Вакцина проти інфекцій дихальної та репродуктивної систем у худоби

1. Імуногенна композиція для викликання імунної відповіді у тварин, що включає: модифікований живий коров'ячий вірус герпесу (BHV-1); модифікований живий вірус парагрипу типу 3 (РI3); модифікований живий коров'ячий респіраторносинцитіальний вірус (BRSV); вірус коров'ячої вірусної діареї типу 1 (BVDV-1); вірус коров'ячої вірусної діареї типу 2 (BVDV-2); та ветеринарно прийнятний носій для лікування або профілактики респіраторних захворювань або розладів. 2. Імуногенна композиція за пунктом 1, в якій згаданий BVDV-1 та BVDV-2 є інактивованим. 3. Імуногенна композиція за пунктом 1, в якій згаданий вірус коров'ячої вірусної діареї типу 1 (BVDV-1) є цитопатичним або нецитопатичним, а згаданий вірус коров'ячої вірусної діареї типу 2 (B\/DV-2) є цитопатичним або нецитопатичним. 4. Імуногенна композиція за пунктом 3, в якій згаданий BVDV-I та B\/DV-2 є цитопатичними. 5 Імуногенна композиція за пунктом 1, в якій згаданим BVDV-2 є BVDV штаму 53637 (АТСС РТА4859). 6. Імуногенна композиція за будь-яким з пунктів 15, в якій згаданий носій містить сапонін, емульсію типу масло-в-воді, що містить сапонін, Quil А, емульсію типу масло-в-воді та холестерин. 7. Імуногенна композиція за пунктом 6, в якій згаданий носій є мікрофлуїдизованим. 8. Імуногенна композиція за будь-яким з попередніх пунктів, що додатково містить принаймні один антиген, вибраний з групи, що включає Leptospira interrogans pomona та Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis. 9. Спосіб індукції імунної відповіді у тварини проти принаймні одного з наступних: (a) коров'ячий вірус герпесу типу 1; (b) вірус коров'ячої вірусної діареї типу 1; (c) вірус коров'ячої вірусної діареї типу 2; (d) вірус парагрипу типу 3 (РI3); UA (21) a200501771 (22) 14.08.2003 (24) 10.06.2011 (86) PCT/IB2003/003633, 14.08.2003 (31) 60/405,969 (32) 26.08.2002 (33) US (46) 10.06.2011, Бюл.№ 11, 2011 р. (72) ДОМІНОВСКІ ПОЛ ДЖОЗЕФ, US (73) ПФАЙЗЕР ПРОДАКТС ІНК., US (56) US3634587 A, 11.01.72. TALENS L T ET AL: "EFFICACY OF VIRAL COMPONENTS OF A NONABORTIGENIC COMBINATION VACCINE FOR PREVENTION OF RESPIRATORY AND REPRODUCTIVE SYSTEM DISEASES IN CATTLE" JOURNAL OF THE AMERICAN VETERINARY MEDICAL ASSOCIATION, XX, XX, vol. 194, no. 9, 1 May 1989 (1989-05-01), pages 1273-1280. CORTESE V S ET AL: "BVD VIRUS TRANSMISSION FOLLOWING ATTENUATED VACCINES TO BVDV SERONEGATIVE CATTLE" LARGE ANIMAL PRACTICE, VETERINARY PRACTICE PUBL., IRVINE, CA, US, vol. 18, no. 5, September 1997 (1997-09), pages 18-20,22-24. ANONYMOUS: "Invest early in CattleMaster 4 vaccine to get the highest rate of return" INTERNET ARTICLE, [Online] 14 August 2002 (2002-08-14), pages 1-2, XP002261912 Retrieved from the Internet: [retrieved on 2003-11-18]. FULTON R W ET AL: "Antibody responses by cattle after vaccination with commercial viral vaccines containing bovine herpesvirus-1, bovine viral diarrhea virus, parainfluenza-3 virus, and bovine respiratory syncytial virus immunogens and subsequent revaccination at day 140" VACCINE, BUTTERWORTH SCIENTIFIC. GUILDFORD, GB, vol. 13, no. 8, 1 June 1995 (1995-06-01), pages 725733. FULTON R W ET AL: "Bovine viral diarrhea virus types 1 and 2 antibody response in calves receiving modified live virus or inactivated vaccines" VACCINE, BUTTERWORTH SCIENTIFIC. GUILDFORD, GB, 2 (19) 1 3 94689 4 (є) коров'ячий респіраторно-синцитіальний вірус (BRSV); (f) антиген, вибраний з групи, яка складається з Leptospira interrogans pomona та Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, що передбачає введення імунологічно ефективної кількості композиції згідно з пунктом 8 та ветеринарно прийнятного носія. 10. Спосіб лікування або профілактики респіраторного захворювання або розладу у тварини, що спричинені інфекцією вірусом, вибраним з групи, яка складається з BVDV типу 1 або типу 2, BHV-1, РI3 і BRSV, що передбачає введення вказаній тварині терапевтично ефективної кількості вакцинної композиції згідно з пунктом 1. 11. Спосіб лікування або профілактики респіраторного захворювання у тварини, що спричинені інфекцією з антигеном, вибраним з групи, яка складається з BVDV-1, BVDV-2, Leptospira interrogans pomona та Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, що передбачає введення терапевтично ефективної кількості вакцинної композиції, яка містить: вірус коров'ячої вірусної діареї типу 1 (BVDV-1); вірус коров'ячої вірусної діареї типу 2 (BVDV-2); принаймні один антиген вибраний з групи, яка складається з Leptospira interrogans pomona та Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, та ветеринарно прийнятний носій. Даний винахід стосується комбінованих вакцин та способів для лікування захворювань або розладів або запобігання захворюванням або розладам у тварин, спричинених інфекцією вірусом коров'ячої вірусної діареї (BVDV) типів 1 та 2, коров'ячим вірусом герпесу типу 1 (BHV-1), коров'ячим респіраторно-синцитіальним вірусом (BRSV), вірусом парагрипу (Різ), Campylobacter fetus, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardjo-prajitno, Leptospira icterohaemmontiagia, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis та Leptospira interrogans pomona шляхом введення тварині ефективної кількості комбінованої вакцини. Комбінована вакцина може представляти собою інактивовані препарати на основі цілих клітин або частин клітин або модифіковані живі препарати. П'ять вірусних агентів, пов'язаних з комплексом респіраторних захворювань корів (BRD) - коров'ячий вірус герпесу типу 1 (BHV-1), що також відомий як інфекційний вірус ринотрахеїту корів (IBR), вірус коров'ячої вірусної діареї (BVDV) типів 1 та 2, коров'ячий респіраторно-синцитіальний вірус (BRSV) та вірус парагрипу (РІ3), що спричинюють інфекції дихальної та репродуктивної систем, які мають велике економічне значення для корів та телят, а також для молочної промисловості в усьому світі. BRD викликає широкий