Спосіб ідентифікації ліпоєвої кислоти в біологічних середовищах організму
Номер патенту: 13722
Опубліковано: 17.04.2006
Автори: Ткаченко Вячеслав Георгійович, Шпуліна Ольга Олександрівна, Лук'янчук Віктор Дмитрович
Формула / Реферат
Спосіб ідентифікації ліпоєвої кислоти в біологічних середовищах організму, що включає екстракцію сироватки крові або гомогенату, центрифугування проб, хроматографію, який відрізняється тим, що сироватку крові або 20 % гомогенат тканин (на фізіологічному розчині) піддають екстракції еквівалентним об'ємом метанолу протягом 15 хвилин, потім проби центрифугують (1500 об./хв) протягом 5 хвилин, 0,1 мл надосадової рідини наносять у вигляді плями на хроматографічну пластинку, при цьому як розчин порівняння використовують 0,1 мл 0,5 % водного розчину субстанції ліпоєвої кислоти, який теж наносять на хроматографічну пластину, після цього пластини піддають хроматографії в системі розчинників (діоксан : ізопропанол : вода : аміак як 4:2:4:1), після хроматографії плями детектують у світлі ультрафіолетової лампи та елююють дистильованою водою, оптичну щільність отриманого розчину визначають спектрофотометрично проти дистильованої води при довжині хвилі 333 нм, концентрацію ліпоєвої кислоти в отриманому розчині розраховують за формулою:
C=195,80D-2,58,
де С - концентрація ліпоєвої кислоти (мкг/мл),
D - екстинкція.
Текст
Спосіб ідентифікації ліпоєвої кислоти в біологічних середовищах організму, що включає екстракцію сироватки крові або гомогенату, центрифугування проб, хроматографію, який відрізняється тим, що сироватку крові або 20% гомогенат тканин (на фізіологічному розчині) піддають екстракції еквівалентним об'ємом метанолу протягом 15 хвилин, потім проби центрифугують (1500об./хв) протягом 5 хвилин, 0,1мл надосадової 3 13722 4 ультрафіолетової лампи та елююють дистильоваДля зручності обчислень за калібрувальним ною водою. Оптичну щільність отриманого розчину графіком методом найменших квадратів була розвизначають спектрофотометрично проти дистирахована формула: льованої води при довжині хвилі 333нм. C=195,80D-2,58, При зміні співвідношення в системі розчинниде С - концентрація ліпоєвої кислоти (мкг/мл), ків не відбувається достатній розподіл між ліпоєD - екстинкція. вою кислотою та високомолекулярними біологічПриклад 1 ними домішками. До погіршення екстракції також Експериментальне дослідження запропоновапризводить зміна співвідношень між біологічним ного способу проводили на 8 білих нелінійних щусубстратом та метанолом. рах обох статей масою 200-250г. Через 20 хвилин Запропонований спосіб відрізняється наступпісля перорального введення ліпоєвої кислоти в ними перевагами: дозі 100мг/кг її концентрація, що визначалася за 1) швидкість проведення аналізу; допомогою запропонованого способу, у сироватці 2) малі затрати часу для підготовки проб, крови склала 47,99±1,47мкг/мл, а в тканині ясен 3) простота апаратури, що використовується, 16,14±0,84мкг/мл. 4) дешевина методу, Таким чином, заявлено новий, експресний, то5) висока надійність способу. чний й чутливий спосіб кількісного визначення ліРозрахунок концентрації ліпоєвої кислоти за поєвої кислоти в біологічних середовищах організапропонованим способом проводиться за допозму, який може знайти застосування в хімікомогою калібрувального графіку (див. фігуру). фармацевтичній промисловості, медицині, фарЗалежність концентрації ліпоєвої кислоти мацевтичному та токсикологічному аналізі. Література: (мкг/мл) від екстинкції ( =333нм). 1. Teichert J., Preiss R. Determination of lipoic Отримана залежність повною мірою підкоряacid in human plasma by high-perfomance liquid ється закону Бугера-Ламберта-Бера, про що свідchromatography with electrochemical detection //J. чить її лінійність, а також високий коефіцієнт кореChromatogr. В Biomed. Appl. -1995. -Vol.672(2). -P. ляції (0,996) і низьке значення середньоквадрати277-281. чного відхилення (3,308мгк/мл). Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for determining content of lipoic acid in biological medium
Автори англійськоюLukianchuk Viktor Dmytrovych, Shpulina Olha Oleksandrivna, Tkachenko Viacheslav Heorhiiovych
Назва патенту російськоюСпособ определения содержания липоевой кислоты в биологической среде
Автори російськоюЛукьянчук Виктор Дмитриевич, Шпулина Ольга Александровна, Ткаченко Вячеслав Георгиевич
МПК / Мітки
МПК: G01N 33/52, G01N 30/52, C07D 339/00
Мітки: спосіб, організму, біологічних, кислоти, ідентифікації, ліпоєвої, середовищах
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/2-13722-sposib-identifikaci-lipoehvo-kisloti-v-biologichnikh-seredovishhakh-organizmu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб ідентифікації ліпоєвої кислоти в біологічних середовищах організму</a>
Попередній патент: Спосіб хімічної обробки яєць курей
Наступний патент: Сівалка точного висіву “водолій”
Випадковий патент: Спосіб лікування хронічного генералізованого пародонтиту і ступеня тяжкості у жінок при стані, пов'язаному з дефіцитом естрогенів