Комбінація (варіанти), що містить метотрексат та інгібітори дигідрооротатдегідрогенази (dhodh)

Реферат: Комбінація, яка включає (а) метотрексат та (б) інгібітор DHODH, що не має гепатотоксичності. UA 114388 C2 G 2 2 R G a 1 R H G N O M b R G G O 1 R 3 4 1 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У даному винаході пропонуються нові комбінації метотрексату й інгібіторів DHODH. Зазначені комбінації можна використовувати для лікування, профілактики або придушення захворювань і порушень, симптоми яких, як відомо, поліпшуються при лікуванні метотрексатом і/або при інгібуванні дигідрооротатдегідрогенази (DHODH), такі як аутоімунні захворювання, імунні й запальні захворювання, порушення, пов'язані з руйнуванням кісткової тканини, злоякісні новоутворення, порушення, пов'язані з ангіогенезом, вірусні захворювання й інфекційні захворювання. Передумови створення даного винаходу Метотрексат (MTX) являє собою антиметаболіт та імуномодулятор, що впливає на безліч внутрішньоклітинних шляхів метаболізму пурину. Він проявляє ефективність при зниженні інтенсивності ознак і симптомів ревматоїдного артриту (RA), а також при вповільненні або припиненні рентгенографічного ушкодження тканин. За рахунок своєї ефективності, простоти введення й відносно низької вартості у цей час MTX є пероральним лікарським засобом для лікування першої лінії більшості пацієнтів, що страждають від RA. Для пацієнтів, що характеризуються неповною відповідною реакцією на MTX, використовують комбінацію MTX та іншого базисного протиревматичного лікарського засобу (DMARD). Таким чином, комбіноване лікування MTX все більше часто застосовується у клінічній практиці. Лефлуномід являє собою приклад зазначеного DMARD. У вересні 1998 р. він був затверджений для лікування RA. Встановлено, що він знижує ознаки й симптоми захворювання, придушує структурні ушкодження (тобто рентгенівські ерозії й звуження щілини суглоба) і поліпшує фізичну функцію. Терифлуномід являє собою активний метаболіт лефлуноміду. Думають, що метотрексат впливає переважно на пуринові шляхи клітинного метаболізму, у той час як лефлуномід впливає на піримідинові шляхи. З урахуванням впливу обох лікарських засобів на різні внутрішньоклітинні шляхи комбінація лефлуноміду й метотрексату є перспективною для забезпечення біохімічного синергетичного ефекту. Дійсно, було встановлено, що комбінація обох агентів приводить до значного поліпшення клінічних симптомів (див., наприклад, Weinblatt M.E. та ін., "Pharmacokinetics, safety, and efficacy of combination treatment with methotrexate and leflunomide in patients with active rheumatoid arthritis", Arthritis Rheum, т. 42, № 7, сс. 1322-1328 (1999) і Kremer J.M. та ін., "Concomitant Leflunomide therapy in patients with active rheumatoid arthritis despite stable doses of methotrexate", Ann. Intern. Med., т. 137, сс. 726-733 (2002)). На жаль, обидва засоби, метотрексат і лефлуномід, характеризуються важкими побічними ефектами, наприклад, гепатотоксичністю. Метотрексат при тривалому застосуванні може викликати серйозні ушкодження печінки, такі як фіброз і цироз. Зростання рівнів печіночних ферментів часто спостерігають при лікуванні метотрексатом (MTX). Таким чином, важливо проводити регулярне й ретельне обстеження пацієнтів, що проходять курс лікування MTX, насамперед при комбінуванні MTX з іншими DMARD. Найбільше часто спостережувані побічні ефекти лефлуноміду включають діарею, диспепсію, висипання, випадання волосся, гіпертензію й підвищений рівень печіночних ферментів. З урахуванням можливої гепатотоксичності для всіх пацієнтів, що проходять курс лікування зазначеними лікарськими засобами, необхідно проводити регулярне обстеження, включаючи аналіз крові на рівень печіночних ферментів (функцію печінки). Лефлуномід не рекомендується використовувати для лікування пацієнтів із діагнозом гепатит В або С або зі значною печіночною недостатністю. Клінічні випробування свідчать про те, що число пацієнтів із підвищеним рівнем печіночних маркерів (за рівнем трансамінази) у групі, що проходять курс лікування комбінацією лефлуноміду й MTX, значно перевищує аналогічне число пацієнтів у групі, що проходять курс лікування MTX окремо. Інструкція зі застосування лефлуноміду включає попередження про небезпеку прийому лефлуноміду у комбінації з метотрексатом, тому що зазначене комбіноване лікування може привести до адитивної або навіть синергетичної гепатотоксичності. Механізм, за яким розвивається гепатотоксичність лефлуноміду, і насамперед його активного метаболіту терифлуноміду, невідомий, але припускають, що така гепатотоксичність пов'язана з активністю зазначеного лікарського засобу як інгібітор DHODH. Таким чином, було встановлено, що побічний ефект у вигляді гепатотоксичності прямо пов'язаний з механізмом дії інгібіторів DHODH, що й перешкоджає розвитку зазначеного класу сполук. Докладний опис даного винаходу У даному винаході зненацька, на відміну від загальної думки, було встановлено, що інгібування DHODH не є причиною ушкодження печінки, яке спостерігається при введенні лефлуноміду й що, насамперед, інгібітори DHODH є переважно придатними для введення у комбінації з метотрексатом. 1 UA 114388 C2 5 10 15 Відомо, що інгібування DHODH приведе до імунодепресантної й антипроліферативної дії. Отже, інгібітори DHODH можна використовувати в якості імунодепресантних і антипроліферативних агентів при лікуванні аутоімунних, запальних і проліферативних захворювань, таких як RA. У даному винаході зненацька було встановлено, що інгібування DHODH не пов'язане з гепатотоксичністю й, отже, інгібітори DHODH не мають гепатотоксичність і є надзвичайно перспективними при лікуванні зазначених захворювань, тому що їхня перевага полягає у сумісності з MTX, що є лікарським засобом першої лінії при лікуванні RA. У даному винаході пропонується спосіб оцінки гепатотоксичності in vivo на моделі миші, відповідно до якого досліджувані сполуки вводять внутрішньочеревинним способом для максимального впливу на печінку. На зазначеній моделі було встановлено, що терифлуномід, активний метаболіт лефлуноміду, викликає значне зростання рівнів трансаміназ і білірубіну у плазмі, у той час як інгібітори DHODH не приводять до підвищення рівнів всіх відомих печіночних маркерів у плазмі на одній і тій же моделі, і при цьому роблять протиартритну дію. Таким чином, у даному винаході пропонується комбінований продукт, який включає (а) метотрексат і (б) інгібітор DHODH, що насамперед не має гепатотоксичності. У кращому варіанті інгібітор DHODH являє собою інший інгібітор, ніж лефлуномід або його будь-який активний метаболіт. У найбільше кращому варіанті інгібітором DHODH (б) є сполука формули (I) G 2 2 R G a 1 R H G N O M b R G O 1 G 3 4 1 20 25 30 35 40 45 50 R де 1 c c одна з груп G означає атом азоту або групу CR , а інша означає групу CR , 2 d G означає атом азоту або групу CR , 1 R означає групу, вибрану з атома водню, атомів галогену, C1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, і C3-С8циклоалкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, 2 R означає групу, вибрану з атома водню, атомів галогену, гідроксигруп, C1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, C1-С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, і C3-С8циклоалкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, а b c R , R і R незалежно означають групи, вибрані з атома водню, атомів галогену, C1С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, і C1-С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, d