Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти і фармацевтична композиція, що його містить

1. Аморфна форма 42-ефіру рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, що має наступні характеристики: (a) зображення піка рентгенівської дифракції, що включає широкий ореол на 2θ приблизно 17°; і (b) термограму диференціальної скануючої калориметрії, що не має піка ендотерми близько 164° для кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. 2. Аморфна форма за п. 1, що має час утримання високоефективної рідинної хроматографії близько 21 хвилини в наступних умовах: (і) температура близько 45 °С, (іі) швидкість потоку близько 1 мл/хвилина, (ііі) довжина хвилі визначення близько 280 нм, (iv) колонка 150 мм х 4,6 мм YMC Pack® ODS-AM, що містить частинки розміром 3 мкм, (v) перша рухома фаза, що включає розчин ацетату амонію з рН близько 3,8, ацетонітрил і діоксан в молярному співвідношенні близько 80:52:68, і (vii) друга рухома фаза, що включає розчин ацетату амонію з рН близько 3,8, ацетонітрил і діоксан в молярному співвідношенні близько 20:34:46. 3. Аморфна форма за п. 1 або п. 2, яка є щонайменше в 3 рази більш розчинною в розчинювальному розчиннику, ніж кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти. 4. Аморфна форма за п. 1 або п. 2, яка є щонайменше в 3,5 разу більш розчинною в розчинюва 2 (19) 1 3 84881 4 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової стеарат магнію, стеаринову кислоту або стеарилкислоти подрібнюють. фумарат натрію. 16. Аморфна форма за п. 14, де термограма ди27. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. ференціальної скануючої калориметрії вказаної 19-26, де вказані компоненти гранулюють вологою аморфної форми не має піка ендотерми близько грануляцією і потім пресують в форму, придатну 164 °С. для введення ссавцеві. 17. Аморфна форма за п. 1, що має термограму 28. Фармацевтична композиція за п. 27, де вказадиференціальної скануючої калориметрії, вибираною формою, що вводиться, є таблетка або капну з гр упи, що складається з Фіг. 5 і Фіг. 6. сула. 18. Фармацевтична композиція, що містить амор29. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. фн у форму 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-219-26, де вказані компоненти додають до капсули (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти за п. або рідкої суспензії, придатної для введення ссав1 і фармацевтично прийнятний носій. цеві. 19. Фармацевтична композиція, що містить: 30. Спосіб отримання фармацевтичної композиції, (і) аморфну форму 42-ефіру рапаміцину і 3що включає аморфну форму 42-ефіру рапаміцину і гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти за п. 1, кислоти за п. 1, що включає стадії: (іі) комплексон металів, (a) об'єднання (і) аморфної форми 42-ефіру рапа(ііі) регулятор рН, міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2(iv) поверхнево-активну речовину, метилпропіонової кислоти, (іі) етилендіамінтетра(v) щонайменше один наповнювач, оцтової кислоти і (ііі) лимонної кислоти; (vi) зв'язуюче, (b) об'єднання лаурилсульфату натрію, першої (vii) дезінтегратор і частини безводної лактози, повідону і першої час(viii) змащувальну речовину. тини кроскармелози натрію; 20. Фармацевтична композиція за п. 19, де вказас) об'єднання продукту (b) з продуктом (а); ний комплексон металів включає етилендіамінтет(d) об'єднання другої частини безводної лактози і раоцтову кислоту, яблучн у кислоту або фумарову другої частини кроскармелози натрію з продуктом кислоту. (с); 21. Фармацевтична композиція за п. 19 або 20, де (e) перемішування продукту (d), і вказаний регулятор рН включає лимонну кислоту, (f) об'єднання продукту (e) зі стеаратом магнію. аскорбінову кислоту, фумарову кислоту або яблу31. Спосіб за п. 30, де продукт стадії (b) пропускачну кислоту. ють через сито. 22. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 32. Застосування аморфної форми 42-ефіру рапа19-21, де вказану поверхнево-активну речовину міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2вибирають з полісорбату, складного ефіру сорбіметилпропіонової кислоти за п. 1 в отриманні літану, полоксамеру або лаурилсульфату натрію. карського засобу для введення ссавцеві для ліку23. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. вання або інгібування відторгнення трансплантата, 19-22, де вказаний наповнювач включає безводну захворювання «трансплантат проти хазяїна», аулактозу, мікрокристалічну целюлозу, маніт, фостоімунних захворювань, солідних пухлин або гіфат кальцію, пептизований крохмаль або сахароперпроліферативних судинних захворювань. зу. 33. Подрібнена аморфна форма 42-ефіру рапамі24. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-219-23, де вказане зв'язуюче включає повідон, гідметилпропіонової кислоти за п. 1, отримана подріроксипропілметилцелюлозу, карбоксиметилцелюбненням аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3лозу або желатин. гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 25. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. кислоти у ви хровому млині. 19-24, де вказаний дезінтегруючий агент включає 34. Подрібнена аморфна форма за п. 33, де вкакроскармелозу натрію, крохмаль, гліколят натрієзаним вихровим млином є млин Trost, гідроенергевого крохмалю, пептизований крохмаль або кростичний млин МС або спіральний вихровий млин повідон. Alpine™ AS. 26. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 19-25, де вказана змащувальна речовина включає Даний винахід відноситься до нової розчинної форми 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти (ССІ-779) має низьку розчинність, яка веде до низького розчинення твердої кристалічної форми, звичайно пероральних твердих лікарських форм, що включають таблетки, в фізіологічно прийнятних розчинниках. Повідомлялося, що розчинення і абсорбція 42ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти було поліпшено за допомогою отримання твердих дисперсій з системами носіїв з використанням методики спільного осадження, сушіння розпилювання, застосування наночастинок і способів мокрої грануляції. Однак, 5 84881 6 хоч з рівня техніки відомо, що рапаміцин може рфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2бути в кристалічній або аморфній формі, аморф(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, ний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2отриманого осадженням. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти ніколи Фіг.4 являє собою термограму диференціююне був раніше отриманий, виділений або охаракчої скануючої калориметрії (DSC) кристалічного теризований. 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2Оскільки 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти є теФіг.5 являє собою DSC термограму аморфного рапевтично активною сполукою, бажано отримати 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, який отриманого випаровуванням. мав би поліпшену розчинність, швидкість розчиФіг.6 являє собою DSC термограму аморфного нення і біодоступність. 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2В одному аспекті даний винахід відноситься до (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2отриманого осадженням. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. АмоФіг.7 являє собою DSC термограму аморфного рфна форма виявляє підвищену розчинність в 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2порівнянні з кристалічною формою і є, отже, за(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, стосовної для множини цілей, включаючи застосуотриманого подрібненням в кульовому млині провання в фармацевтичних композиціях. тягом 60 хвилин. В іншому аспекті даний винахід відноситься до Даний винахід відноситься до аморфного 42способу отримання аморфного 42-ефіру рапаміефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти. Аморфний 42-ефір раметилпропіонової кислоти. паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2У наступному аспекті даний винахід відноситьметилпропіонової кислоти виділяли і характеризуся до фармацевтичних композицій, що містять вали високоефективною рідинною хроматографіаморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2єю (ВЕРХ), рентгенівською дифракцією (XRD) і (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. диференціальною скануючою калориметрією У ще одному аспекті даний винахід відносить(DSC). ся до наборів, що містять аморфний 42-ефір раАморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти згідно метилпропіонової кислоти. з даним винаходом позбавлений недоліків кристаІнші аспекти і переваги даного винаходу опилічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2сані в наступному докладному описі його перева(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Аможних варіантів здійснення. рфна форма є щонайменше в 3 рази більш розФіг.1A-1D являють собою рентгенівські дифрачинною, ніж кристалічна форма. кційні зображення (XRD) кристалічного і аморфноЗ нижченаведеного опису будуть видні додатго подрібненого в кульовому млині 42-ефіру рапакові переваги аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової метилпропіонової кислоти. Фіг.1A являє собою кислоти і способи його отримання і застосування. XRD зображення кристалічного 42-ефіру рапаміІ. Визначення цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2Термін "розчинювальний розчинник" означає метилпропіонової кислоти. Фіг.1B-D являють сорозчинник, який здатний розчиняти тверду речобою XRD зображення подрібненого в кульовому вину. У рамках даного опису розчинювальний розмлині 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2чинник включає будь-який розчинник, який здатний (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, розчиняти аморфний 42-ефір рапаміцину і 3отриманого після подрібнення протягом 20 хвилин, гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 40 хвилин і 60 хвилин. кислоти, кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3Фіг.2 являє собою графік, що порівнює швидгідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кість розчинення таблеток, які містять аморфний і кислоти або комбінацію аморфного і кристалічного кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-242-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти в (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. 