Ця залишкова непередбаченість процедури комплексоутворення сечовини та можливість отримання внаслідок 25 UA 114615 C2 5 цього процесу неприйнятних рівнів етилкарбамату, які будуть вимагати застосування певної обов’язкової додаткової обробки, спочатку свідчило на користь виключення комплексоутворення сечовини з процесу очищення, який застосовують для промислового виробництва фармацевтично чистих композицій омега-3 ПНЖК у формі вільної кислоти, які задовольняють технічним умовам, наведеним у Таблиці 1 нижче. Таблиця 1 Початкові бажані технічні характеристики Параметр (всі види існують у формі вільної кислоти) ЕПК ДГК ЕПК+ДГК загальний вміст омега-3 жирних кислот арахідонова кислота насичені жирні кислоти мононенасичені жирні кислоти омега-6 жирні кислоти інші ненасичені жирні кислоти загальний відсоток невизначених речовин, вищий, ніж 0.1% Граничні значення 50.0-60.0% (за вагою) 15.0-25.0% (за вагою) 70.0-80.0% (за вагою) 80.0-90.0% (за вагою) не більш, ніж 4.5% (a/a) не більш, ніж 3.0% (a/a) не більш, ніж 5.0% (a/a) не більш, ніж 10.0% (a/a) не більш, ніж 5.0% (a/a) не більш, ніж 2.0% (a/a) "(за вагою)" – відсоток за вагою всіх жирних кислот у композиції. "(a/a)" -- відсоток за площиною всіх жирних кислот у композиції на газовій хроматограмі. 10 15 Проте, попередні зусилля з розробки процесу, вільного від застосування сечовини показали, подібний процес не в змозі забезпечити надійного промислового виробництва фармацевтичних композицій, які будуть задовольняти відповідним бажаним технічним умовам. У Таблиці 2 нижче наведені дані двох таких партій. Підкреслено значення, які знаходяться за межами прийнятного діапазону технічних характеристик. Таблиця 2 Партія 1 (без виморожування) параметр (всі види існують у формі вільної кислоти) ЕПК граничні значення 50.0-60.0% (за вагою) ДГК 15.0-25.0% (за вагою) ЕПК+ДГК 70.0-80.0% (за вагою) загальнийі вміст омега-3 жирних кислот арахідонова кислота 80.0-90.0% (за вагою) насичені жирні кислоти не більш, ніж 3.0% (a/a) мононенасичені жирні кислоти не більш, ніж 5.0% (a/a) омега-6 жирні кислоти не більш, ніж 10.0% (a/a) інші ненасичені жирні кислоти не більш, ніж 5.0% (a/a) загальний відсоток не більш, ніж 2.0% (a/a) (за вагою) не більш, ніж 4.5% (a/a) 26 49.0 19.6 68.3 78.0 2.8 1.9 6.6 4.2 2.7 5.4 (a/ a) 51 .5 20 .3 71 .8 81 .2 2. 8 2. 6 5. 1 5. 3 0. 3 5. Партія 2 (з виморожуванн ям) (за вагою) 49.8 19.6 69.4 79.3 (a/a ) 53. 0 20. 9 73. 9 83. 7 2.9 2.8 0.6 0.5 6.7 5.1 4.3 5.2 2.1 0.4 6.3 5.4 UA 114615 C2 Таблиця 2 Партія 1 (без виморожування) параметр (всі види існують у формі вільної кислоти) невизначених речовин, вищий, ніж 0.1% 5 10 15 20 25 30 35 граничні значення (за вагою) (a/ a) Партія 2 (з виморожуванн ям) (за вагою) (a/a ) 5 Відповідно, були здійснені пошуки застосування прийнятного процесу комплексоутворення сечовини та було знайдено, що жорсткий композиційний контроль видів ПНЖК, присутніх у проміжній сировині у формі етилового естеру, пов'язаний з застосуванням кількостей сечовини, які знаходяться у алгоритмічно встановлених межах може забезпечити надійне отримання фармацевтичних композицій, які відповідають умовам, наведеним у Таблиці 1 без появи перевищуючих прийнятні обмеження надлишкових рівнів