Трансформаційна суміш для трансформації cacl2-компетентних клітин е.coli плазмідною днк
Номер патенту: 67253
Опубліковано: 10.02.2012
Автори: Кунах Віктор Анатолійович, Перерва Тамара Петрівна, Мирюта Ганна Юріївна
Формула / Реферат
Трансформаційна суміш для трансформації СаСl2-компетентних клітин Е.соlі плазмідною ДНК, що включає компетентні клітини Е.соlі НВ101, в стерильному розчині 50 мМ СаСl2 + 10 мМ Tris-HCl, рН 8,0 та ДНК плазміди pBR322, яка відрізняється тим, що додатково містить нівалін (галантаміну гідробромід) при наступному співвідношенні інгредієнтів на 100 мкл розчину:
компетентних клітин Е.соlі НВ101 в стерильному розчині 50 мМ СаСl2 (хлористого кальцію) + 10 мМ Tris-HCl (Tris - (Hydroxymethyl) - Aminomethane), рН 8,0-94;
ДНК плазміди pBR322-1,0;
нівалін (галантаміну гідробромід) - 1,0-5,0;
стерильний розчин 50 мМ СаСl2 + 10 мМ Tris-HCl, рН 8,0 - до 100.
Текст
Трансформаційна суміш для трансформації СаСl2-компетентних клітин Е.соlі плазмідною ДНК, що включає компетентні клітини Е.соlі НВ101, в стерильному розчині 50 мМ СаСl2 + 10 мМ Tris 3 67253 У пропонованому способі використовували 0,1% розчин ніваліну (галантаміну гідробромід) виробництва фірми "Sopharma" (Болгарія). Пропонована корисна модель ілюструється наступним прикладом. Трансформація клітин E.coli HB101 ДНК плазміди pBR322. Компетентні клітини E.coli HB101 отримували за допомогою стерильного розчину 5 мМ СаСl2 + 1мМ Tris-HCl,pH 8,0; залишали на ніч при 0 °C (льодяна баня). Наступної доби готували трансформаційну суміш: 94 мкл компетентних клітин + 1,0 мкл (0,1 мкг) ДНК, додавали розчин ніваліну в 4 кількостях 1,2,5 та 5 мкл (що дорівнює 1,2,5 та 5 % об/об) та стерильний розчин 50 мМ СаСl2 + 10 мМ Tris-HCl, pH 8,0 до кінцевого об'єму 100 мкл, витримували 30 хв. в льодяній бані, піддавали суміш температурному шоку (42 °C 1,5хв.), витримували ще 10 хв. в льодяній бані, додавали 4 об'єми рідкого живильного середовища, витримували 1 год. при 37 °C і висівали на селективне тверде живильне середовище з додаванням відповідних антибіотиків, а саме, ампіциліну та тетрацикліну, та отримували вихід трансформантів від 148 % до 250 %. Таблиця 1 Вплив різних концентрацій ніваліну (галантаміну гідробромід) на вихід трансформантів Концентрація ніваліну % (об/об) 1,0 2,5 5,0 № досліду 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Вихід трансформантів у досліді порівняно з контролем, % 141 156 147 175 149 156 208 278 264 Середнє 148±4,4** 160±7,8** 250±21,4** Примітка: ** - Р
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюTransformation mixture for transformation of cacl2-competent e.coli cells with plasmid dna
Автори англійськоюMyriuta Hanna Yuriivna, Pererva Tamara Petrivna, Kunakh Viktor Anatoliovych
Назва патенту російськоюТрансформационная смесь для трансформации cacl2-компетентных клеток е.coli плазмидной днк
Автори російськоюМирюта Анна Юрьевна, Перерва Тамара Петровна, Кунах Виктор Анатолиевич
МПК / Мітки
МПК: C12N 5/00, C12N 5/04, C12N 1/20
Мітки: cacl2-компетентних, плазмідною, днк, e.coli, суміш, трансформаційна, трансформації, клітин
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/2-67253-transformacijjna-sumish-dlya-transformaci-cacl2-kompetentnikh-klitin-ecoli-plazmidnoyu-dnk.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Трансформаційна суміш для трансформації cacl2-компетентних клітин е.coli плазмідною днк</a>
Спосіб генетичної трансформації рослинних клітин
Номер патенту: 49529
Опубліковано: 26.04.2010
Автор: Лавренчук Володимир Юрійович
МПК: C12N 5/14, A01H 5/00, C12N 15/82, C12N 15/40
Мітки: генетично, клітин, спосіб, трансформації, рослинних
Формула / Реферат:
1. Спосіб генетичної трансформації рослинних клітин, за яким отримують трансформовану рослинну клітину шляхом введення до устячкової клітини рослини фрагмента ДНК, що містить селективний маркерний ген, який не має стійкості до антибіотиків, здійснюють подальше оброблення трансформованої рослинної клітини прийнятним селективним агентом та наступну регенерацію цілої рослини з трансформованої рослинної клітини, причому використовують устячкові...