0,4% розчині лаурилсульфату натрію (SLS). ТабТермін "осадження" призначений для опису летки, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину і процесу, за допомогою якого тверду форму сполу3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової ки осаджують з розчину, що містить розчинену кислоти, представлені квадратами, і таблетки, що сполуку. У рамках даного опису осадження ознамістять кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3чає осадження аморфного 42-ефіру рапаміцину і гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, представлені трикутниками. кислоти з розчину 42-ефіру рапаміцину і 3Фіг.3А-В являє собою XRD зображення аморгідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової фного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2кислоти в розчинювальному розчиннику. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Термін "осаджувальний розчинник" означає Фіг.3А є XRD зображенням аморфного 42-ефіру розчинник, який здатний осаджувати сполуку, розрапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2чинену в розчині. У рамках даного опису осаджуметилпропіонової кислоти, отриманого випаровувальний розчинник означає розчинник, який осаванням. Фіг.3В являє собою XRD зображення амоджує аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2 7 84881 8 (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти з розВ одному аспекті даний винахід відноситься до чинювального розчинника. Осаджувальні розчинспособів для отримання аморфного 42-ефіру раники можуть включати розчинники, які можуть зміпаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2шуватися з розчинювальним розчинником, який метилпропіонової кислоти. Звичайно, аморфну містить розчинену сполуку. Альтернативно, осаформу отримують з кристалічного 42-ефіру рападжувальний розчинник може включати розчинник, міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2який є таким, що незмішується з розчинювальним метилпропіонової кислоти. Такі процеси серед розчинником, що містить розчинену сполуку. В інших методик включають випаровування, осаодному варіанті здійснення винаходу осаджувальдження і подрібнення. Однак певні процеси, що ним розчинником є вода. В іншому варіанті здійсвикористовуються для отримання аморфного 42нення винаходу осаджувальним розчинником є ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2алкан. Одним прикладом відповідного алкану є нметилпропіонової кислоти, не є обмеженням в гептан. Однак можуть бути вибрані інші відповідні даному винаході. алкани або комбінації будь-яких з вищезазначених (А) Випаровування окремих осаджувальних розчинників. Відповідно до даного винаходу, аморфний 42Термін "випаровування" означає процес, за ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2допомогою якого тверду форму сполуки утворюметилпропіонової кислоти може бути отриманий ють випаровуванням розчинника з розчину. випаровуванням розчинювального розчинника з Термін "подрібнення" означає процес, за дорозчину, що містить 42-ефір рапаміцину і 3помогою якого тверду форму сполуки подрібнюють гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової з використанням методик, відомих фа хівцеві в кислоти і розчинювального розчинника. даній галузі техніки, що включають методики, вкаКристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідроксизані в [R.W. Lee et al., "Particle Size Reduction in 2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти Water Insoluble Drug Formulation", Rong Liu, Ed., змішують з розчинювальним розчинником для Interpharm Press Co., Denver, Co: 473-392 (2000)]. утворення розчину, що містить кристалічний 42В рамках даного опису подрібнення означає проефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2цес подрібнення кристалічного 42-ефіру рапаміциметилпропіонової кислоти. Розчинювальний розну і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2чинник є звичайно спиртом або простим ефіром і метилпропіонової кислоти для отримання аморфможе бути зневоднений або може містити воду. ного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2Наприклад, відповідні спирти включають етанол, (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти з виметанол і ізопропанол. В одному особливо перекористанням апаратури, відомої в даній галузі техважному варіанті здійснення винаходу розчинюваніки, включаючи, серед іншого, подрібнювальну льним розчинником є етанол. В іншому особливо посудину. Однак тип подрібнюючого апарату не є переважному варіанті здійснення винаходу розчиобмеженням даного винаходу. нювальним розчинником є діетиловий ефір. Термін "кімнатна температура" означає темІнші компоненти необов'язково додають до пературу від близько 23 до близько 25°C. Однак розчину, що містить розчинювальний розчинник і фа хівцеві в даній галузі техніки зрозуміло, що спекристалічну форму перед випаровуванням, такі як цифічна кімнатна температура може варіювати в сполуки, які запобігають розкладанню 42-ефіру залежності від умов, що використовуються під час рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2утворення аморфної форми і навколишніх умов. метилпропіонової кислоти. Наприклад, антиоксиТермін "стабільний" в рамках даного опису данти і стабілізатори можуть бути додані до розвідноситься до сполуки, яка розкладається менш чину, що містить розчинювальний розчинник і криніж на близько 10% протягом тривалих періодів сталічну форму. В одному варіанті здійснення часу. В одному варіанті здійснення винаходу тервинаходу антиоксиданти, які можуть бути додані мін стабільний відноситься до сполуки, яка роздо розчину, включають серед іншого бутилований кладається на менш ніж близько 6%. В іншому гідроксіанІзол і бутилований гідрокситолуол. В варіанті здійснення винаходу термін стабільний іншому варіанті здійснення винаходу стабілізатовідноситься до сполуки, яка розкладається менш ри, які можуть бути додані до розчину, включають ніж на близько 3%. У наступному варіанті здійсетилендіаміноцтову кислоту, аскорбілпальмітат і нення винаходу термін стабільний відноситься до вітамін E. сполуки, яка розкладається на менш ніж близько Після додання кристалічного 42-ефіру рапамі0,7%. У ще одному варіанті здійснення винаходу цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2термін стабільний відноситься до сполуки, яка метилпропіонової кислоти, і необов'язкових інших розкладається менш ніж на близько 0,4%. сполук до розчинювального розчинника розчин Термін "тривалий період часу" в рамках даного перемішують протягом щонайменше близько 1 опису відноситься до періоду щонайменше 1 або 2 хвилини. Звичайно, розчин перемішують протягом тижні, під час яких сполуки згідно з винаходом є від близько 1 хвилини до близько 2 годин. Фахістабільними. Переважно, сполуки згідно з винаховець в даній галузі те хніки легко зможе визначити дом є стабільними протягом від близько 6 до блитип змішування, що використовується, а також зько 12 місяців. Однак фахівець в даній галузі техперіод часу, необхідний для змішування розчинюніки здатний визначити період часу, протягом вального розчинника з кристалічним 42-ефіром якого сполуки згідно з винаходом є стабільними. рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2II. Способи отримання аморфного 42-ефіру метилпропіонової кислоти. рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2Розчинювальний розчинник випаровують з метилпропіонової кислоти розчину при температурах, які не сприяють роз 9 84881 10 кладанню аморфної або кристалічної форм, або анті здійснення винаходу розчинювальним розпри більш низьких. Фахі вець в даній галузі техніки чинником може бути простоєм ефір. В одному може визначити температуру, необхідну для випаособливо переважному варіанті здійснення винаровування, на основі властивостей розчинювальходу простим ефіром є діетиловий ефір. ного розчинника. В одному варіанті здійснення Після додання кристалічного 42-ефіру рапамівинаходу розчинювальний розчинник випаровують цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2при температурі щонайменше близько 20°C. У метилпропіонової кислоти до розчинювального наступному варіанті здійснення винаходу розчирозчинника розчин перемішують протягом щонайнювальний розчинник випаровують при темпераменше близько 1 хвилини. Звичайно, розчин змітурі від близько 25 до близько 50°C. В іншому вашують протягом від близько 1 хвилини до близько ріанті здійснення винаходу розчинювальний 2 годин. Фахівець в даній галузі техніки легко зморозчинник випаровують при температурі від ближе визначити тип використовуваного змішування, зько 25 до близько 30°C. а також період часу, необхідний для змішування Вакуум також може бути використаний для порозчинювального розчинника з кристалічним 42легшення випаровування розчинювального розефіром рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)чинника. Вакуум, що має тиск менш ніж близько 1 2-метилпропіонової кислоти. атмосфери (атм), використовують в даному винаПісля відповідного періоду часу аморфну фоході для випаровування розчинювального розчинрму осаджують з розчину з використанням осаника. Альтернативно, розчинювальний розчинник джувального розчинника. Аморфна форма є звивипаровують з розчину при атмосферному тиску чайно нерозчинною в суміші розчинювального близько 1атм. В одному варіанті здійснення винарозчинника/осаджувального розчинника при темходу випаровування проводять з використанням пературі, що використовується під час осадження. тиску менш ніж близько 1атм. В іншому варіанті Фахівець в даній галузі техніки зможе визначиздійснення винаходу випаровування проводять з ти осаджувальний розчинник, необхідний для осавикористанням тиску, отриманого ротаційним видження аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3парником і включає вакуум близько 0,02атм. гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової Вакуум може підтримуватися протягом короткислоти з розчинювального розчинника в залежких або більш