Штам bacillus subtilis (кмиэв-39) для одержання вірусоспецифічних білків вірусу діареї великої рогатої худоби

Штам Bacillus Subtilis (КМИЭВ-39) для одержання вірусоспецифічних білків вірусу діареї великої рогатої худоби. (19) (21) u200610644 (22) 09.10.2006 (24) 10.10.2007 (72) КРАСОЧКО ПЄТР АЛЬБІНОВІЧ, КРАСОЧКО ІРІНА АЛЕКСАНДРОВН А, ВОЛОСЯНКО ОЛЕНА ВІКТОРІВН А, UA, ЄРЄМІЯ НІКОЛАЙ ГЕОРГІЄВІЧ 3 26673 сироватками проти ВД. Постановку реакції здійснювали макрометодом у полістиролових панелях в обсязі 0,2мол. Як стандартні сироватки використані моноспецифічні сироватки з набору діагностикумів ВД (виробництво Приволзької біофабрики, Росія), набору діагностикумів для Риф-зондів ВД (виробництво Інституту експериментальної й клінічної ветеринарної медицини УААН) (табл. 1). Підтвердження наявності антигенів ВД в бактеріях підтверджували в ІФА з тест-системою для виявлення антигенів ВД в біологічному матеріалі [виробництво НПО «Нарвак», Росія]. У таблиці 1 представлені результати постановки РА 11 штамів бацил з моноспецифічними сироватками проти інфекційного ринотрахеїту (ІРТ) і ВД. Отримані дані свідчать, що бактерії Вас. Subtilis БГУ 53 Б, Вас. Subtilis (КМИЭВ-39) і Bac.antracoides показали високу агглютинабельність до ВД. Підтвердженням специфічності даного явища з'явилася постановка імуноферментного аналізу зі стандартними діагностичними наборами для виявлення антигенів ВД в біологічному матеріалі. Дослідження проводилися в умовах діагностичної лабораторії Білоруського державного ветеринарного центра. У таблиці 2 представлені результати постановки імуно-ферментний аналіз (ІФА) при виявлення антигенів ВД в бактеріях. Таким чином, за результатами ІФА, антигени ВД встановлені в штамі Вас.Subtilis КМИЭВ-39. Приклад 3. Для підтвердження наявності в структурі генома бацил ділянок РНК ВД використали ПЦР із праймерами, гомологичными для ділянки гена ВД. Дослідження, проведені з використанням ПЦР показали, що в штамі Вас.Subtilis КМИЭВ-39 є ділянки РНК, комплементарні ВД Фіг. При дослідженні для контролю використали ряд штамів Bacillus 100b(НИИП), Bacillus 200а (НИИП), Bacillus Білий НИИЭВ-2, Bacillus Subtilis Білий НИИЭВ, Bacillus Subtilis ВВИ-1, Bacillus alvei ВВИ - 1. Джерела інформації 1. Каталог культур микроорганизмов института биохимии и физиологии микроорганизмов РАН и Всероссийской коллекции микроорганизмов. Пущино - Москва, 1992. - С.33. 2. Жидков С.А. Вирусная диарея - болезнь слизистых оболочек крупного рогатого скота (характеристика возбудителя, диагностика и специфическая профилактика): Автореф.дис. ... дра вет. наук: 16.00.03 / Всер. ин-т экс. ветеринарии. М, 1994. - 45с. 4 6 7 8 9 10 11 №№ п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Bac.alvei ВВИ-Т Вас. antracoides Вас. Subtilis 945 (НИИП) Bacillus 100b (НИИП) Bacillus 200а (НИИП) Bac.alvei (КМИЭВ-11) Штам Вас. Subtilis БГУ 53 Б Вас. Subtilis КМИЭВ-39 Вас. Subtilis БелНИИЭВ-2 Вас. Subtilis БГУ-2 Bac.alvei B-3 Bac.alvei ВВИ-1T Bac.antracoides Вас.Subtilis 945 (НИИП) Bacillus 100b (НИИП) Bacillus 200a (НИИП) Bac.alvei (КМИЭВ-11) Таблиця 1 №№ п/п 1 2 3 4 5 Штам Вас. Subtilis БГУ 53 Б Вас. Subtilis КМИЭВ- 33 Вас. Subtilis БелНИИЭВ-2 Вас. Subtilis БГУ-2 Bac.alvei B-3 Антисироватка до ВД (Iog2) 4,0 5,0 3,0 2,0 2,0