спектр клінічних синдромів, включаючи гострий розвиток респіраторного захворювання та передчасне переривання вагітності. Респіраторна форма BRD характеризується запаленням, розпуханням, геморагією та некрозом слизових оболонок респіраторного тракту та може супроводжуватися сильною лихоманкою, анорексією, депресією, виділеннями з носу, утрудненим диханням, запаленням морди. Викидні, які індуковані IBR та BVDV вірусами, можуть виникати в усіх трьох триместрах вагітності, але, головним чином, під час другої половини вагітності, та часто при відсутності інших клінічних симптомів (Ellis та ін. (1996) JAVMA 208: 393 - 400; Ellsworth та ін. (1994) в: Роботи 74-ої конференції науковців у галузі захворювань тварин : 34). Коров'ячий вірус герпесу типу 1 (BHV-1) є членом підродини Alphaherpesviridae та викликає різноманітність клінічних форм захворювання у худоби, включаючи респіраторні інфекції та інфекції геніталій, кон'юнктивіти, енцефаліти та викидні. У попередніх спробах боротьби з BHV-1 інфекцією використовувалися вакцини, що містили живий атенуйований вірус (Gerber, J. D. та ін., 1978, Am. J. Vet. Res. 39: 753-760; Mitchell, D., 1974, Can. Vet. Jour. 15: 148-151), інактивований вірус (Frerichs, G. N. та ін., 1982, Vet. Rec. 111: 116 -122) та вірусні субодиниці, такі, як, наприклад, один з трьох основних глікопротеїнів BHV-1, які позначаються в області техніки як gl, gill та gIV (Babiuk, L. А., та ін., 1987, Virology 159: 57-66; van Drunen, S., та ін., 1993, Vaccine 11: 25-35). Крім того, було продемонстровано здатність рекомбінантного, вкороченого варіанту глікопротеїну gIV BHV-1 (який позначається в області техніки як BHV-1 tglV) індукувати імунітет у слизових оболонках до BHV-1 (van Drunen, S., та ін., 1994, Vaccine, 12: 1295-1302). Проте використання визнаних в області техніки вакцин BHV-1 протипоказані для серопозитивної або серонегативної вагітної худоби, а також їх використання протипоказане для вагітних корів, що вигодовують телят. BVDV типів 1 та 2 пов'язується з рядом клінічних синдромів. Дослідження показали, що вірус спричинює тяжке первинне респіраторне захворювання; що худоба з персистентною інфекцією (РІ) є основним джерелом інфекції для чутливих телят та що BVDV інфікує джерела білих клітин крові, що спричинює глибокий дефіцит імунної системи. Ellis та ін. (1996) JAVMA 208: 393-400; Baum та ін. (1993) The Compendium Collection: Infectious Disease in Food Animal Practice. Trenton, NJ Veterinary Learning Systems 113-121; Meyling та ін. (1987) Agric Pestivirus Infect Rumin 225-231. Аборти або муміфікація можуть виникати, коли вагітна худоба стає інфікованою, особливо під час першого триместру (Bolin та ін. (1989) Am. J. Vet. Res. 52: 1033-1037). Захворювання слизової оболонки, що представляють собою інший часто фатальний 5 прояв вірусної діареї корів (BVD), має причину, що полягає у ранній інфекції плоду нецитопатичним біотипом BVDV, розвитку імунотолерантності до вірусу, народженні телят з персистентною інфекцією (РІ), та подальшій суперінфекції цитопатичним біотипом BVDV (Bolin та ін. (1989) Am. J. Vet. Res. 52: 1033-1037). BVDV типу 2, що колись в основному був визнаний як геморагічний ізолят BVDV, головним чином, у молочних стадах, став переважаючим штамом, ізольованим у більшості районів Сполучених Штатів як від матеріалу плоду, одержаного в результаті аборту, що пов'язаний з BVD, так і у випадку респіраторних захворювань (Van oirschot та ін. (1999) Vet Micro 64: 169-183). BVDV відноситься до роду пестівірусів та родини Flaviviridae. Він є близькоспорідненим з вірусами, що спричинюють захворювання слизової оболонки в овець та класичну лихоманку у свиней. Інфікована худоба демонструє «захворювання слизової оболонки», яке характеризується підвищеною температурою, діареєю, кашлем, виразками слизових оболонок травного тракту (Olafson та ін., Cornell Vet. 36: 205-213 (1946): Ramsey та ін., North Am. Vet. 34: 629-633 (1953)). Вірус BVD є здатним проходити через плаценту у вагітної худоби та може призводити до народження телят з РІ (Malmquist та ін., J. Am. Vet. Med. Assoc. 152: 763-768 (1968); Ross та ін. J. Am. Vet. Med. Assoc. 188: 618-619 (1986)). Такі телята є імунотолерантними до вірусу та мають персистентну віремію протягом усього свого життя. Вони забезпечують джерело спалахів захворювання слизової оболонки (Liess та ін., Dtsch. Tiraerztl. Wschr. 81: 481-487 (1974)) та є схильними до інфекції мікроорганізмами, які спричинюють захворювання, такі, як пневмонія або кишкове захворювання (Barber та ін., Vet. Rec. 117: 459-464 (1985). У відповідності з дослідами вирощування вірусу BVDV у культивованих клітинах було класифіковано два вірусні біотипи: віруси, що індукують цитопатичний ефект (ер), та віруси, що не індукують цитопатичного ефекту (пер) в інфікованих клітинах (Lee та ін., Am. J. Vet. Res. 18: 952-953; Gillespie Cornell Vet. 50: 73-79, 1960). Варіанти ер можуть виникати у PI тварин, що попередньо інфіковані за допомогою пер вірусів (Howard та ін., Vet. Microbiol. 13: 361-369, 1987: Соrарі та ін., J.Virol. 62: 2823 - 2827, 1988). На основі генетичної дивергенції 5'-нетрансльованої ділянки (NTR) та антигенних відмінностей у структурі поверхневого вірусного глікопротеїну Е2 вірусів BVD було запропоновано два основні генотипи: тип І та II. BVDV типу І представляє собою класичні або традиційні штами вірусу, які звичайно викликають тільки м'яку діарею у імунокомпетентних тварин, у той час, як BVDV типу 2 представляє собою нерозвинені віруси з високою вірулентністю, які можуть викликати тромбоцитопенію, геморагію та гостре смертельне захворювання (Соrарі та ін., J. Virol. 63: 3934-3943; Bolin та ін., Am. J. Vet Res. 53: 2157-2163: Pellerin та ін., Virology 203: 260-268, 1994: Ridpath та ін., Virology 205: 66-74, 1994: Carman та ін., J. Vet. Diagn. Invest. 