тривалих періодів часу з метою виності від певної температури, тиску і розчинювадалення небажаних летких сполук, включаючи льного розчинника, що використовується (їй). Одзахоплені або залишкових розчинювальний рознак будь-хто з вищезазначених осаждаючих чинник або воду. Фахівець в даній галузі техніки розчинників може бути використаний в справжлегко зможе визначити кількість часу, необхідну ньому винаході. для випаровування захоплених або залишкових Таким чином, аморфну форму осаджують із розчинювального розчинника або води. В одному зразка при температурі, яка дозволяє осадити варіанті здійснення винаходу вакуум підтримують аморфну форму або при більш низькій. Фахівець в протягом щонайменше 8 годин. В іншому варіанті даній галузі техніки буде здатний визначити певну здійснення винаходу вакуум підтримують протягом температуру, необхідну для полегшення осадженвід близько 8 годин до близько 7 днів. ня аморфної форми, беручи до уваги визначені Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2використовувані розчинювальний розчинник і оса(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти отриджувальний розчинник. В одному варіанті здійсмують випаровуванням спирту з рідкого зразка, що нення винаходу осадження проводять при темпемістить кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3ратурі близько 50°C або нижче. В іншому варіанті гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової здійснення винаходу осадження проводять при кислоти і спирт. температурі при або нижче близько кімнатної тем(В) Осадження ператури. У наступному варіанті здійснення винаВ альтернативному варіанті здійснення винаходу осадження проводять при температурі близьходу аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2ко 5°C. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти отриПісля отримання аморфного 42-ефіру рапамімують осадженням. Особливо, аморфну форму цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2осаджують доданням осаджувального розчинника метилпропіонової кислоти він може бути виділений до розчину, що містить кристалічний 42-ефір раз використанням методик, відомих фа хівцеві в паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2даній галузі техніки, які включають фільтрацію, метилпропіонової кислоти, і розчинювальний роздекантацію, центрифугування і хроматографію, чинник. серед інших. Звичайно, фільтрацію використовуКристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідроксиють для виділення осадженого аморфного зразка. 2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти Після осадження може бути використаний варозчиняють в розчинювальному розчиннику. В куум для видалення залишкових або захоплених одному варіанті здійснення винаходу розчинювалетких сполук, включаючи залишкові, або захопльним розчинником є спирт або простий ефір. У лений розчинювальний розчинник або воду. Вакунаступному варіанті здійснення винаходу розчиум, що має тиск менш ніж близько 1 атмосфери нювальним розчинником є спирт. Таким спиртом (атм), може бути використаний в даному винаході. може бути дегідратований спирт або він може місПереважно, використовують вакуум від близько тити воду. Відповідні розчинники можуть включати 0,2 до близько 0,8атм. етанол, метанол і ізопропанол. В одному особливо Такий вакуум може підтримуватися протягом переважному варіанті здійснення винаходу розчикоротких або більш тривалих періодів часу. Фа хінювальним розчинником є етанол. В іншому варівець в даній галузі техніки буде здатний легко ви 11 84881 12 значити кількість часу, необхідну для випаровуздійснення винаходу кристалічну форму подрібвання будь-якого залишкового або захопленого нюють протягом щонайменше близько 60 хвилин. розчинювального розчинника або води. В одному Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2варіанті здійснення винаходу вакуум підтримують (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти може протягом щонайменше близько 8 годин. В іншому бути о триманий подрібненням кристалічного 42варіанті здійснення винаходу вакуум підтримують ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2протягом щонайменше близько 2 днів. У наступметилпропіонової кислоти. ному варіанті здійснення винаходу вакуум підтриIII. Визначення характеристик аморфного 42мують протягом від близько 2 днів до близько 7 ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2днів. метилпропіонової кислоти Вакуум можуть підтримувати при температурі Визначення характеристик аморфного 42для підтримки видалення будь-якого залишкового ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2або захопленого розчинювального розчинника або метилпропіонової кислоти і його відмінності від води. В одному варіанті здійснення винаходу може кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2бути використана температура близько кімнатної (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти викотемператури. В іншому варіанті здійснення винанували з використанням методик, відомих фахівходу може бути використана температура від блицеві в даній галузі техніки. Особливо, підтверзько 5°С до близько 25°С. дження того, що 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти при(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отже, сутній після випаровування, осадження або подріотримують осадженням аморфної форми з рідкого бнення може бути проведено з використанням зразка з використанням осаджувального розчинметодик, включаючи температуру плавлення, інника, де рідкий зразок містить кристалічний 42фрачервону спектроскопію (ІЧ), спектроскопію ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2ядерного магнітного резонансу (ЯМР), масметилпропіонової кислоти і розчинювальний розспектральний аналіз (MC), аналіз паливних газів, чинник. комбінаційну спектроскопію, елементний аналіз і C) Подрібнення хроматографію, включаючи високоефективну ріУ ще одному аспекті аморфний 42-ефір рападинну хроматографію. міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2Аморфна природа 42-ефіру рапаміцину і 3метилпропіонової кислоти може бути отриманий гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової подрібненням кристалічного 42-ефіру рапаміцину і кислоти може також бути підтверджена з викорис3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової танням методик, що використовуються в даній кислоти. галузі техніки, і що включають диференціальну Деякі прилади можуть бути використані для скануючу калориметрію (DSC) і рентгенівську диподрібнення кристалічного 42-ефіру рапаміцину і фракцію (XRD). 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової (А) Ідентифікація з використанням спектроскокислоти і можуть бути вибрані фахівцем в даній пії галузі те хніки. Такі прилади можуть включати поВЕРХ може бути використана для веріфікації, дрібнюючі посудини, кульові млини і гідроенергещо продукт, отриманий випаровуванням, осатичні млини, серед інших. Фа хівець в даній галузі дженням або подрібненням, як указано вище, є 42техніки може визначити відповідні подрібнюючі ефіром рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)прилади і умови для застосування в даному вина2-метилпропіонової кислоти. Особливо, ВЕРХ ході. Однак застосування певного подрібнюючого хроматограма аморфного зразка повинна бути приладу не є обмеженням згідно з даним винахосхожою з ВЕРХ хроматограмою кристалічної фордом. ми. Бажано, ВЕРХ хроматограма аморфної форми Звичайно кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3є ідентичною ВЕРХ хроматограмі кристалічної фогідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової рми. кислоти вміщують в подрібнюючу посудину і крисВЕРХ хроматограма аморфної форми може талічну форму подрібнюють. Кількість часу подрітакож містити додаткові піки, які відповідають добнення буде залежати від кількості кристалічного мішкам, які можуть бути легко визначені фахівцем 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2в даній галузі техніки. Однак фахівцеві в даній га(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, вмілузі техніки зрозуміло, що присутність домішок не щеного в подрібнюючу посудину і певної подрібвтр учається в ідентифікацію аморфної форми. нюючої посудини, що використовується. Без зв'язМножину умов ВЕРХ використовують для ку з теорією автори винаходу виявили, що коли отримання ВЕРХ хроматограми, і вони можуть процес подрібнення прогресує у часі, кількість бути легко визначені фахівцем в даній галузі техніаморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2ки і не є обмеженням даного винаходу. Такі умови (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти збіВЕРХ включають варіації в температурі колонки, льшується. В одному варіанті здійснення винаходу швидкості струму, довжини хвилі визначення, типу кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2колонки, розміру колонки і рухомої фази, серед (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти може інших. В одному варіанті здійснення винаходу бути подрібнений протягом щонайменше близько умови ВЕРХ включають температуру близько 20 хвилин. В іншому варіанті здійснення винаходу 45°С, швидкість струму близько 1,0 мілілітру кристалічну форму подрібнюють протягом щонай(мл)/хвилину, довжину хвилі визначення близько менше близько 40 хвилин. У наступному варіанті 280 нанометрів (нм) і колонку зворотної фази 150 міліметрів (мм) ´ 4,6мм YMC PackÒ ODS-AM, що 13 84881 14 містить 3 мікрон (мкм) ODS частинки. Множина кристалічної форми містить декілька гострих піків рухомих фаз може також бути використана в даваріюючої інтенсивності на близько 8°, близько 9°, ному винаході для отримання ВЕРХ хроматограми близько 11°, близько 15°, близько 16°, близько 18°, аморфної форми. В одному варіанті здійснення близько 19° і близько 20°. винаходу рухома фаза включає розчин ацетату Зображення порошкового XRD аморфного 42амонію, ацетонітрил, діоксан або їх комбінацію. В ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2одному варіанті здійснення винаходу рухома фаза метилпропіонової кислоти, отримане, як описано в включає розчин, що містить розчин ацетату амоданому описі, отже, отримують з