R означає групу, вибрану з атома водню, атомів галогену, гідроксигруп, C1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, і C1-С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, і C3-С8циклоалкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, 3 4 одна з груп G і G означає атом азоту, а інша означає групу CH, M означає атом водню або фармацевтично прийнятний катіон, a b 2 за умови, що якщо принаймні одна з груп R і R означає атом водню, а G означає групу d d CR , то R означає групи, вибрані з C1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, і C3-С8циклоалкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісника, вибраних із атомів галогену й гідроксигруп, або її фармацевтичні прийнятні солі й N-оксиди. Термін "алкільна група", що використаний у даному контексті, означає необов'язково заміщений, з прямим або розгалуженим ланцюгом вуглеводневий радикал, що містить від 1 до 2 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 4 атомів вуглецю. Кращі замісники алкільних груп включають атоми галогену й гідроксигрупи, більше переважно атоми галогену. Приклади включають метил, етил, н-пропіл, ізопропіл, н-бутил, втор-бутил і трет-бутил. Термін "алкоксигрупа", що використаний у даному контексті, означає необов'язково заміщений, з прямим або розгалуженим ланцюгом кисневмісний радикал, що містить від 1 до 4 атомів вуглецю. Кращі замісники алкоксигруп включають атоми галогену й гідроксигрупи, більше переважно атоми галогену. Приклади включають метокси, етокси, н-пропокси, ізопропокси, н-бутокси, втор-бутокси й трет-бутоксигрупи. Термін "циклоалкільна група", що використаний у даному контексті, означає насичені карбоциклічні радикали й, якщо не зазначене інше, циклоалкіл звичайно містить від 3 до 8 атомів вуглецю. Приклади включають циклопропіл, циклобутил, циклопентил, циклогексил і циклогептил. Якщо циклоалкільний радиакал містить 2 або більше замісників, то вони є однаковими або різними. Кращі замісники циклоалкільних груп включають атоми галогену й гідроксигрупи, більше переважно атоми галогену. Термін "циклоалкоксигрупа", що використаний у даному контексті, означає насичені кисневмісні радикали й, якщо не зазначене інше, циклоалкокси звичайно містить від 3 до 8 атомів вуглецю. Приклади включають циклопропілокси, циклобутилокси, циклопентилокси, циклогексилокси й циклогептилоксигрупу. Якщо циклоалкоксирадикал містить 2 або більше замісників, то вони є однаковими або різними. Кращі замісники циклоалкоксигруп включають атоми галогену й гідроксигрупи, більше переважно атоми галогену. Як зазначено у даному контексті, деякі атоми, радикали, залишки, ланцюги або цикли у складі основної структури за даним винаходом є "необов'язково заміщеними". Це означає, що зазначені атоми, радикали, залишки, ланцюги або цикли можуть бути незаміщеними або заміщеними у будь-якому положенні одним або більше, наприклад, 1, 2, 3 або 4, замісниками, при цьому атоми водню, пов'язані з незаміщеними атомами, радикалами, залишками, ланцюгами або циклами, замінені на хімічно прийнятні атоми, радикали, залишки, ланцюги або цикли. Якщо є присутніми 2 або більше замісників, то вони можуть бути однаковими або різними. Термін "атом галогену", що використаний у даному контексті, означає атоми фтору, хлору або брому, найбільше переважно брому або фтору. M означає атом водню або фармацевтично прийнятний катіон. Якщо М означає фармацевтично прийнятний катіон, то сполука формули (I) може в іншому варіанті характеризуватися формулою (I*), як показано нижче. G2 R2 Ra G1 G1 H O N Rb G3 M+ O G4 R1 40 45 (I*) Термін "фармацевтично прийнятний катіон", що використаний у даному контексті, означає + + + неорганічні катіони, такі як катіони лужних металів (Li , Na , K ), катіони лужноземельних 2+ 2+ металів (Ca , Mg ) та інші фармацевтично прийнятні неорганічні катіони, відомі у даній області 2+ 3+ + техніки (Zn , Al ), і органічні катіони, наприклад іон амонію (тобто, NH 4 ) і заміщені іони амонію, 1+ 1 + 1 + 1 + 1 такі як NH3R , NH2(R )2 , NH(R )3 і N(R )4 , де кожний R незалежно вибраний з фенільної групи, бензильної групи, C1-С4алкільної і C3-С8циклоалкільної групи. + + + Приклади деяких придатних заміщених іонів амонію включають EtNH 3 , Et2NH2 , Et3NH , + + + + (C6H11)2NH2 , CH3CH2CH2CH2NH3 , PhCH2NH3 і (Ph)(PhCH2)NH2 . Приклад найбільше часто + використовуваного четвертинного іона амонію включає N(CH3)4 . + + Звичайно М означає атом водню або фармацевтично прийнятний катіон, вибраний з Li , Na , + 2+ 2+ K , Ca і Mg . У кращому варіанті М означає атом водню або фармацевтично прийнятний 3 UA 114388 C2 + 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 + + + катіон, вибраний з Li , Na і K . Більше переважно М означає атом водню або Li , і найбільше переважно М означає атом водню. Якщо М у сполуці формули (I) означає фармацевтично прийнятний катіон із зарядом більше +1, то повинні бути присутніми додаткові аніони для забезпечення електронейтральності сполуки. Протианіоном може бути аніон X , як зазначено нижче, або аніон, як показано у формулі (I*) вище. Термін "фармацевтично прийнятна сіль", що використаний у даному контексті, означає сіль фармацевтично прийнятної кислоти або основи. Фармацевтично прийнятні кислоти включають неорганічні кислоти, наприклад, хлористоводневу, сірчану, фосфорну, дифосфорну, бромистоводневу, йодистоводневу й азотну кислоти, і органічні кислоти, наприклад, лимонну, фумарову, малеїнову, яблучну, мигдальну, аскорбінову, щавлеву, бурштинову, винну, бензойну, оцтову, метансульфонову, етансульфонову, бензолсульфонову, циклогексилсульфамову (цикламову) або пара-толуолсульфонову кислоту. Фармацевтично прийнятні основи включають гідроксиди лужних металів (наприклад, натрію або калію) і лужноземельних металів (наприклад, кальцію або магнію), і органічні основи, наприклад, алкіламіни, арилалкіламіни й гетероциклічні аміни. Інші кращі солі за даним винаходом включають четвертинні амонієві сполуки, в яких еквівалент аніону (Х ) пов'язаний з позитивним зарядом на атомі азоту. X може бути аніоном різних мінеральних кислот, таким як хлорид, бромід, йодид, сульфат, нітрат, фосфат, або аніоном органічної кислоти, таким як ацетат, малеат, фумарат, цитрат, оксалат, сукцинат, тартрат, малат, манделат, трифторацетат, метансульфонат і пара-толуолсульфонат. X переважно є аніоном, що вибраний з хлориду, броміду, йодиду, сульфату, нітрату, ацетату, малеату, оксалату, сукцинату або трифторацетату. Більше переважно X означає хлорид, бромід, трифторацетат або метансульфонат. N-оксид, що використаний у даному контексті, одержують з третинних основних амінів або імінів, присутніх у молекулі, з використанням стандартного окислювача. 1 Звичайно R вибраний з групи, що включає водень, атоми брому й фтору, метил, етил, циклопропіл і циклобутил. 3 4 Звичайно G означає атом азоту, а G означає групу CH. 3 4 Звичайно G означає групу CH, а G означає атом азоту. 1 c Звичайно G означає групу CR . c Звичайно кожний R незалежно вибраний з групи, що включає водень, атоми фтору, атоми хлору й C1-С3алкільні групи. 2 d Звичайно G означає групу CR . d Звичайно R вибраний з групи, що включає гідроксигрупу, C1-С3алкоксигрупу, 2,2,2трифторетокси- і C3-С4циклоалкоксигрупу, переважно C1-С3алкоксигрупу, 2,2,2-трифторетокси- і C3-С4циклоалкоксигрупи. a Звичайно R вибраний з групи, що включає фтор, метил і трифторметоксигрупу. b Звичайно R вибраний з групи, що включає водень, атоми фтору й хлору. 