10: 27-35, 1998). Типи І та II BVDV вірусів мають відмінну антигенність, що визначається за допомогою ряду монок 94689 6 лональних антитіл (Mabs) та шляхом перехресної нейтралізації при використанні специфічної до вірусу сироватки, одержаної від тварин (Соrарі та ін., Am. J. Vet. Res. 51: 1388-1394, 1990). Віруси обох генотипів можуть існувати у вигляді одного з двох біотипів, ер або пер вірусу. Дослідження, проведені з тваринами, інфікованими вірусами BVDV індукують як В-клітинну, так Т-клітинну, відповідь у тварин (Donis та ін., Virology 158: 168-173, 1987; Larsson та ін., Vet. Microbiol. 31: 317-325, 1992; Howard та ін., Vet. Immunol, immunopathol. 32: 303-314, 1992; Lambot та ін., J. Gen. Virol. 78: 1041-1047; Beer та ін., Vet Microbiology. 58:9-22, 1997). Було розроблено ряд вакцин BVDV при використанні хімічно інактивованих вірусних ізолятів BVD (Fernelius та ін., Am. J. Vet. Res. 33: 14211431, 1972; Коlаr та ін., Am. J. Vet. Res. 33: 14151420, 1972; McClurkin та ін., Arch. Virol. 58: 119, 1978). Для вірусних вакцин на основі інактивованих вірусів необхідно багато доз для досягнення первинної імунізації. Деякі інактивовані вакцини BVDV забезпечують захист проти інфекції тільки типом І BVDV (Beer та ін., Vet. Microbiollgy. 77: 195208, 2000). Захисту плоду неможливо досягти за допомогою інактивованих вакцин BVDV завдяки короткій тривалості імунітету та неефективному перехресному захисту (Bolin, Vet. Clin. North Am. Food Anim. Pract. 11: 615-625, 1995). Вакцини на основі модифікованих живих вірусів (MLV), з іншого боку, забезпечують високий рівень захисту. Існуючі зараз ліцензійні MLV вакцини BVDV одержують при використанні атенуйованих вірусів, що одержані шляхом повторюваних пасажів на клітинах корів або свиней (Coggins та ін., Cornell Vet. 51: 539-, 1961; Phillips та ін., Am. J. Vet Res. 36: 135-, 1975) або при використанні хімічно модифікованих вірусів, які демонструють чутливий до температури фенотип (Lobman та ін., Am. J. Vet. Res. 45: 2498-, 1984; 47: 557-561, 1986). Одна доза вакцини MLV є достатньою для імунізації, а імунітет у вакцинованої худоби може зберігатися протягом років. Проте оскільки ці вакцини були розроблені тільки при використанні вірусних штамів типу І BVDV, то при цьому забезпечується тільки захист проти типу І вірусу. Крім того, доступні вакцини BVDV не призначені для використання у вагітної худоби або у вагітних корів, що вигодовують телят. Pl3 вірус типово викликає тільки помірне захворювання, якщо діє окремо; проте вірус надає респіраторному тракту схильності до вторинної інфекції більш патогенними організмами, включаючи вірус IBR, BRSV та BVDV, що приводить до виникнення класичного синдрому загальної лихоманки. Серед різноманітних вірусів, які відомі як такі, що викликають респіраторне захворювання у великої рогатої худоби, РІ3 вірус є найбільш широко розповсюдженим (Ellis та ін., (1996) JAVMA 208: 393-400) BRSV інфікує переважно нижні ділянки респіраторного тракту, тяжкість інфекції визначається, головним чином, відповіддю імунної системи на ключові вірусні білки (Bolin та ін. (1990) Am. J. Vet. Res. 51: 703). Заражена худоба демонструє не 7 специфічні ознаки, включаючи серозні виділення з носа та очей, помірну, часто двофазну, лихоманку та сухий кашель. Худоба, заражена в більшій мірі, демонструє грубий кашель, ускладнене дихання з відкритим ротом, пінисту слину навколо рота та може відмовлятися від їжі та пиття (Ellis та ін. (1996) JAVMA 208: 393-400). Лептоспіроз, що спричинений спірохетами роду Leptospira, представляє собою економічно важливу зоонозну інфекцію поголів'я великої рогатої худоби. Leptospira borgpetersenii серовару hardjo (L.hardjo) та Leptospira interrogans серовару pomona (L.pomona) представляють собою два серовари, що у більшості випадків асоційовані з лептоспірозом худоби в усьому світі. В одному з досліджень худоби в США було показано, що 29% худоби серологічно реагує з L.hardjo, a 23% - з L.pomona. Інвазія лептоспірами здійснюється через слизові оболонки або пошкоджену шкіру, та інфекція поширюється з кров'ю. Лептоспіри виявляють тропізм до нирок та статевого тракту, в меншій мірі - до рідини скловидного тіла ока та нервової системи. Найбільш часто причиною виникнення інфекції є безпосередній або опосередкований контакт з інфікованою сечею, молоком або плацентарною рідиною, але також відомі статевий та транс-яєчниковий шляхи передачі. Лептоспірозна інфекція у худоби може приводити до гострої лихоманки, агалактії, аборту або до народження недорозвинених та слабких інфікованих телят, це приводить до втрат при розведенні стада та до низьких рівнів відтворюваності. Інфекцію можна лікувати за допомогою антибіотиків, але вона може не виявлятися в очевидній формі у худоби, яка не знаходиться у фазі лактації або яка не є вагітною. У такої худоби встановлюється гостра або хронічна інфекція нирок, що приводить до виділення вірулентних організмів з сечею, які можуть, у свою чергу, інфікувати інших тварин або обслуговуючий персонал людей. Імунітет до Leptospira є серовар-специфічним, та незважаючи на те, що вакцини доступні вже багато років, більшість з них індукує тільки слабкий імунітет або недовготривалий імунітет. Таким чином, існує потреба у розвитку комбінованих вакцин, що забезпечують захист від великої різноманітності антигенів, яка є безпечною для вагітної худоби та корів, що вигодовують телят, а також для їх потомства, та відповідають потребам ринку молочних та м'ясних порід. Даний винахід забезпечує вакцини для лікування та запобігання основним інфекційним хворобам респіраторної та репродуктивної систем у тварин, таких, як корови та телята. Даний винахід також забезпечує імуногенні композиції та способи лікування та запобігання захворюванням або розладам у тварин. Даний винахід забезпечує спосіб лікування або запобігання захворювання або розладу у тварини, що спричинені, принаймні, однією з інфекцій BVDV типів 1 або 2, BHV-1, Різ, BRSV, Campylobacter fetus, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardjoprajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis та Leptospira interrogans 94689 8 pomona, що включає введення тварині ефективної кількості комбінованої вакцини. Даний винахід забезпечує захист тварин, таких, як корови, зокрема, корови молочних порід, від респіраторної інфекції та захворювання репродуктивної системи. Даний винахід забезпечує захист тварин, таких, як вагітні корови від аборту, спричиненого IBR, та персистентних інфекцій плоду, спричинених BVDV типів 1 та 2. Даний винахід також забезпечує захист тварин, таких, як корови, що знаходяться в періоді лактації, а також вагітних корів, що вигодовують телят, від персистентних інфекцій, спричинених BVDV типів 1 та 2. Таким чином, даний винахід забезпечує захист тварин репродуктивного віку, вагітних тварин та тварин у періоді лактації. Комбінована вакцина, що використовується у даних способах, може представляти собою препарат цілих клітин або частин клітин (наприклад, модифіковані живі препарати). Комбінована вакцина, що вводиться у відповідності з даним винаходом, може включати додаткові компоненти, такі, як ад'ювант, а також необов'язково другий антиген або більше антигенів. Другий антиген вибирають з наступних, що без обмеження включають: коров'ячий вірус герпесу типу 1 (BHV-1), вірус коров'ячої вірусної діареї (BVDV типу 1 або 2), коров'ячий респіраторно-синцитіальний вірус (BRSV), вірус парагрипу (Pl3), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardjoprajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, Leptospira interrogans pomona, Leptospira bratislava, Campylobacter fetus, Neospora caninum, Trichomonus fetus, Mcoplasma bovis, Haemophilus somnus, Mannheimia haemolytica та Pasteureila muitocida. Даний винахід забезпечує спосіб лікування або запобігання захворюванню або розладу у тварини, спричиненому інфекцією IBR, BVDV, Pl3, BRSV, Campylobacter fetus та/або лептоспірами, шляхом введення тварині ефективної кількості комбінованої вакцини. В окремих втіленнях вакцини, що використовуються у способі згідно з даним винаходом, включають модифіковану живу вакцину та фармацевтично прийнятний носій або модифіковану живу вакцину та ад'ювант. Для чіткого розкриття, але не з метою обмеження, детальний опис винаходу розділений на наступні підрозділи, які описують або ілюструють певні ознаки, втілення або застосування винаходу. Визначення та скорочення Термін «лікування або запобігання» стосовно захворювання або розладу, як такий, що використовується в контексті даної заявки, означає зменшення або усунення ризику інфекції вірулентним вірусом BVDV типу 1 та 2; IBR; Pl3; BRSV; Campylobacteria та/або лептоспірозними антигенами, покращення або полегшення симптомів інфекції або прискорення видужання від інфекції. Лікування вважається терапевтичним, якщо виникає зменшення вірусного або бактеріального навантаження, зменшення легеневих інфекцій, зниження ректальних температур та/або підвищення споживання їжі та/або росту. Лікування також вва 9 жається терапевтичним, якщо наявне зниження інфекції плоду та виділення патогенів з сечею під час інфекції, наприклад, Leptospira сероварів hardjo та pomona. Спосіб за даним винаходом є, наприклад, ефективним у запобіганні або зменшенні кількості абортів, спричинених IBR, та інфекцій, що викликаються BVDV типів 1 та 2, та зниженні ректальних температур. Даний винахід, таким чином, призначений для забезпечення захисту плоду від IBR та інфекцій, спричинених BVDV типів 1 та 2, а також для захисту плоду від герпесу та пестівірусів худоби. Даний винахід також призначений для забезпечення захисту від персистентної інфекції плоду, такої, як персистентна інфекція BVDV. Під «персистентною інфекцією плоду» розуміють інфекцію, що виникає при ранньому розвитку плоду (наприклад 45-125 дні вагітності), що веде до народження тварин, які є імунотолерантними до BVDV та підтримують активну реплікацію та розмноження BVDV, що часто виникає у значних масштабах протягом місяців або років, які представляють собою постійне джерело BVDV у стаді. Такі персистентно інфіковані тварини також мають ризик розвитку смертельного грибкового захворювання, якщо є єуперінфікованими за допомогою вірусу цитопатичного біотипу. Термін «комбінована вакцина» означає бівалентну або мультивалентну комбінацію антигенів, включаючи модифіковані живі антигени та/або інактивовані антигени. Згідно з даним винаходом комбінована вакцина може включати модифіковані живі інфекційні IBR, Рl3, BRSV та інактивовані BVDV типів 1 та 2, один або більше антигенів таких, як, але не обмежуючись, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardjo-prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, Leptospira interrogans pomona, Leptospira bratislava, Campylobacter fetus, Neospora caninum, Trichomonus fetus, Mycoplasma bovis, Haemophilus somnus, Mannheimia haemolytica та Pasteurella multocida, ветеринарно прийнятний носій та ад'ювант. У бажаному втіленні модифікований живий компонент IBR представляє собою температурно чутливий IBR. В іншому бажаному втіленні компонент BVDV типу 2 представляє собою цитопатичний штам (cpBVD-2 штам 53637-АТСС №РТА4859), а компонент типу 1 BVDV також є цитопатичним штамом 5960 (cpBVD-1 штам 5960Національний Центр з захворювань тварин, Департамент сільського господарства Сполучених Штатів, Амес, Айова). Даний винахід також охоплює нецитопатичні штами BVDV типів 1 та 2. Ще в одному бажаному втіленні модифіковані живі антигени є висушеними, ліофілізованими або оскловані. Згідно з даним винаходом комбінована вакцина може включати інактивовані BVDV типів 1 та 2, один або більше антигенів, таких, як, але без обмеження, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardjoprajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, Leptospira interrogans pomona, Leptospira bratislava, Campylobacter fetus, 94689 10 Neospora caninum, Trichomonus fetus, Mycoplasma bovis, Haemophilus somnus, Mannheimia