використанням нію при рН близько 3,8, ацетонітрил і діоксан в рентгенівських кристалографічних методик, відомолярному співвідношенні близько 80:52:68. В мих фа хівцеві в даній галузі техніки. В одному ваіншому варіанті здійснення винаходу р ухома фаза ріанті здійснення винаходу XRD зображення амовключає розчин, що має розчин ацетату амонію рфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2при рН близько 3,8, ацетонітрил і діоксан в моляр(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти вклюному співвідношенні близько 20:34:46. Комбінації чає один широкий пік або ореол. В іншому варіанті вищезгаданих рухомих фаз також можуть бути здійснення винаходу, XRD зображення аморфної використані. форми містить один широкий ореол. У наступному Таким чином отримують ВЕРХ хроматограму варіанті здійснення винаходу XRD зображення для аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2аморфної форми містить один широкий ореол на (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти і порі2q близько 17°. внюють з відомою ВЕРХ хроматограмою кристаліІнші піки також можуть бути присутніми в XRD чної форми. Звичайно, кристалічний 42-ефір разображенні аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової метилпропіонової кислоти має час утримання бликислоти і відповідають домішкам в зразку. Інші піки зько 21 хвилини з використанням умов, вказаних звичайно відповідають мінімальним кількостям вище. кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2З використанням умов ВЕРХ, як указано вище, (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, все отримували ВЕРХ хроматограму аморфного 42ще присутнім в зразку. ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2Крім охарактеризованого аморфної форми, метилпропіонової кислоти. Для аморфної форми XRD використовують для моніторинга утворення отримували час утримання близько 21 хвилини. аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2ВЕРХ хроматограму аморфної форми потім порів(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Звинювали з ВЕРХ кристалічної форми з використанчайно зразки отримують на різних стадіях під час ням таких же умов ВЕРХ. У даному винаході час випаровування, осадження і подрібнення і з них утримання для аморфної форми був ідентичним отримують XRD зображення. В одному варіанті часу утримання близько 21 хвилини для кристаліздійснення винаходу зразки забирають на різних чної форми. стадіях під час подрібнення і отримують їх XRD Після підтвердження того, що 42-ефір рапамізображення. В іншому варіанті здійснення винахоцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2ду зразки в розчинювальному розчиннику забираметилпропіонової кислоти був присутнім після виють з різними інтервалами, тверду речовину амопаровування, осадження або подрібнення, його рфного 42-ефіру рапаміцину і 3-(гідрокси-2аморфну природу підтверджували з використангідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти осаням XRD і DSC. джують і отримують його дифракційні XRD зобра(В) Ідентифікація з використанням рентгенівження. У наступному варіанті здійснення винаходу ської дифракції зразки в розчинювальному розчиннику забирають Методику рентгенівської дифракції (XRD) виз різними інтервалами, розчинювальний розчинник користовували для відрізнення аморфних форм випаровують і отримують дифракційне XRD зовід кристалічних форм. Як відомо фахівцеві в дабраження аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3ній галузі техніки, кристалічні сполуки дають XRD гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової зображення, що містять гострі піки. Аморфні спокислоти. луки, однак, звичайно дають XRD зображення, що Автори винаходу виявили, що 2q піки XRD зомістять широкі піки і піки, що погано визначаються. бражень зразків, отриманих після подрібнення Звичайно порошкові методики XRD дифракції викристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2користовують для ідентифікації аморфних сполук. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, менТаким чином XRD використали в даному винашають по інтенсивності з плином часу, коли крисході для того, щоб відрізнити аморфний 42-ефір талічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти пометилпропіонової кислоти від кристалічної форми. дрібнюють. Порошкове XRD зображення кристалічного 42C) Ідентифікація з використанням диференціефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2альної скануючої калориметрії метилпропіонової кислоти отримували в даному Методики диференціальної скануючої калоривинаході, але також було легко доступно фахівцеві метрії (DSC) також використовують для відрізненв даній галузі техніки. Див. зображення і/або дані ня аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2XRD для кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти від гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кристалічної форми. Фахівець в даній галузі технікислоти на Фіг.1A. Як відомо фахівцеві в даній гаки легко зможе визначити умови, необхідні для лузі те хніки, типове порошкове XRD зображення отримання DSC термограми. Множина DSC термо 15 84881 16 графів є доступною фахівцям в даній галузі техніки кислоти має більш високу розчинність, ніж кристаі включає ТА диференціальний скануючий калолічна форма. риметр, сухий газоподібний азот як продувальний Твердий 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2газ і збільшення температури з швидкістю 5°С/хв., (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, в серед інших приладів і умов. кристалічній або аморфній формі, додавали до DSC термограма кристалічного 42-ефіру рарозчинювальних розчинників для розчинення. В паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2одному варіанті здійснення винаходу аморфний метилпропіонової кислоти відома фахівцеві в да42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)ній галузі техніки і характеризується чіткою ендо2-метилпропіонової кислоти отримували у вигляді термою плавлення близько 164°С, таким чином твердої речовини випаровуванням, осадженням ілюструючи кристалічну природу сполуки. DSC або подрібненням, як відмічено вище, і необов'язтермограма кристалічної форми також може вклюково пресували через сито для подальшого зменчати піки, які відповідають продуктам розкладання шення розміру частинок твердої речовини. і включають ендотерми від близько 173° до близьЯк відомо фахівцеві в даній галузі те хніки, поко 178°С. дрібнення також може бути використане для дрібDSC термограми аморфного 42-ефіру рапаміного подрібнення або зменшення розміру часток цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2твердої речовини. Аморфний 42-ефір рапаміцину і метилпропіонової кислоти, отриманого відповідно 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової до даного винаходу випаровуванням, осадженням кислоти може бути подрібнений з використанням і подрібненням, не мають піка ендотерми близько методик, відомих фахівцеві в даній галузі техніки. 164°С, який присутній в XRD зображенні для крисФахівець в даній галузі техніки легко зможе вибраталічної форми. Відсутність цього піка підтверджує ти прилад для подрібнення, включаючи, серед аморфну природу зразка. DSC термограма аморіншого, вихрові млини. Приклади вихрових млинів, фної форми, отриманої випаровуванням і осавідомих в даній галузі те хніки, включають серед дженням, також може включати ендотерми розіншого млини TrostÔ , енергетичні млини MC кладання близько 43°C, 105°C, 173°С і 176-177°С. FluidÒ і спіральні вихрові млини AlpineÔ AS. Без зв'язку з теорією ендотерма 43°С відповідає Розчинність аморфного 42-ефіру рапаміцину і залишковому розчинювальному розчиннику, зви3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової чайно етанолу і/або воді. кислоти може бути виміряна розчиненням окремих DSC термограма аморфного 42-ефіру рапамізразків кристалічної і аморфної форм в розчинюцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2вальному розчиннику. Розчинність таких зразків метилпропіонової кислоти, отриманого осадженпотім можна порівняти. Множина розчинників може ням, також включає екзотерму близько 109°C. бути використана для визначення розчинності DSC термограма аморфної форми, отриманої аморфної форми і вони можуть бути вибрані фахіподрібненням, може включати ендотерми близько вцем в даній галузі техніки. В одному варіанті здій52°С, 105°C, 155°С і 173-177°C і екзотерму близьснення винаходу розчинник розчиняє один або ко 127°C. Без зв'язку з теорією автори винаходу обидва з аморфного і кристалічного 42-ефіру равизначили, що ендотерми 176-177° відповідають паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2продукту розкладання. Автори винаходу також метилпропіонової кислоти. У наступному варіанті визначили, що при прогресуванні подрібнення тездійснення винаходу розчинником є вода. В іншомпература плавлення аморфного 42-ефіру рапаму варіанті здійснення винаходу розчинником є міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2розчин, що містить воду і лимонну кислоту. У ще метилпропіонової кислоти, відповідна ендотермі одному варіанті здійснення винаходу розчинником 164°С, зсувається до 155°C. є розчин, що містить воду, лимонну кислоту і е тиВ одному варіанті здійснення винаходу може лендіамінтетраоцтову кислоту (ЕДТО) або лаурилбути отриманий аморфний 42-ефір рапаміцину і 3сульфат натрію (SLS). У ще одному варіанті здійсгідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової нення винаходу розчинник являє собою 0,005M кислоти, що має зображення піка рентгенівської розчин води і лимонної кислоти, доведений до рН дифракції, що містить широкий ореол на 2q близьблизько 4,6. У ще одному варіанті здійснення вико 17°, термограму диференціальної скануючої находу розчинником є цитратний буфер, що міскалориметрії, що не має піка ендотерми близько тить ЕДТО, необов'язково доведений до рН близь164° для кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3ко 4,6. В іншому варіанті здійснення винаходу гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової розчинником є цитратний буфер, що містить 0,2% кислоти, і хроматограму високоефективної рідинSLS. ної