Амінокислотний складний ефір, що містить азол, спосіб його одержання, проміжні сполуки та фармацевтична композиція

1 Амінокислотний складний ефір, що містить азол формули (І) чхх>л. о W \ сн3 о >—сп—сн/ А—В його N-оксидна форма, фармацевтично прийнятна адитивна сіль або стереохімічна ізомерна форма, Де -А-В- утворюють бівалентний радикал з формулою -N=CH(a), -CH=N(b), -СН=СН(с), де один атом водню в радикалі (а) та (Ь) може бути заміщений Сі єалкільним радикалом, та до двох атомів водню у радикалі (с) можуть бути заміщені Сі єалкільним радикалом, L - ацильна складова амінокислоти, D - радикал формули a .h о . /СН 3 , (Di) (D2) деХ-ЫабоСН, R1 - галоген, R2 - водень або галоген 2 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що L - це радикал формули (а) О -С- •СН О .(а) Де R' - аміно, моно або ді(Сі балкіл)аміно, аміноСі єалкіл, Сі балкілоксикарбоніламіно, бензилоксикарбоніламіно, трифторметоксикарбоніламшо, 1піролідиніл, 1-піперидиніл, 4-морфолшіл, 1піперазиніл або 1-піперазиніл, заміщений Сі єалкілом, пдроксіСі єалкілом, аміноСі єалкілом або Сі балкіламіноСі єалкілом, R" - водень, Сі єалкіл, арил, Сі єалкіл, заміщений арилом, Сі єалкілтю, ІНДОЛІЛОМ, аміно, гідрокси, меркапто, амінокарбонілом, карбоксилом, гуанідинілом, імідазолілом, або R' та R" взяті разом утворюють -CH2-CH2-CH2-NH-, арил - феніл або феніл, заміщений гідрокси або галогеном З Сполука за п 2, яка відрізняється тим, що L ацильна складова одної із наступних амінокислот (О 61919 HO—C—Ck*-NH* НО або тих їх похідних, в яких змінна складова є моноабо дизаміщеною Сі єзлкілом або монозаміщена трет-бутилокси карбонілом 4 Сполука за будь-яким із пп 1-3, яка відрізняється тим, що замінники на дюксолановому КІЛЬЦІ мають цис-конфігурацію 5 Сполука за будь-яким із пп 1-4, яка відрізняється тим, що D - радикал формули D1 6 Сполука за будь-яким із пп 1-5, яка відрізняється тим, що R1 та R2 - фтор, X - N та -А-В- є радикалом формули (Ь) 7 Сполука за будь-яким із пп 1-4, яка відрізняється тим, що обидва хіральних атоми вуглецю 1метилпропільної складової мають S конфігурацію, та D - радикал формули D1, де замінники мають на дюксолановому КІЛЬЦІ цис-конфігурацію, а атом вуглецю під номером 2 на дюксолановому КІЛЬЦІ має абсолютну S конфігурацію 8 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що вона являє собою 2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2-(1Н-1,2,4триазол-1 -ілметил)-1,3-дюксолан-4іл]метокси]феніл]-1-піперазиніл]феніл]-4,5-дипдро5-оксо-1 Н-1,2,4-триазол-1 -іл]-1 -метилпропіл-N.Nдіетил гліцин, 2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2-(1Н-1,2,4триазол-1 -ілметил)-1,3-дюксолан-4іл]метокси]феніл]-1-піперазиніл]феніл]-4,5-дипдро5-оксо-1 Н-1,2,4-триазол-1 -іл]-1 -метилпропіл-Lфеніл аланін, 2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2-(1Н-1,2,4триазол-1 -ілметил)-1,3-дюксолан-4іл]метокси]феніл]-1-піперазиніл]феніл]-4,5-дипдро5-оксо-1 Н-1,2,4-триазол-1 -іл]-1 -метилпропіл-Lлейцин, 2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2-(1Н-1,2,4триазол-1-ілметил)-1,3-дюксолан-4-іл]метокси]феніл]-1 -піперазиніл]феніл]-4,5-дипдро-5-оксо-1 Н1,2,4-триазол-1-іл]-1-метилпропіл-І_-валш, 2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2-(1Н-1,2,4триазол-1-ілметил)-1,3-дюксолан-4-іл]метокси]феніл]-1 -піперазиніл]феніл]-4,5-дипдро-5-оксо-1 Н1,2,4-триззол-1-іл]-1-метилпропіл-І_-фенілгліцин, їх N-оксидну форму, їх фармацевтично прийнятну адитивну сіль або їх стереохімічну ізомерну форму 9 Енантюмерно чиста форма проміжної сполуки формули (II) її N-оксид або адитивна сіль, де D та -А-В- мають значення за п 1 10 Проміжна сполука формули (II) за п 9, яка відрізняється тим, що сполука являє собою [2S[2 а ,4 а [(Р*,Р*)]]]-4[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2(1Н-1,2,4-триззол-1-ілметил)-1,3-дюксолзн-4іл]метокси]феніл]-1-піперазиніл]феніл]-2,4-дипдро2-(2-пдрокси-1-метилпропіл)-ЗН-1,2,4-триазол-3-он або [2S-[2 a ,4 a [(R*,R*)]]]-4[4-[4-[4-[[2-(2,4дихлорфеніл)-2-(1 Н-1,2,4-триазол-1 -ілметил)-1,3дюксолан-4-іл]метокси]феніл]-1-піперазиніл]феніл]2,4-дипдро-2-(2-пдрокси-1-метилпропіл)-ЗН-1,2,4триазол-3-он 11 Енантюмерна суміш проміжних сполук формули їх N-оксид або адитивна сіль, де D та -А-В- мають значення за п 1 12 Енантюмерна суміш за п 11, яка відрізняється тим, що енантюмерна суміш являє собою [2 а ,4 а [(Р*Р*)]]-4[4-[4-[4-[[2-(2,4-дифторфеніл)-2(1Н-1,2,4-триззол-1-ілметил)-1,3-дюксолзн-4іл]метокси]феніл]-1-піперазиніл]феніл]-2,4-дипдро2-(2-пдрокси-1-метилпропіл)-ЗН-1,2,4-триазол-3-он 13 Сполука за будь-яким з пп 1-8 для використання як лікарського засобу 14 Фармацевтична композиція, яка включає фармацевтично прийнятний носій та активний інгредієнт, яка відрізняється тим, що як активний інгредієнт вона містить терапевтично ефективну КІЛЬКІСТЬ сполуки за одним ІЗ пп 1-8 15 Фармацевтична композиція за п 14, яка відрізняється тим, що придатна для внутрішньовенного призначення 16 Спосіб отримання сполуки за п 1, який відрізняється тим, що проводять О-ацилювання проміжної сполуки формули (II) реагентом формули (VI) та далі проводять реакцію таким чином отриманої проміжної сполуки формули (VII) з аміном формули (VIII) 1 де W - реактивна відхідна група, зв'язана з ацильною складовою L, W 3 - реактивна відхідна група, D та -А-В- має значення за п 1, причому NRxRy є