Спосіб виробництва біомаси, що містить лікопін

Спосіб виробництва біомаси, що містить ліко 3 91424 здійснюють одноразово в живильне середовище до його стерилізації в концентрації 0,0015-0,0045% від його об'єму, а процес ферментації ведуть не більш 72 годин. Використання штамів гриба Blakeslea trispora TKCT (+) і TKCT (-), які мають високу здатність до синтезу каротиноїдів, гарантує при здійсненні описуваного способу одержання біомаси, що містить лікопін, з максимально можливою концентрацією цільового продукту. Штами гриба Blakeslea trispora TKCT (+) і TKCT (-) депоновано в Депозитарії Інституту мікробіології й вірусології HAH України імені Д.К. Заболотного 1 1 листопада 2002 року, реєстраційний номер Blakeslea trispora ІMB F100022. Використання у якості інгібітору активності лікопінциклази 2-метилімідазолу замість імідазолу гарантує використання концентрацій інгібітору менших у 17-50 разів, тим самим, знижуючи ризик наявності залишкових кількостей даної хімічної речовини в кінцевому продукті, і виключаючи ризик шкідливого впливу на обслуговуючий персонал у випадку його багаторазового введення у ферментер. Одноразове введення 2-метилімідазолу в живильне середовище до його стерилізації замість кількаразового введення імідазолу дозволяє спростити технологічний процес введення інгібітору у ферментер, тому що не вимагає створення асептичних умов, а також виключає ризик інфікування культуральної рідини, що багаторазово збільшується при кількаразовому введенні інгібітору в процесі ферментації. До того ж 2-метилімідазол є більш активним інгібітором активності лікопінциклази, ніж імідазол, що дає можливість отримувати біомасу з набагато більш високим вмістом лікопіну, при цьому 2метилімідазол не виявляє впливу, що пригнічує синтез біомаси та каротиноїдів у цілому, що позитивно позначається на збільшенні кількості знімання біомаси, що містить лікопін. Також 2-метилімідазол не сповільнює швидкість синтезу біомаси і лікопіну, що дозволяє скоротити тривалість ферментації з 90 до 72 годин; скорочення тривалості ферментації підвищує ефективність використання основного устаткування (ферментерів) і сприяє збільшенню виробничої потужності підприємства. Переваги запропонованого способу полягають у збільшенні накопичення лікопіну у порівнянні з винаходами-аналогами з одночасним скороченням тривалості ферментації й значним зниженням концентрації шкідливих хімічних речовин, які є обов'язковими компонентами технологічного процесу Комп’ютерна верстка А. Крулевський 4 виробництва лікопіну шляхом введення інгібіторів активності лікопінциклази. Приклади здійснення способу. Приклад 1 У якості компонентів живильного середовища вибрали екстракт кукурудзяний згущений, патоку зелену, олію соняшникову і воду. У живильне середовище до стерилізації ввели 2-метилімідазол у концентрації 0,003% від його об'єму, що при об'ємі середовища 7000л склало 0,21кг. Живильне середовище разом з введеним 2метилімідазолом стерилізували паром при температурі 130 C протягом 60 хвилин. У живильне середовище ввели штами міцеліального гриба Blakeslea trispora TKCT (+) і TKCT (-) у співвідношенні 1:7. Ферментацію вели при температурі 30±2 C. Періодично (4 рази на добу) відбирали проби на аналіз для визначення накопичення біомаси, кількісного вмісту лікопіну, проведення мікробіологічного та біохімічного контролю. За результатами аналізів оцінювали динаміку накопичення лікопіну в біомасі. Після 66 годин ферментації 3 послідовні виміри показали той самий відсотковий вміст лікопіну в біомасі. Після цього процес ферментації припинили. Отриманий вміст лікопіну в культуральній рідині (живильне середовище зі штамами, що інкубують) становив 2,43г/л, що при накопиченні біомаси 27г/л склало 9,0% лікопіну у біомасі. Потім отриману наприкінці ферментації культуральну рідину фільтрували, а біомасу, що містить лікопін висушували у вакуумній гребковій сушарці при температурі в масі не більше 50 C під вакуумом до залишкового вмісту вологи в продукті 7%. Приклад 2 Приклад виконувався аналогічно Прикладу 1, тільки з наступними відмінними рисами. У живильне середовище до стерилізації ввели 2метилімідазол у концентрації 0,0045% від його об'єму, що при об'ємі середовища 7000л склало 0,315кг. Отриманий вміст лікопіну в культуральній рідині становив 2,05г/л, що при накопиченні біомаси 25г/л склало 8,2% лікопіну в біомасі. Приклад 3 Приклад виконувався аналогічно Прикладу 1, тільки з наступними відмінними рисами. У живильне середовище до стерилізації ввели 2метилімідазол у концентрації 0,0015% від його об'єму, що при об'ємі середовища 7000л склало 0,105кг. Отриманий вміст лікопіну в культуральній рідині становив 1,89г/л, що при накопиченні біомаси 29г/л склало 6,5% лікопіну в біомасі. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601