2 Звичайно R вибраний з групи, що включає водень й атоми галогену, переважно водень і фтор. 1 c 2 d 2 Звичайно обидві групи G означають групи C(R ), G означає групу C(R ), переважно G a b означає групу, вибрану з C(OH), C(OMe) і C(OEt), R означає атом фтору, R вибраний з групи, 1 що включає водень і фтор, а R вибраний з групи, що включає водень, атоми брому й фтору, 1 2 метильну, етильну й циклопропільну групи. Переважно обидві групи G означають групи CH, G a b вибраний з C(OMe) і C(OEt), R означає атом фтору, R вибраний з групи, що включає атоми 1 водню й фтору, а R вибраний з групи, що включає водень, атоми брому й фтору, метильну, етильну й циклопропільну групи. c d 2 Переважно R означає атом водню, R означає гідроксигрупу або C1-С3алкоксигрупу, а R c d 2 означає атом водню, переважно R означає атом галогену, R означає C1-С3алкоксигруппу, а R означає атом водню. 3 4 b Переважно G означає атом азоту, G означає групу CH, а R означає атом фтору, і кращою 3 4 є сполука, де G означає групу CH, G означає атом азоту. 1 c 2 d a Більше переважно обидві групи G означають групи C(R ), G означає групу C(R ), R b 1 означає атом фтору, R вибраний з групи, що включає водень і фтор, а R вибраний з групи, що включає водень, атоми брому й фтору, метильну, етильну й циклопропільну групи. Переважно c d R означає водень, R вибраний з групи, що включає C1-С3алкоксигрупу і C32 3 С4циклоалкоксигрупу, а R означає водень. Особливо кращими є сполуки, де G означає атом 4 b 3 4 азоту, G означає групу CH, а R означає атом фтору, і сполуки, в яких G означає групу CH, G означає атом азоту. 4 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Переважно інгібітором DHODH є одна зі сполук, представлених нижче: 1. 2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2. 2-(3'-етокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 3. 2-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 4. 2-(3'-етокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5. 2-(3'-метокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 6. 2-(2,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 7. 2-(3'-етокси-2,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 8. 2-(2',3-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 9. 2-(2-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 10. 2-(3-хлор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 11. 2-(3-хлор-3'-етоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 12. 2-(3-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 13. 2-(3-хлор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 14. 2-(3'-(дифторметокси)-3-фторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 15. 2-(3'-циклобутокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 16. 2-(3-фтор-3'-(2,2,2-трифторетокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 17. 2-(3'-циклобутокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 18. 2-(3,5-дифтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 19. 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 20. 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 21. літієва сіль 3-(3'-етокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, 22. літієва сіль 3-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, 23. літієва сіль 3-(3'-метокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно) ізонікотинової кислоти, 24. літієва сіль 3-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, 25. 2-(3'-етоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 26. 2-(5-фтор-2-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 27. 2-(2',3-дифтор-5'-ізопропоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 28. 2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 29. 2-(3,5-дифтор-3'-гідроксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 30. 5-бром-2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 31. 5-бром-2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 32. 5-бром-2-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 33. 2-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 34. 5-циклопропіл-2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 35. 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 36. 2-(3'-етокси-5-фтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 37. 2-(5-фтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 38. 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 39. 5-циклопропіл-2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 40. 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-етилнікотинова кислота, 41. 5-бром-2-(3'-етокси-2,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 42. 5-циклопропіл-2-(3'-етокси-2,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 43. 2-(5-фтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 44. 5-циклопропіл-2-(5-фтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 45. 2-(2',3,5-трифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 46. 2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 47. 2-(3'-циклопропокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 48. 2-(3,5-дифтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 49. 5-циклопропіл-2-(2,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 50. 2-(3'-циклопропокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-циклопропілнікотинова кислота, 51. 5-хлор-2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 52. 5-циклопропіл-2-(3,5-дифтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно) нікотинова кислота, 53. 2-(2,3,5-трифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 54. 2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-циклопропілнікотинова кислота, 55. 2-(3,5-дифтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 56. 2-(3,5-дифтор-2-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 57. 2-(2'-хлор-3,5-дифтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 58. 5-хлор-2-(3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 59. 5-хлор-2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60. 2-(2,3,5,6-тетрафтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 61. 2-(3,5-дифтор-2'-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 62. 3-(3'-циклопропокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)ізонікотинова кислота, або їх фармацевтично прийнятні солі або N-оксиди. Більше переважно інгібітор DHODH вибраний з наступних сполук: 2-(3'-етокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-метокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, літієва сіль 3-(3'-етокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, літієва сіль 3-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, літієва сіль 3-(3'-метокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, 2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 5-бром-2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-етилнікотинова кислота, 2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-циклопропокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(2,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(3,5-дифтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-циклопропілнікотинова кислота, 2-(2,3,5,6-тетрафтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, або їх фармацевтично прийнятні солі або N-оксиди. Найбільше переважно інгібітором DHODH є 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 2-(3'-циклопропокси-3,5дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота або 5-циклопропіл-2-(3,5-дифтор-3'(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота або їх фармацевтично прийнятні солі або