необов'язково моно- або дизаміщеною змінною складовою амінокислоти, як визначено відносно L у п 1, причому U є ідентичним L, як визначено у п 1, за виключенням необов'язкової моно-або дизаміщеної змінної складової, тз, зз бзжзнням, перетворення сполук формули (І) однз в іншу зз допомогою відомих у дзній гзлузі перетворень, і дзлі, зз бзжзнням перетворення сполук формули (І) у терзпевтично зктивну нетоксичну кислотно-здитивну сіль шляхом обробки кислотою, збо нзвпзки, перетворення форми кислотно-здитивної солі у вільну основу шляхом обробки лугом, тз, зз бзжзнням, отримзння їхніх стереохімічних ізомерних збо Nоксидних форм 61919 Цей винахід стосується нових азолових протигрибкових сполук широкого застосування та їх отримання, зокрема, до композицій, що їх вміщують, а також до їх використання в медицині Систематичні грибкові інфекції у людини досить рідко зустрічаються у країнах із помірним кліматом і більшість видів грибків, що можуть стати хворобоутворюючими, існують коменсально у нормальних умовах у ТІЛІ і є звичайним явищем у оточуючому середовищі Однак, протягом декількох минулих десятиріч спостерігається тенденція до збільшення числа випадків систематичних смертельно загрозливих грибкових захворювань у всьому СВІТІ , які зараз становлять найбільшу загрозу для значної КІЛЬКОСТІ сприйнятливих пацієнтів, особливо вже госпіталізованих В основному зростання чисельності таких випадків можна пояснити покращанням виживання імуноскомпрометованих пацієнтів за рахунок постійного вживання антимікробних препаратів Більш ТОГО, типова флора для більшості видів простих грибкових інфекцій також змінюється і це є складною епідеміологічною проблемою, важливість якої постійно зростає Найбільший ризик являють ті пацієнти, які мають ослаблену імунну функцію, або безпосередньо в результаті імуносупресм від прийому цитотоксичних ЛІКІВ, або в разі наявності інфекції СНІДу, або як побічний ефект в результаті інших захворювань, які послаблюють імунітет, такі як рак, гостра форма лейкемії, або хірургічних операцій або тривалого діяння антимікробних агентів В основному у людей зустрічаються такі прості систематичні грибкові інфекції, як кандидоз, аспергільоз, пстоплазмоз, КОКСИДІОІДОМІКОЗ, паракоксидюідомікоз, бластомікоз та криптококкоз Для лікування та профілактики хронічних грибкових інфекцій у імуноскомпрометованих пацієнтів застосовуються такі протигрибкові препарати як кетоконазол, ітраконазол та флуконазол Однак, викликає непокоєння СТІЙКІСТЬ грибкових інфекцій до деяких із таких препаратів, особливо тих , що мають обмежене застосування, наприклад, флуконазол Як визнано у СВІТІ медицини біля 40% людей, які хронічно страждають гострим грибковим захворюванням, ледве або зовсім не можуть вживати ліки орально, і це є значним їх недоліком Причиною такої несприйнятливості може бути знаходження пацієнтів у комі або наявність у них гострого гастропарезу Тому вживання нерозчинних або слабо розчинних протигрибкових препаратів, наприклад, ітраконазолу, які важко призначати внутрішньовенно, навряд чи допоможе вказаній групі пацієнтів Отже існує потреба створення нових протигрибкових препаратів переважно широкого застосування, проти яких не існує СТІЙКОСТІ і які можна призначати внутрішньовенно Переважно протигрибкові препарати треба виробляти у формі фармацевтичних композицій, принадних для орального призначення Це дає змогу лікарям продовжити лікування тими ж ліками після того, як пацієнт вийшов із тих умов, які вимагали тільки внутрішньовенного лікування ними У патенті США US-4,267,179 описані гетероциклічні ПОХІДНІ (4-фенілпіперазин-1-иларилоксиметил-1,3-дюксолан-2-ил)-метил-1Німідазолівта 1Н-1,2,4-тріазолів, які використовуються як протигрибкові агенти Вказаний патент стосується ітраконазолу, який зараз є широко розповсюдженим у СВІТІ протигрибковим препаратом У патенті США US-4,9 16,134 викладені вдосконалені антимікробні властивості 4-[4-[4-[[2-(2,4діфторофеніл)-2-(1 Н-азолиметил)-1,3-дюксолан-4ил]метокси]феніл]-1-піперазинил]феніл]тріазолонів У патенті США US-4,791,111 описані ПОХІДНІ [[4[4-(4-феніл-1-піперазинил)феноксиметил]-1,3дюксолан-2-ил]метил]-1Н-імідазолів та 1Н-1,2,4,тріазолів, які за структурою відносяться до деяких із сполук цього винаходу, які, як було виявлено, мають виключні антимікробні властивості Зокрема, особлива увага у вищевказанному патенті приділяється цис-4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-діфторофеніл)-2-(1Н1,2,4-тріазол-1-илметил)-1,3-дюксолан-4-ил]метокси]-феніл]-1-піперазинил]феніл-2,4-діпдро-2(2-пдрокси-1-метилпропил)-ЗН-1,2,4-тріазол-3-он, причому вказана сполука є стереоізомерною сумішшю всіх можливих енантюмерів та діастереомерів, які мають цис-конфігурацію у 1,3дюксолановому КІЛЬЦІ У патенті WO93/19061 виявлені стереоспецифічні ізомери [2R-[2a,4a,4(R*)]],[2R[2a,4a,4(S*)]],[2S-[2a,4a,4(S*)]] та [2S-[2a,4a,4(R*)]] ітраконазолу, який, як виявилось, має кращу розчинність у воді, ніж ВІДПОВІДНІ діастереомеричні суміші У патенті WO-95/19983 описані ПОХІДНІ [[4-[4-(4феніл-1-піперазинил)]феноксиметил]-1,3-дюксолан2-ил]метил]-1Н-імідазолів та 1Н-1,2,4,-тріазолів, які за структурою відносяться до деяких із сполук цього винаходу, які, як було виявлено, є розчинними у воді антимікробними агентами У патентах WO 95/17407, WO-96/38443 та WO97/00255 описані