Розріджувач сперми бугаїв

УКРАЇНА ( 1 9 ) U A (11) 4347 (із, U (5i)7A61D19/00,A61K35/20,A61K35/54 МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ ДЕРЖАВНИЙ ДЕПАРТАМЕНТ ІНТЕЛЕКТУАЛЬНОЇ ВЛАСНОСТІ ОПИС ДО ДЕКЛАРАЦІЙНОГО ПАТЕНТУ НА КОРИСНУ МОДЕЛЬ видається під відповідальність власника патенту (54, РОЗРІДЖУВАЧ СПЕРМИ БУГАЇВ (21)20040403143 (22,27.04.2004 (24,17 01.2005 (46,17 01.2005, Бюл. № 1, 2005 р. (72, Буркат Валерій Петрович, Романов Леонід Максимович, Бойко Олена Володимирівна (73, ІНСТИТУТ РОЗВЕДЕННЯ І ГЕНЕТИКИ ТВАРИН УКРАЇНСЬКОЇ АКАДЕМІЇ АГРАРНИХ НАУК (57, Розріджувач для розбавлення і заморожування сперми бугаїв у вигляді гранул, який включає лактозу, яєчний жовток, гліцерин і дистильовану воду, який відрізняється тим, що в розріджувач додатково вносять пролактин при наступному співвідношенні інгредієнтів, вагових частин (г)1 лактоза 11-12 пролактин 0,012-0,025 яєчний жовток 5-6 гліцерин 24-30 вода дистильована 100. Корисна модель відноситься до сільського господарства, безпосередньо до штучного осіменіння великої рогатої худоби, і може бути використаний на станціях штучного осіменіння сільськогосподарських тварин Відомий розріджувач для розбавлення і заморожування сперми бугая у формі гранул, до складу якого входять такі речовини [1]Лактоза 11,5г Яєчний жовток 20 мл Гліцерин 5 мл Вода дистильована 100 мл Прототипом корисної моделі служить середовище, в якому розріджується сперма і заморожується у вигляді гранул, такого складу [2], вагових відсотків (г): Натрій лимоннокислий 1,8 Глюкоза 5,4 Трилон-Б 0,2 [3-глюкуронідаза 2,0 Вода до 100 мл До недоліків прототипу слід віднести те, що введення у склад середовища р-глюкуронщази для стимуляції" рухливості сперміїв економічно не доцільно із-за високої' вартості ферменту, при цьому введення Р-глюкуронідази в стандартне середовище безпосередньо перед осіменінням тварин значно ускладнює роботу техніків на пунктах штучного осіменіння В основу корисно"! моделі поставлено задачу розробки розріджувача сперми бугаїв для підвищення рухливості та життєздатності їх сперміїв. Поставлена задача вирішується тим, що в первинний розріджувач сперми вводиться пролактин - препарат, який являє собою білий люфілізований порошок, легко розчинний у дистильованій воді, що випускається фармацевтичною промисловістю і використовується в медицині та ветеринари' [3]. Запропонований розріджувач готують наступним чином: на аналітичних вагах зважують згідно рецепту лактозу і пролактин, вносять в чисту, стерильну хімічну колбу і додають необхідний об'єм прокип'яченої дистильованої води. Колбу нагрівають на водяній бані при 90°С, помішуючи скляною паличкою до повного розчинення компонентів. Потім розчин охолоджують до 30-3 5°С і вносять жовток курячого яйця і гліцерин. Для розрідження і заморожування використовують сперму бугаїв з рухливістю сперміїв не менше 8 балів і концентрацією статевих клітин - не менше 0,8 млрд/мл. Підготовлений розріджувач тримають у термостаті або водяній бані з температурою ЗО-35°С і в теплому вигляді використовують для розріджування Строк використання розріджувача не повинен перевищувати 3-4 години з моменту його приготування. Для отримання розріджувача були підготовлені 4 суміші інгредієнтів, кожна з яких вміщувала: лактози - 11 5г, яєчного жовтка - 20 мл, гліцерину 5 мл і відрізнялись одна від одної' вмістом пролактину - в кожній суміші відповідно 0,0062; 0,0122, 0,025 та 0,0372 г. Розбавлення сперми у вказаних розріджувачах і заморожування сперми у вигляді гранул у рідкому азоті проводили згідно "Инструкции по организации и технологии работы станций и предприятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных", Москва, 1981 Розморожування сперми і перевірку рухливості сперміїв