N-оксиди. Переважно активні інгредієнти (а) і (б) входять доскладу єдиної фармацевтичної композиції. У даному винаході пропонуються також комбінації, як описано вище, які додатково включають іншу сполуку (в), що вибрана з наступних: (1) моноклональні антитіла анти-TNF-α, такі як інфліксимаб, пегілований цертолізумаб, голімумаб, адалімумаб і продукт AME-527 фірми Applied Molecular Evolution, (2) антагоністи TNF-α, такі як етанерцепт, ленерцепт, онерцепт і пегсунерцепт, (3) інгібітори кальциневрину (PP-2B)/інгібітори експресії гена INS, такі як циклоспорин А, такролімус і продукт ISA-247 фірми Isotechnika, (4) антагоністи рецептора IL-1, такі як анакінра й продукт AMG-719 фірми Amgen, (5) моноклональні антитіла проти-CD20, такі як ритуксимаб, офатумумаб, окрелізумаб і продукт TRU-015 фірми Trubion Pharmaceuticals, (6) інгібітори p38, такі як продукт AMG-548 (фірми Amgen), продукт ARRY-797 (фірми Array Biopharma), хлорметіазолу едизилат, дорамапімод, продукт PS-540446 (фірми BMS), продукти SB-203580, SB-242235, SB-235699, SB-281832, SB-681323, SB-856553 (фірми GlaxoSmithKline), KC-706 (фірми Kemia), LEO-1606, LEO-15520 (фірми Leo), SC-80036, SD-06 (фірми Pfizer), RWJ67657 (фірми R.W. Johnson), RO-3201195, RO-4402257 (фірми Roche), AVE-9940 (фірми Aventis), SCIO-323, SCIO-469 (фірми Scios), TA-5493 (фірми Tanabe Seiyaku), VX-745 і VX-702 (фірми Vertex), (7) інгібітори активації NF-κB (NFKB), такі як сулфасалазин та ігуратимод, (8) інгібітор дигідрофолатредуктази (ДГФР), такий як аміноптерин і продукт CH-1504 фірми Chelsea, (9) інгібітори кінази Janus, такі як продукти CP-690, 550 фірми Pfizer і INCB-18424 фірми Incyte, (10) інгібітор MEK, такий як продукт ARRY-162 фірми Array, (11) агоністи рецептора сфінгозин-1-фосфату, такі як фінголімод (фірми Novartis), (12) інтерферони, що включають інтерферон β 1а, такий як авонекс фірми Biogen Idec, цинновекс фірми CinnaGen і ребіф фірми Merck Serono, та інтерферон β 1b, такий як бетаферон фірми Schering і бетасерон фірми Berlex, 6 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 (13) імуномодулятори, такі як продукт BG-12 (похідне фумарової кислоти) фірми Biogen Idec/Fumapharm AG, (14) інгібітори аденозинаміногідролази, такі як кладрибін фірми Merck Serono. У даному винаході пропонується також застосування (а) метотрексату й (б) інгібітора DHODH за даним винаходом для одержання лікарського засобу, призначеного для одночасного, роздільного або послідовного застосування при лікуванні патологічного стану або захворювання, інтенсивність симптомів якого зменшується при інгібуванні дигідрооротатдегідрогенази (DHODH). Захворювання або порушення, у розвитку яких інгібування DHODH відіграє велику роль, включають, але не обмежуючись тільки ними, аутоімунні захворювання, імунні й запальні захворювання, порушення, пов'язані з руйнуванням кісткової тканини, злоякісні новоутворення, порушення, пов'язані з ангіогенезом, вірусні захворювання й інфекційні захворювання. Аутоімунні захворювання, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, ревматоїдний артрит, псоріатичний артрит, системну червону вовчанку, розсіяний склероз, псоріаз, анкілозуючий спондилоартрит, гранулематоз Вегенера, юнацький ідіопатичний поліартрит, запальне захворювання кишечника, таке як виразковий коліт, хвороба Крона, синдром Рейтера, фіброміальгія й діабет типу 1. Імунні й запальні захворювання, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, астму, хронічну обструктивну хворобу легенів (COPD), респіраторний дистрес-синдром, гострий або хронічний панкреатит, хвороба "трансплантатпроти-хазяїна", хронічний саркоїдоз, відторгнення трансплантата, контактний дерматит, атопічний дерматит, алергійний риніт, алергійний кон'юнктивіт, синдром Бехчета, запальні стани очей, такі як кон'юнктивіт і увеїт. Порушення, пов'язані з руйнуванням кісткової тканини, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, остеопороз, остеоартрит і пов'язане з множинними мієломами ураження кісткової тканини. Злоякісні новоутворення, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, рак передміхурової залози, яєчників і мозку. Порушення, пов'язані з ангіогенезом, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, гемангіоми, очну неоваскуляризацію, дегенерацію жовтої плями або діабетичну ретинопатію. Вірусні захворювання, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, ВІЛ, гепатит і цитомегаловірусну інфекцію. Інфекційні захворювання, що піддаються профілактиці або лікуванню, включають, але не обмежуючись тільки ними, сепсис, септичний шок, ендотоксичний шок, грамнегативний сепсис, токсичний шоковий синдром, бактеріальну дизентерію й інші інфекції, викликані найпростішими, такі як малярія. Переважно патологічний стан абозахворювання вибране з ревматоїдного артриту, псоріатичного артриту, анкілозуючого спондилоартриту, розсіяного склерозу, гранулематозу Вегенера, системної червоної вовчанки, псоріазу й саркоїдозу. Більше переважно патологічний стан або захворювання вибране з ревматоїдного артриту, псоріатичного артриту або псоріазу. Найбільше кращим захворюванням є ревматоїдний артрит. У даному винаході пропонується також комбінація, що включає (а) інтерферони, такі як інтерферон β 1а й інтерферон β 1b, і (б) інгібітор DHODH за даним винаходом, переважно інгібітор DHODH формули (I). У даному винаході пропонується також застосування комбінації, що включає (а) інтерферони, такі як інтерферон β 1а й інтерферон β 1b, і (б) інгібітор DHODH за даним винаходом, переважно інгібітор DHODH формули (I), для одержання лікарського засобу, призначеного для одночасного, роздільного або послідовного використання при лікуванні розсіяного склерозу. У даному винаході пропонується також продукт, що включає (а) метотрексат і (б) інгібітор DHODH за даним винаходом, у вигляді комбінованої сполуки для одночасного, роздільного або послідовного застосування при лікуванні людини або тварини, що страждає від патологічного стану або захворювання або підданого зазначеним захворюванням, як описано вище. Зазначений продукт може необов'язково містити активну сполуку (в), як описано вище. У даному винаході пропонується також набір компонентів, що включає (б) інгібітор DHODH за даним винаходом разом із інструкцією зі застосування сполуки для одночасного, роздільного або послідовного введення у комбінації з (а) метотрексатом, для лікування людини або тварини, що страждає від патологічного стану або захворювання або підданого зазначеним 7 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 захворюванням, як описано вище. Зазначений набір може необов'язково містити активну сполуку (в), як описано вище. У даному винаході пропонується також упакування, що включає (б) інгібітор DHODH за даним винаходом й (а) метотрексат, призначене для одночасного, роздільного або послідовного застосування при лікуванні патологічного стану або захворювання, як описано вище. Зазначене впакування може необов'язково містити активну сполуку (в), як описано вище. У даному винаході пропонується також застосування (б) інгібітора DHODH за даним винаходом для одержання лікарського засобу для застосування у комбінації з (а) метотрексатом, для лікування патологічного стану або захворювання, як описано вище. У даному винаході пропонується також застосування (а) метотрексату для одержання лікарського засобу для застосування у комбінації з (б) інгібітором DHODH за даним винаходом, для лікування патологічного стану або захворювання, як описано вище. У даному винаході пропонується також застосування, як