тетрапдрофуранові протигрибкові сполуки У останніх двох публікаціях описані тетрапдрофуранові протигрибкові сполуки, які можна отримувати у вигляді водного розчину та/або суспензії для внутрішньовенного призначення, та які містять групи заміщення, які легко перетворюються у гідроксильні групи у живому організмі Цей винахід відноситься до нових сполук з формулою V D-~O—/ V-N 1 - H HC j X NC — C - H до азотнокислих форм, їхніх фармацевтично сприйнятливих адитивних солей та стереохімічно ізомерних форм, де -А-В- утворюють двохвалентний радикал з формулою -N=CH(а) -CH=N(b) -СН=СН(с) де один атом водню в радикалі (а) та (Ь) можна замінити Сі єалкіл радикалом, а до двох атомів водню у радикалі (с) можна замінити Сі єалкіл радикалом, 61919 L це эцильнэ склэдовэ змінокислоти , і тэким чином -O-L це групэ склэдних ефірів змінокислоти, D це рздикзл з формулою деХце Na6oCH, R1 це гало, R2 це водень або гало У визначеннях цього винаходу термін гало означає фтор, хлор, бром та йод (в сполуці), Сі єзлкіл є родовим для прямих або розгалужених ланцюгових пдрокарбонів, які мають від 1 до 6 атомів вуглецю, наприклад метил, етил, пропил, бутил, пентил або гексил та можливо розгалужені ізомери із них При визначенні L у термін "амінокислота" слід включати, але не обмежувати, 20 а-амінокислот, звичайно присутніх у протеїнах, таких як гліцин, аланін, валін, лейцин, ізолейцин, метіонін, пролін, фенілаланін, триптофан, серин, треонін, цистеїн, тирозин, аспарагін, глютамін, аспарагінова кислота, глютамінова кислота, лізин, аргінін та гістидин, та відносно рідкісні амінокислоти, які можна визначити в спеціальних видах протеїнів, наприклад, у 4-пдроксипроліні, гідрокси ЛІЗИНІ, десмозині та ізодесмозині, та більше 150 інших амінокислот, які зустрічаються у біологічно чистій чи комбінованій формі, але ні в якому разі не в протеїнах, будь то а-, р -, у- та 5амінокислоти, або в L- або D-конфігураціях, таких як, наприклад, р-злзнш, гомог/истеш та гомосерин, цитрулін, орнітин, у-аміномасляна кислота, Dглютамінова кислота та D-аланін, та Синтетичні аналоги амінокислот, такі як, наприклад, фенілгліцин, р-фторфенілаланін, тюнін, норлейцин та подібні При визначенні L у термін "амінокислота" слід включати ті амінокислоти, в яких змінна складова є моно- або ді-заміщеною, у таких випадках L можна представити як -L'-NRxRy Приклади RxTa Ry включають водень, Сі єалкіл та ВІДОМІ спеціалістам групи захисту складової аміно, наприклад, третбугилоксикарбонил, бензилоксикарбонил, трифторметоксикарбонил або захисні групи, згадані у розділі 7 "Групи захисту в органічному синтезі" '"Protective Groups in Organic Syntesis" T Грін та П Байте (Джон Вілей енд Соне, інк 1991) Rx та Ry разом із атомом азоту аміно складової можуть утворювати кільце, таке як, наприклад, кільце піролідину, піперідину, морфоліну, піперазину або заміщеного піперазину, причому вказаний заміщений піперазин є кільце піперазину, заміщене у 4-ій позиції цього кільця , наприклад, Сі єзлкілом, гідрокси Сі єалкілом, аміноСі єзлкілом, моно- або ді-(Сі єалкіл)аміноСі єзлкілом Наприклад, якщо L це ацильна складова N,Nдіетилгліцин, то U це -С(=О)-СН2- та -NRxRy це N(CH2CH3)2 У комерційному виробництві існує багато амінокислот, які перелічені у Каталозі та Довіднику Нова 8 бюхема 1997/1998 (Calbiochem-Novabiochem AG, Loefelfmgen, Switzerland) Крім того, комерційно існують амінокислоти, які відповідають терміну "амінокислоти", які використовуються при визначенні L Передбачається, що у склад фармацевтично сприйнятливих адитивних солей, як згадано вище, входять форми активних нетоксичних кислотноадитивних солей, які можуть утворити сполуки з формулою (І) Останні можна легко отримати при обробці форми основи такими ВІДПОВІДНИМИ кислотами, як неорганічні кислоти, наприклад, гідровані кислоти, наприклад, пдрохлорна, пдробромна та ІНШІ подібні кислоти, сірчана, азотна, фосфорна та подібні кислоти, або органічні кислоти, наприклад, оцетна, пропанова, пдроксиоцетна, 2пдроксипропанова, 2-оксопропанова, щавелева , малонова, янтарна, малеїнова, фумарова, яблучна, винна, 2-пдрокси-1,2,3,-пропанотрикарбонова кислоти, метансульфо кислота, етансульфо кислота, бензольна сульфокислота, 4-метил бензольна сульфокислота, циклогексансульфамидна, 2пдроксибензольна, 4-амшо-2-пдроксибензольна та подібні кислоти, І навпаки, форма солі може бути перетворена у вільну форму основи шляхом обробки лугом Сполука з формулою (І), яка містить кислотні протони, може бути перетвореною у форми їхніх терапевтично активних нетоксичних металевих або змінних адитивних солей шляхом обробки ВІДПОВІДНИМИ органічними тз неорганічними основзми Форми солей ВІДПОВІДНИХ основ містять, нзприклзд, солі змонію, солі лужних тз лужноземельних метзлів, тзкі як, нзприклзд, солі ЛІТІЮ, нзтрію, кзлію, мзгнію, кзльцію тз подібні, солі із органічними основзми, нзприклзд, солі бензотину, N-метил-Оглюкзміну, 2-змшо-2-(пдроксиметил)-1,3пропзндюлу, пдрзбзмшу, тз солі із змінокислотзми, нзприклзд, аргінін, лізин та подібні Нзвпзки форму солі можнз перетворити у вільну форму кислоти шляхом обробки кислотою Термін "здитивнз сіль" ТЗКОЖ ВКЛЮЧЗЄ пдрзти тз розчинні здитивні форми, здзтні утворити сполуки з формулою (І) Приклздзми тзких форм можуть бути пдрзти, злкоголятитз ін ВІДПОВІДНІ форми солей сполук згідно з цим винзходом включзють форму