Процес дослідження механізмів виникнення і розвитку різних форм цукрового діабету

Процес дослідження механізмів виникнення і розвитку різних форм цукрового діабету, який від 3 20354 4 дозволяє реєструвати особливості структур ування муляторів на системи внутрішньоклітинної регуляводного компоненту і, таким чином, оцінювати біоції еритроцитів та тромбоцитів. І у перспективі логічну рідину, наприклад кров, як систему в цілоодержати можливість здійснювати індивідуальний му [патент RU № 2137126, 29.03.1999]. Недоліком підбір фармакологічних препаратів для терапевтиспособу є його трудомісткість. чної корекції виявлених порушень. Існує спосіб експрес-діагностики прихованих Поставлена задача вирішується в таким чиформ ЦД, заснований на реєстрації інфрачервононом. го випромінювання в сукупності акупунктурних Вивчали інсулінорецепторні взаємодії на ериточок, розташованих на бічній поверхні животу, на троцитах здорових і хворих людей, а також ериткистях рук і на стопах [патент RU, №2108741, роцитах здорових тварин - кроликів. Для цього 20.04.1998]. використовували метод КХЧ-діелектрометрії, що Недоліками способу є необхідність знання медозволяє в реальному часі сканувати клітинні відтодики рефлексодіагностики і топографії акупункповіді при стимуляції живої клітини біостимулятотурних точок, а також трудомісткість (потрібно дорами, гормонами і лікарськими препаратами. сліджувати інфрачервоне випромінювання в 12 Зазначений технічний результат для здійсненбіологічно активних точках - по 6 точок праворуч і ня винаходу, заснованому на виявленні зв'язку ліворуч). АЦС і IP, досягається тим, що експерименти проПри традиційних підходах експериментального водилися на називних зразках суспензії еритроцидослідження ЦД на тваринах застосовуються різні тів і сироватках крові людини і кроликів. Для аналіметоди і підходи з використанням радіоімунних зу відповідей керуючих клітинних комплексів на методів, методів визначення параметрів зв'язувплив біологічно активних речовин суспензію клівання інсулінових рецепторів за допомогою електтин розливали в комірки імунологічного планшета. ронно-парамагнітно-резонансної спектроскопії, Стимуляцію проводили біологічно активними регувизначення пероксідації фосфоліпідів у ліпідному ляторами: інсуліном (І) 1,6%, адреналіном (А), іншарі біомембран еритроцитів, метод конкурентносуліном (І) і бета-блокатором обзіданом (О), (І+А) і го зв'язування інсуліну еритроцитами за допомоІ і глюкозою (Г), добавки яких здійснюють мікродогою радіоактивної мітки та інші.. Для даних цілей затором безпосередньо перед вимірами. використовуються: тканини печінки, нирок, кістякоВиміри діелектричної проникності суспензії вих м'язів, легеневої тканини, а також еритроцити, еритроцитів і сироватки крові проведені на довжині що вимагає значної кількості експериментальних хвилі 7,6 мм с допомогою КХЧ діелектрометра тварин. Однак експерименти на тваринах при різрозробленого в 1РЭ НАН України. Обсяг проби не них моделях діабету, у багатьох випадках, не відперевищує 0,005мл. [UA, патент N9844 від повідають ситуації в організмі людини, так як не 11.03.2005р. "Пристрій для дослідження водної враховують патогенетичні фактори, які призводять компоненти біологічних об'єктів", кл. G01N 33/48, до виникнення захворювання, тому аналіз функції Щеголєва Т.Ю.]. Потужність у тракті не перевищурецепторів на живих клітинах крові пацієнта більш вала 10мвт. Погрішність виміру абсолютних знаефективний. чень не перевищує 3%, відносних 1%, час виміру Наявність в еритроцитах інсулін-зв'язуючих кожної проби 2-3 хвилини. рецепторів являє собою можливість використовуХарактеристикою зміни функціонального стану вати еритроцити для тестування інсулінклітин є зміна величини комплексної діелектричної рецепторних взаємодій у популяційних дослідженпроникності зразка, обмірюваної в області диспернях різноманітних форм діабету методом діелектсії вільної води. Будь-яке конформаційне перетворометрії в міліметровому діапазоні частот (меторення макромолекулярних компонентів клітини дом КХЧ діелектрометрії). Даний метод дозволяє призводить до перебудови складної мережі водоцінити стан аденілатциклазної системи (АЦС) них зв'язків і, як наслідок, до зміни кількості вільної хворих ЦД, що відображає стан IP у клітинах. і зв'язаної води навколишньої структури клітини. Автори пропонують наступний процес досліПо зміні параметрів діелектричної проникності є дження механізмів виникнення і розвитку ЦД. можливість судити як про зміни гідратного оточенШляхом аналізу реакції живих клітин крові метоня нативної клітини, так і про тонкі механізми кондом КХЧ діелектрометрії на дію біостимуляторів формаційних перетворень ланцюга макромолекул на системи регуляції клітин, які зв'язані з інсулінов плазматичної мембрани та внутрішньоклітинних