описано вище, відповідно до якого метотрексат (а) вводять у дозі від 0,015 до 3 мг/кг/тиждень і інгібітор DHODH (б) вводять у дозі від 0,03 до 30 мг/кг/день. Звичайно лікарський засіб призначений для лікування людини або тварини, що страждає від печіночної недостатності або від стану, що погіршується за рахунок гепатотоксичності, або підданого зазначеним станам. Більше докладно зазначена людина або тварина страждає від фіброзу печінки, гепатиту (гепатиту A-G), цирозу (звичайно викликаного алкоголізмом) або раку печінки. В одному варіанті даного винаходу комбінація, продукт, набір або впакування включають в якості єдиних активних компонентів (б) інгібітор DHODH за даним винаходом й (а) метотрексат. У даному винаході встановлено, що інгібітори DHODH знижують інтенсивність печіночних побічних ефектів. Таким чином, у даному винаході також пропонується застосування інгібітора DHODH за даним винаходом, як описано вище, для одержання лікарського засобу, призначеного для лікування або профілактики патологічного стану або захворювання, як описано вище, людини або тварини, що страждає від печіночної недостатності або від стану, що погіршується за рахунок гепатотоксичності, або підданих зазначеним станам. У даному винаході пропонується також спосіб лікування людини або тварини, що страждає від патологічного стану або захворювання, як описано вище, або підданого зазначеним станам, при цьому зазначений спосіб полягає в одночасному, роздільному або послідовному введенні зазначеній людині або тварині терапевтично ефективної кількості (а) метотрексату й (б) інгібітора DHODH, як описано вище. Переважно відповідно до зазначеного способу (а) метотрексат і (б) інгібітор DHODH є єдиними активними компонентами. У даному винаході пропонується також спосіб лікування людини або тварини, що страждає від патологічного стану або захворювання, як описано вище, або підданого зазначеним станам, причому людина або тварина страждає від печіночної недостатності або стану, що погіршується за рахунок гепатотоксичності, як описано вище, при цьому зазначений спосіб полягає у введенні зазначеній людині або тварині терапевтично ефективної кількості інгібітора DHODH, як описано вище. У даному винаході пропонується також комбінація, як описано вище, для лікування патологічних станів або захворювань, як описано вище. У даному винаході пропонується також інгібітор DHODH для лікування людини або тварини, що страждає від патологічного стану або захворювання, як описано вище, або підданого зазначеним станам, причому людина або тварина страждає від печіночної недостатності або стану, що погіршується за рахунок гепатотоксичності, як описано вище. Активні сполуки у складі комбінації за даним винаходом можна вводити будь-яким придатним способом залежно від природи захворювання, наприклад, перорально (у вигляді сиропів, таблеток, капсул, коржів, сполук із контрольованим вивільненням, швидкорозчинних сполук тощо), місцевим способом (у вигляді кремів, мазей, лосьйонів, назальних спреїв або аерозолів тощо), введенням ін'єкцій (підшкірно, черезшкірно, внутрішньом'язово, внутрішньовенно тощо) або інгаляцією (у вигляді сухого порошку, розчину, дисперсії тощо). Активні сполуки у складі комбінації за даним винаходом можна вводити у складі єдиної загальної фармацевтичної композиції або різних композицій, призначених для роздільного, одночасного, послідовного або почергового введення однаковим або різним способом. Комбінації за даним винаходом можна одержувати у вигляді стандартної лікарської форми будь-яким способом, відомим у фармацевтиці. Комбінації за даним винаходом, придатні для перорального введення, можна одержувати у вигляді окремих форм, таких як капсули, пакетики або таблетки, що містять певну кількість активного інгредієнта, у вигляді порошків або гранул, у вигляді розчинів або суспензій у водній 8 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 рідині або у неводній рідині, у вигляді рідкої емульсії масло-у-воді або вода-у-маслі. Активний інгредієнт можна також одержувати у вигляді болюсу, електуарія або пасти. Склади у вигляді сиропу звичайно складаються з суспензії або розчину сполуки або солі у рідкому носії, наприклад, етанолі, арахісовому маслі, оливковому маслі, гліцерині або воді, у суміші з ароматизатором або барвником. Для одержання комбінації у формі таблетки можна використовувати будь-який стандартний фармацевтичний носій для одержання твердих складів. Приклади таких носіїв включають стеарат магнію, тальк, желатин, аравійську камедь, стеаринову кислоту, крохмаль, лактозу й сахарозу. Таблетки можна одержувати пресуванням або формуванням, необов'язково у комбінації з одним або більше додаткових інгредієнтів. Таблетки можна пресувати у придатній машині для таблетування з використанням активного інгредієнта у поточній формі, такій як порошок або гранули, необов'язково у суміші зі сполучним, змазувальною речовиною, інертним розріджувачем, ПАР або диспергуючим агентом. Формування таблеток проводять на придатній машині з використанням порошкоподібної сполуки, змоченої інертним рідким розріджувачем. На таблетки можна необов'язково наносити покриття або насічки, а також таблетки одержувати у формі з уповільненим або контрольованим вивільненням активного інгредієнта. Комбінації у формі капсул можна одержувати будь-яким стандартним способом інкапсулювання, наприклад, з використанням згаданих вище носіїв у твердих желатинових капсулах. Для одержання композицій у формі м'яких желатинових капсул можна використовувати будь-який стандартний фармацевтичний носій для одержання дисперсій або суспензій, наприклад, водні камеді, целюлози, силікати або масла. Комбінації можуть являти собою суху порошкоподібну композицію для місцевої доставки у легені методом інгаляції. Сухі порошкоподібні композиції, наприклад, можуть являти собою капсули й картриджі, наприклад, з желатину, або блістери, наприклад, з ламінованої алюмінієвої фольги для застосування в інгаляторах або розпилювачах. Склади звичайно містять порошкоподібну суміш для інгаляції, що включає сполуку за даним винаходом й придатний порошкоподібний носій, такий як лактоза або крохмаль. Кращою є лактоза. Кожна капсула або картридж звичайно містить від 2 до 150 мкг кожного терапевтично ефективного інгредієнта. В іншому варіанті можна використовувати тільки активні інгредієнти без ексципієнтів. Упакування складів для інгаляції здійснюють з використанням інгаляторів, таких як Novolizer ® SD2FL або Genuair ®, описаних у заявках WO 97/000703, WO 03/000325 і WO 03/061742. Комбінація може являти собою форму для доставки назальним способом. Типові композиції для назальної доставки включають згадані вище склади для інгаляції й крім того включають композиції у неаерозольному впакуванні у формі розчину або суспензії в інертному носії, такому як вода, необов'язково у комбінації зі стандартними ексципієнтами, такими як буферні речовини, протимікробні агенти, тонізуючі агенти й модифікатори в'язкості, і зазначені комбінації можна вводити назальним способом. Типові шкірні й черезшкірні склади включають стандартний водний або неводний носій, наприклад, крем, мазь, лосьйон або пасту, у формі медичного пластиру, трансдермальної терапевтичної системи або мембрани. Переважно комбінація являє собою стандартну лікарську форму, наприклад, таблетку, капсулу або відміряну аерозольну дозу, які можна вводити пацієнтові у вигляді однократної дози. Кількість кожного активного інгредієнта, необхідного для забезпечення терапевтичного ефекту, залежить