Спосіб діагностики раку позапечінкових жовчних проток

Спосіб діагностики раку позапечінкових жовчних проток, який включає ультразвукове дослідження гепатопанкреатобіліарної зони, який відрізняється тим, що при виявленні новоутворення додатково досліджують протокову жовч на концентрацію інтерлейкшу-6 і при концентрації штерлейкіну-6 в межах 38,8-139,8 пг/мл діагностують рак Винахід відноситься до медицини, а саме до діагностики, і може бути використаний для лікування хворих на рак позапечінкових жовчних проток ВІДОМІ способи діагностики раку позапечінкових жовчних проток, які включають гістологічне дослідження клітин крові, бюпсійного матеріалу [1] Недоліком цих способів є складність, травматичність, низька точність Найбільш близьким аналогом є спосіб діагностики раку позапечінкових жовчних проток, який включає ультразвукове дослідження гепатопанкреатобіліарної зони [2] Недоліком цього способу є низька точність діагностики (18% візуалізацм пухлини) Завданням винаходу є розробка такого способу діагностики раку позапечінкових жовчних проток, який за рахунок додаткового імуноферме нтного аналізу проб протокової жовчі забезпечував би підвищення точності діагностики Поставлене завдання вирішується тим, що в способі діагностики раку позапечінкових жовчних проток, який включає ультразвукове дослідження гепатопанкреатобіліарної зони, згідно винаходу, при виявленні новоутворення додатково досліджують протокову жовч і при концентрації інтерлейкшу-6 в межах 38,8 - 139,8пг/мл діагностують рак позапечінкових жовчних проток Дослідження протокової жовчі дозволяє виявити інтерлейкш-6 в безпосередньо біля джерела, що і забезпечує більш високу точність діагностики Вказані у формулі винаходу концентрації штерлейкшу-6 визначені при КЛІНІЧНИХ дослідженнях 13 хворих Дані зведені в таблицю Таблиця № п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 РІВНІ інтерлейкіну-6 у протоковіи жовчі хворих на механічну жовтяницю Концентрація ІЛ-6, № іст хвороби Діагноз пг/мл 577 / 99 60,0 Рак супрадуоденального відділу холедоху 496 / 99 59,3 Рак дистального відділу холедоху 1726/99 118,8 Рак дистального відділу холедоху 1742/99 59,5 Рак проксимального відділу холедоху 1829/99 56,2 Пухлина Кляцкіна (воріт) 1857/99 139,8 Рак великого дуодентального соска 2133/99 38,8 Рак центрального відділу холедоху 4498 / 99 0 Хронічний холецистит 3735 / 99 3,3 Холедохолітіаз 3835 / 99 233,0 Гнійний холангіт Стриктура геп ато хол є доху 00 (О о 47068 11 12 13 318/01 4148/00 1616/00 Продовження таблиц Хронічний калькульозний холецистит Стриктура геп ато хол є доху Гнійний холангіт Холедохолітіаз 6,9 443,9 4,8 Спосіб виконують наступним чином Забирають протокову жовч шляхом черезшкірної черезпечінкової пункції жовчних проток під контролем ультразвукового дослідження Жовч в КІЛЬКОСТІ 0,5мл центрифугують при 1000об/хв протягом 15хв Надосад знімають і визначають у ньому вміст інтерлейкшу-6 імуноферментним методом, в якому використовують пероксидазу хрону як індикаторний фермент (набори фірми "Протеїновий контур", Санкт-Петербург) Вносять в лунки мікро планшета по 200мкл стандартів інтерлейкшу-6 і досліджувану жовч Добавляють по 50мкл моноклональних антитіл бютінілірованих Інкубують протягом 1год при 37°С при безперервному струшуванні Тричі промивають буфером (по ЗООмкл на одну лунку) Вносять по 200мкл розчину кон'югату стрептавідша з пероксидазою хрону Інкубують ЗОхв при температурі 37°С при безперервному струшуванні Тричі промивають буфером (по ЗООмкл на одну лунку) і ДВІЧІ промивають дистильованою водою Висушують Вносять у всі лунки по 200мкл розчину субстрату з барвником Інкубують стрипи 15хв при кімнатній температурі в захищеному від прямих сонячних променів МІСЦІ при безперервному струшуванні Зупиняють реакцію додаванням 50мкл розчину сірної кислоти в кожну лунку Враховують результат, вимірюючи концентрацію штерлейкіну-6 з використанням імуноферментного аналізатора "STAT FAX303" фірми "AWARENESS TECHNOLOGY NC", США При значенні інтерлейкшу-6 в межах 38,8 139,8пг/мл встановлювали діагноз рак позапечшкових жовчних проток Приклад 1 Хворий Ч , 65 років, (№ іст хвороби 577/99) поступив у ІХтаТ АМН України зі скаргами на жовтяницю, шкірну сверблячку, втрату у вазі 10кг Хворіє 3 тижні При лабораторному дослідженні крові, загальний білірубін - 402,3ммоль/л При ультразвуковому дослідженні виявлені непрямі ознаки пухлини воріт печінки ("зморщений" жовчний міхур, розширення внутрішньо печінкових жовчних проток з "обривом" просвіту на рівні розгалуження дольових проток печінки) Для дослідження на наявність інтерлейкшу-6 взято протокову жовч Діагноз підтверджено КІЛЬКІСТЮ інтерлейкшу-6 (60,0пт/мл), що свідчить про раковий генез жовтяниці, що було підтверджено під час операції Приклад 2 Хворий В , 58 років, (№ іст хвороби 4148/99) поступив у ІХтаТ АМН України з явищами поступаючої обтураційної жовтяниці внаслідок ятрогенного пошкодження загальної печінкової протоки під час холецистектомм 20 діб тому назад При лабораторному дослідженні крові загальний білірубін - 287,1 ммоль/л При ультразвуковому дослідженні відмічається помірне розширення внутрішньо печінкових жовчних проток з "обривом" просвіту на 1 см нижче розгалуження дольових проток печінки У протоковій жовчі концентрація інтерлейкшу-6 склала 443,9пг/мл Встановлено відсутність раку , що і було підтверджено під час операції По запропонованому способу проведена диференційна діагностика механічної жовтяниці у 13 хворих При цьому у 7 хворих встановлено діагноз рак позапечінкових жовчних проток, який в подальшому був підтверджений під час операції і гістологічне В той же час, при обстеженні 13 хворих за способом-аналогом встановлено діагноз рак у 9 хворих, серед яких у 2-х в подальшому діагноз не був підтверджений Таким чином, використання запропонованого способу дозволить підвищити точність до операційної діагностики раку позапечінкових жовчних проток Джерела інформації 1 Кормак Д Гистология Пер с англ - М Мир, 1983 -Т4-245С 2 Шерлок Ш , Дули Дж Заболевания печени и желчных путей Практич рук Пер с англ /Под ред 3 Г Апросиной, П А Мухина - М Геотар Медицина, 1999 - 846с - найближчий аналог ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71