Спосіб трансформації рослин і лінія клітин ембріогенного калюсу zea mays
Номер патенту: 72443
Опубліковано: 15.03.2005
Автор: Хансен Дженевів
МПК: A01H 1/00, C12N 5/10, C12N 15/82, C12N 15/09, C07K 14/01, C07K 14/415
Мітки: клітин, калюсу, рослин, ембріогенного, трансформації, спосіб, лінія
Формула / Реферат:
1. Спосіб трансформації рослинної клітини або тканини геном, що представляє інтерес, який включає обробку рослинної клітини або тканини Agrobacterium в умовах, які інгібують індукований Agrobacterium некроз (АІН), причому Agrobacterium включає вектор, який містить ген, що представляє інтерес, де умови, які інгібують АІН, включають: (а) контактування рослинної клітини або тканини з Agrobacterium після обробки температурним шоком; або (б)...
Спосіб оцінки реакції бластної трансформації лімфоцитів у культурі клітин
Номер патенту: 48845
Опубліковано: 15.08.2002
Автори: Фролов Олександр Кирилович, Федотов Євген Рудольфович, Копійка Віра Вікторівна
МПК: G01N 21/00, C12N 5/08, G01N 33/48, C12R 1/91
Мітки: бластної, лімфоцитів, клітин, трансформації, оцінки, спосіб, реакції, культури
Формула / Реферат:
Спосіб оцінки реакції бластної трансформації лімфоцитів (РБТЛ) у культурі клітин, що включає забір крові, вилучення лімфоцитів, постановку культури, розподіл отриманої культури на два зразки, стимулювання одного зразка антигенами або мітогенами, інкубацію зразків, визначення ступеня РБТЛ, який відрізняється тим, що інкубацію проводять протягом доби, готують адгезивні відбитки з наступною їх фіксацією, флуорохромуванням акридиновим оранжевим,...
Спосіб визначення антилізоцимної активності бактерій e. coli
Номер патенту: 33352
Опубліковано: 25.06.2008
Автори: Волинець Леонід Кузьмич, Яненко Уляна Миколаївна, Компанієць Костянтин Сергійович, Смоленко Наталія Іванівна, Дорофеєва Олена Вікторівна
МПК: C12N 1/00
Мітки: визначення, активності, антилізоцимної, бактерій, спосіб
Формула / Реферат:
Спосіб визначення антилізоцимної активності бактерій E. coli, що включає використання поживного середовища із 1,5 % поживного агару і сироватки крові, який відрізняється тим, що як сироватку крові використовують 20 % очищену сироватку крові великої рогатої худоби, яку попередньо обробляють поліетиленгліколем.
Плазмідний експресуючий вектор ркs 103, маючий послідовність днк, відповідаючу за експресію в бактеріях e.coli злитного білка оболонки оболонки trepanema pallidum
Номер патенту: 14744
Опубліковано: 04.02.1997
Автори: Чєрєпанов Пьотр Алєксєєвіч, Мартиненко Дмитро Леонідович, Міхайлова Татьяна Гавріловна, Чумак Ростислав Максимович
МПК: C12N 15/31, C12N 15/62, C12N 15/70
Мітки: відповідаючу, pallidum, плазмідний, послідовність, trepanema, злитного, ркs, експресію, білка, бактеріях, експресуючий, оболонки, днк, e.coli, вектор, маючий
Формула / Реферат:
Плазмідний експресуючий вектор pKS 103, маючий послідовність ДНК, відповідаючу за експресію в бактеріях Е.соlі элитного білка оболонки Тгерапетоа Pallidum, який кодує під контролем промотора фага лямбда послідовність білка, відповідаючу за експресію в бактеріях Е.соlі злитного білка оболонки Trepanema Pallidum загальною формулою (N-бета-СаІ-рТr-СООН), молекулярною масою 106 кД, що продукує штам бактерій Е.соlі Тр 15.
Попередній патент: Спосіб іммобілізації мікроорганізмів
Наступний патент: Спосіб модернізації упора переднього розетки хребтової балки, залізничного транспортного засобу
Випадковий патент: Електронний емітер та пристрій з автоелектронною емісією