вими рецепторами (IP), по змінам діелектричної структурах. проникності діагностувати ЦД. Проведені дослідження з патентних і науковоЗадачею корисної моделі є створення процесу технічних джерел інформації показали, що пропопрогнозування розвитку цукрового діабету будьнований спосіб невідомий і не випливає явно з якого типу на підставі вивчення інсулінвивченого рівня техніки, тобто відповідає критерірецепторних взаємодій із системами внутрішньоям "новизна". клітинної регуляції еритроцитів. Пропонований спосіб здійснюється клінікоТехнічним результатом є моделювання процелабораторним методом в амбулаторносів ЦД на клітинному рівні. поліклінічних умовах, не вимагає спеціальних умов В основу корисної моделі поставлено завдандля проведення, економічний у часі, простий в ня процес дослідження механізмів виникнення і експлуатації. Таким чином, спосіб що заявляється розвитку різних форм цукрового діабету на підстає доступним і, отже, практично застосовним. ві вивчення інсулін-рецепторних взаємодій на ериПриклад 1. троцитах шля хом КХЧ діелектрометрії по змінам У першій серії експериментів проводили порідіелектричної проникності в результаті дії біостивняльний аналіз функціонального стану відмитої 5 20354 6 суспензії еритроцитів здорових пацієнтів і пацієнпрактиці цей випадок відомий і називається ефектів хворих ЦД при дії А. Провели вимір діелектритом малих доз, коли субстрат, у даному випадку чної проникності суспензії еритроцитів методом інсулін, блокує подальше його зв'язування рецепКХЧ-діелектрометрії, отримані значення показали, торами клітин і молекулами білків і вплив гормону що відзначаються достовірні зміни, тобто суспензії припиняється. еритроцитів здорових і хворих ЦД істотно відрізПриклад 4. нялися. У четвертій серії експериментів, як стимулятоПриклад 2. ри на АЦС використовували біологічно активні В другій серії експериментів проводили поріврегулятори І, I+O, А, І+А. З досвіду видно, що стиняльну характеристику діелектричної проникненомуляція адреналіном впливає на дію І на мембрасті суспензії еритроцитів здорових пацієнтів і інтакну еритроцитів, що показує зв’язок АЦС та IP. З тних кроликів при навантаженні інсуліном (І) у досвіду видно, що b-блокатор (обзідан - О) перерозведеннях 1/1000, 1/100, 1/10. Отримані дані шкоджає дії І на мембрану еритроцитів, що добре показали, що при дії І на суспензію еритроцитів відомо в клініці, де не рекомендується введення людини спостерігався дозозалежний ефект і індипрепаратів інсуліну хворим, у лікуванні яких виковідуальні відмінності в діючій концентрації.. Макристовується b-блокатори. симальна дія І спостерігалася при середнім розвеТаким чином, показано що використання КХЧденні 1/100. Також виявили значні видові діелектрометрії для аналізу інсулін-рецепторних відмінності при зв'язуванні І в суспензії еритроцивзаємодій дає можливість запропонувати модель тів людини і кролика. Завдяки отриманим резульдля аналізу процесів в організмі при розвитку діататам можна робити висновок про необхідність бету з використанням клінічного матеріалу хворовивчення ЦД на клінічному матеріалі хворих, а го. Для аналізу досить 1мл крові, тому що обсяг також можливості індивідуального підбору доз І комірки не перевищує 0,01мл. В представлених пацієнтам. результатах на клітинному рівні продемонстровані Приклад 3. відомі клінічні прояви лікарських засобів, що підУ третій серії експериментів брали 5 серій тверджує адекватність досліджень методом КХЧеритроцитів кролика і додавали різні концентрації: діелектрометрії. І- максимальна концентрація, II концентрація в 10 Перевагами процесу, що заявляється є просразів менше максимальної, 12 концентрація в 100 тота виконання дослідження, точність, він вимагає разів менше максимальної, ІЗ концентрація в 1000 менших витрат часу на його виконання. Метод разів менше; Г - розчин глюкози концентрації С1; КХЧ діелектрометрії дає можливість реєструвати Г1 - розчин глюкози концентрації С2. нативні властивості сук упності різних компонентів На еритроцитах кролика при додаванні різних крові (клітин та сироватки), що забезпечують біоконцентрацій інсуліну в сполученні с глюкозою логічні функції організму. Таким чином, запропоспостерігалася залежність від дози препарату: зі нований процес дозволяє оцінювати загальні пазменшенням концентрації інсуліну значення діелераметри регуляції клітин, які характеризують ктричної проникності також зменшувалося, причосистему організму в цілому, на відміну від інших му велика концентрація глюкози С2 сприяла цьому способів діагностики ЦД, що вимірюють кількість зменшенню, а мінімальна добавка інсуліну (ІЗ) окремого компонента крові (глюкози). викликала зворотний ефект. В біології і медичної І Комп’ютерна в ерстка Г. Паяльніков Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601