haemolytica та Pasteurella multocida, ветеринарно прийнятний носій та ад'ювант. Термін «комбінована вакцина» як використовується в даній заявці, також відноситься до багатокомпонентної композиції, що містить, принаймні, один модифікований живий антиген, принаймні, один другий антиген та ад'ювант, який зменшує або знижує ризик інфекції та/або покращує симптоми інфекції. У бажаному втіленні другий антиген є інактивованим. У бажаному втіленні джерело комбінованої вакцини представляє собою PregSure® 5 (Pfizer Inc.), PregSure® 5-L5 (Pfizer Inc.), PregSure® 5-VL5 (Pfizer Inc.). Особливо бажане джерело комбінованої вакцини представляє собою PregSure® 5-VL5 (Pfizer Inc.). Захисні ефекти композиції комбінованої вакцини стосовно патогену в нормі досягаються шляхом індукції у пацієнта імунної відповіді, або опосередкованої клітинами, або гуморальної імунної відповіді, або комбінації обох. Кажучи взагалі, усунення або зниження або зниження кількості випадків виникнення BVDV, IBR та/або РІ3 інфекцій, полегшення симптомів або прискорення виведення вірусів з інфікованого організму є показовими для захисних ефектів комбінованої вакцинної композиції. Вакцинні композиції за даним винаходом забезпечують захист від інфекцій, спричинених або одним або двома типами 1 та 2 вірусів BVDV, а також абортів, спричинених BHV-1 (IBR) та респіраторних інфекцій, спричинених Різ та BRSV. Даний спосіб лікування або запобігання захворюванню або розладу у тварини, спричинений інфекцією IBR, BVDV, Pl3, BRSV, Campylobacter fetus та/або лептоспірами шляхом введення комбінованої вакцини також називається в даній заявці способом вакцинації. Термін «комбінована вакцина», що може використовуватися у даному способі, може включати, наприклад, інактивований повністю або частково клітинний препарат С. fetus та/або лептоспір, інактивований BVDV типів 1 та 2 та/або один або більше модифікованих живих антигенів, таких, як BHV-1, РІ3 та/або BRSV. В одному втіленні вакцинні композиції за даним винаходом включають ефективну кількість одного або більше описаних вище вірусів BVDV, бажано cpBVD-2 штаму 53537 (АТСС РТА-4859), cpBVD-1 штаму 5960 (cpBVD-1 штаму 5960, Національний центр з захворювань тварин, Департамент сільського господарства США, Амес, Йова); ts мутантний штам IBR RBL 106 (Національний інститут з ветеринарних досліджень, Брюссель, Бельгія); ts мутантний штам Pl3 RBL 103 (RIT, Ріксенсарт, Бельгія); BRSV штаму 375 (Дослідницький інститут ветеринарної медицини, Амес, Йова). Очищені віруси BVDV можуть безпосередньо використовуватися у вакцинній композиції або бажано можуть бути далі атенуйовані шляхом хімічної інактивації або проведення серійних пасажів in vitro. Типово, коли вакцина містить від приблизно 3 10 1×10 до приблизно 1×10 бляшкоутворювальних або колонієутворювальних одиниць вірусів, з ветеринарно прийнятним носієм та ад'ювантом в 11 об'ємі від 0,5 до 5мл та більш бажано в об'ємі приблизно 2мл. Точна кількість вірусу у вакцинній композиції, ефективна для захисного ефекту може бути визначена кваліфікованим ветеринаром. Ветеринарно прийнятні носії, придатні для використання у вакцинних композиціях, можуть бути будьякими з тих, що описані в даній заявці нижче. Типовий шлях введення представляє собою внутрішньом'язову або підшкірну ін'єкцію у кількості від приблизно 0,1 до приблизно 5мл вакцини. Вакцинні композиції за даним винаходом можуть також включати додаткові активні інгредієнти, такі, як інші вакцинні композиції проти BVDV, наприклад, ті, що описані в WO 9512862, WO 9955366, патенті США №6,060,4576 патенті США №6,015,795, патенті США №6,001,613 та патенті США №5,593,873. Вакцинація може бути здійснена шляхом однієї інокуляції або за допомогою багаторазових інокуляцій. Якщо це є бажаним, то від тварин, яких піддавали інокуляції, можна одержувати сироватку та досліджувати її на присутність антитіл до вірусу BVDV. В іншому втіленні за даним винаходом вакцинні композиції забезпечують способи лікування інфекцій BVDV. Згідно з цим даний винахід забезпечує способи лікування інфекцій у тварин, які спричинені вірусами BVDV типу 1 або типу 2, або комбінацією типу 1 та типу 2, шляхом введення тварині терапевтично ефективної кількості вірусу BVD за даним винаходом. В іншому втіленні вакцинні композиції згідно з даним винаходом є ефективними для поліпшення фертильності стада та або зниження ризику передачі захворювання від тварин до обслуговуючого персоналу. Під «твариною» розуміють поняття, що включає будь-яку тварину, яка є чутливою до інфекцій, спричинених IBR, BVDV, Pl3, BRSV, Campylobacter fetus та/або лептоспірами, наприклад, таку, як корова, вівця та свиня. У практиці використання даних способів вакцинна композиція згідно з даним винаходом вводиться великій рогатій худобі, переважно внутрішньом'язовим або підшкірним шляхами, незважаючи на те, що також можуть використовуватися інші шляхи введення, такі, як наприклад, оральний, інтраназальний (наприклад, шляхом введення з аерозолем або за допомогою інших безголкових пристроїв), введення у лімфатичні вузли, шляхом внутрішньошкірного, інтраперитонеального, ректального або вагінального введення або комбінацією цих шляхів. Можуть бути необхідними додаткові режими, крім того, дозовий режим може підганятися для забезпечення оптимальної імунізації. Під терміном «імунногенний» розуміють здатність вірусу BVD викликати імунну відповідь у тварин на віруси BVD типу 1 або типу 2, або на віруси BVD типу 1 та типу 2. Імунна відповідь може представляти собою клітинну імунну відповідь, опосередковану, головним чином, цитотоксичними Тклітинами, або гуморальну імунну відповідь, опосередковану, головним чином, хелперними Тклітинами, які, у свою чергу, активують В-клітини, що приводить до продукції антитіл. 