солі фумзрової, янтзрноі, L-яблучноі, щавлевої, малеїнової, L-винноі, соляної кислот, а тзкож гідратні форми Термін "стереохімічно ізомерні форми", який вживався тут попередньо, означзє всі можливі стереохімічні форми, в яких можуть існувзти сполуки з формулою (І), і при цьому які тзкож включзють всі ензнтюмери, ензнтюмерні тз дізстереомерні суміші Якщо іншого обумовлено не було, ХІМІЧНІ познзчення сполук ознзчзють суміші всіх можливих стереохімічно ізомерних форм, при чому вкзззні суміші екпздзють всі дізстереомери тз ензнтюмери основних молекулярних структур Теж езме стосується і описзних тут проміжних сполук, які використовуються для отримзння кінцевих продуктів з формулою (І) Ензнтюмерно чисті форми сполук тз згадзні проміжні сполуки визнзчзються як ензнтюмери, у яких в основному відсутні ІНШІ ензнтюмерні збо дізстереомерні форми з подібною основною молекулярною структурою вкзззних тз проміжних сполук 61919 Асиметричні центри можуть мати R- або Sконфігурацію Термін цис та транс використовується тут згідно із номенклатурою, прийнятою в "Chemical Abstracts", та відноситься до позиції замінників на кільцевій складовій, більше всього на дюксалановому КІЛЬЦІ у сполук з формулою (І) В останньому випадку, при визначенні цис та транс конфігурації, розглядаються замінник в першу чергу на атом вуглецю в позиції 2 дюксоланового кільця та замінник в першу чергу на атом вуглецю в 4 позиції дюксоланового кільця (при чому першочерговість замінника визначається згідно із правилами порядку слідування Кан-Інголд-Прелога) Якщо два вказані першочергових замінника розташовані на одному боці кільця, то конфігурація позначається цис, якщо ні, то позначається транс Всі сполуки з формулою (І) містять при наймі 4 асиметричних центра Використані в цьому винаході стереохімічні ключові слова, які означають стереохімічну конфігурацію кожного із 4 або більше асиметричних центрів, також вибрані згідно із номенклатурою Chemical Abstracts Наприклад, абсолютна конфігурація асиметричних атомів вуглецю в сполуці 23, як описано в прикладі В 2 нижче, а саме [2S-[2a,4a[(R*,R*)]]]-2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4діфторфеніл)-2-(1 Н-1,2,4-триазол-1 -илметил)-1,3дюксолан-4-ил]метокси]-феніл]-1-піперазинил]феніл]-4,5-діпдро-5-оксо-1 Н-1,2,4,-тріазол-1 -ил]-1 метилпропил L-фенілаланш, зображена нижче Дюксоланове кільце в цій сполуці має цисконфігурацію 10 ватися, наприклад, їхнім оптичним обертанням, якщо" А" та "В" мають енантюмерний взаємозв'язок Кваліфікований спеціаліст може визначити абсолютну конфігурацію таких сполук, використовуючи ВІДОМІ спеціальні методи, наприклад діфракціюХ променів Наприклад, проміжна сполука 2Ь, яка має стереохімічне ключове слово [2S-[2a,4a[A-R*,S*)]]], означає енантюмер, який має конфігурацію або [2S[2a,4a[(R*,S*)]]l або [2S-[2a,4a[(S*,R*)]], та однозначно характеризується його оптичним обертанням, яке має значення [ефо0- -17,9° (с=49 75мг/5мл N,Nдиметилформамид) Це означає, що азотнокислі форми сполук згідно з цим винаходом включають сполуки з формулою (І), в яких один або декілька атомів азоту окислюються до так-званих окислів азоту Термін "сполуки з формулою (І)", який далі тут зустрічається, означає їхні азотнокислі форми, їхні фармацевтично сприйнятливі адитивні солі та їхні стереохімічні ізомерні форми В межах обсягу цього винаходу -А-В- це ВІДПОВІДНО радикал з формулою (b) D це ВІДПОВІДНО ра дикал з формулою D X це ВІДПОВІДНО N R1 та R2-BiflnoBiflHO ідентичні, переважно хлор або фтор (в сполуці) Зокрема, R1 та R2 це фтор (в сполуці) Цікавою групою сполук згідно з цим винаходом є ті сполуки з формулою (І), в яких L це радикал з формулою (а) о к —С-Сї( V Далі згідно із номенклатурою Chemical Abstracts, назва радикалу, яка супроводжується назвою амінокислоти, відноситься до ефірів, де амінокислота це ацильна група Наприклад, у сполуці 23, L-фенілаланш етерифікується із вказаною групою заміщення 1-метилпропилу Таж сама номенклатура Chemical Abstracts використовується і для позначення енантіеомерних сумішей Наприклад, ключове слово проміжної сполуки 2і, а саме [2a,4a(R*,R*)], означає, що проміжна сполука 2і це суміш двох енантюмерів, які мають ВІДПОВІДНО [2S-[2a,4a(R*,R*)]],[2R-[2a,4a(R*,R*)]], як стереохімічне ключове слово Нумерація кільця на дюксолановому КІЛЬЦІ ДЛЯ радикалів D1 та D2 дана нижче згідно із номенклатурою Chemical Abstracts (а) Де R' це аміно, моно- або ді(Сі єалкіл), Сі бал кіл оксикарбонил аміно, бензил оксикарбонил аміно, трифторметоксикарбонил аміно, 1пиролідинил, 1-піперідинил, 4-морфолінил, 1піперазинил або 1-піперазинил, заміщений Сі єзлкілом, гідрокси Сі єзлкілом, аміноСі єалкілом або Сі єалкіламіноСі єзлкілом, R" це водень, Сі єалкіл, арил, Сі єалкіл, заміщений арил ом, Сі єалкілалкілтіо, індол и лом, аміно, гидрокси, меркапто, амінокарбонилом, карбоксилом, гуанідинилом, імідазолилом, або R' та R" взяті разом утворюють -СН2-СН2CH2-NH-, Арил це феніл або феніл, заміщений гідрокси або гало Більш цікаву групу складають ті сполуки з формулою (І), в яких L це ацильна складова однієї із наступних амінокислот во-!-аі-«т 1 "'ВДН Для деяких сполук з формулою (І) та проміжних для їх отримання сполук абсолютна стереохімічна конфігурація не була підтверджена експериментально У цих випадках стереохімічно ізомерна форма, яка була ізольована першою, позначається "А", другою-"В", без подальшого посилання на фактичну стереохімічну конфігурацію Однак, вказані ізомерні форми "А" та "В" можуть однозначно характеризу І г и L і О-С 8 і"' OS, Я ДІЯМ)! CJIJ-MHJ ІЮ-С-С!!