Спосіб одержання екстракту з ранозагоюючою активністю

Спосіб одержання екстракту з ранозагоюючою активністю, що включає використання листків кремени гібридної, який відрізняється тим, що сировину кремени гібридної екстрагують 40 % етиловим спиртом у співвідношенні сировина:екстрагент 1:10-1:20, екстрагент відганяють і екстракт висушують ліофільно. Корисна модель відноситься до галузі медицини, а саме фармації, і може бути використаний при створенні нового лікарського засобу з ранозагоюючою активністю на основі біологічно активних речовин, виділених з листків кремени гібридної. У медичній практиці використовується настій з листків кремени гібридної як ранозагоюючий, відхаркуючий і спазмолітичний засіб [Губергриц А.Я., Соломченко Н.И. Лекарственные растения Донбасса І Под редакцией канд. фарм. наук Кобзарь А.Я. - Изд. 5-е. - Донецк: Донбасс, 1990. - С.112115]. Відомий спосіб одержання настою заключається в тому, що листки кремени гібридної заливаються кип'ячою водою і настоюють протягом 12год. Дана технологія не дозволяє максимально екстрагувати діючі речовини з рослинної сировини, а сам лікарський засіб має обмежений термін зберігання. Крім цього, недоліком даного способу є те, що він не дозволяє одержати ранозагоюючий засіб у вигляді стійкої субстанції, придатної до застосування в технології лікарських засобів. В основу корисної моделі поставлено задачу розширення спектру препаратів, які проявляють ранозагоюючу активність, в яких в якості сировини використовують листки кремени гібридної, забезпечується нова схема одержання екстракту, який має вищезгадані властивості і за рахунок чого одержаний екстракт можна використовувати в технології лікарських засобів. Поставлена задача вирішується тим, що згідно зі способом одержання екстракту з ранозагоюючою активністю, який включає використання листків кремени гібридної, який відрізняється тим, що сировину кремени гібридної екстрагують 40% ети ловим спиртом у співвідношенні сировинаекстрагент 1:10-1:20, екстрагент відганяють і екстракт висушують ліофільно. Удосконалений спосіб екстрагування листків кремени гібридної приводить до одержання кінцевого продукту з високим виходом, який проявляє ранозагоюючу дію. Запропонований спосіб здійснюється наступним чином. Листки кремени гібридної (Petasites hybridus) попередньо висушують і подрібнюють на порошок з діаметром частинок 1-2,5мм. Подрібнену сировину екстрагують 40% етиловим спиртом протягом 30-45 хвилин у співвідношенні сировинаекстрагент 1:10-1:20. Екстракцію повторюють 3-4 рази. Об'єднані екстракти фільтрують і відганяють етанол за допомогою вакууму. Екстракт розводять до початкового об'єму гарячою очищеною водою, охолоджують і фільтрують. Фільтрат розливають у флакони на 500мл і висушують ліофільно. Одержаний екстракт представляє собою суму біологічно активних речовин поліфенольного характеру у вигляді гігроскопічного аморфного порошку світло-жовтого кольору без запаху і терпкого смаку. Вихід кінцевого продукту становить 28,5-34,3%. У ліофілізаті виявлені дубильні речовини, фенолкарбонові і органічні кислоти, флавоноїди, полісахариди. Рослинний ліофілізованнй засіб умовно позначений "БЛ-4". Спосіб ілюструється наступними прикладами: Приклад 1. 100г попередньо висушених і подрібнених в порошок листків кремени гібридної з діаметром частин 1-2,5мм екстрагуємо ЮООмл 40% етилового спирту в круглодонній колбі із зворотнім холодильником при температурі кипіння 00 00 со 00 8388 екстрагента протягом 30хв. Екстракцію проводили у співвідношенні сировина-екстрагент 1:10. Екстракцію повторювали ще тричі. Екстракти об'єднуємо і відганяємо етанол за допомогою вакууму. Екстракт розводимо гарячою очищеною водою до початкового об'єму, охолоджуємо і фільтруємо. Фільтрат розливаємо у флакони на 500мл і висушуємо ліофільне. Вихід кінцевого продукту становить 28,5%. Приклад 2. 