94689 12 Згідно з даним винаходом віруси переважно піддають атенуювання шляхом хімічної інактивації або серійними пасажами у клітинній культурі перед застосуванням в імуногенній композиції. Способи атенуювання добре відомі спеціалістові у даній галузі техніки. Бажаний вірус, який включають в імуногенну композицію згідно з даним винаходом, представляє собою BVDV ср53637 (АТСС № РТА-4859). Інший бажаний вірус, який включають в імуногенну композицію згідно з даним винаходом, представляє собою BVDV 5960. Ще одним бажаним вірусом, який включають в імуногенну композицію за даним винаходом, є ts мутантний штам IBR RBL 106. Інший бажаний вірус, який включають в імуногенну композицію за даним винаходом, представляє собою ts мутантний штам Різ RBL 103. Ще один бажаний вірус, який включають в імуногенну композицію згідно з даним винаходом, представляє собою штам 375 BRSV. Імуногенна композиція за даним винаходом може також включати додаткові активні інгредієнти, такі, як інші імуногенні композиції проти BVDV, наприклад, такі, що описані у заявці, що знаходиться у стадії розгляду з реєстраційним номером 08/107,908, WO 9512682, WO 9955366, патенті США №6,060,457, патенті США №6,015,795, патенті США №6,001,613 та патенті США №5,593,873. Крім того, імуногенні та вакцинні композиції за даним винаходом можуть включати один або більше ветеринарно-прийнятних носіїв. Термін „ветеринарно-прийнятний носій" як такий, що використовується в даній заявці включає декілька або усі розчинники, дисперсійні середовища, покриття, ад'юванти, стабілізувальні агенти, розріджувачі, консерванти, антибактеріальні та протигрибкові агенти, ізотонічні агенти, агенти, що затримують адсорбцію, і т.п. Розріджувачі можуть включати воду, фізіологічний розчин, декстрозу, етанол, гліцерин і т.п. Ізотонічні агенти можуть включати хлорид натрію, дектрозу, маніт, сорбіт та лактозу серед інших. Стабілізатори включають альбумін, серед інших. Ад'юванти включають без обмеження ад'ювантну систему RIBI (Ribi Inc.), галуни, гель гідроксиду алюмінію, холестерин, емульсії типу олія-у-воді, емульсії типу вода-в-олії, такі, як повний та неповний ад'юванти Фрейнда, блокспівполімери (CytRx, Atlanta GA), SAF-M (Chiron, Emeryville CA), ад'ювант Амфіген®, сапонін, Quil A, QS-21 (Cambridge Biotech Inc., Cambridge MA), GPI-0100 (Galenica Pharmaceuticals, Inc., Birmingham, AL) або інші фракції сапоніну, монофосфориловий ліпід А, Авридин-ліпід-амінний ад'ювант, термолабільний ентеротоксин з Е.соїі (рекомбінантний або інший), холерний токсин або мураміловий дипептид, серед інших. Імуногенні композиції можуть також включати один або більше інших імуномодуляторних агентів, таких, як інтерлейкіни, інтерферони або інші цитокіни. Імуногенні композиції можуть також включати гентаміцин або мертіолят. Незважаючи на те, що кількості та концентрації ад'ювантів та добавок, корисних у контексті даного винаходу, можуть бути легко визначені середнім спеціалістом, даний винахід охоплює композиції, що включають від приб 13 лизно 50мкг до приблизно 2000мкг ад'юванту та бажано приблизно 500мкг на 2мл дози вакцинної композиції. В іншому бажаному втіленні даний винахід охоплює вакцинні композиції, що містять від приблизно 1мкг/мл до приблизно 60мкг/мл антибіотика, та більш бажано менше, ніж приблизно 30мкг/мл антибіотика. Імуногенні композиції за даним винаходом можуть бути виготовлені у різноманітних формах в залежності від способу введення. Наприклад, імуногенні композиції можуть бути виготовлені у формі стерильних водних розчинів або дисперсій, прийнятних для застосування у вигляді ін'єкцій або можуть бути виготовлені у ліофілізованих формах при застосуванні методик сублімаційного висушування. Ліофілізовані імуногенні композиції типово підтримуються при температурі приблизно 4°С, та можуть бути відновлені за допомогою стабілізувального розчину, наприклад, фізіологічного розчину та/або HEPES з доданням або без додання ад'юванту. Імуногенні композиції за даним винаходом можуть вводитися тваринам для індукції імунної відповіді проти вірусів BVD типу 1 або типу 2 або проти вірусів типу 1 та типу 2 BVD. Згідно з цим інше втілення даного винаходу забезпечує способи стимуляції імунної відповіді проти вірусів BVD типу 1 або типу 2, або проти комбінації вірусів BVD типу 1 та типу 2 шляхом введення тварині ефективної кількості імуногенної композиції за даним винаходом, як описано вище. Під „твариною" розуміють будь-яку тварину, що є чутливою до інфекцій BVDV, таку, як корова, вівця та свиня. У відповідності зі способами за даним винаходом бажана імуногенна композиція для введення тварині включає BVD ср53637 вірус та/або вірус BVD ср5960. Імуногенна композиція, що містить вірус BVDV, бажано атенуйований хімічною інактивацією або серійними пасажами у культурі, вводиться худобі, переважно шляхом внутрішньом'язового або підшкірного введення, незважаючи на те, що інші шляхи введення також можливі, такі, як, наприклад, пероральний, інтраназальний, введення у лімфатичний вузол, інтрадермальний, інтраперитонеальний, ректальний або вагінальний або шляхом комбінації різних шляхів. Прописи стосовно імунізації можуть бути оптимізовані при використанні процедур, що добре відомі у рівні техніки. Одна доза може вводитися тваринам або альтернативно, можуть здійснюватися шляхом двох або більше інокуляцій з інтервалами від двох до десяти тижнів. В залежності від віку тварини імуногенна або вакцинна композиція може вводитися повторно. Наприклад, даний винахід передбачає вакцинацію здорової худоби перед досягненням віку шість місяців та повторну вакцинацію у віці шести місяців. В іншому прикладі даний винахід передбачає вакцинацію худоби у віці, що передує вступу у період розмноження, приблизно за 5 тижнів перед вступом у період розмноження, та ще один раз приблизно за 2 тижні перед вступом у період розмноження для того, щоб захистити плід від інфекцій, спричинених BVDV типів 1 та 2. Повторна вакцинація з інтервалами півроку у вигляді однієї дози комбінованої 94689 14 вакцини також призначені для запобігання інфекції BVDV плоду. Тривалість та природа імунних