Спосіб діагностики прохідності сім’явивідного тракту

Спосіб діагностики прохідності сім'явивідного тракту, який полягає у визначенні активності нейт 3 14239 4 виключають за допомогою контрольного аналізу глюкопіраназиду). Якщо активність нейтральної без інкубації. глюкозидази відповідає показникам норми, то сіПідготовка біоматеріалу: еякулят, зібраний за м'явивідні шляхи включно та дистальніше протоки стандартних умов (після 2-7 діб статевого утрипридатку вважають прохідними, операцію епідідімання та виключення впливу шкідливих факторів мовазанастомоз вважають недоцільною і подружна організм пацієнта) центрифугують при ній парі рекомендують інсіменація спермою доно3000об./хв. впродовж 15 хвилин, відділяють сім'яра. Якщо визначена активність нейтральної ну плазму, розводять її фізіологічним розчином в глюкозидази еякуляту нижче за норму, то діагнос20 разів (до 1 частини сім'яної плазми додають 19 тують обструкцію сім'явивідних шляхів. В такому частин 0,9% водного розчину хлористого натрію). випадку показана операція по відновленню прохіХід визначення нейтральної -глюкозидази: до дності (епідідімовазанастомоз) та допоміжні ре0,2мл реакційної суміші з 0,2М калій-фосфатного продуктивні технології. буферу рН6,5 та 8,3мМ мальтози додають 0,1мл Недоліком даного методу є необхідність викорозведеної сім'яної плазми. Пробу інкубують ристання специфічних інгібіторів та синтетичного впродовж 30 хвилин при 37°С. В контрольну пробу субстрату, відсутність яких лімітує діагностичні додають сім'яну плазму після інкубації. Пробірки можливості. щільно закривають гумовими пробками та поміВ основу корисної моделі поставлена задача щають в киплячу водяну баню на 5 хвилин для удосконалення способу діагностики прохідності припинення ферментативної реакції. Проби охосім'явивідного тракту шляхом біохімічного визналоджують та визначають кількість глюкози глюкочення активності нейтральної -глюкозидази в зооксидазним методом за допомогою набору реаеякуляті з використанням в якості субстрату - мактивів для визначення глюкози в біологічних льтози, яка під впливом -глюкозидази гідролізурідинах. При розрахунку активності нейтральної ється з утворенням глюкози, в залежності від приглюкозидази враховують ступінь розведення сім'яросту концентрації якої, діагностують збережену ної плазми (в 20 разів). прохідність, або двосічну обструкцію сім'явивідних Активність нейтральної -глюкозидази в еякушляхів, це спрощує процес диференційної діагноляті відповідає кількості глюкози, яка утворилася в стики азооспермії з використанням меншого об'єрезультаті гідролізу мальтози під впливом фермему еякуляту, що важливе за умов малого об'єму отриманої проби. нту і виражають в мкмоль/с л. За умов, що граниПоставлена задача вирішується тим, що споцею вирішення є 10мкмоль/с л, при показниках сіб діагностики прохідності сім'явивідного тракту, вище 10,0мкмоль/с л діагностують збережену проякий полягає у визначенні активності нейтральної хідність, а якщо менше - двобічну обструкцію сі-глюкозидази в еякуляті, згідно з корисною мом'явивідних шляхів. деллю, додатково використовують мальтозу в якоСпосіб діагностики прохідності сім'явивідного сті субстрату реакційної суміші для визначення тракту використано в клініці відділу сексопатології активності нейтральної -глюкозидази в еякуляті, та андрології Інституту урології АМН України. Обта при показниках її активності вище стежено 66 пацієнтів з азооспермією. У 34 з них за даними біопсії яєчка було діагностовано екскрето10,0мкмоль/с л діагностують збережену прохідрно-обтураційну форму безплідності (обструктивність, а менше - двобічну обструкцію сім'явивідних на азооспермія), а у 32 - секреторну форму (необшляхів. структивна азооспермія). Контрольну групу склав Спосіб діагностики прохідності сім'явивідного 31 пацієнт з нормозооспермією. Результати витракту виконують таким чином. В основі методу значення активності нейтральної -глюкозидази в визначення активності нейтральної -глюкозидази еякуляті представлені в таблиці. в еякуляті лежить здатність цього ферменту гідроЯк свідчать наведені в таблиці дані, вищий рілізувати молекулу мальтози, яка складається з вень активності нейтральної -глюкозидази визнадвох залишків глюкози, з'єднаних глікозидним зв'язком, за схемою: чають в еякуляті пацієнтів з нормоспермією та секреторною формою безплідності відносно її активності при екскреторно-обтураційній формі, що нейтральна -глюкозидаза глюкоза Мальтоза за результатами аналізу за допомогою критерія 37оС, 30хв., рН 6,5 Краскела-Уолліса визнано статистично значимою різницею. Це обумовлює можливість диференційЗа швидкістю приросту глюкози в реакційній ної діагностики цих станів за допомогою запропосуміші судять про активність нейтральної нованого способу. Різниця між показниками в групі глюкозидази. Після додавання еякуляту до реаксекреторної безплідності та нормою статистично тивної суміші, яка містить мальтозу, та інкубації в не значима. стандартних умовах, за допомогою глюкозооксидазного методу визначають приріст глюкози в пробі. Вплив глюкози, що природно входить до складу еякуляту та складає фонову концентрацію, 5 14239 6 Таблиця Показники активності нейтральної -глюкозидази в еякуляті у пацієнтів з азооспермією Показники Група 1 НеобГрупа 2 Обструк- Група 3 Ноструктивна азоо- тивна азооспермія рма n-31 сперміяn=32 n=34 Середня активність нейтральної -глюкозидази в еякуляті, мкмоль/с л Стандартна похибка Стандартне відхилення P1,2 P1,3 P2,3 Наводимо приклади практичного застосування запропонованого способу. Приклад 1. Пацієнт Ю., і.х. №1226, звернувся в клініку у зв'язку з безплідністю в шлюбі. Жінку обстежено гінекологом - здорова. При об'єктивному обстеженні пацієнта ріст волосся за чоловічим типом. Яєчка та придатки в мошонці задовільних розмірів, безболісні, придатки ущільнено. За результатами ультрасонографії ознаки дистальної обструкції відсутні. В аналізі еякуляту виявлено азооспермію. Активність нейтральної -глюкозидази в еякуляті за запропонованим способом становила 2,4мкмоль/с л. Тестостерон сироватки крові - 6,2нг/мл (норма 3,012,0нг/мл). Фолікулостимулюючий гормон сироватки крові - 4,8мМО/мл (норма 1,5-5,84мМО/мл). При дослідженні біоптата яєчка в просвіті більшості сім'яних канальців визначається біля 10 сперматозоїдів. Заключний діагноз: екскреторнообтураційна безплідність. Рекомендовано операцію епідідімовазанастомоз. Приклад 2. Пацієнт У., і.х. №2217, звернувся в клініку у зв'язку з безплідністю в шлюбі. Жінку обстежено гінекологом - здорова. При об'єктивному обстеженні пацієнта ріст волосся за чоловічим типом. Яєчка та придатки в мошонці задовільних розмірів та консистенції, безболісні. В аналізі еякуляту виявлено азооспермію. Активність нейтральної -глюкозидази в еякуляті за запропонованим способом становила 27,3мкмоль/с л. Тестостерон сироватки крові 3,0нг/мл (норма 3,0-12,0нг/мл). Комп’ютерна верстка М. Мацело 23,9 1,8 10,4 4,0 0,3 2,0 0,05