хроматографії, характерну для 42-ефіру рапаРозчинність аморфного 42-ефіру рапаміцину і міцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-23-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової метилпропіонової кислоти. кислоти може також бути збільшена шляхом збіIV. Розчинність аморфного 42-ефіру рапаміцильшення періодів часу змішування кристалічної ну і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2форми в розчинювальному розчиннику або шляметилпропіонової кислоти хом подрібнення такого ж. Фахівець в даній галузі Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2техніки спроможний визначити кількість часу, не(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, обхідну для полегшення розчинення аморфного отриманий відповідно до даного винаходу, має 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2декілька переваг над кристалічною формою. В (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти в розодному аспекті аморфний 42-ефір рапаміцину і 3чинювальному розчиннику. В одному варіанті здійгідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової снення винаходу аморфний 42-ефір рапаміцину і 17 84881 18 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової Фармацевтично ефективна кількість аморфнокислоти розчиняли в розчиннику протягом щонайго 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2менше близько 0,5 години. В іншому варіанті здій(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти може снення винаходу аморфний 42-ефір рапаміцину і варіювати в залежності від конкретної сполу3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової ки(сполук), типу доставки, тяжкості стану, що підкислоти розчиняли в розчиннику протягом від блидається лікуванню, і будь-яких інших активних інгзько 0,5 години до близько 72 годин. У наступному редієнтів, що використовуються в композиції. варіанті здійснення винаходу аморфний 42-ефір Режим дозування також може бути встановлений рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2для забезпечення оптимальної терапевтичної відметилпропіонової кислоти розчиняли в розчиннику повіді. За добу можуть бути доставлені декілька протягом від близько 24 до близько 48 годин. розділених доз, наприклад, у вигляді окремих доз Зразки аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3від 2 до 4 разів на добу, або може бути доставлегідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової на одна доза. Доза може, однак, бути пропорціокислоти можуть також бути пресовані в таблетки, нально знижена або збільшена в залежності від як обговорюється детально нижче. Такі таблетки, терапевтичної ситуації. В одному варіанті здійсщо містять те ж саме, показують більшу швидкість нення винаходу доставку здійснюють на щоденній, розчинення, ніж таблетки, що містять кристалічний тижневій або місячній основі. В іншому варіанті 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)здійснення винаходу доставкою є щоденна доста2-метилпропіонової кислоти (Фіг.1). В одному варівка. Однак добові дози можуть бути знижені або анті здійснення винаходу таблетки, що містять збільшені в залежності від періодичності доставки. аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, є (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти може приблизно в 1,5 рази більш розчинними, ніж таббути змішаний з одним або більше фармацевтичлетки, що містять кристалічну форму. но прийнятними носіями або ексципієнтами, вклюЗвичайно аморфний 42-ефір рапаміцину і 3чаючи, без обмеження, тверді і рідкі носії, які є гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової сумісними з композиціями згідно з даним винахокислоти є стабільним при температурі до близько дом. Такі носії включають серед іншого добавки, 5°C. сиропи, еліксири, розріджувачі, в'яжучі речовини, V. Композиції, що містять аморфний 42-ефір змащувальні речовини, поверхнево-активні речорапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2вини, гранулювальні агенти, дезінтегруючі агенти, метилпропіонової кислоти пом'якшувальні речовини, комплексони металів, Композиції, що містять аморфний 42-ефір рарегулятори рН, поверхнево-активні речовини, напаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2повнювачі, дезінтегруючі агенти і їх комбінації. В метилпропіонової кислоти, також можуть бути одному варіанті здійснення винаходу аморфний отримані відповідно до даного винаходу. Такі ком42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)позиції отримують змішуванням аморфного 422-метилпропіонової кислоти змішують з комплекефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2сонами металів, регуляторами рН, поверхневометилпропіонової кислоти і фармацевтично приактивними речовинами, наповнювачами, дезінтегйнятного носія. руючими агентами, змащувальними речовинами і Композиції, описані в даному описі, що містять в'яжучими речовинами. аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2Добавки можуть включати, без обмеження, (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, моароматизуючі агенти, барвники, консерванти і дожуть бути складені в будь-якій формі, відповідній даткові антиоксиданти, які можуть включати вітадля бажаного шляху доставки з використанням мін E, аскорбінову кислоту, бутилований гідроксифармацевтично ефективної кількості аморфного толуол (BHT) і бутилований гідроксіанізол (BHA). 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2В'яжучі речовини можуть включати, без обме(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Наження, целюлозу, метилцелюлозу, гідроксиметилприклад, композиції згідно з винаходом можуть целюлозу, карбоксиметилцелюлозу кальцію, карбути доставлені таким шляхом, як пероральний, боксиметилцелюлозу натрію, шкірний, черезшкірний, інтрабронхіальний, інтрагідроксипропілцелюлозу, фталат гідроксипропілназальний, внутрішньовенний, внутрішньом'язометилцелюлози, мікрокристалічну целюлозу, невий, підшкірний, внутрішньочеревинний, інтранакристалічну целюлозу, поліпропілпіролідон, полівізальний, вагінальний, ректальний, сублінгвальний, нілпіролідон (повідон, PVP), желатин, аравійську інтракраніальний, епідуральний, інтратрахеальний камедь і гуміарабік, поліетиленгліколи, крохмаль, або шляхом уповільненого вивільнення. Переважцукри, такі як сахароза, каолін, декстроза і лактоно, доставка є пероральною. за, холестерин, трагакант, стеаринову кислоту, Пероральна лікарська таблетована композиція желатин, казеїн, лецитин (фосфатиди), цетостеазгідно з даним винаходом також може бути викориловий спирт, цетиловий спирт, віск цетилових ристана для отримання пероральних таблеток, що ефірів, декстрати, декстрин, гліцерилмоноолеат, містять похідні аморфного 42-ефіру рапаміцину і гліцерилмоностеарат, гліцерилпальмітостеарат, 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової алкілові ефіри поліоксіетилену, поліоксіетиленові кислоти, включаючи, але, не обмежуючись ними, похідні касторової олії, поліоксіетиленстеарати, складні ефіри, карбамати, сульфати, прості ефіри, полівініловий спирт і желатин, серед інших. В одоксими, карбонати і подібні, які відомі фахівцеві в ному варіанті здійснення винаходу в'яжучою речоданій галузі техніки. виною є повідон, гідроксипропілметилцелюлоза, карбоксиметилцелюлоза або желатин. В іншому 19 84881 20 варіанті здійснення винаходу в'яжучою речовиною персного порошку, гранул, суспензії, сиропу, елікє повідон. сиру і аерозолю. Бажано, коли композиції, що місЗмащувальні речовини можуть включати, сетять аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2ред іншого, стеарат магнію, світлу безводну крем(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, донієву кислоту, тальк, стеаринову кислоту, лаурилставляють перорально, доставка здійснюється за сульфат натрію і стеарилфумарат натрію. В допомогою таблеток, капсул, заповнених твердою одному варіанті здійснення винаходу змащувальречовиною або рідиною. ною речовиною є стеарат магнію, стеаринова кисВ іншому варіанті здійснення винаходу комполота або стеарилфумарат натрію. В іншому варіазиції, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину і нті здійснення винаходу змащувальною 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової речовиною є стеарат магнію. кислоти можуть бути доставлені внутрішньовенно, Гранулюючі агенти можуть включати, серед внутрішньом'язово, підшкірно, парентерально і іншого, без обмеження, діоксид кремнію, мікрокривнутрішньочеревинно в формі стерильних ін'єкційсталічну целюлозу, крохмаль, карбонат кальцію, них розчинів, суспензій, дисперсій і порошків, які є пектин, кросповідон і поліпласдон. рідкими настільки, що легко можуть виходити з Дезінтегруючі агенти або дезінтегранти мошприца. Такі ін'єкційні композиції є стерильними і жуть включати, серед іншого, кроскармеллозу настабільними в умовах виробництва і зберігання, і трію, крохмаль, карбоксиметилцелюлозу, заміщевільними від забруднюючої дії мікроорганізмів, ну гідроксипропілцелюлозу, бікарбонат натрію, таких як бактерії і гриби. фосфа т кальцію, цитрат кальцію, гліколат крохмаВ наступному варіанті здійснення винаходу лю натрію, пептизований крохмаль або кросповікомпозиції, що містять аморфний 42-ефір рапамідон. В одному варіанті здійснення винаходу дезінцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2тегрантом є кроскармелоза натрію. метилпропіонової кислоти, можуть бути доставлені Пом'якшувальні речовини можуть включати, ректально в формі звичайного супозиторію. без обмеження, стеариловий спирт, норковий жир, В іншому варіанті здійснення винаходу компоцетиловий спирт, олеїловий спирт, ізопропіллаузиції, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину і рат, поліетиленгліколь, оливкову олію, вазелінове 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової масло, пальмітинову кислоту, олеїнову кислоту і кислоти, можуть бути доставлені вагінально в фоміристилміристат. рмі звичайного супозиторію, крему, гелю, кільця Поверхнево-активні речовини можуть включаабо покритого оболонкою внутрішньоматкового ти полісорбати, складні ефіри сорбітану, полоксапристрою (IUD). мер або лаурилсульфат натрію. В одному варіанті У ще