від його природи, способу введення, конкретного пацієнта й конкретного захворювання або порушення, які піддаються лікуванню. Звичайно всі активні агенти у складі комбінації вводять одночасно або з невеликими тимчасовими інтервалами. В іншому варіанті один або два активних агенти вводять ранком, а інший(і) пізніше вдень. У ще одному варіанті один або два активних агенти вводять два рази на день, а інший(і) тільки один раз на день, або одночасно в один із прийомів 2 рази на день, або роздільно. Переважно принаймні 2 і, більше переважно, всі активні агенти вводять одночасно. Переважно принаймні 2 і, більше переважно, всі активні агенти вводять у вигляді суміші. Переважно комбінацію лікарських засобів за даним винаходом вводять відповідно до наступного курсу лікування, що включає введення: (1) від 0,015 до 3 мг/кг/тиждень метотрексату, більше переважно від 0,07 до 0,7 мг/кг/тиждень, і найбільше переважно від 0,15 до 0,35 мг/кг/тиждень метотрексату й (2) від 0,03 до 30 мг/кг/день інгібітора DHODH, більше переважно від 0,07 до 14 мг/кг/день, і найбільше переважно від 0,15 до 0,3 мг/кг/день інгібітора DHODH. 9 UA 114388 C2 5 10 15 20 Приклади Приклад 1 Визначення інгібуючої активності у відношенні DHODH людини Активність DHODH та її інгібування визначали методом відновлення хромогену 2,6дигідрофеноліндофенолу (DCIP). Крім відновлення хромогену використовували окислювання субстрату/дигідрооротату, L-DHO) і відновлення спів-субстрату (коензим Q, КоQ), у такий спосіб ферментативна активність відповідала зниженню поглинання хромогену при 600 нм. Екстракти ферментів (8 мкл, приблизно 1,5 мкг білка людини) інкубували у 96-ямкових планшетах. Суміш для аналізу (200 мкл) містила 200 мкМ КоQD, 100 мкМ L-DHO, 120 мкМ DCIP у буферному розчині для аналізу (100 мМ HEPES pH 8,0, 150 мМ NaCl, 10 % гліцерин, 0,05 % тритон X-100) і 2 мкл досліджуваної сполуки. Сполуку розчиняли у ДМСО при концентрації 1 мМ і досліджували при різних концентраціях від 10 мМ до 1 пМ, потім розраховували IC50 (концентрація інгібітора, необхідна для 50 % інгібування). Реакцію ініціювали при додаванні ферменту й інкубували протягом 10 хв при кімнатній температурі, потім реєстрували відновлення DCIP за зниженням поглинання при 600 нм з використанням стандартного програмного забезпечення (Spectramax). Всі реакції проводили у подвійному повторі й будували графіки для визначення величин IC 50 для кожної сполуки з використанням програмного забезпечення ABase. У табл. 1 зазначені величини інгібуючої активності у відношенні DHODH людини деяких сполук за даним винаходом (список сполук наведений вище), що свідчать про те, що зазначені сполуки є ефективними інгібіторами DHODH. Таблиця 1 № сполуки 2 6 13 17 19 20 21 23 24 33 34 35 37 40 42 45 47 48 50 52 54 56 57 58 60 61 25 IC50 DHODH людини(нМ) 200 88 150 90 19 15 19 14 200 110 33 12 99 12 23 53 17 5 6 4 5 6 4 8 3 11 Приклад 2 Зниження гепатотоксичності Гостру гепатотоксичність оцінювали на моделі будинкових мишей (Swiss mice). Тваринам вводили однократну дозу носія або 100 мг/кг терифлуноміду або сполуки за даним винаходом (список сполук представлений вище) внутрішньочеревинним способом. Через 24 год. тварин умертвляли й визначали рівні печіночних маркерів AST (аспартатамінотрансфераза), ALT (аланінамінотрансфераза) і BIL (загальний білірубін) у плазмі. 30 10 UA 114388 C2 Таблиця 2 Рівні печіночних маркерів у плазмі миші після введення 100 мг/кг сполуки, 100 мг/кг терифлуноміду або носія (міжнародні одиниці (МЕ)) № сполуки ALT (МО/л) AST (МО/л) BIL (мг/дл) 1 99 84 0,03 2 35 57 0 3 52 83 0,01 4 70 108 0,05 19 60 92 0,05 20 73 95 0 23 35 72 0 47 66 91 0,14 48 44 95 0,08 57 60 109 0,06 Носій 55 78 0,05 Терифлуномід 423 542 0,5 5 10 15 20 25 Як зазначено у Таблиці 2, у мишей, що проходили курс лікування терифлуномідом, спостерігається значне зростання рівнів всіх трьох печіночних маркерів у порівнянні з мишами, яким вводили носій, що свідчить про значну гепатотоксичність, у той час як інгібітори DHODH за даним винаходом не викликають значного збільшення всіх зазначених параметрів. Приклад 3 Аналіз ефективності комбінованого продукту за даним винаходом на моделі індукованого ад'ювантом артриту Ефективність інгібіторів DHODH оцінювали у комбінації з метотрексатом (0,05 мг/кг/день) на моделі викликаного ад'ювантом артриту у пацюків із установленим діагнозом (протокол лікування). Повний ад'ювант Фрейнда вводили у подушечку лівої задньої лапи пацюка Wistar і через 10 днів вимірювали набрякання двох задніх лап із використанням плетизмометра. Пацюків із однаковим ступенем запалення обох лап рандомізували у групи лікування (7 тварин у групі). Сполуки вводили перорально 1 раз на день протягом 10 днів і об'єми лап визначали кожні 2 дні до дня 21. Таблиця 3 Дія сполуки А (3 мг/кг/день), метотрексату (0,05 мг/кг/день) та їхньої комбінації на придушення запалення лап у пацюків, хворих артритом Результати представлені у вигляді середньої величини придушення запалення, що визначали за площею під кривою (AUC) для об'ємів правої лапи у період між 10 і 21 днем після індукування артриту. Величину придушення у відсотках для кожної групи розраховували стосовно величин для пацюків, яким вводили носій. Результати усереднювали за двома незалежними експериментами, кожний з яких проводили на 5-6 тваринах у групі. Лікування Придушення запалення, % (AUC) Права лапа Сполука A (3 мг/кг) MTX (0,05 мг/кг) 35 37 Сполука A (3 мг/кг) + MTК (0,05 мг/кг) 30 41 55 Результати, зазначені у Таблиці 3, свідчать про те, що сполука А за даним винаходом придушує запалення, викликане артритом у пацюків. Крім того, спільне введення MTX і сполуки А приводить до підвищення ефективності (34 %) у порівнянні зі сполукою А окремо, що вказує на можливість введення сполуки пацієнтам, яким вводили метотрексат. Таблиця 4 Дія терифлуноміду (3 мг/кг/день), метотрексату (0,05 мг/кг/день) та їхньої комбінації на придушення запалення лап у пацюків, хворих артритом Результати представлені у вигляді середньої величини придушення запалення, що визначали за площею під кривою (AUC) для об'ємів правої лапи у період між 10 і 21 днем після індукування артриту. Величину придушення у відсотках для кожної групи розраховували 11 UA 114388 C2 стосовно величин для пацюків, яким вводили носій. Результати усереднювали за одним експериментом, який проводили на 6 тваринах. Придушення запалення, % (AUC) Права лапа Лікування Терифлуномід (3 мг/кг) MTX (0,05 мг/кг) 10 24 Терифлуномід (3 мг/кг) + MTК (0,05 мг/кг) 5 56 61 Спільне введення MTX і терифлуноміду приводить до підвищення ефективності (9 %) у порівнянні з введенням терифлуноміду окремо. Результати експериментів свідчать про те, що інгібітори DHODH за даним винаходом характеризуються протиартритним ефектом як окремо, так і у комбінації з MTX, аналогічно терифлуноміду, і значно знижують можливість розвитку гепатотоксичності, що вказує на перспективність комбінації за даним винаходом, тобто (а) MTX та (б) інгібітора DHODH, з погляду безпеки. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 15 1. Комбінація, яка включає (а) метотрексат та (б) інгібітор DHODH, що не має гепатотоксичності. 2. Комбінація, яка включає (а) метотрексат та (б) інгібітор DHODH, де інгібітор DHODH є іншим, ніж лефлуномід або будь-який його активний метаболіт. 