Спосіб виявлення helicobakter pylori у біосубстраті

Спосіб виявлення Helicobacter pylori у біосубстраті, який включає вміщення субстрату в інкубаційне середовище, що складається з сечовини, індикатору, буферного розчину, та його експозицію у середовищі до 24 годин, який відрізняється тим, що середовище попередньо розводять у 20-25 разів дистильованою водою, експозицію біосубстрату у середовищі здійснюють при 37°С оцінюють результат за змінами кольору середовища після експозиції. (19) (21) 98041894 (22) 14.04.1998 (24) 15.12.2000 (33) UA (46) 15.12.2000, Бюл. № 7, 2000 р. (72) Гайдар Юрій Адольфович, Мосійчук Лідія Миколаївна, Філіпова Олександра Юр'ївна (73) УКРАЇНСЬКИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ ІНСТИТУТ ГАСТРОЕНТЕРОЛОГІЇ 30681 вової оболонки шлунка, вносять у кожну лунку по 0,5 мл середовища. Потім у лунки з середовищем занурюють досліджувані біоптати слизової оболонки шлунка або краю виразки. Сусідні лунки із середовищем є контрольними, Дослідні та контрольні лунки мікропланшету накривають липкою прозорою стрічкою і мікропланшет поміщують у термостат при t-37°С. Результат оцінюють через 30 хвилин, одну, три і 24 години. Перехід кольору середовища від жовтогарячого до рожевого свідчить про наявність у біоптаті HP. Спосіб виявлення HP, використано в умовах лабораторії патоморфології та діагностичного відділу УкрНДІ гастроентерології при дослідженні 20 хворих на виразкову хворобу дванадцятипалої кишни. Біоптати сливової оболонки шлунка та дванадцятипалої кишки, що взято під час фіброгастродуоденоскопії досліджували заявленим способом з використанням індикаторного середовища, розведеного у 20 разів та концентрованого (прототип). У 17 хворих виявлена уреазна активність біоптатів, яка свідчить про наявність HP. Однак, оцінку зміни кольору середовища візуально зробити було значно легше при використанні середовища у розведенні. У 3-х хворих уреазна активність не виявлена. У тих самих 17 хворих при мікроскопії були виявлені HP у мазках-відбитках досліджуваних біоптатів та забарвлених азур-ІІ-еозином. Таким чином, спосіб, забезпечує високу точність, дозволяє простіше визначити зміни кольору середовища. Крім того, при його використанні скорочується витрата реактивів, вменшуються витрати на дослідження. Джерела інформації. 1. Аруин Л.Н. и др. - Архив патологи. 1988. N 2. - С. 13-18. 2. Григорьев П.Я. и др. - Tep. Apxив. 1989. N 2. - С. 142. 3. Warren I.R. - Lanоet, 1983. - Р. 1273. 4. Старостин Б.Д., Петрушак Д.В. - Клин. мед.1989. - N 8. - С. 50-52. 5. Lamonliotta H., Cayla R., Daskalopulos. B кн. Неlісоbасtеr pylori, Byk Gulden, 1998. - Р. 1-16. Поставлене завдання, згідно предмету винаходу, досягається тим, що у способі, що включає розміщення досліджуваного біосубстрату в індикаторному середовищі та експозицію до 24 годин, середовища розводять у 20-25 разів, а експонують при 37 градусах по Цельсію. При співставленні ознак прототипу та способу, що пропонується виявлені загальні ознаки: розміщення досліджуваного біосубстрату у індикаторному середовищі, який містить мочовину, індикатор-забарвник, буферний розчин та консервант; експозицію біосубстрату в індикаторному середовищі здійснюють до 24 годин. Відмінними ознаками є: індикаторне середовищу перед використанням розводять у 20-25 разів; експозицію біосубстрату у середовищі виконують при 37°С. Сполучення відомих та відмінних ознак, що характеризують даний спосіб, не виявлено у відомій техніці, а сутність способу явно не витікає з відомого рівня техніки. Таким чином, даний спосіб відповідає критеріям патентоспроможності "новизна" і "винахідницький рівень". Спосіб може бути використано в охороні здоров'я - він промислово виконуваний. Спосіб виявлення HP у біосубстратах здійснюють таким чином. Попередньо готують індикаторне середовище такого складу: мочовина 10,0 г; феноловий червоний 0,5% р-н - 50,0 мл; однозаміщена натрієва сіль фосфорної кислоти NaH2PО4HО2 – 0,218 г; двохзаміщена натрієва сіль фосфорної кислоти Nа2НРО4 - 0,51 г; азид натрію або мертіолят - 100 мг; дистильована вода 450 мл. Для приготування середовища спочатку розчинюють солі натрію і мочовнну у 450 мл дистильованої води, потім додають розчин фенолового червоного і рН доводять до 6,0. Отримане середовище може зберігатися довгий час. Щоб отримати робоче середовище беруть певний об'єм цього середовища, та розводять у 20-25 разів. Наприклад, беруть 1,0 мл концентрованого середовища і добавляють 19,0 або 24,0 мл дистильованої води. Перед дослідженням робочим середовищем заповнюють по 2 лунки мікропланшету на кожний досліджуваний біосубстрат, наприклад, біоптат сли __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 2