одному варіанті здійснення винаходу здійснення винаходу поверхнево-активною речокомпозиції, що містять аморфний 42-ефір рапамівиною є лаурилсульфа т натрію. цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2Комплексони металів можуть включати фізіометилпропіонової кислоти, можуть бути доставлені логічно прийнятні хелатоутворювальні агенти, інтраназально або інтрабронхіально в формі аеровключаючи етилендіамінтетраоцтову кислоту, ябзолю. лучн у кислоту або фумарову кислоту. В одному Також композиції згідно з даним винаходом, варіанті здійснення винаходу комплексоном метащо містять аморфний 42-ефір рапаміцину і 3лів є етилендіамінтетраоцтова кислота. гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової Регулятори рН можуть також бути використані кислоти, можуть бути спільно введені з одним або для регуляції рН розчину, що містить 42-ефір рабільше іншими агентами, включаючи хіміотерапевпаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2тичні агенти проти відторгнення. метилпропіонової кислоти від близько 4 до близьВимоги до дозування аморфного 42-ефіру рако 6. В одному варіанті здійснення винаходу рН паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2розчину, що містить 42-ефір рапаміцину і 3метилпропіонової кислоти можуть варіювати в гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової залежності від тяжкості симптомів і конкретного кислоти, доводили до рН близько 4,6. Регулятори пацієнта, одержуючого лікування. Фахівець в даній рН можуть включати фізіологічно прийнятні агенгалузі техніки легко зможе визначити необхідну ти, включаючи лимонну кислоту, аскорбінову кискількість аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3лоту, фумарову кислоту або яблучн у кислоту і їх гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової солі. В одному варіанті здійснення винаходу регукислоти. В одному варіанті здійснення винаходу лятором рН є лимонна кислота. вводять від близько 0,5 до близько 75мг. У наступНаповнювачі, які можуть бути використані відному варіанті здійснення винаходу вводять від повідно до даного винаходу, включають безводну близько 1 до близько 25мг. В іншому варіанті здійлактозу, мікрокристалічну целюлозу, маніт, фосснення винаходу вводять від близько 0,5 до блифат кальцію, пептизований крохмаль або сахарозько 10мг, особливо, коли використовують в комзу. В одному варіанті здійснення винаходу наповбінації з іншим агентом. У ще одному варіанті нювачем є безводна лактоза. В іншому варіанті здійснення винаходу вводять від близько 2 до здійснення винаходу наповнювачем є мікрокрисблизько 5мг. У ще одному варіанті здійснення виталічна целюлоза. находу вводять від близько 5 до близько 15мг. В одному варіанті здійснення винаходу компоЛікування може починатися з доз аморфного зиції, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину і 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-23-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти менкислоти, доставляють перорально за допомогою ших, ніж необхідні для отримання бажаного ефектаблетки, каплети або капсули, мікрокапсул, дисту і звичайно менших, ніж оптимальна доза амор 21 84881 22 фного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Після кислоти, включають змішування аморфного 42цього доза може бути збільшена до досягнення ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2оптимального ефекту в даних обставинах. Приметилпропіонової кислоти, етилендіамінтетраоцзначені дози визначаються лікуючим лікарем на тової кислоти, лимонної кислоти, лаурилсульфату основі досвіду, що стосується пацієнта, одержуюнатрію, безводної лактози, повідону, кроскармелочого лікування. Загалом, композиції згідно з винази натрію і стеарату магнію. ходом найбільш переважно вводять в концентраУ ще одному варіанті здійснення винаходу ції, яка звичайно дає ефективні результати без способи отримання фармацевтичної композиції, яких-небудь шкідливих або згубних побічних ефекщо містить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3тів. гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової VI. Способи отримання композицій, що ввокислоти, включають змішування аморфного 42дяться, які містять аморфний 42-ефір рапаміцину і ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-23-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової метилпропіонової кислоти, етилендіамінтетраоцкислоти тової кислоти, лимонної кислоти, лаурилсульфату В одному аспекті даний винахід включає спонатрію, першої частини безводної лактози, повідсоби отримання фармацевтичної композиції, що ону, першої частини кроскармелози натрію, другої містить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідроксичастини безводної лактози, другої частини кроска2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. рмелози натрію і стеарату магнію. Композицію можна вводити ссавцеві декількома У ще одному варіанті здійснення винаходу різними шляхами, як указано вище, і бажано ввоспособи отримання фармацевтичної композиції, дять перорально в твердій або рідкій формі. що містить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3Тверді форми, включаючи таблетки, капсули і гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової каплети, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину кислоти, включають стадії (а) змішування аморфі 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової ної форми 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2кислоти, можуть бути утворені змішуванням амо(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, комрфної форми з одним або більше компонентами, плексону металів і регулятора рН; (b) змішування описаними вище. В одному варіанті здійснення поверхнево-активної речовини, першої частини винаходу компоненти композиції змішують сухим щонайменше одного наповнювача, зв'язуючого і або вологим змішуванням. В іншому варіанті здійпершої частини дезінтегранту; (с) змішування проснення винаходу компоненти гранулюють сухим дукту (b) з продуктом (a); (d) змішування другої способом. У наступному варіанті здійснення виначастини щонайменше одного наповнювача і другої ходу компоненти суспендують або розчиняють в частини дезінтегранту з продуктом (с); (e) перемірідині і додають до форми, придатної для введеншування продукту (d); і (f) змішування продукту (e) ня ссавцеві. із змащувальним агентом. Продукт стадії (b) може Рідкі форми, що містять аморфний 42-ефір необов'язково бути пропущений через пристрій рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2для видалення великих гр удок, наприклад, сито. метилпропіонової кислоти, можуть бути утворені У ще одному наступному варіанті здійснення розчиненням або суспендуванням аморфної форвинаходу способи отримання фармацевтичної ми в рідині, придатній для введення ссавцеві. композиції, що містить аморфний 42-ефір рапаміВ одному варіанті здійснення винаходу спосоцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2би отримання фармацевтичної композиції, що місметилпропіонової кислоти, включають стадії (а) тить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2змішування аморфної форми 42-ефіру рапаміцину (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової включають змішування аморфного 42-ефіру рапакислоти, етилендіамінтетраоцтової кислоти і лиміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2монної кислоти; (b) змішування лаурилсульфату метилпропіонової кислоти, комплексону металів, натрію, першої частини безводної лактози, повідрегулятора рН, поверхнево-активної речовини, ону і першої частини кроскармелози натрію; (с) наповнювача, в'яжучої речовини, дезінтегранту і змішування продукту (b) з продуктом (a), (d) змізмащувальної речовини. шування другої частини безводної лактози і другої В іншому варіанті здійснення винаходу спосочастини кроскармелози натрію з продуктом (с); (e) би отримання фармацевтичної композиції, що місперемішування продукту (d); і (f) змішування протить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2дукту (e) зі стеаратом магнію. (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, Даний винахід також відноситься до наборів включають змішування аморфного 42-ефіру рапаабо упаковок фармацевтичних композицій, ствоміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2рених для застосування в даному винаході. Набометилпропіонової кислоти, комплексону металів, ри згідно з даним винаходом можуть включати регулятора рН, поверхнево-активної речовини, аморфну форму 42-ефіру рапаміцину і 3-гідроксипершої частини щонайменше одного наповнюва2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти і ча, в'яжучого агента, першої частини дезінтегранносій, придатний для введення ссавцеві, як обготу, другої частини щонайменше одного наповнюворювалося вище. вача, другої частини дезінтегранту і VII. Способи застосування аморфного 42змащувального агента. ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2В наступному варіанті здійснення винаходу метилпропіонової кислоти способи отримання фармацевтичної композиції, Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2що містить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти може 23 84881 24 бути використаний в лікуванні або профілактиці Приклад 1 множини станів, відомих фа хівцям в даній галузі Способи отримання аморфного 42-ефіру ратехніки, про які відомо, що вказана кристалічна паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2форма лікує або запобігає ним. метилпропіонової кислоти Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2A. Спосіб отримання аморфного 42-ефіру ра(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти може, паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2отже, володіти імуносупресивною, активністю прометилпропіонової кислоти випаровуванням з викоти відторгнення, протигрибковою, протизапальристанням бутилованого гідрокситолуолу і бутилоною, протипухлинною і антипроліферативною акваного гідроксіанізолу тивністю. Кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідроксиАморфна форма, отже, може бути використа2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти на для лікування або інгібування відторгнення (0,5г), бутилований гідрокситолуол (BHT) (0,063г) і трансплантату, включаючи нирку, серце, печінку, бутилований гідроксіанізол (BHA) (0,125г) розчилегені, кістковий мозок, підшлункову залозу, рогівняли в зневодненому етанолі (15мл). Спирт випаку, тонкий кишечник, шкірні алотрансплантати і ровували при зниженому тиску з використанням ксенотрансплантати серцевих клапанів. Аморфна ротаційного випарника і при постійній температурі форма також може бути використана для лікуванвід близько 25 до близько 30°C з використанням ня або інгібування алергічного енцефаломієліту, водяної бані. Випарену тверду речовину (партія артриту і гіперпроліферативних судинних розлаA1) тримали протягом ночі у вакуумі для видалендів, включаючи рестеноз, атеросклероз і серцеві ня залишкового етанолу. запальні захворювання. Т-клітинний лейВисушен у речовину потім пропускали через коз/лімфома дорослих, захворювання «трансплан#80 сито і аналізували з використанням рентгенівтат проти хазяїна», запалення очей і грибкові інської дифракції (XRD) і диференціальної скануюфекції також можна лікувати з використанням чої калориметрії (DSC). аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2B. Спосіб отримання аморфного 42-ефіру ра(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Амопаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2рфна форма також може бути використана для метилпропіонової кислоти випаровуванням лікування або інгібування солідних пухлин, вклюКристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідроксичаючи саркоми і карциноми, включаючи астроци2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти томи, рак передміхурової залози, рак молочної (0,5г) розчиняли в зневодненому етанолі (2мл). залози, дрібноклітинний рак легенів і рак яєчника. Потім спирт випаровували при зниженій темпераАутоімунні захворювання, включаючи вовчак, ревтурі з використанням ротаційного випарника при матоїдний артрит, цукровий діабет, міастенію і постійній температурі від близько 25 до близько розсіяний склероз, також можуть бути вилікувані 30°C з використанням водяної бані. Випарені реабо відвернені із застосуванням аморфного 42човини витримували при зниженому тиску протяефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2гом ночі для видалення залишкового етанолу. метилпропіонової кислоти, отриманого згідно з Висушен у речовину (партія B1) потім пропусданим винаходом. Крім того, запальні захворюкали через #80 сито і аналізували з використанням вання, включаючи псоріаз, дерматит, екзему, сеXRD і DSC. борею, запальні захворювання кишечника, легеC. Способи отримання аморфного 42-ефіру неве запалення, включаючи астму, хронічні рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2обструктивні захворювання легенів, емфізему, метилпропіонової кислоти гострий респіраторний дистрес синдром, бронхіт і Варіюючі кількості кристалічного 42-ефіру раувеїт очей можуть бути вилікувані або інгібовані з паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2використанням аморфної форми 42-ефіру рапаміметилпропіонової кислоти розчиняли у варіюючих цину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2кількостях етанолу, як указано в таблиці 1. Отриметилпропіонової кислоти. мані розчини потім тримали при кімнатній темпеВідповідні схеми прийому можуть бути легко ратурі (партії С1-С3) або охолоджували до темпевизначені на основі інформації, представленої в ратури нижче кімнатної температури (партії С4 і даному описі. С5) з використанням крижаної води при темпераНаступні приклади приведені для ілюстрації турі близько 0°C протягом близько 40 хвилин. Довинаходу і не обмежують його рамки. Фахівець в давали воду до кожного з цих розчинів, і тверді даній галузі техніки повинен брати до уваги, що речовини осаджували з розчинів. Осаджені тверді хоча в наступних прикладах описані специфічні речовини збирали фільтрацією і сушили при зниреагенти і умови, можуть бути зроблені модифікаженому тиску при кімнатній температурі протягом ції, які не вийдуть за рамки винаходу. від близько 2 до близько 7 днів. Приклади 25 84881 26 Таблиця 1 Партія № Розмір партії (г) C1 0,20 С2 1,00 С3 1,00 С4 4,50 С5 20,0 Температура Кімнатна температура Кімнатна температура Кімнатна температура 8°C 9°C D. Спосіб отримання аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти подрібненням Кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти (1,416г) подрібнювали в мішальному млині RetschÒ (Тип ММ2) з 25мл подрібнюючим резервуаром і двома кульками з неіржавіючої сталі, що мають діаметри 12мм з швидкістю млина 40 обертів за хвилину (об./хв.). Подрібнені зразки забирали для аналізів XRD і DSC на 20 (партія D1), 40 (партія D2) і 60 хвилин (партія D3). Приклад 2 Подрібнення аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти Подрібнення аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти (15,0г) проводили з використанням млину TrostÔ (вихровий млин) при вхідному тиску азоту близько 40 фунтів на квадратний дюйм (psi), швидкістю подачі близько 1г/хв. для отримання подрібненого аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти (10,3г). Приклад 3 Спектральний аналіз аморфного 42-ефіру рапацимина і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти Отримували ВЕРХ хроматограми зразків аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отриманих випаровуванням, осадженням і подрібненням, як указано в прикладі 1. Умови ВЕРХ включали температур у колонки близько 45°C, швидкість струму близько 1,0мл/мм, довжину хвилі визначення близько 280 нанометрів (нм), колонку 150 міліметрів (мм) ´ 4,6мм YMC PackÔ ODS-AM, що містить 3мкм частинки, першу рухому фазу, що містить розчин ацетату амонію з рН близько 3,8, ацетонітрил і діоксан в молярному співвідношенні близько 80:52:68, і другу рухому фазу, що містить розчин ацетату амонію при рН близько 3,8, ацетонітрил і діоксан в молярному співвідношенні близько 20:34:46. ВЕРХ хроматограми аморфних зразків порівнювали з ВЕРХ хроматограмою зразка речовини кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти з використанням таких же вищезгаданих умов. Час утримання близько 21хв. спостерігали для речовини аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. Приклад 4 Об'єм етанолу (мл) 4 6 6 25 90 Об'єм води(мл) Вихід (%) 20 75 100 Не визначали 40 82 150 94 200 90 Характеристика аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти XRD зображення і DSC термограми отримували для кристалічного і аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти. XRD зображення отримували відповідно до даного винаходу з використанням комерційно доступного приладу рентгенівської дифракції PhilippsÒ Expert BW-3040. DSC термограми отримували відповідно до даного винаходу з використанням комерційно доступного диференціального скануючого калориметра. А. Рентгенівська дифракція (XRD) (і) Кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти XRD зображення кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти отримували, і воно відображало характерні піки в XRD зображенні на 2q на близько 8°, близько 9°, близько 11°, близько 15°, близько 16°, близько 17°, близько 18° і близько 20° (Фіг.1A). (іі) Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти XRD зображення аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманого випаровуванням і осадженням, показало, що характерні кристалічні піки для кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, так само не були присутніми в зображенні рентгенівської дифракції для аморфної форми. Особливо, XRD зображення аморфного 42ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманого випаровуванням розчинника (партія A1) або осадженням (партія C1), показало широкий пік на 2q на близько 17° (Фіг.3А і 3В). Крім того, XRD зображення аморфного 42ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманого подрібненням (партії D1-D3), показали помітне зниження характерних кристалічних піків із збільшенням часу подрібнення (Фіг.1B-1D і таблиця 2). Особливо, при збільшенні часу подрібнення, піки, відповідні кристалічному 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, зникали, таким чином ілюструючи утворення аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. 27 84881 28 Таблиця 2 Партія Кристалічний D1 D2 D3 A1 C1 Піки рентгенівської дифракції при 2q (°) 7,8, 9,0, 9,8, 10,1, 11,0, 11,3, 12,7, 13,3, 14,8, 15,2, 16,0, 17,2, 17,6, 18,1, 18,3, 19,0, 19,8, 21,1, 21,8, 22,1, 23,5, 25,0, 25,6, 26,6, 27,1, i 28,5 7,8, 8,8, 9,7, 10,0, 10,8 11,3, 12,5, 13,3, 15,0, 15,5, 16,2, 17,2, 18,2, 19,1, 19,9, 21,1 22,2, 23,6, 25,0, 26,7, 27,3 і 28,8 7,8, 9,0, 9,3, 10,8, 11,2, 12,8, 13,2, 15,0, 15,3, 16,0, 17,6, 18,2, 19,9, 21,1, i 24,9 8,0, 9,1, 11,2, 12,8, 13,7, 15,4 і 16,5 17 17 В. Ди ференціальна скануюча калориметрія (DSC) (і) Кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти DSC термограма кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти характеризувалася гострою ендотермою плавлення при 163,98°С, така ендотерма показує кристалічну природу 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропюнової кислоти (Фіг.4). DSC термограма також включає ендотерму продукту розкладання при 178,25°С. (іі) Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отриманий випаровуванням DSC термограма аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманого методом випаровування етанолу (партія B1), показала широку ендотерму при 43,30°C. Без зв'язку з теорією автори винаходу передбачили, що така широка ендотерма при 43,30°C була, видимо, внаслідок залишкового етанолу і води (Фіг.5). DSC термограма також показала невелику ендотерму при 105,18°C. Можливі ендотерми продуктів розкладання в DSC термограмі при 173,24°С і 176,50°C також спостерігали. Характерна ендотерма плавлення при 163,98°C для кристалічної форми не була присутнім в DSC термограмі для аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, що таким чином вказує на присутність аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. (ііі) Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отриманий осадженням DSC термограма аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманого осадженням (партія C1), показала широку ендотерму близько 43,30°C, видимо, внаслідок залишкового етанолу і води (Фіг.6), як вказано вище. DSC термограма також показала невелику ендотерму 105,18°C. Також спостерігали можливі ендотерми продуктів розкладання в DSC термограмі 173,24°C і 176,50°C. Характерна ендотерма плавлення 163,98°С для кристалічної форми не була присутньою в цієї DSC термограмі, що, таким чином, вказує на присутність аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. (IV) Аморфний 42-ефір рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отриманий подрібненням DSC термограма аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманого подрібненням протягом 60 хвилин (партія D3), показала знижену інтенсивність і зсув кристалічної ендотерми з 163,98°С до 155,17°C. Такий зсув, отже, показує значне зниження кристалічності зразка (Фіг.7). Приклад 5 Розчинність аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти А. Розчинність в буфері Визначали розчинність аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти (партія С4) і подрібненого кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти в розчині лимонної кислоти. Окремі зразки, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти (партія С3) (9,1мг) і подрібнений кристалічний 42-ефір рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти (41,0мг), додавали в сцинтиляційні флакони, що містять 10г (0,005M) розчину лимонної кислоти, який містить 0,001% ЕДТО. Розчини змішували і підтримували при кімнатній температурі і рН близько 4,6. Потім флакони струшували на ротаційному змішувачі протягом 24 годин. Зразки (2мл) і аморфного і кристалічного розчинів відбирали з вибраними тимчасовими інтервалами (0, 0,5, 3, 5 і 24ч), фільтрували через 0,2мкм фільтр і аналізували при кімнатній температурі з використанням високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) (таблиця 1). Розчинність зразків розраховували з використанням даних, представлених в ВЕРХ хроматограмі і методик, що використовуються фа хівцями в даній галузі техніки, і представлених в таблиці 3. Розчинність аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти розраховували протягом періоду 24 години і виявили, що вона складає близько 1,88нг/мл при 25°C, що в 3 рази вище, ніж для кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2 29 84881 30 (гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти. У ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2зв'язку з цим розчинення аморфного 42-ефіру раметилпропіонової кислоти. паміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2У зв'язку з цим розчинення аморфного 42метилпропіонової кислоти є, отже, більш швидким, ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2ніж розчинення подрібненої кристалічної форми. метилпропіонової кислоти в розчині поверхневоактивної речовини також є більш швидким, ніж Таблиця 3 розчинення подрібненої кристалічної форми. Приклад 6 Стабільність аморфного 42-ефіру рапаміцину і Розчинність (мкг/мл) Час (години) 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової Аморфна партія С3 Кристалічний кислоти 0 0 0 Стабільність аморфного 42-ефіру рапаміцину і 0,5 0,66 0,26 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 3 0,77 0,29 кислоти визначали при різних температурах протя5 0,79 0,23 гом певних періодів часу. 24 1,88 0,61 Приблизно 200мг зразків аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2В. Розчинність в розчині поверхнево-активної метилпропіонової кислоти, отриманого випаровуречовини ванням (партія A1) або осадженням (партія С4), Визначали розчинність аморфного 42-ефіру додавали в скляні флакони для ВЕРХ, флакони рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2накривали папером Kim WipesÔ (Fisher Scientific) і метилпропіонової кислоти (партія С4) і подрібнепапером Кіm WipesÔ , прив'язаним до шийки фланого кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3конів з використанням дроту. гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової Зразки аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3кислоти в розчині поверхнево-активної речовини. гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 0,005M розчин лимонної кислоти, що містить кислоти, отриманого випаровуванням, і аморфного 0,2% лаурилсульфату натрію і 0,001% ЕДТО каль42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2цієвих солі, доводили до рН близько 4,73. (гідроксиметил)-2-метилпропюнової кислоти, Окремі зразки, що містять аморфний 42-ефір отриманого осадженням, потім вміщували в більш рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2великі сцинтиляційні флакони, що містять близько метилпропіонової кислоти (партія С4) (60мг) і по1г безводного вологопоглинача сульфату кальцію. дрібненого кристалічного 42-ефіру рапаміцину і 3Зовнішні сцинтиляційні флакони закривали, гермегідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової тизували парафільмом і вміщували в стійкі камекислоти (60мг), додавали в сцинтиляційні посудири. Одну стійку камеру підтримували при темперани, що містять 10г розчину лимонної кислоти/SLS. турі близько 5°C при близько 10-20% відносної Потім розчини змішували, підтримували при кімнавологості (BB), і іншу стійку камеру підтримували тній температурі і струшували на ротаційному зміпри температурі близько 40°C при близько 75% шувачі протягом від близько 24 до близько 48 гоBB.) дин. Зразки аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3Зразки (2мл) і аморфного, і кристалічного розгідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової чинів забирали на 24год. і 48год., фільтрували кислоти, отриманого осадженням, потім вміщувачерез 0,2мкм фільтр і аналізували при кімнатній ли в 4мл флакони з поліетилену високої щільності температурі з використанням високоефективної (HDPE), що містять близько 2г безводного вологорідинної хроматографії (ВЕРХ) (таблиця 4). Розпоглинача сульфату кальцію. HDPE флакони герчинність зразків потім розраховували з викорисметизували з використанням пробок, що вводятьтанням даних, отриманих в ВЕРХ хроматограмі і ся теплом і закривали з використанням методик, що використовуються фахівцями в даній пластикових кришок. Один флакон вміщували в галузі техніки, і представлені в таблиці 4. стійку камеру при близько 5°С, один флакон вміщували в стійку камеру при близько кімнатній темТаблиця 4 пературі і третій флакон вміщували в стійку камеру при близько 40°C при BB близько 75%. Розчинність (мг/мл) Продукт Зразки зразків аморфного 42-ефіру рапаміци24 години 48 годин ну і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2Аморфний (партія С4) 2,17 2,24 метилпропіонової кислоти, отриманого випаровуПодрібнений кристалічний 0,64 0,64 ванням, забирали через 1 і 2 тижні (таблиця 5). Зразки зразків аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3Розчинність аморфного 42-ефіру рапаміцину і гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отриманого осадженням, забирали через кислоти в розчині поверхнево-активної речовини 1 тиждень і аналізували (таблиця 6). SLS протягом періоду 24 години розраховували як складову близько 2,17мг/мл при 25°С, яка приблизно в 3,5 рази вище, ніж така для кристалічного 42 31 84881 32 Таблиця 5 Початково 1 тиждень 2 тижні Сила (%) 95,20 92,56 Сила=98,33%, загальні прим.=0,46%, SLI=0,19% 5°С 40°С/75% OB Загальні прим. (%) SLI* (%) Сила (%) Загальні прим. (%) 5,07 3,91 94,16 5,15 4,42 3,74 90,55 4,60 SLI* (%) 3,93 3,72 Таблиця 6 Стан КT 5°C 40°С/75% BB Час початково 1 тиждень 1 тиждень 1 тиждень Сила (%) 97,93 97,49 98,71 91,36 Такі дані ілюструють, що аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)-2метилпропіонової кислоти, отриманий осадженням і випаровуванням, є стабільним. Приклад 7 Отримання таблеток, що містять аморфний 42-ефір рапаміцину і 3-гідрокси-2-(гідроксиметил)2-метилпропіонової кислоти Етилендіамінтетраоцтову кислоту (0,008г), безводну лимонну кислоту (0,021г) і суміш аморфного 42-ефіру рапаміцину і 3-гідрокси-2(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, отриманого осадженням (партія A1), змішували геометрично на папері для утворення заздалегідь змішаної суміші. SLS (2,841г), безводну лактозу (17,356г), повідон (16,521г) і близько 75% суміші, що містить мікрокристалічну целюлозу (MCC) PH 112, NF (35,049г) і кроскармелозу натрію (3,165г), пропускали через #20 сито. Таку просіяну суміш потім об'єднували із заздалегідь змішаною сумішшю, що містить аморфний 42-ефір рапаміцину і 3гідрокси-2-(гідроксиметил)-2-метилпропіонової кислоти, і переносили в V-змішувач. Суміш 25%, що залишилися MCC і кроскармелози натрію додавали в V-змішувач і перемішували протягом 5 хвилин. Додавали стеарат магнію (0,397г) до перемішаної суміші і перемішували протягом додаткових 2 хвилин. Загальні прим. (%) 0,41 0,37 0,44 0,70 SLI (%) 0,20 0,12 0,15 0,32 SECO (%) ND ND ND 0,04 Остаточн у суміш пресували в 625мг таблетки (твердість 14-17 кілопонд (кп)) з використанням 0,25´0,71" інструментів в формі каплети на таблетувальній машині В2 StokesÔ . ВЕРХ кожного зразка отримували, як відмічено вище, з використанням температури близько 45°С, швидкості потоку близько 1,0мл/хвилина, довжини хвилі визначення близько 280нм, колонки зворотної фази 150мм´4,6мм YMC PackÒ ODS-AM, що містить 3мкм частинки ODS, першу рухому фазу розчину ацетату амонію при рН близько 3,8, ацетонітрилу і діоксану в молярному співвідношенні близько 80:52:68, і другу р ухому фазу розчину ацетату амонію при рН близько 3,8, ацетонітрилу і діоксану в молярному співвідношенні близько 20:34:46. Спостерігали пік часу утримання близько 21 хвилини. Всі публікації, цитовані в даному описі, включені в даний опис у вигляді посилання. Хоча винахід був описаний з посиланням на особливо переважний варіант здійснення винаходу, необхідно брати до уваги, що можуть бути внесені модифікації без відхилення від суті винаходу. Такі модифікації входять в рамки прикладеної формули винаходу. 33 84881 34 35 84881 36 37 84881 38 39 Комп’ютерна в ерстка О. Гапоненко 84881 Підписне 40 Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601