Спосіб діагностики спадкової тромбофілії, що обумовлена порушенням перетворення метіоніну на цистин

Спосіб діагностики спадкової тромбофілії, що обумовлена порушенням перетворення метіоніну на цистин, шляхом визначення рівня гомоцистеїну в крові хворих на артеріальні та венозні тромбози, який відрізняється тим, що додатково хворому 3 24837 2006. - Т.5. - с.29-34]. Порушення перетворення метіоніну до цистину призводить до накопичення гомоцистеїну у кров'яному руслі, а також у сечі. Тому патологічні стани, при яких у сечі виявляється підвищений рівень гомоцистіну відносять до групи гомоцистинурій (ГЦУ). Найчастіша форма ГЦУ обумовлена мутаціями у гені, що кодує циста тіон-b-синтетазу (CBS). Частота цієї форми ГЦУ складає 1:50001:25000. Ген CBS розташований на довгому плечі 21 хромосоми (21q21-q22.1). Секвенювання геному дозволило виявити біля 60 мутацій цього гену, які в гомозиготному стані призводять до розвитку клінічної маніфестації ГЦУ, 40-кратному збільшенню рівня гомоцистеїна в крові, аномаліям розвитку очей, деформаціям скелету, розумовій відсталості та ранньому атеросклерозу. Приблизно у 50% таких хворих к 30 рокам розвивається ішемічна хвороба серця або порушення мозкового кровообігу, що привертає велику увагу до цієї проблеми [див., Welch G., Loscalzo J. Homosysteine and aterothrombosis // N. Engl. J. Med. - 1998. - Vol. 338. - P. 1042-1050]. Відомий спосіб діагностики спадкових форм тромбофілій шляхом виявлення гомозиготного носійства мутацій гена CBS [див., наприклад, De Stefano V., Rossi E., Paciaroni К., Leone G. Screening for inherited thrombophilia: indication and therapeutic implications // Haematologica. - 2002. Vol. 87. - P. 1095-1108] або гетерозиготного носійства мутацій CBS [див. Мухин Н.А., Моисеев С.В., Фомин В.В. Гипергомоцистеинемия как фактор риска развития заболеваний сердечно-сосудистой системы // Клиническая медицина. - 2001. - Т.6. С. 7-14]. Ці способи з використанням молекулярногенетичних технологій для діагностики СТФ є ефективними, але такими, що дорого коштують. Тому медицина потребує способів діагностики СТФ, що потребують менших затрат, але водночас є ефективними та доступними, які надалі можна пропонувати для проведення масового скринінгу на СТФ. Неонатальний скринінг ГЦУ на теперішній час проводиться в 15 штатах США, Японії та багатьох странах Європи. У більшості програм використовують спосіб діагностики ГЦУ шляхом проведення бактеріального тесту Гатрі на метіонін [див. Ю.И. Барашев, В.А. Бахарев, П.В. Новиков. Диагностика и лечение врожденных и наследственных заболеваний у детей. М. - «Триада-Х». - 2004. - с. 479481]. Але при цьому способі виявляються тільки В6-незалежні форми ГЦУ (вітамін В6 є коферментом у реакції перетворення метіоніну у цистин), що найчастіше обумовлені мутацією І278Т; В6залежні форми, що обумовлені мутацією G307S, цім методом виявити не вдається. Найбільш близьким до винаходу по суті і результату, який досягається, є спосіб діагностики спадкових форм тромбофілій, що обумовлені порушенням перетворення метіоніну до цистину, шляхом визначення рівня гіпергомоцистеїнемії [див. Cattaneo M. Hyperhomocysteinemia: a risk factor for arterial and venous trombotic disease // Int. J. Clin. Lab. Res. - 1997. - Vol. 27. - P. 139-144]. Він полягає у тому, що у хворих, які мають в анамнезі 4 випадки тромбозів та емболій, проводять визначення рівню гомоцистеїну в плазмі крові, та якщо він складає більш ніж 30мкмоль/л, діагностують СТФ, яка обумовлена порушенням перетворення метіоніну на цистін. Недоліком цього способу є те, що автори перед проведенням біохімічного обстеження не визначають повну груп у хворих з підвищеним ризиком розвитку ГЦУ, тому існує висока імовірність пропуску цієї патології у значної