Спосіб створення анаеробних умов для культивування анаеробних бактерій

Спосіб створення анаеробних умов для культивування анаеробних бактерій шляхом генерації водню, який відрізняється тим, що водень генерують методом електролізу води та порційно накопичують і зберігають безпосередньо в спеціальному модулі, з якого водень при потребі подають у контейнер для культивування анаеробів з каталізатором. (19) (21) u200705932 (22) 29.05.2007 (24) 26.11.2007 (72) ДАНИЛЕЙЧЕНКО ВАЛЕРІЙ ВАСИЛЬОВИЧ, UA, ФЕДЕЧКО ЙОСИП МИХАЙЛОВИЧ, UA, ГАРБУЗОВ АНТОН ОЛЕКСАНДРОВИЧ, UA (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМ. ДАНИЛА ГАЛИЦЬКОГО, UA (56) 3 27970 4 летючих токсичних продуктів, наприклад AsH. В of clinically significant anaerobes. - J. Clin. Microbiol. спеціальному модулі діє система зворотного - 1997. - vol.35. - p.558-562. зв'язку: при накопиченні потрібного об'єму водню 3. Downes, J., J. Aranki, A., and R. Freter.// Use генерація автоматично припиняється. of anaerobic glove boxes for cultivation of strictly Спосіб здійснюють таким чином. У спеціальній anaerobic bacteria. - Am. J. Clin. Nutr. - 1972. камері модуля водень генерують шляхом vol.25. - p.1329-1334. електролізу води. Після накопичення потрібного 4. URL http://www.himedialabs.ru/anaer/. об'єму, який визначається об'ємом камери, генерація водню припиняється. У цій же камері водень зберігають. При потребі водень подають у через трубку у контейнер для культивування анаеробів, який містить каталізатор. Для запобігання вибуху каталізатор знаходиться в спеціальному контейнері, що виготовлений з тонкої мідної сітки. Перед початком роботи перевіряють придатність каталізатора, скерувавши на нього струмінь водню - придатний до роботи каталізатор швидко починає нагріватися. Водень окислюється на каталізаторі та створює анаеробні умови для культивування анаеробних бактерій. Ефективність створення анаеробних умов перевіряли за допомогою комерційних смужок Anaer Indicator (виробництво фірми BioMerieux, Франція), принцип дії яких полягає у знебарвленні метиленового синього в безкисневій атмосфері. В контейнер для культивування анаеробів помістили смужку Anaer Indicator, що має голубий колір в атмосферних умовах, та каталізатор, попередньо перевіривши його придатність. Контейнер заповнили воднем з модуля, стінки контейнера покрились водяною парою, що свідчило про те, що відбулось окислення водню. Через 2 години спостерігали знебарвлення смужки Anaer Indicator. Через 24, 48 та 72 години смужка була білого кольору. Після відкриття контейнера смужка знову набула голубого кольору. Також ефективність створення анаеробних умов перевіряли біологічним методом - визначали наявність росту облігатних анаеробів Bacteroides fragilis в атмосфері, що була створена запропонованим способом. На чашку Петрі з агаром Шедлера, що містить гемін та вітамін К, засіяли культуру Bacteroides fragilis. В контейнер для культивування анаеробів помістили засіяну чашку Петрі та каталізатор, попередньо перевіривши його придатність. Контейнер заповнили воднем з модуля, стінки контейнера покрились водяною парою, що свідчило про те, що відбулось окислення водню. Контейнер помістили в термостат на 48 годин. Через 48 годин відкрили контейнер і на агарі Шедлера спостерігали ріст бактерій у вигляді колоній, що морфологічно нагадують Bacteroides fragilis. З культурою провели тест на аеротолерантність - засіяли на агар Шедлера з геміном та вітаміном К, посів помістили в термостат в аеробних умовах. Через 24 та 48 годин росту бактерій не спостерігалось. Це дозволило стверджувати, що запропонований спосіб створив анаеробні умови для культивування анаеробних бактерій. Джерела інформації: 1. URL http://bivax.com.ua/bivaxn/news/1999/202/2-02-3.pdf 2. Delaney, M.L., and А.В. Onderdonk. // Evaluation of the AnaeroPack system for the growth