100г попередньо висушених І подрібнених в порошок листків кремени гібридної з діаметром частин 1-2,5мм екстрагуємо 1500мл 40% етилового спирту в круглодонній колбі із зворотнім холодильником при температурі кипіння екстрагента протягом 30хв. Екстракцію проводили у співвідношенні сировина-екстрагент 1:15. Екстракцію повторювали ще двічі Екстракти об'єднуємо і відганяємо етанол за допомогою вакууму. Екстракт розводимо гарячою очищеною водою до початкового об'єму, охолоджуємо і фільтруємо. Фільтрат розливаємо у флакони на 500мл і висушуємо ліофільне. Вихід кінцевого продукту становить 31,5%. Приклад 3. 100г попередньо висушених і подрібнених в порошок листків кремени гібридної з діаметром частин 1-2,5мм екстрагуємо 2000мл 40%етилового спирту в круглодонній колбі із зворотнім холодильником при температурі кипіння екстрагента протягом 45хв. Екстракцію проводили у співвідношенні сировина-екстрагент 1:20. Екстракцію повторювали ще двічі Екстракти об'єднуємо і відганяємо етанол за допомогою вакууму. Екстракт розводимо гарячою очищеною водою до початкового об'єму, охолоджуємо і фільтруємо. Фільтрат розливаємо у флакони на 500мл І висушуємо ліофільне. Вихід кінцевого продукту становить 34,3%. Концентрація спирту 40% вибрана тому, що дозволяє максимально екстрагувати діючі речовини; співвщношення сировина-екстрагент 1:10-1:20 тому, що нижче співвідношення не дозволяє екстрагувати діючі речовини, а вище - є технологічно недоцільним. Вивчення ранозагоюючої дії одержаного екстракту проводили згідно методики Венцюса І.В. і співавт. [Венцюс И.В., Слуцкий Л.И., Домбровская Л.Э. Экспериментальное испытание нового препарата «Целлоцина» для лечения термических ожогов// Система реабилитации детей с поражением опорно-двигательного аппарата: Сб. науч. работ под ред. В.Л. Андриянова. -Л..1989. - С.152-155]. Тваринам на ділянці спини (ліва, права лопатки) під ефірним наркозом викликали термічний опік ПІ-А степені, для чого до оголеної шкіри на 3-4 Комп'ютерна верстка М. Мацело секунди прикладали прямокутну металеву пластинку розміром 2хЗсм, нагріту до 200°С. Експериментальні дослідження проводили на білих щурах - самцях масою 0,15-0,20кг, розділених на 2 групи. Тварини першої групи отримували лікування розчином екстракту БК-4; тварини другої групи - лікування не отримували. Досліджувані розчини наносили на опікову поверхню щоденно два рази на день, починаючи з дня проведення опіку і до закінчення заживления. Візуальним спостереженням за тваринами встановлювали термін відходження первинної і вторинної кірок. Відходження первинної кірки оцінювали як показник дозрівання грануляційнофіброзної тканини в опіковому дефекті; відходження вторинної* кірки за наявності сухої епщермізованої поверхні було критерієм завершення процесу заживления [3]. Терміни заживления експериментальних опіків представлені в таблиці 1. Таблиця 1 Вплив екстракту кремени гібридної на терміни заживления експериментальних опіків у щурів. Група тварин Досліджуваний засіб 1 -а група 2-а група БЛ-4 Терміни відходження кірок (доби) Первинної Вторинної 16,4±0,4 22,2±0,6 19,2±0,8 31,0±1,3 Результати досліджень наведені в таблиці 1 свідчать, що водно-спиртовий люфіпізований екстракт листків кремени гібридної БЛ-4 проявляє виражену ранозагоюючу дію і забезпечує при експериментальному термічному опіку відходження первинної кірки на 16,4±0,4 добу, вторинної кірки на 22,2±0,6 добу (контроль 19,2±0,8 і 31,0±1,3 доби відповідно). Таким чином, ліофілізований водно-спиртовий екстракт листків кремени гібридної БЛ-4 як засіб для лікування термічних опіків в експерименті забезпечує заживления опікового дефекту в більш короткі терміни. Проведені дослідження свідчать, що удосконалений спосіб одержання екстракту дозволяє отримати новий комплекс біологічно активних сполук з листків кремени гібридної, який проявляє ранозагоюючу активність. Виявлена властивість дозволяє пропонувати вищезгаданий спосіб для одержання засобу, що стимулює регенераційні процеси і активізує процеси заживлення, сприяє очищенню ран від фіброзних напливів, виявляє бактерицидну і бактеріостатичну дію. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуально'і власності, вул. Урицького, 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601