відповідей, що індукуються у худоби, можна оцінювати при використанні різноманітності способів. Наприклад, у інокульованих тварин можна збирати сироватку та досліджувати її на присутність антитіл, специфічних для вірусів BVDV, наприклад, у традиційному аналізі з нейтралізації вірусів. Термін „худоба", як такий, що використовується у контексті даної заявки, відноситься до корів, включаючи, але без обмеження, кастрованого бика, некастрованого бика, корів та телят. Термін „худоба", як використовується в даній заявці, стосується вагітних корів та корів, які знаходяться у періоді лактації. Бажано, коли спосіб за даним винаходом застосовують до тварин, які представляють собою тварину, відмінну від людини; бажано вагітну корову або корову у періоді лактації та її плід. Термін „терапевтично ефективна кількість" або „ефективна кількість" стосується кількості комбінованої вакцини, достатньої для того, щоб викликати імунну відповідь у тварини, якій її вводять. Імунна відповідь може включати, без обмеження, індукцію клітинного та/або гуморального імунітету. Кількість вакцини, що є терапевтично ефективною, може варіювати в залежності від вірусу, що використовується, від стану худоби та/або ступеня інфекції, та може визначатися практикуючим ветеринаром. Інактивовані (на основі цілих клітин або частин клітин) та модифіковані живі вакцини Інактивовані або модифіковані живі вакцини для використання у способі за даним винаходом можуть бути одержані при використанні різноманітних способів, що відомі у рівні техніки. Наприклад, ізоляти BVDV можуть бути одержані безпосередньо з інфікованої матки корів при використанні відомих способів. Ізоляти BVDV можуть бути інактивовані при використанні різноманітних відомих способів, наприклад, обробки бактеріального ізоляту бінарним етиленіміном (ВЕІ) як описано у патенті США №5,565,205 або шляхом інактивації формаліном, глютаральдегідом, нагріванням, випромінюванням, BPL або іншими інактивуючими агентами, відомими уданій галузі техніки. У доповнення до інактивованих вірусних ізолятів вакцинний продукт може також включати прийнятну кількість одного або декількох ад'ювантів, які звичайно використовуються. Прийнятні ад'юванти можуть включати, але не обмежені: мінеральні гелі, наприклад, гідроксид алюмінію; поверхневоактивні речовини, такі, як лізолецитин; глікозиди, наприклад, похідні сапоніну, такі, як Quil А або GPI-0100; поліоли плюроніку; поліаніони, неіонні блокполімери, наприклад, Плюронік F-127 (B.A.S.F., USA); пептиди, мінеральні олії, наприклад, Монтанід ISA-50 (Seppic, Paris, France), карбопол, Амфіген, Амфіген марки II (Hydronics, USA), Альгідрогель, масляні емульсії, наприклад, емульсії мінерального масла та води, такі, як BayolF/Arlacel А, або емульсії рослинної олії та води, такі емульгаторів, як лецитин; галуни; коров'ячі цитокіни; холестерин; та комбінації ад'юван 15 тів. У бажаному втіленні емульсія типу масло-уводі, що містить сапонін, є переважно мікрофлюїдизованою. Особливо бажаним джерелом BVDV типу 1 для використання у вакцині та спосіб за даним винаходом є PregSure® (PFIZER INC.), що містить BVDV штаму 5960 (одержаний з Національного центру з захворюванням тварин (NADC), USDA, Амес, ІА). Особливо бажаним джерелом BVDV типу 2 для використання у вакцині та способі за даним винаходом є PregSure® (PFIZER INC.), що містить BVDV штаму 53637 (АТСС РТА-4859), що одержаний з Гвелфського Університету, м. Гвелф, Онтаріо. Бажано, коли штами 5960 та 53637 інактивують ВЕІ та доповнюють комерційно доступним ад'ювантом, Quil А-холестерин-Амфіген (Hydronics, USA). Бажана доза імуногенної та вакцинної композицій згідно з даним винаходом складає приблизно 2,0 мл. Також можуть включатися консерванти у способи та композиції згідно з даним винаходом. Консерванти, що охоплюються даним винаходом, включають гентаміцин та мертіолят. Також може додаватися носій, бажано, PBS. Одержання модифікованих живих вакцин, наприклад, шляхом атенуювання вірулентних штамів за допомогою пасажів у культурі є відомим в області техніки. Інактивовані ізоляти BVDV можуть також бути поєднані з наступними бактеріями та вірусами, влючаючи, але не обмежуючись, коров'ячий вірус герпесу типу 1 (BHV-1), коров'ячий респіраторносинцитіальний вірус (BRSV), вірус парагрипу (Pl3), Campylobacter fetus, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardjoprajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis та Leptospira interrogans pomona. Дозування та способи введення У відповідності з даним винаходом ефективна кількість комбінованої вакцини, що вводиться худобі, включаючи вагітних корів та вагітних корів, що вигодовують телят, забезпечує ефективний імунітет до захворювання та інфекції плоду, які асоціюються з вірусом коров'ячої вірусної діареї (типу 1 та 2). В одному втіленні комбінована вакцина вводиться коровам у двох дозах з інтервалом приблизно 3-4 тижні. Наприклад, перше введення проводять через приблизно 1-4 тижні після першого введення комбінованої вакцини. У бажаному втіленні перше введення проводять приблизно за 5 тижнів перед заплідненням тварини. Друге введення здійснюють приблизно за 2 тижні перед заплідненням тварини. Введення відповідних вакцинних доз бажано здійснювати щорічно. В іншому бажаному втіленні тварини, вакциновані у віці приблизно 6 місяців, будуть піддаватися повторній вакцинації у віці, що перевищує 6 місяців. Введення відповідних вакцинних доз переважно проводять щороку. Кількість комбінованої вакцини, що є ефективною, залежить від інгредієнтів вакцини та пропису введення. Типово, коли у вакцині використовують препарат інактивованого вірусу коров'ячої вірусної діареї, то кількість вакцини, що містить приблизно 94689 16 3 10 від 10 до приблизно 10 колонієутворювальних одиниць на дозу BVDV, та бажано від приблизно 5 8 10 до приблизно 10 колонієутворювальних одиниць на дозу BVDV (типу 1 та 2), є ефективною, коли вводиться тварині двічі протягом