3. Комбінація за п. 1 або п. 2, де інгібітором DHODH (б) є сполука формули (І) G R G Ra O M H 25 30 35 40 1 G 1 N Rb G O R 20 2 1 3 G 4 , де 1 с с одна з груп G означає атом азоту або групу CR , а інша означає групу CR , 2 d G означає атом азоту або групу CR , 1 R означає групу, вибрану з атома водню, атомів галогену, С 1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, і С3-С8циклоалкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, 2 R означає групу, вибрану з атома водню, атомів галогену, гідроксигруп, С 1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, С1С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, і С3-С8циклоалкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, a b c R , R і R незалежно означають групи, вибрані з атома водню, атомів галогену, С 1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, і С1-С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, d R означає групу, вибрану з атома водню, атомів галогену, гідроксигруп, С 1-С4алкільних груп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, і С1-С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, і С3-С8циклоалкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, 12 UA 114388 C2 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4 одна з груп G і G означає атом азоту, а інша означає групу СН, М означає атом водню або фармацевтично прийнятний катіон, a b 2 d за умови, що, якщо принаймні одна з груп R і R означає атом водню, a G означає групу CR , d то R означає групи, вибрані з С1-С4алкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, С 3-С8циклоалкоксигруп, які необов'язково можуть містити 1, 2 або 3 замісники, вибрані із атомів галогену й гідроксигруп, або її фармацевтичні прийнятні солі й N-оксиди. 4. Комбінація за п. 3, де кожна з груп С1-С4алкіл, С3-С8циклоалкіл, С1-С4алкоксигруп і С3С8циклоалкоксигруп необов'язково заміщена 1, 2 або 3 атомами галогену. 1 5. Комбінація за п. 3 або п. 4, де R вибраний з групи, що включає водень, атоми брому й фтору, метил, етил, циклопропіл і циклобутил. 3 4 6. Комбінація за будь-яким із пп. 3-5, де G означає атом азоту, a G означає групу СН. 3 4 7. Комбінація за будь-яким із пп. 3-5, де G означає групу СН, a G означає атом азоту. 1 с 8. Комбінація за будь-яким із пп. 3-7, де обидві групи G означають групу CR . c 9. Комбінація за будь-яким із пп. 3-8, де кожна група R незалежно вибрана з групи, що включає водень, фтор, хлор і С1-С3алкіл. 2 d 10. Комбінація за будь-яким із пп. 3-9, де G означає групу CR . d 11. Комбінація за п. 10, де R вибраний з групи, що включає гідроксигрупи, С 1-С3алкоксигрупи, 2,2,2-трифторетокси- і С3-С4циклоалкоксигрупи. d 12. Комбінація за п. 11, де R вибраний з групи, що включає С 1-С3алкоксигрупи, 2,2,2трифторетокси- і С3-С4циклоалкоксигрупи. a 13. Комбінація за будь-яким із пп. 3-12, де R вибраний з групи, що включає фтор, метил і трифторметоксигрупу. b 14. Комбінація за п. 13, де R вибраний з групи, що включає атоми водню, хлору й фтору. 2 15. Комбінація за будь-яким із пп. 3-14, де R вибраний з групи, що включає атоми водню й галогену. 2 16. Комбінація за п. 15, де R вибраний з групи, що включає атоми водню й фтору. 1 с 2 d a 17. Комбінацію за п. 3 або п. 4, де обидва G означають групи C(R ), G означає групу C(R ), R b 1 означає фтор, R вибраний з групи, що включає атоми водню й фтору, a R вибраний з групи, що включає водень, атоми брому й фтору, метил, етил і циклопропіл. 2 18. Комбінація за п. 17, де G вибраний з групи, що включає С(ОН), С(ОМе) і C(OEt). 1 2 19. Комбінація за п. 18, де обидва G означають групу СН, a G являє собою групу, вибрану з С(ОМе) і C(OEt). c d 20. Комбінація за п. 17, де R означає водень, R вибраний з групи, що включає С12 С3алкоксигрупу і С3-С4циклококсигрупу і R означає водень. d 21. Комбінація за п. 20, де R означає гідроксигрупу або С1-С3алкоксигрупу. d 22. Комбінація за п. 21, де R означає С1-С3алкоксигрупу. 3 4 b 23. Комбінація за п. 20 або п. 21, де G означає атом азоту, G означає групу СН і R означає фтор. 3 4 24. Комбінація за п. 20 або п. 21, де G означає групу СН, G означає атом азоту. 25. Комбінація за п. 3 або п. 4, де інгібітором DHODH є одна з наступних сполук: 2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-етокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-етокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-метокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-етокси-2,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2',3-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-хлор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-хлор-3'-етоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-хлор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-(дифторметокси)-3-фторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-циклобутокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-фтор-3'-(2,2,2-трифторетокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-циклобутокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 13 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, літієва сіль 3-(3'-етокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, літієва сіль 3-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, літієва сіль 3-(3'-метокси-3-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, літієва сіль 3-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)ізонікотинової кислоти, 2-(3'-етоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(5-фтор-2-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2',3-дифтор-5'-ізопропоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-гідроксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-бром-2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-бром-2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-бром-2-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3-фтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(3-фтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 2-(3'-етокси-5-фтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(5-фтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)-5-етилнікотинова кислота, 5-бром-2-(3'-етокси-2,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(3'-етокси-2,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(5-фтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)-5-метилнікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(5-фтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2',3,5-трифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-циклопропокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(2,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3'-циклопропокси-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-циклопропілнікотинова кислота, 5-хлор-2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-циклопропіл-2-(3,5-дифтор-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2,3,5-трифтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)-5-циклопропілнікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-3'-метокси-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-2-метил-3'-(трифторметокси)біфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2'-хлор-3,5-дифтор-2-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-хлор-2-(3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 5-хлор-2-(2'-хлор-3,5-дифторбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(2,3,5,6-тетрафтор-3'-метоксибіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 2-(3,5-дифтор-2'-метилбіфеніл-4-іламіно)нікотинова кислота, 3-(3'-циклопропокси-3-фторбіфеніл-4-іламіно)ізонікотинова кислота або їх фармацевтично прийнятні солі або N-оксиди. 26. Комбінація за п. 3 або п. 4, де інгібітором DHODH є 2-(3'-етокси-3,5-дифторбіфеніл-4іламіно)нікотинова кислота або її фармацевтично прийнятна сіль або N-оксид. 