Набір гібридом-продуцентів моноклональних антитіл до igм людини, придатних для використання у імуноферментних тест-системах

Набір гібридом-продуцентів моноклональних антитіл до IgM людини, придатних для використання у імуноферментних тест-системах, 2 для со краснухи в скла діагност хламідіо для сор хламідіо для сорб 3 28626 4 виключення тріпанового синього. Їх змішували з центрифугування при 3000об/хв. протягом 5 мієломними клітинами у співвідношенні 2:1 і хвилин асцит зберігали в замороженому стані. центрифугували при 1000об/хв протягом 12хв у Літературні посилання: пробірці ємністю 50мл. Середовище майже 1. Shao Z., Xu D., Li J. et a]. Detection of antiповністю видаляли, а клітинний осад старанно HAV antibody with dot immunoglobulin filtration розбивали, постукуючи пробіркою по столу assay// World J. Gastroenterol. - 2003. - Vol.9. ламінарного боксу. Потім у суспензію клітин P.1508-1511. вносили 1мл 40% розчину ПЕГ з 5% ДМСО. 2. Ramskill S., Senior P., Barlow P. et al. Enzyme Суміш клітин витримували в середовищі з ПЕГ linked immunosorbent assay (ELISA) for 5хв при кімнатній температурі і центрифугували cytomegalovirus antibody in donor plasma// J. Clinic. при 1000об/хв 2хв. Потім суспензію повільно Pathol. - 1988. - Vol.41. - P.1233-1235. розводили середовищем DMEM без сироватки до 3. Ніколаєнко І.В. Отримання та порівняльний об’єму 50мл. До суспензії додавали 3мл ETC. аналіз гібридом - продуцентів моноклональних Клітини після зливання осаджували при 1000об/хв антитіл, що диференціюють вакцинні та вірулентні 15хв. Надосад відсмоктували, а осад обережно поліовіруси І, II та III типів: Автореф. дис. ... канд. ресуспендували у повному ростовому середовищі мед. наук. - Київ, 1999. - 18с. DMEM з 15% ETC і 50мкг/мл гентаміцину. 4. Широбоков В.П., Ніколаєнко І.В., Копаниця Концентрацію клітин доводили до (1-2)х106/мл і Л.В. та ін. Панель моноклональних антитіл для вносили в 96-лункові планшети по 100мкл на внутрішньотипової диференціації поліовірусів II лунку. типу// Мікробіол. журн. - 1997. - №6. - С.27-35. Приклад 2. Зберігання гібридом у рідкому 5. Goding J. Monoclonal antibodies. Principles азоті. and practice. - San Diego: Acedemic press, 1996. Для зберігання гібридом-продуцентів 492p. використовували кріосередовище, що містить 5% ДМСО, 50% ETC та 45% DMEM. В одну ампулу вносили від 105 до 2х106 клітин, які суспендували в 1мл кріосередовища, шляхом змивання моношару з 1-2 лунок 24-лункового планшету. Потім ампули поміщали в контейнер із теплоізоляційного матеріалу і повільно охолоджували до мінус 70°С. На другу добу ампули переносили в резервуар з рідким азотом. Таким чином, кріоконсервацію проводили по двоетапній схемі. Приклад 3. Клонування гібридом. Гібридоми клонували методом лімітувальних розведень [5]. Суть його полягає у поступовому розведенні клітинної суспензії, поки концентрація не досягне однієї або менше клітин на лунку. Клонування проводили на 96-лункових плашках, на які попередньо вносили фідер із перитонеальних макрофагів по 100мкл на лунку. Із суспензії гібридом відбирали об’єм від 1 до 10мкл, у залежності від вихідної концентрації клітин, і розводили до 3мл повним ростовим середовищем. Розносили по 100мкл на 1/4 частину плашки. Потім ще тричі повторювали розведення до заповнення всієї плашки. Таким чином, сумарний об’єм середовища в лунках становив 200мкл. У результаті отримували чотири різні концентрації клітин. У якомусь із розведень обов’язково росли ізольовані клони, які після тестування, пересаджували або знову клонували. Приклад 4. Одержання асцитичної рідини. Для накопичення значної кількості МКАТ гібридоми культивували у черевних порожнинах мишей. Для цього за 10-14 днів до ін’єкції клітин мишам вводили внутрішньочеревно по 0,5мл пристану. Мінеральне масло слугувало сильним стимулятором асцитоутворення. Потім вводили від 2x106 до 107 гібридом в 1мл середовища. Через 58 днів у мишей починала накопичуватися рідина в черевній порожнині. Її відбирали шляхом проколювання черевної стінки товстою голкою. З однієї миші за кілька разів вдавалося отримати від 5 до 10мл асцитичної рідини. Після