—fill, а»*,™ финчглщіні ка—с—ш—і або ті ПОХІДНІ із них, в яких змінна складовз це моно- збо ді-ззміщенз 11 61919 12 1,2,4-тріазол-1-ил]-1-метилпропил^^діетил гліцин, Сі єалкілом або монозаміщена трет2-[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-діфторфеніл)-2-(1 Н-1,2,4бутилоксикарбонилом тріазол-1-илметил)-1,3-дюксолан-4-ил]метокси]Особливо цікаві ацильні складові це ті ВИХІДНІ ІЗ феніл]-1 -піперазинил]-феніл]-4,5-діпдро-5-оксо-1 Наланіну, р-аланіну, гліцину, лейцину, валіну, феніл1,2,4-тріазол-1-ил]-1-метилпропил L-фенілаланш, 2гліцину, фенілаланіну та їхніх похідних N-трет[4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-діфторфеніл)-2-(1Н-1,2,4-тріазолбутилоксикарбонилу, та N.N-діетилгліцину та N,N1-илметил)-1,3-дюксолан-4-ил]метокси]-феніл]-1діетил-р-аланіну, особливо гліцину, р-аланіну, Lпіперазинил]-феніл]-4,5-діпдро-5-оксо-1 Н-1,2,4аланіну, L-валшу, L-лейцину, L-фенілгліцину, Lтріазол-1-ил]-1-метилпропил L-лейцин, 2-[4-[4-[4-[4фенілаланшу, D-фенілаланшу, N-((1,1 [[2-(2,4-діфторфеніл)-2-(1Н-1,2,4-тріазол-1діметилетил)оксикарбонил)-р-аланшу, N-((1,1илметил)-1,3-дюксолан-4-ил]метокси]-феніл]-1діметилетмл)окси-карбонил)-гліцину, N.N-діетилпіперазинил]-феніл]-4,5-діпдро-5-оксо-1 Н-1,2,4гліцину, М,М-діетил-р-алаиіну, N-(1,1тріазол-1-ил]-1-метилпропил L-валін, 2-[4-[4-[4-[4діметилетил)окси-карбонил)-І_-аланіну, N-(1,1[[2-(2,4-діфторфеніл)-2-(1Н-1,2,4-тріазол-1діметилетил)оксикарбонил)-І_-лейцину, N-(1,1илметил)-1,3-дюксолан-4-ил]метокси]-феніл]-1діметилетил)оксикарбонил)-І_-феніл-гліцину, N-(1,1піперазинил]-феніл]-4,5-діпдро-5-оксо-1 Н-1,2,4діметилетил)оксикарбонил)-І_-валшу, N-(1,1тріазол-1-ил]-1-метилпропил L-фенілгліцин, азотнодіметилетил)оксикарбонил)-І_-феніл-аланіну, N-(1,1кислі форми, їхні фармацевтично сприйнятливі метилетил)оксикарбонил)-О-феніл-аланшу адитивні солі та їхні стреохімічні ізомерні форми, Окремі сполуки це ті сполуки з формулою (І), в особливо форма [2S-[2a,4a[R*,R*)]]] яких D це радикал з формулою D1, де X це N та R1 2 та R -фтор, та -А-В- це радикал з формулою (Ь), та Значення змінних, які використовувались у наL це ацильна складова лейцину, валіну, фенілгліступних реакціях, приймаються згідно із нижченацину, фенілаланіну та їхні азото-третведеними визначеннями, якщо іншого не обумовбутилоксикарбонильні ПОХІДНІ, або L це ацильна лено складова N.N-діетилгліцину Сполуки згідно із цим винаходом можна отримати за відомими фахівцям методами етерифікації, Інші окремі сполуки це ті сполуки з формулою які були описані, наприклад, у "Принципах синтезу (І), в яких D (D1 або D2) має цис-конфігурацію пептидів" , М Боданшкі, Спрингер-Ферлаг Берлін Переважні сполуки це сполуки, в яких D це раХайделберг, 1984 ("Principles of Peptide Synthesis", дикал з формулою D1, де замінники на дюксоланоM Bodanszky, Spnngier-Verlag Berlin Heidelberg, вому КІЛЬЦІ мають цис-конфігурацію, а атом вугле1984 ) Виконання окремих реакцій описані нижче цю за номером 2 на дюксолановому КІЛЬЦІ має абсолютну S конфігурацію, як показано нижче Взагалі сполуки з формулою (І) можна отримати шляхом О-ациляцм проміжніх спиртів з формулою (II) із ацилюючим реагентом за формулою (III), де W 1 це реактивна залишкова група, така як гало, азид або активована кислотна функція, наприклад, галофенільний ефір, наприклад, пентахлор- або пентафторфенільний ефір, яка з'єднується із ацильною часткою L Вказану реакцію можна виконати за відомими фахівцям методами ациляцм, наприІншими переважними сполуками є ті сполуки, в клад, підмішуючи реагенти у інертний розчинник, яких 1-метилпропильна складова має трео конфігупри необхідності у суміш із основою для відбору рацію, тобто два хіральні атоми вуглецю 1кислоти, яка утворюється під час реакції Інакше Ометилпропильної частки (обидва хіральні атоми ациляція виконується з використанням ВІДПОВІДНОГО вуглецю позначені зірочками на малюнку нижче) зв'язкового агенту, такого як діциклогексилкарбодммають абсолютно ідентичну конфігурацію, напримід або його функціональна похідна клад, вони обидва мають або R конфігурацію, або обидва-S конфігурацію X С m ) i г~\ Переважнішими сполуками є сполуки за формулою (І) у їхніх енантюмерно чистих формах, зокрема ті сполуки за формулою (І), в яких обидва хіральні атоми вуглецю 1-метилпропильноі складової мають S конфігурацію, a D це радикал за формулою D1, в якому замінники на дюксолановому КІЛЬЦІ мають цис-конфігурацію, а атом вуглецю за номером 2 на дюксолановому КІЛЬЦІ має абсолютну S конфігурацію, яка відповідає тим сполукам з формулою (І), де D це радикал за формулою D1, який має конфігурацію [2S-[2a,4a[R*,R*)]]] Найбільш переважними є сполуки 2-[4-[4-[4-[4-[[2-2,4-діфторфеніл)-2-(1 Н-1,2,4тріазол-1-илметил)-1,3-дюксолан-4-ил]метокси]феніл]-1 -піперазинил]феніл]-4,5-діпдро-5-оксо-1 Н У цьому та наступних дослідах продукти реакції можна ізолювати від середовища реакції та при необхідності потім їх очистити за загально відомими методиками, такими, як, наприклад, екстракція, кристалізація, подрібнення в порошок та хроматографія Крім того, сполуки з формулою (І) можна отримати О-алкіляцією фенолу з