етилкарбамату. Композиційні вимоги до проміжної сировини у формі етилового естеру наведені у Розділі 5.6.2 та у Прикладах 2 та 4. (див. Таблиці 3 - 6, 8 - 9). Було відкрито, що оптимальна кількість необхідної для застосування сечовини буде визначатися (i) згідно за Формулою I(a) або (ii) згідно за Формулою I(b) або (iii) згідно за Формулою I(a) та за Формулою I(b) з кількістю сечовини, встановленою, як значення, що знаходиться у межах (включно), заданих результатами за Формулою I(a) та I(b), як-то являти собою середнє значення двох результатів, де зазначені формули є наступними: [Сечовина] = F збагачення-DHA * ( (ДГКмішень – ДГК-EEзавантаження)/ДГК-EEзавантаження)) (Ia) [Сечовина] = F збагачення -EPA * ((EPAмішень – EПК-EEзавантаження)/EПК-EEзавантаження)) (Ib). Фактори збагачення (F збагачення-DHA та F збагачення-EPA) можуть бути однаковими або різними. Було виявлено, що типове значення, отримане при застосуванні описаних у Прикладах 2 та 4 партій проміжної сировини дорівнює приблизно 100/0.34 (тобто біля 300) для обох. Приклад 2: Композиційний аналіз чотирьох зразкових серійних партій, отриманих з застосуванням контрольованого комплексоутворення сечовини підтверджує дотриманість умов специфікації. Дослідники отримали чотири зразкові серійні партії поліненасичених жирних кислот у формі вільної кислоти. Проміжну сировину у формі етилового естеру піддали жорсткому композиційному контролю, який дозволяє застосування лише таких партій, у яких зазначені види поліненасичених жирних кислот знаходяться у межах визначеного діапазону. Кількості застосованої для комплексоутворення у промисловому масштабі сечовини спочатку визначали емпірично у лабораторних умовах з застосуванням маленької тестової партії проміжної сировини у формі етилового естеру та змінюючи концентрацію сечовини, тим самим змінюючи співвідношення жиру, сечовини та етанолу. Було підтверджено, що оптимальні концентрації, запропоновані шляхом подібних тестових визначень, знаходилися у межах, обумовлених алгоритмом, описаним у Прикладі 1 та вони були застосовані для виробництва у промислових масштабах. Композиція проміжної переестерифікованої сировини та кінцевої фармацевтичної композиції (" активний фармацевтичний інгредієнт " або " AФІ ") була визначена шляхом газової хроматографії та результати зведені у наведених нижче Таблицях 3 – 6. 27 UA 114615 C2 Таблиця 3 Види ПНЖК прийнятна назва лінолева кислота гаммаліноленова кислота αліноленова кислота мороктова кислота ейкозадієно ва кислота дигомогаммаліноленова кислота арахідонов а кислота (АК) ейкозатрієн ова кислота ейкозатетр аєнова кислота ейкозапент аєнова кислота (EПК) хенейкозап ентаєнова кислота докозапент аєнова кислота докозапент аєнова кислота (ДПК) докозагекса єнова кислота (ДГК) Проміжна сировина AФІ переестерифік овані етилові естери (% a/a) кінцева композиція вільної жирної кислоти (% a/a) 18:2 n-6 0.54 0.55 18:3 n-6 0.00 0.15 18:3 n-3 0.45 0.39 18:4 n-3 1.52 1.70 20:2 n-6 0.00 0.10 20:3 n-6 0.47 0.35 20:4 n-6 2.11 2.43 20:3 n-3 0.00 0.15 20:4 n-3 1.78 2.18 20:5 n-3 49.42 57.25 21:5 n-3 2.32 2.79 22:5 n-6 0.71 0.83 22:5 n-3 5.80 6.23 22:6 n-3 17.09 19.58 загальний % % ПНЖК Сукупні показники 99.41 82.77 98.43 96.30 тотожність 28