27. Комбінація за п. 3 або п. 4, де інгібітором DHODH є 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4іламіно)нікотинова кислота або її фармацевтично прийнятна сіль або N-оксид. 28. Комбінація за п. 3 або п. 4, де інгібітором DHODH є 2-(3'-циклопропокси-3,5-дифторбіфеніл4-іламіно)нікотинова кислота або її фармацевтично прийнятна сіль або N-оксид. 29. Комбінація за п. 3 або п. 4, де інгібітором DHODH є 2-(3,5-дифтор-3'-метоксибіфеніл-4іламіно)-5-метилнікотинова кислота або її фармацевтично прийнятна сіль або N-оксид. 30. Комбінація за будь-яким із попередніх пунктів, яка відрізняється тим, що активні інгредієнти (а) і (б) є компонентами єдиної фармацевтичної композиції. 31. Комбінація за будь-яким із попередніх пунктів, яка додатково включає іншу сполуку (в), вибрану з наступних: (1) моноклональні антитіла анти-TNF-, такі як інфліксимаб, пегильований цертолізумаб, голімумаб, адалімумаб і продукт АМЕ-527 фірми Applied Molecular Evolution, (2) антагоністи TNF-, такі як етанерцепт, ленерцепт, онерцепт і пегсунерцепт, 14 UA 114388 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 (3) інгібітори кальциневрину (РР-2В)/інгібітори експресії гена INS, такі як циклоспорин А, такролімус і продукт ISA-247 фірми Isotechnika, (4) антагоністи рецептора IL-1, такі як анакінра й продукт AMG-719 фірми Amgen, (5) моноклональні антитіла npoTH-CD20, такі як ритуксимаб, офатумумаб, окрелізумаб і продукт TRU-015 фірми Trubion Pharmaceuticals, (6) інгібітори р38, такі як продукт AMG-548 (фірми Amgen), продукт ARRY-797 (фірми Array Biopharma), хлорметіазолу едизилат, дорамапімод, продукт PS-540446 (фірми BMS), продукти SB-203580, SB-242235, SB-235699, SB-281832, SB-681323, SB-856553 (фірми GlaxoSmithKline), KC-706 (фірми Kemia), LEO-1606, LEO-15520 (фірми Leo), SC-80036, SD-06 (фірми Pfizer), RW.I67657 (фірми R.W. Johnson), RO-3201195, RO-4402257 (фірми Roche), AVE-9940 (фірми Aventis), SCIO-323, SCIO-469 (фірми Scios), TA-5493 (фірми Tanabe Seiyaku), VX-745 і VX-702 (фірми Vertex), (7) інгібітори активації NF-В (NFKB), такі як сулфасалазин та ігуратимод, (8) інший інгібітор дигідрофолатредуктази (ДГФР), такий як аміноптерин і продукт СН-1504 фірми Chelsea, (9) інгібітори кінази Janus (JAK), такі як продукти СР-690, 550 фірми Pfizer і INCB-18424 фірми Incyte, (10) інгібітор МЕК, такий як продукт ARRY-162 фірми Array, і (11) агоністи рецептора сфінгозин-1 фосфату, такі як фінголімод (фірми Novartis), (12) інтерферони, що включають інтерферон 1а, такий як авонекс фірми Biogcn Idee, циновекс фірми CinnaGen і ребіф фірми Merck Serono, та інтерферон 1b, такий як бетаферон фірми Schering і бетасерон фірми Berlex, (13) імуномодулятори, такі як продукт BG-12 (похідне фумарової кислоти) фірми Biogen Idec/Fumapharm AG, (14) інгібітори аденозинаміногідролази, такі як кладрибін фірми Merck Serono. 32. Застосування (а) метотрексату й (б) інгібітора DHODH за будь-яким із попередніх пп. 1-29 для одержання лікарського засобу, призначеного для одночасного, роздільного або послідовного застосування при лікуванні патологічного стану або захворювання, інтенсивність симптомів якого зменшується при інгібуванні дигідрооротатдегідрогенази. 33. Застосування за п. 32, де патологічний стан або захворювання вибрано з ревматоїдного артриту, псоріатичного артриту, анкілозуючого спондилоартриту, розсіяного склерозу, гранулематозу Вегенера, системного червоного вовчака, псоріазу й саркоїдозу. 34. Продукт, який включає (а) метотрексат і (б) інгібітор DHODH за будь-яким із пп. 1-29, як комбінований склад, призначений для одночасного, роздільного або послідовного застосування при лікуванні людини або тварини, що піддана або страждає від патологічного стану або захворювання, зазначеного у п. 32 або п. 33. 35. Продукт за п. 34, який додатково включає активну сполуку (в), визначену у п. 31. 36. Набір, який включає (б) інгібітор DHODH за будь-яким із пп. 1-29 разом із інструкцією з одночасного, роздільного або послідовного застосування у комбінації з (а) метотрексатом, призначений для лікування людини або тварини, що піддана або страждає від патологічного стану або захворювання, зазначеного у п. 32 або п. 33. 37. Набір за п. 36, який додатково включає активну сполуку (в), визначену у п. 31. 38. Упаковання, яке включає (б) інгібітор DHODH за будь-яким із пп. 1-29 і (а) метотрексат, для одночасного, роздільного або послідовного застосування, призначене для лікування патологічного стану або захворювання, визначеного у п. 32 або п. 33. 39. Упаковання за п. 38, яке додатково включає активну сполуку (в), визначену у п. 31. 40. Застосування (б) інгібітора DHODH за будь-яким із пп. 1-29 для одержання лікарського засобу, призначеного для застосування у комбінації з (а) метотрексатом для лікування патологічного стану або захворювання, визначеного у п. 32 або п. 33. 41. Застосування (а) метотрексату у комбінації з (б) інгібітором DHODH за будь-яким із пп. 1-29 для лікування патологічного стану або захворювання, визначеного у п. 32 або п. 33. 42. Застосування за п. 40 або п. 41, де метотрексат (а) призначений для введення у дозуванні, що включає введення від 0,015 до 3 мг/кг/тиждень метотрексату, та інгібітор DHODH (б) призначений для введення у дозуванні, що включає введення від 0,03 до 30 мг/кг/день інгібітора DHODH. 43. Застосування за будь-яким із пп. 32, 33 і 40-42, де лікарський засіб призначений для лікування людини або тварини, що страждає від ушкодження печінки або стану, який погіршується у зв'язку з гепатотоксичністю. 44. Застосування за п. 43, де зазначений стан, який погіршується у зв'язку з гепатотоксичністю, являє собою фіброз печінки, гепатит, цироз або рак печінки. 15 UA 114388 C2 5 10 15 20 45. Застосування інгібітора DHODH за будь-яким із пп. 1-29 для одержання лікарського засобу, призначеного для лікування людини або тварини, що піддана або страждає від патологічного стану або захворювання, зазначеного у п. 32 або п. 33, де людина або тварина піддана або страждає від ушкодження печінки або стану, який погіршується у зв'язку з гепатотоксичністю, як визначено у п. 43 або 44. 46. Спосіб лікування людини або тварини, що піддана або страждає від патологічного стану або захворювання, зазначеного у п. 32 або п. 33, який включає одночасне, роздільне або послідовне введення зазначеній людині або тварині (а) метогрексату й (б) інгібітора DHODH за будь-яким із пп. 1-29 у терапевтично ефективній кількості. 47. Спосіб лікування людини або тварини, що піддана або страждає від патологічного стану або захворювання, зазначеного у п. 32 або п. 33, причому людина або тварина піддана або страждає від ушкодження печінки або стану, який погіршується у зв'язку з гепатотоксичністю, як визначено у п. 43 або 44, який включає введення зазначеній людині або тварині інгібітора DHODH за будь-яким із пп. 1-29 у терапевтично ефективній кількості. 48. Комбінація за будь-яким із пп. 1-31, призначена для застосування при лікуванні патологічного стану або захворювання, визначеного у п. 32 або п. 33. 49. Інгібітор DHODH за будь-яким із пп. 1-29, призначений для лікування людини або тварини, що піддана або страждає від патологічного стану або захворювання, зазначеного у п. 32 або п. 33, причому людина або тварина піддана або страждає від ушкодження печінки або стану, який погіршується у зв'язку з гепатотоксичністю, як визначено у п. 43 або 44. Комп’ютерна верстка О. Гергіль Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 16