кількості хворих гомозиготних та гетерозиготних носіїв ГЦУ. У зв'язку з вищевикладеним, в основу корисної моделі покладено задачу підвищення якості діагностики спадкових форм тромбофілій, що потребують своєчасного початку лікування та профілактики життєво небезпечних ускладнень цих захворювань. Задачу, яку покладено в основу корисної моделі, вирішують тим, що у відомому способі діагностики спадкової тромбофілії, яка обумовлена порушенням перетворення метіоніну на цистин, шляхом визначення рівня гіпергомоцистеїнемії у хворих на артеріальні та венозні тромбози, згідно корисної моделі додатково хворому проводять клініко-генеалогічний аналіз і з'ясовують, хто з його родичів І ступені спорідненості (батьки, діти, сібси) відноситься до групи ризику недостатності CBS і має прояви артеріальних та венозних тромбозів, ментальної ретардації, судом, психічних порушень, скелетних аномалій, підгострого панкреатиту або дислокації кришталика, а потім у хворого та його родичів І ступені спорідненості з вище перерахованими ознаками визначають рівень цистину в крові методом високоефективної рідинної хроматографії та при його зменшенні на 50% від нормального рівня діагностують у них спадкову форму тромбофілії, що обумовлена порушенням перетворення метіоніну на цистин. Технічний ефект корисної моделі, а саме підвищення якості діагностики СТФ досягають за рахунок того, що проводять обстеження пацієнтів із групи ризику недостатності CBS, що мають прояви артеріальних та венозних тромбозів, ментальної ретардації, судом, психічних порушень, скелетних аномалій, підгострого панкреатиту або дислокації кришталика та визначають у них рівень цистину в крові. Зменшений рівень цистину в крові при наявності гіпергомоцистеїнемії свідчить про порушення перетворення метіонін ® гомоцистеїн ® цистин та наявність у пацієнта СТФ. Спосіб виконують наступним чином. При надхоженнні пацієнта з артеріальними або венозними тромбозами, що обумовлені гіпергомоцістеїнемією, йому проводять клініко-генеалогічний аналіз та з'ясовують, хто з його родичів І ступені спорідненості (батьки, діти, сібси) має прояви артеріальних та венозних тромбозів, ментальної ретардації, судом, психічних порушень, скелетних аномалій, підгострого панкреатиту або дислокації кришталика. Потім пацієнту з гіпергомоцістеїнемією і його родичам І ступені спорідненості з вище перерахованими ознаками проводять високоефективну рідинну хроматографію амінокислот крові, та якщо виявляють зменшення цистину, діагностують у них СТФ, що обумовлена порушенням перетворення 5 24837 метіоніну на цистин. Ефективність способу ілюструє наступний приклад: Приклад. Хворий Г., 24 роки, поступив з діагнозом: Гематогенна тромбофілія, що обумовлена гіпергомоцистеїнемією. Підгострий тромбоз правої підключичної вени, оклюзійна форма. Постромбофлебітична хвороба лівої верхньої кінцівки. Хронічна венозна недостатність І ст. При надходженні скаржився на повторні тромбози правої підключичної вени за останній рік. При огляді виявлено марфаноподібний фенотип у пробанда. При проведенні клініко-генеалогічного аналізу з'ясовано, що Комп’ютерна в ерстка А. Крулевський 6 сібс хворого (молодший брат) находився на лікуванні в хірургічному стаціонарі з діагнозом: Гострий тромбоз правої підключичної вени. Фенотипично у сібса виявлено марфаноподібні ознаки, сколіоз хребта. При проведенні біохімічного дослідження крові пробанда та його сібса методом високоефективної рідинної хроматографії у обох було виявлено достовірне зменшення цистину на 50% (0,016 і 0,015ммоль/л при нормі 0,0330,117ммоль/л), що свідчило на користь порушення перетворення метіоніну на цистин. Тому у пробанда та його сібса діагностовано спадкову тромбофілію. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601