формулою (IV) із алкілуючим реагентом з формулою (V), де VV це реактивна залишкова група, така як гало, або група сульфонилокси Вказану реакцію можна виконати, перемішуючи реагенти у реагєнтно-шертному розчиннику, при необхідності у суміші з ВІДПОВІДНОЮ основою для збору кислоти, яка утворюється під час реакції У основних та проміжних сполуках, вказаних нижче, замінники такі, як було визначено вище, якщо іншого не обумовлено 13 61919 ЛХс (IV) Отримання проміжних сполук з формулою (V), де D це радикал за формулою D , було описано у патенті США №4,267,179 Як визначено вище, ЗМІННІ І_ можна також виразити L'-NRxRy, в якій дві складові, а саме V- та NRxRy використовуються в наступній схемі реакції 1 . Г~\ f -СН--СН—СН, N— U i — С Н — С Н , (Vffi Вищенаведена схема реакції зображує отримання сполук з формулою (І) шляхом О-ациляцм проміжної сполуки за формулою (II) із реагентом за формулою (VI), де\Л/3 це реактивна залишкова група, така як гало, a W 1 визначена вище та з'єднується з ацильною складовою U, та шляхом послідовного виконання реакції таким чином отриманої проміжної сполуки з формулою (VII) із аміном з формулою (VIII) Сполуки за формулою (І) можна послідовно перетворити у ВІДОМІ модифікації Наприклад, сполуки з формулою (І), в яких L містить захищену аміночастку, можна перетворити у сполуки за формулою (І), де вказана складова не заміщується за відомими методиками позбавлення захисту, наприклад, шляхом проведення реакції із трифтороцетною кислотою у відповідному розчиннику, наприклад, діхлорметані Сполуки з формулою (І) можна також перетворити у ВІДПОВІДНІ азотнокислі форми за відомими фахівцям методиками для перетворення трьохвалентного азоту у його азотнокислу форму Взагалі вказану реакцію окислення азоту можна провести, виконуючи реакцію вихідного матеріалу з формулою (І) із ВІДПОВІДНИМ органічним або неорганічним перекисом ВІДПОВІДНІ неорганічні перекиси включають, наприклад, перекис водню, перекис лужних або земельнолужних металів, наприклад перекис натрію або калію, ВІДПОВІДНІ органічні перекиси можуть містити надкислоти, такі як, наприклад, бензолкарбонадкислота або галозаміщена бензолкарбонад кислота, наприклад, 3хлорбензол карбонад кислота, пероксоалканоідні кислоти, наприклад, пероксоцетна кислота, алкілпдропероксид, наприклад, трет-бутильний пдропероксид ВІДПОВІДНИМИ розчинниками, наприклад вода, є нижчі спирти, наприклад етанол та ш , вуглеводні, наприклад, толуол, кетони, наприклад, 2-бутанол, галогенні вуглеводні, наприклад діхлорметан, та суміші цих розчинників Деякі проміжні сполуки та ВИХІДНІ матеріали, використані у вищенаведених реакціях, існують у комерційному виробництві, або їх можна синтезувати згідно із широко розповсюдженими методиками, описаними, наприклад, у патентах США US4,791,111, US-4,931,444 та US-4,267,179 У цьому винаході нижче описані деякі методи отримання проміжних сполук Наприклад, проміжні сполуки з формулою (II) 14 можна отримати шляхом О-алкіляцм реагентів з формулою (IX), виконуючи алкіляцію реагентів за формулою (V) з описаною вище методикою Оалкіляцм для отримання сполук за формулою (І) А г\ п (X I) (V) Проміжні сполуки з формулою (II) можна отримати шляхом О-алкіляцм реагентів за формулою (X), виконуючи алкіляцію реагента з формулою (V) за вище описаною методикою О-алкіляцм для отримання сполук з формулою (І) із подальшим диспергуванням таким чином утвореної проміжної сполуки за формулою (XI) Вказане диспергування можна виконати, перемішуючи проміжну сполуку з формулою (XI) із подрібнюючим реагентом, наприклад, борним гідридом натрію у інертному розчині, наприклад діхлорметан, метанол або їхні суміші О—W' j і Г—О f -И \ f ^_гр—(,—си, А—В (V) # \ ' \ / \ уК ^ Отримання проміжних сполук з формулою (X) було описано в патенті США US-4,931,444 Крім того, проміжні сполуки з формулою (XI) можна отримати шляхом азотної алкіляцм проміжної сполуки з формулою (XII) за відомою методикою азотної алкіляцм за допомогою лужного реагента з формулою (XIII), де W4 це відповідна залишкова група, наприклад, гало № №} t w'-CH—С-Ш, *- (XI) (Xffl) Чисті стереохімічні ізомерні форми сполук та проміжні сполуки згідно з цим винаходом можна отримати за допомогою відомих фахівцям методик Діастереомери можна розділити методом фізичного розділення,, наприклад, методами селективної кристалізації та хроматографії, наприклад, рідинної хроматографії Енантюмери можна розділити шляхом селективної кристалізації їхніх діастереомерних солей з оптично активними кислотами ВІДПОВІДНО енантюмери можна розділити хроматографічними методами з використанням хіральних стаціонарних фаз Вказані чисті стереохімічні ізомерні форми можна утворити із ВІДПОВІДНИХ ЧИСТИХ стереохімічно ізомерних форм ВІДПОВІДНИХ вихідних матеріалів, при умові, що реакція наступає стереоселективно або стереоспецифічно Переважно, при необхідності використання спеціального стереоізомера, вказана сполука синтезується стереоселективним або стереоспеціфічним способом м отримання Ці способи передбачають переважне використання енантюмерно чистих вихідних матеріалів Очевидно, що стереохімічно ізомерні форми сполук з формулою (І) входять в обсяг винаходу Як встановлено вище, енантюмерно чисті форми сполук з формулою (І) утворюють переважну групу сполук Отже, енантюмерно чисті форми проміжних сполук з формулою (II), їхні азотнокислі фо 16 15 61919 рми та адитивні солі мають особливе значення при сприяють трео формі 2-пдрокси-1-метилпропильноі отриманні енантіомерно чистих сполук з формулою складової, тобто формі, в якій два асиметричні ато(І) Крім того, енантюмерні та діастереомерні суміші ми вуглецю мають абсолютно ідентичні конфігурапроміжних сполук з формулою (II) використовуютьції Рекристалізація отриманої суміші після стереося при отриманні сполук з формулою (І) з ВІДПОВІДселективного відновлення може надалі навіть НОЮ конфігурацією Вказані енантіомерно чисті фопокращити співвідношення трео/еритро в бік трео рми, а також енантюмерні та діастереомерні суміші форми Потім можна бажану форму [S-(R*,R*)] ізопроміжних сполук з формулою (II) вважаються нолювати хроматографічним способом, використовувими ючи хіральну стаціонарну фазу, таку як, наприклад, Хіралпак АД (3,5 діиетилфеніл карбамат амілози), 4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-діфторфеніл)-2-(1 Н-1,2,4яку купляють в Японії, від фірми Дайсел Кемікал тріазол-1 -илметил)-1,3-дюксолан-4Індастріз, Лтд ил]метокси]феніл]-1-піперазинил]феніл]-2,4-діпдро2-(2-пдрокси-1-метилпропил)-ЗН-1,2,4-тріазол-3-он Алкоксифенільні ПОХІДНІ проміжних сполук з у її енантіомерно чистій формі [2S-[2a,4a[R*,R*)]]]Ta формулою (ІХ-а) можна отримати при проведенні ВІДПОВІДНИЙ аналог 2,4-діхлорфенілу є особливо тих самих реакцій, що вказані у схемі 1 переважними проміжними сполуками з формулою У схемі 2 зображений інший шлях отримання проміжних сполук з формулою (ІХ-а) або їхніх алко(II) ксифенільних аналогів Зокрема, енантіомерно чисту форму [2SСхема 2 [2a,4a[R*,R*)]]] проміжної сполуки з формулою (II) можна отримати при виконанні реакції енантіомерно чистої форми проміжної сполуки з формулою (IX), тобто форми [S-(R*,R*)] з формулою (ІХ-а), з ВІДПОВІДНОЮ енантіомерно чистою формою проміжної сполуки (V), тобто [2S-([2a,4a)], з формулою (Vа), згідно з реакцією, описаною вище Стереоселективний синтез проміжної сполуки (ІХ-а), починаючи з проміжної сполуки (X), можна надати як зображено у схемі 1 (XV b) Сіереоселективне відновлення вяапряшу трео форми X ЇІ-ЧН—Cll-CIk \— —/ Хроматографія Л. (ІХ-а) ВІДПОВІДНІ умови стереоселективного відновлення включають використання К-селектридів у відповідному розчиннику, наприклад, діметилацетамид або тетрапдрофуран, борпдрид натрію при необхідності у комбінації із СеСІз 7Н2О, ZnCb або СаСЬ 2Н2О у відповідному розчиннику, наприклад у діметилацетамиді, діметилформамиді, метанолі або тетрапдрофурані Вказані умови відновлення \—J Реакція проміжної сполуки з формулою (XIV) із (4R-TpaHc)-4,5-fliMeTHn-2,2-flioKCHfl-1,3,2,ділксатюланом можна провести у відповідному розчиннику, переважно у полярному непротонному розчиннику, такому як, наприклад, діметилацетамид або N.N-діметилформамид, та в присутності основи, наприклад, трет-бутанолату калію, гідроксиду калію або гідриду калію Потім до отриманої суміші можна додати кислоту, наприклад, сірчану, отримуючи при цьому проміжну сполуку з формулою (XV-b), в якій 2-пдрокси-і-метилпропильна складова має еритроформу Потім атом вуглецю, який мас функцію спирту вказаної 2-пдрокси-іметилпропильної складової, епімеризується, переважно із 100% обертанням, при цьому отримуючи проміжну сполуку (XV-a), в якій 2-пдрокси-1метилпропильна складова маєтрео форму Існують два шляхи Перший шлях включає перетворення функції спирту у відповідну залишкову групу O-LG, наприклад, виробляючи гідроксильну групу з орга 17 61919 18 нічною кислотою, наприклад, карбоновою, а саме, безпосередньо з'єднати з енантюмерно чистою оцетною або 4-нітробензольною кислотою, або супроміжною сполукою, наприклад [R-(R*,S**)]-3льфокислотою, наприклад, рбром-2-бутанол4-нітробензоатом, або з їхньою футолуол сульфокислотою або метан сульфокислотою, нкціональною похідною, при цьому негайно отримутаким чином отримуючи проміжну сполуку з формується проміжна сполука з формулою (XV-a) лою (XVI) Атом вуглецю, який несе функцію залишЦікаво, що особливо чисті енантюмерні форми кової групи у вказаній проміжній сполуці (XVI) потім проміжних сполук з формулою (IV) можна синтезуможе епімеризуватись, переважно із 100% обервати, використовуючи шлях Мітсунобу в схемі 2, по танням, за допомогою реакції Б^-типу з ВІДПОВІДякому карбонова кислота, використана в реакції з НИМ нуклеофільним реагентом, таким як, наприактивованим спиртом з формулою (XV-b), заміщуклад, алкоголят, а саме, бензольна група, гідрокси ється захищеною амінокислотою При необхідності сіллю лужного металу, а саме гідроксидом натрію аміно кислоту можна позбавити захисту за відомою або калію, ацетатом, а саме, ацетатом натрію Вкаметодикою зана реакція виконується у відповідному розчинниСполуки з формулою (І), їхні фармацевтично ку, переважно полярному непротонному розчиннисприйнятливі адитивні солі та їхні стереохімічні ізоку, такому як, наприклад, діметилацетамид, Nмеричні форми використовуються як агенти для метилпиролідинон, діметилімідазолідинон або суборотьби із грибковими інфекціями у живому оргальфолан У випадку використання у Змг-реакцм алнізмі Крім того, здатність розчинюватись у водних коголяту або ацетату, таким чином отримана пророзчинах сполук з формулою (III) робить їх принадміжна сполука може бути позбавлена захисту ними для внутрішньовенного призначення