проводили зараз же після заморожування, через 1 добу, через 7-Ю діб та через 20 діб зберігання у замороженому стані. t CO З 4347 Приклад ефективної дії розріджувача наведерухливості сперміїв, но у таблиці 1 на прикладі результатів перевірки Таблиця 1 Рухливість сперміїв після розморожування гранул при введенні в склад середовища для заморожування пролактину баліР Кличка та інвентарний номер бугая Рухливість нативної сперми Без пролактину 6 8 7 6 6 6 6 8 6 62±0 32 3 4 4 4 3 4 4 4 3 75±0.16 Барій-861 Граніт-763 Бантик-7 Гамлет-881 Бут-831 Лор-781 Горностай-805 Емір-58 В середньому Р< Розріджувач 3 пропзктином (0,012г) Л 3 пролактином (0 006 г] 3 3 4 3 3 4 4 4 3,62±0,20 5 5 5 Д 5 5 5 4 75*0.16 0 01 3 про л актином (0,025 г| 4 5 5 5 3 6 5 5 4,75±0,16 0 01 3 пролактином (0,037 г| 3 4 3 3 3 4 3 4 3,3 7± 0,17 - 24-30, вода дистильована -100. Розріджену сперму охолоджували до 5°С протягом 5 годин (еквілібрація), а потім заморожували у вигляді гранул об'ємом 0,2 мл на фторопластовіи пластині у парах рідкого азоту. Заморожену сперму зберігали у рідкому азоті при -196°С. Визначали також показник виживаності сперміі'в згідно правилам "Инструкции..." (табл. 2). Як видно з таблиці, показник виживаності сперміїв при додаванні в розріджувач иполактина збільшується на 12.6-38,9%. Наведені дані свідчать, що строк зберігання сперми у запропонованому розріджувачі не викликав зниження рухливості сперміїв, а, навпаки, при введенні в склад розбавника пролактину відбувається стимуляція рухливості сперміїв При цьому активація відбувається при добавленні пролактина у середовище в КІЛЬКОСТІ 0,012-0,025 г Більша та менша кількість препарату неефективна. Оптимальний склад запропонованого розріджувача вагових частин (г). лактоза - 11-12, пролактин - 0,012-0,025, яєчний жовток - 5-6, гліцерин Таблиця 2 Визначення показників виживаності сперміїв (дані 8 ДОСЛІДІВ розріджування сперми кожного бугая) Дата визначення Час визначення М t 24 02 12-00 0 12 25 02 12-00 24 24 а at а at а Без пролактину 3 пролактином % збільшення 6 7 72 84 5 7 120 168 4 Є 27 02 28 02 12-00 12-00 48 72 24 24 Сту інь прозріджування сперми а! а at а at їарій-861 96 4 4 144 96 144 6 144 6 216 Без пролактину 3 пролактином 8 8 96 96 8 8 192 192 7 8 168 192 Без пролактину 3 пролактином % збільшення 8 9 96 108 8 9 192 216 8 8 Bvr-831 7 168 8 192 % збільшення Гран г-763 192 144 6 192 7 168 Використання запропонованого розріджувача не впливало негативно на осіменіння тварин. Принципова перевага використання розріджувача сперми забезпечує в порівнянні з існуючими наступні переваги1 1) збереження високого рівня рухливості спермії'в, придатних для штучного осіменіння; 2) збільшення життєздатності сперміїв, 3) зниження собівартості осіменіння; 4) спрощення роботи техніка по штучному осіменінню. Економічна ефективність запропонованого Комп'ютерна верстка А. Крулевский •3 03 12-00 96 36 •4 03 12-00 144 36 D6 03 2-00 168 24 07 03 12-00 192 48 а at а at а at 4 5 144 180 4 5 96 120 2 3 96 144 6 7 216 252 2 3 72 108 2 2 48 48 6 7 216 252 6 7 216 252 5 6 120 144 864 1200 38,9 960 1180 12 6 30 4 144 192 1320 1524 15,4 способу складається із збільшення рухливості сперміїв бугаїв на 26,7%, виживаності статевих клітин - на 12,6-38,9%, що дозволяє значно знизити собівартість осіменіння Джерела інформації' 1 Инструкция по организации и технологии работы станций и предприятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных М., Колос, 1981.-160 с 2 Авторское свидетельство СССР № 487640, А61Д 7/02, 1974.3. Мозгов И Е Фармакология. - М.; Агропромиздат, 1985. - С.248. Підписне Тираж 37 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул УрицькогО, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м Київ - 42, 01601