періоду приблизно 3-4 тижні. Бажано, коли комбінована вакцина, що забезпечує ефективний імунітет, міс5 8 тить приблизно від 10 до 10 колонієутворювальних одиниць на дозу BVDV (тип 1 та 2) та більш 6 бажано приблизно 10 колонієутворювальних одиниць на дозу, коли вводиться тварині двічі протягом періоду приблизно від 3 до 4 тижнів. Перше введення проводять приблизно за 5 тижнів до запліднення тварини. Друге введення здійснюють приблизно за 2 тижні до запліднення тварини. Введення подальших доз вакцини бажано здійснювати щороку. Тварини, вакциновані до досягнення віку 6 місяців, будуть піддаватися повторній вакцинації після досягнення віку 6 місяців. Введення подальших вакцинних доз бажано здійснювати щорічно. Згідно з даним винаходом, коли вводять бажаний продукт PregSure® 5 (Pfizer Inc.), то PregSure® 5 (PFIZER INC.) вводять переважно двічі, кожний раз у кількості від приблизно 0,5мл до приблизно 5,0мл, бажано від приблизно 1,5мл до приблизно 2,5мл, та більш бажано у кількості приблизно 2 мл. Коли вводять бажаний продукт PregSure® 5-L5 або PregSure® 5-VL5, то PregSure® 5-L5 або PregSure® 5-VL5 бажано вводять двічі, кожний раз у кількості від приблизно 0,5мл до приблизно 10,0мл, бажано від приблизно 3мл до приблизно 7мл, та більш бажано у кількості приблизно 5мл. Перше введення здійснюють приблизно за 5 тижнів до запліднення тварини. Друге введення здійснюють приблизно за 2 тижні до запліднення тварини. Введення подальших вакцинних доз бажано здійснювати щороку. Тварини, вакциновані перед досягненням віку приблизно 6 місяців, повинні бути повторно вакциновані після досягнення віку 6 місяців. Введення подальших вакцинних доз бажано здійснювати щороку. Згідно з даним винаходом введення можна проводити відомими шляхами, включаючи оральний, інтраназальний, місцевим, трансдермальним та парентеральним (наприклад, внутрішньовенним, інтраперитонеальним, інтрадермальним, підшкірним або внутрішньом'язовим). Бажаним способом введення є підшкірне або внутрішньом'язове введення. Даний винахід також передбачає одиничну первинну дозу, після чого проводять повторну вакцинацію, що усуває необхідність введення додаткових доз телятам перед щорічною ревакцинацією для того, що викликати та/або підтримати імунітет до інфекції. Комбінована вакцина вводиться у відповідності з даним винаходом може включати додаткові компоненти, такі, як ад'ювант (наприклад, мінеральні гелі, наприклад, гідроксид алюмінію; поверхнево-активні речовини, такі, як холестерин, лізолецитин; глікозиди, наприклад, похідні сапоніну, такі Quil A, QS-21 або GPI-0100; поліоли плюроніку; поліаніони, неіонні блокполімери, наприклад, Плюронік F-127; пептиди, мінеральні олії, напри 17 клад, Монтанід ISA-50, карбопол, Амфіген, Альгідрогель, масляні емульсії, наприклад, емульсії мінерального масла, такі, як BayolF/Arlacel А, та води або емульсії рослинної олії та води, а також емульгатор, такий, як лецитин, галуни, коров'ячі цитокіни та комбінації ад'ювантів). Згідно з даним винаходом введення ефективної кількості комбінованої вакцини, що вводиться коровам у віці приблизно 3 місяці, забезпечує ефективний імунітет проти респіраторних інфекцій та репродуктивного захворювання та зменшує кількість викиднів. Даний винахід також забезпечує спосіб імунізації худоби, включаючи, але не обмежуючись, корів, телят та телят, що не вступили в період розмноження, від інфекції, спричиненої BVDV (типу 1 та типу 2), та респіраторних захворювань, що спричинені IBR, BVDV (типу 1 та типу 2), Pl3, BRSV, кампілобактеріозу та лептоспірозу, що передбачає введення тварині, принаймні, однієї дози, та бажано двох доз комбінованої вакцини для того, щоб імунізувати тварину проти інфекції, викликаної BVDV (типів 1 та 2), IBR, РІ3, BRSV, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardio-prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira interrogans pomona, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, Leptospira bratislava та Campylobacter fetus. У бажаному втіленні вакцину вводять підшкірно. В іншому бажаному втіленні вакцину вводять внутрішньом'язово. Крім того, бажано, коли вакцинна доза включає від 2мл до приблизно 7мл, та бажано приблизно 5мл, при цьому кожний мілілітр 3 10 містить від приблизно 10 до приблизно 10 колонієутворювальних одиниць на дозу вірусу. В іншому бажаному втіленні вакцина включає приблизно 2мл, при цьому кожний мілілітр містить від приб3 10 лизно 10 до приблизно 10 колонієутворювальних одиниць на дозу вірусу. Комбіновану вакцину бажано вводять тварині двічі; один раз у віці від приблизно 1 до приблизно 3 місяців, та один раз через приблизно 1-4 місяці. Даний винахід також передбачає повторні вакцинації кожні півроку однією дозою та повторну вакцинацію перед заплідненням. Даний винахід також забезпечує спосіб захисту плоду корів від інфекції плоду та персистентної інфекції плоду, що включає введення тварині, принаймні, однієї дози, бажано двох доз, комбінованої вакцини, для того, щоб імунізувати плід проти інфекції, спричиненої BVD (типів 1 та 2), iBR, Pl3, BRSV, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii hardioprajitno, Leptospira icterohaemmorrhagia, Leptospira interrogans pomona, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis, Leptospira bratislava та Campylobacter fetus. Комбіновану вакцину бажано вводять тварині двічі, один раз приблизно за п'ять тижнів перед заплідненням та один раз приблизно за два тижні перед заплідненням. Даний винахід також передбачає, що проводять введення ефективної кількості комбінованої вакцини тваринам, бажано худобі, для лікування або запобігання розладам, включаючи персистен 94689 18 тні інфекції плоду та репродуктивні розлади, такі, як аборти, у таких тварин. Даний винахід далі ілюструється, але не обмежується, наступними прикладами. ПРИКЛАД 1 Матеріали та способи Тварини - 56 серонегативних за BVDV корів (тобто таких, що мають сироваткові титри нейтралізації [SN]