Як вивідомими ВІДПОВІДНИМИ способами позбавлення явилось, сполуки згідно з цим винаходом є ефектизахисту, отримуючи таким чином спиртову проміжну вним засобом проти широкого різновиду грибків, сполуку з формулою (XV-a) таких як Candida spp , наприклад, Candida glabrata, Candida krusei, Candida parapsihsis, Candida kefyr, Іншим шляхом для перетворення стереохімічCandida tropicahs, Aspergillus spp, наприклад, ної структури атому вуглецю, який виконує функції Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus спирту, є використання реакції Мітсунобу Функція flavus, Cryptococcus neoformans, Sporothnx спирту проміжної сполуки із формулою (XV-b) актиschenckii, Fonsecaea spp, Epidermophyton візується дизопропил азодікарбоксилатом або його floccosum, Microsporum cams, Tnchophyton spp, функціональною похідною, наприклад, діетил азодіFusarmm spp , та деякі кожні ппомицети карбоксилатом, в присутності тріфенілфосфіну та в діпольному апротонному розчиннику, наприклад Крім того, чисті енантюмери, енантюмерні судіметилацетамид, або діметилформамид Потім міші та діастеремерні суміші проміжних сполук з таким чином отриманий активізований спирт встуформулою (II) є протигрибковими засобами, які мапає в реакцію із карбоновою кислотою, наприклад, ють сприятливий фармакологічний характер, що до 4-нітробензольною, оцетною або монохлороцетною протигрибкової астивності та побічних ефектів Хікислотою Далі таким чином отриманий складний мічна стабільність деяких сполук із формулою (І) ефір, в якому складова 2-пдрокси-1-метилпропилу визначається у експериментальній частині опису була перетворена утреоформу, можна пдролізувацього винаходу Експерименти показують, що мети із використанням відомих методів гідролізу, таболічне розщеплення цих сполук на проміжні отримуючи при цьому проміжну сполуку з формусполуки Із формулою (II) має органічно специфічний лою (XV-a) характер і не наступає легко Крім того, експерименти, проведені у штучних умовах, показують, що В результаті алкоксифенільну складову промісполуки з формулою (І) мають жних сполук з формулою (XV-a) можна перетворити у фенольну складову, використовуючи, наприклад, удосконалену внутрішню здатність стримувати бромновату кислоту в оцетній кислоті у присутності ріст грибків, наприклад, Candida albicans, порівняно тіосульфату натрію, при цьому отримуючи проміжну із проміжними сполуками з формулою (II), протисполуку з формулою (ІХ-а) грибкова активність яких викладена у патенті США US-4,791,111 Вказані експерименти у штучних умоДля (6,20 29 12 13 15 16 18 21 23 24 25 26 28 31 4,40 1,34 3,76 1,29 3,17 1,30 3,59 1,23 3,94 1,26 6,29 1,35 6,68 1,37 5,97 1,38 5,83 1,45 4,40 1,50 4,00 1,50 4,55 1,55 4,90 2,84 >6,94 3,28 >6,08 2,95 >6,32 5,50 >6,17 3,85 >5,30 0,05 >5,25 0,11 >5,56 0,02 >5,49 0,014 >6,44 0,67 >6,37 4,64 >10,89 0,19 >5,84 0,069 Приклад С-2 Хімічна стабільність 50мг еспериментальної сполуки поміщали у відкритий скляний взбовтувач при температурі 40°С та ВІДНОСНІЙ вологості 75% Після тижневого терміну визначали залишок експериментальної сполуки Таблиця 7 № п/п 10 12 13 15 16 18 21 23 24 ЗО 61919 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL 0 1MHCL 0 0001MHCL Стабільність 31,0% 96,1% 98,3% 90,4% 100,3% 101,7% 100,3% 99,7% 101,2% D Фармакологічні приклади Приклад D-1 Визначення грибкової сприйнятливості Для оцінки активності експериментальних сполук у живому організмі був використаний список культур Candida плюс одиничні культури дерматофитів Microsporum cams, Trichophyton rubrum та Т ментагрофітів, Aspergilhs fumigates ma Cryptococcus neoformans Висів виробляли у вигляді бульонних культур (дріжджі) або суспензій грибкового матеріалу, культивованого у скошеному поживному середовищі на агарі (плісень) Експериментальні сполуки відбирали піпеткою із штаммного розчину DMSO і капали у воду для отримання серій 10-ти шарових (складних) розчинів Висів грибків суспендували у культивованому середовищі CYG (F С Odds, Journal of Clinical Microbiology (журнал клінічної мікробіології), 29, (2735-2740, 1991), при приблизно 50 000 колони утворюючих одиниць (КУО) на мл та додавали у водні розчини експериментальних ЛІКІВ Культури розміщали у 96 комірок для мікророзведення (мікрокультування) і вирощували їх протягом 2 днів при температурі 37°С (Candida spp ) або протягом 5 днів при температурі 30°С (ІНШІ грибки) Ріст мікрокультур заміряли по їхній оптичній густині (ОГ) при довжині хвилі 405нм Для культур із експериментальними сполуками у складі ОГ обчислювали як процент регуляції, ОГ без врахування ЛІКІВ Затримка росту до 35% регуляції або менше була зазначена як визначна У таблиці 8 подані значення мінімальної конце6 нтрації інгібіторів (МКІ у 10 М) проміжної сполуки 2 як основного метаболіту та деяких сполук з формулою (І) для Candida glabrata, Candida knsei, Candida parapsilosis, Candida albicans, Candida kefyr, Candida tropicahs, Microsporum cams, Trichophyton rubkum, Trichophyton mentagrophytes, Cryptococcus neoformans Aspergillusfumigatus Таблиця 8 Інфекція Candida glabrata Candida krusei Candida parapsilosis Candida albicans Candida kefyr Candida tropicahs Microsporwn cams Trichophyton rubrum Trichophyton mentagrophytes Cryptococcus neoformans Aspergillus fumigatus Значення М К І в Ю ь М проміж № сполуки 2a 16 18 21 23 10 10 10 10 10 1 1 1 1 1 1