Спосіб ідентифікації присутності келіну у лікарський рослинній сировині

Спосіб ідентифікації присутності келіну у лікарській рослинній сировині шляхом екстракції його з ідентифікуємого зразка екстрагентом та розділяння екстракту у тонкому шарі силікагелю, використовуючи як рухому фазу етилацетат, з наступним виявлянням роз'єднаних зон в УФ світлі, який відрізняється тим, що сировину екстрагують хлороформом із співвідношенням сировина:розчинник (1:95)-(1:105). (19) (21) 98052443 (22) 13.05.1998 (24) 15.02.2001 (33) UA (46) 15.02.2001, Бюл. № 1, 2001 р. (72) Калоєв Василь Васильович, Підпружников Юрій Васильович, Лисоченко Лілія Михайлівна (73) Калоєв Василь Васильович 32828 сировині сировину екстрагують хлороформом із співвідношенням сировина:розчинник (1:95)(1:105). В пропонованому способі подрібнені плоди Аммі зубної екстрагують 15 хвилин хлороформом із співвідношенням (1:95)-(1:105), нагріваючи на гарячій водяній бані, після фільтрування хроматографують у тонкому шарі силікагелю, використовуючи як рухому фазу етилацетат, та виявляють роз'єднані зони в УФ світлі з довжиною хвилі 365 нм. Приклад 1 0,5 г сировини (плоди Аммі зубної), подрібненої до розміру частинок, які проходять крізь сито з розміром отворів 0,2 мм по ДГСТ 4403-77, вносять до колби на 100 мл, додають 50 мл хлороформу і гріють із зворотним холодильником на гарячій водяній бані протягом 15 хвилин при помірному кипінні розчинника. Охолоджують до 20°С і фільтрують крізь паперовий фільтр. На лінію старту хроматографічної пластинки "Kieselgel 60 F254" розміром 6х15 см наносять краплю 10 мкл одержаного екстракту. Паралельно на відстані 2 см наносять 5 мкл (5 мкг) розчину стандартного зразка келіну. Пластинку с нанесеними зразками сушать на повітрі протягом 10 хвилин, вносять до камери з етилацетатом і хроматографують підіймаючим способом. Коли фронт розчинників пройде близько 12 см від лінії старту, пластинку, після сушіння на повітрі протягом 10 хвилин, розглядають в УФ світлі з довжиною хвилі 365 нм. На хроматограмі виявляють пляму жовтокоричневого кольору на рівні плями на хроматограмі розчину стандартного зразку келіну (келін). Допускається присутність від двох до п'яти додаткових плям. Якщо треба, то спеціальний додатковий кількісний аналіз аналізуємого екстракту показує, що повнота однократної екстракції дорівнює 93%, що дозволяє в разі термінової необхідності проводити оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту келіну, якщо треба використовувати сировину для приготування чистого келіну та келіну-стандарту. Приклад 2 0,5 г сировини (плоди Аммі зубної), подрібненої як у прикладі 1, змішують з 47,5 мл хлороформу і далі - як у прикладі 1. На хроматограмі виявляють пляму жовто-коричневого кольору на рівні плями на хроматограмі розчину стандартного зразку келіну (келін). Якщо треба, то спеціальний додатковий кількісний аналіз аналізуємого екстракту показує, що повнота однократної екстракції дорівнює 92%, це дозволяє в разі термінової технічної необхідності проводити оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту келіну, якщо треба використовувати сировину для приготування чистого келіну та келіну-стандарту. Приклад 3 0,5 г сировини (плоди Аммі зубної), подрібненої як у прикладі 1, змішують з 52,5 мл хлороформу і далі як у прикладі 1. На хроматограмі виявляють пляму жовто-коричневого кольору на рівні плями на хроматограмі розчину стандартного зразку келіну (келін). Якщо треба, то спеціальний додатковий кількісний аналіз аналізуємого екстракту показує, що повнота однократної екстракції дорівнює 93%. Це дозволяє в разі термінової технічної необхідності проводити оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту келіну, якщо треба використовувати сировину для приготування чистого келіну та келіну-стандарту. Приклад 4 0,5 г сировини (плоди Аммі зубної), подрібненої як у прикладі 1, змішують з 55 мл хлороформу і далі як у прикладі 1. На хроматограмі виявляють пляму жовто-коричневого кольору на рівні плями на хроматограмі розчину стандартного зразку келіну (келін). Якщо треба, то спеціальний додатковий кількісний аналіз аналізуємого екстракту показує, що повнота однократної екстракції дорівнює 93%, це дозволяє в разі термінової технічної необхідності проводити оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту келіну, якщо треба використовувати сировину для приготування чистого келіну та келіну-стандарту. Приклад 5 0.5 г сировини (плоди Аммі зубної), подрібненої як у прикладі 1, змішують з 50 мл хлороформу і далі як у прикладі 1, крім терміну екстракції, дорівнюючому 10 хвилин. На хроматограмі виявляють пляму жовто-коричневого кольору на рівні плями на хроматограмі розчину стандартного зразку келіну (келін). Якщо треба, спеціальний додатковий кількісний аналіз аналізуємого екстракту показує, що повнота однократної екстракції дорівнює 90% і це не дозволяє в разі термінової технічної необхідності проводити оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту келіну, якщо треба використовувати сировину для приготування чистого келіну та келіну-стандарту. Приклад 6 0,5 г сировини (плоди Аммі зубної), подрібненої як у прикладі 1, змішують з 45 мл хлороформу і далі як у прикладі 1. На хроматограмі виявляють пляму жовто-коричневого коліру на рівні плями на хроматограмі розчину стандартного зразку келіну (келін). Якщо треба, спеціальний додатковий кількісний аналіз аналізуємого екстракту показує, що повнота однократної екстракції дорівнює 89% і це не дозволяє в разі термінової технічної необхідності достатньо надійно проводити оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту суми хромонів в перерахунку на келін, або оцінку вмісту келіну, якщо треба використовувати сировину для приготування чистого келіну та келінустандарту. Дані з наведених прикладів свідчать, що для ідентифікації келіну у сировині треба проводити екстракцію 15 хвилин, а як демонструє один з прикладів, зменшення цього часу зменшує показники екстрактивності, які можуть стати у пригоді. В той же час, згідно з способом прототипу, необхідно ра 2 32828 зом із упарюванням трохи як не 40 хвилин. Таким чином, експресність в нашому способі науково підтверджена. І свій вклад в це вносить вибране співвідношення сировини і розчинника (1:95)-(1:105). Крім того, при екстрагуванні сировини при встановлених співвідношеннях (1:95)–(1:105) за однократну екстракцію можна досягти повноту екстрагування, а вже при співвідношенні 1:90 такої повноти нема і ця додаткова відзнака дає можливість, якщо потребує необхідність, проводити тер міновий кількісний аналіз спектрофотометричним методом. А в разі вірогідного використання для цієї мети екстракту, який залишився від способу аналізування як у прототипу, це взагалі неможливо, бо у тому способі повнота екстракції досягає тільки 4050% і тому такий екстракт не можна використовувати з метою здійснення швидких рішень щодо складу сировини. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3