Спосіб ідентифікації іридовірусу комара

Формула / Реферат | Подібні патенти | МПК / Мітки | Додаткова інформація | Код посилання

Номер патенту: 52258

Опубліковано: 25.08.2010

Автори: Рудь Юрій Петрович, Бучацький Леонід Петрович

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб ідентифікації іридовірусу комара, що включає синтез специфічних олігонуклеотидних праймерів і ампліфікацію ДНК методом полімеразної ланцюгової реакції з використанням олігонуклеотидних праймерів, аналіз розміру продуктів полімеразної ланцюгової реакції, який відрізняється тим, що синтезовані праймери мають нуклеотидні послідовності:

5'-CAAGTCGGGCAGCGGCAAGTC-3' та

5'-GGGAGCCTTGTAGTAAAAGACGC-3'.

Текст

Спосіб ідентифікації іридовірусу комара, що включає синтез специфічних олігонуклеотидних 3 52258 гель-електрофорезу в 1% агарозі. З цією метою після реакції вміст мікропробірки змішують з барвником та переносять в лунки агарозного гелю. По закінченні електрофорезу гель фарбують бромистим етидієм 2-3хв та спостерігють результати під ультрафіолетовим трансілюмінатором. Наявність специфічного фрагменту ДНК іридовірусу комара та його розміру оцінюють в присутності маркера визначеної довжини. Приклад. Для досліджень використовували очищений вірусний препарат. В стандартні мікропробірки для ПЛР вносили 2мкл буфера для ДНКполімерази, 2мкл суміші дезоксинуклеотидтрифосфатів (2mM кожного), 2,5мкл 25mM розчину Mgda, 0,5мкл ДНК-полімерази (1,25од/мкл), специфічні олігонуклеотиди (10рМ кожного), 2мкл екстрагованої ДНК та доводили суміш до загального об'єму 20мкл стерильною деіонізованою водою. Ці пробірки поміщали в термоциклер та проводили реакцію ампліфікації. Параметри реакції включали попередній цикл денатурації ДНК при 94°С 3хв з Комп’ютерна верстка М. Ломалова 4 наступними 35 циклами ампліфікації при температурі денатурацію ДНК 94°С 1хв, віджигу специфічних праймерів при 60 С 1хв та елонгації фрагментів ДНК іридовіруса комара при 72°С 1хв. Оцінку результатів реакції проводили методом гельелектрофорезу в 1% агарозі. Як показали результати проведених досліджень, застосування підібраних специфічних олігонуклеотидних праймерів дозволяє проводити ідентифікацію іридовірусу комара методом полімеразної ланцюгової реакції. Розмір ампліфікону, як і передбачалось, становив близько 450 пар нуклеотидів. Таким чином, спосіб, що пропонується, дозволяє проводити високочутливу ідентифікацію іридовірусу комара. [1] - Journal of Virology, 1971, Vol. 8, №6, p. 900909. [2] - Virology Journal, 2007, Vol. 4, №11, p. 1-17. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for identification of mosquito iridovirus

Автори англійською

Buchatskyi Leonid Petrovych, Rud Yurii Petrovych

Назва патенту російською

Способ идентификации иридовируса комара

Автори російською

Бучацкий Леонид Петрович, Рудь Юрий Петрович

МПК / Мітки

МПК: C12Q 1/68

Мітки: комара, іридовірусу, спосіб, ідентифікації

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/2-52258-sposib-identifikaci-iridovirusu-komara.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб ідентифікації іридовірусу комара</a>

Подібні патенти