Спосіб діагностики захворювань щитовидної залози

Спосіб діагностики захворювань щитовидної залози, який включає оцінку імунологічних аспектів крові, який відрізняється тим, що додатково виконують морфометричний аналіз лімфоцитів периферичної крові і при відхиленні від норми вмісту малих лімфоцитів, зниженні вмісту середніх і великих лімфоцитів на 20% і більше на фоні зниження відносної і абсолютної кількості Т-лімфоцитів і 37664 (Александрова Г.Ф., Внотченко С.Л., Коннова Е.В. и др. Метод определения аутоантител к тиреоидным ангенам при диффузном токсическом зобе и тиреоидите Хашимото. //Сов. медицина- 1981.№ 5.- с. 36-39). Не потребує доказів необхідність вивчення у даного контингенту хворих іммунологічних аспектів. Обгрун тованим є вивчення вмісту імуноглобулінів А, М, G, абсолютного і відносного числа Т-, В- і О-лімфоцитів (Шевченко С.И., Якимова Т.П., Лозинская И.Н. Иммунноморфологические и гормональные изменения у больных с узловым зобом и аутоиммунным тиреоидитом //Клин. хирургия1986- № 12.- с. 3; Потемкина Е.Е., Ра фибеков Д.С., Фомина Е.Е. и др. Гуморальные и клеточные иммунные факторы при аутоиммуном тиреоидите //Проблемы эндокринологии.- 1995.- Т. 41, № 1.с. 9-12). До теперішнього часу накопичились дані клінічних досліджень по використанню морфометричного аналізу лімфоцитів периферичної крові з метою діагностики захворювань. Характерною особливістю популяції лімфоцитів є їх неоднорідність, яка обумовлена великою кількістю функцій, які ними виконуються: імунологічне розпізнання, реакції відторгнення, лізис клітин мішеней, забезпечення процесів клітинної кооперації, синтез антитіл, регулювання інтенсивності імунної відповіді, формування імунної пам'яті, тощо. Методика визначення лімфоцитів в мазках периферичної крові проста та доступна, що обумовлює велику практичну цінність данного методу. Кількісне визначення великих, середніх і малих лімфоцитів, а також контроль за динамікою їх вмісту в крові дає можливість не тільки уточнювати діагноз захворювання, а й використовувати даний метод, як самостійний захід. (Либерман Л.Н., Матущенко А.Г. Морфометрический метод исследования лимфоцитов крови //Лабораторное дело.1989.- с. 18-20). Вищезгаданий спосіб діагностики обрано нами за прототип, як самий близький по суті та результату до того, що пропонується В доступній інформації не виявлено кількісних критеріїв лімфоцитів для захворювань щитовидної залози. У зв'язку з ви щевикладеним, в основу винаходу покладено задачу розширення арсеналу діагностичних заходів для діагностики захворювань щитовидної залози. Задача, яку покладено в основу винаходу, вирішується тим, що у відомому способі діагностики захворювань щитовидної залози, який включає оцінку імунологічних аспектів крові, згідно з винаходом, додатково виконують морфометричний аналіз лімфоцитів периферичної крові і при відхиленні від норми вмісту малих лімфоцитів, зниженні вмісту середніх і великих лімфоцитів на 20% і більше на фоні зниження відносної і абсолютної кількості Т-лімфоцитів і підвищення відносної і абсолютної кількості В- і О-лімфоцитів в порівнянні з нормою, діагностують вузловий зоб; при відхиленні від норми вмісту малих та великих лімфоцитів, зниженні вмісту середніх лімфоцитів на 40% і більше на фоні відхилення від норми відносної і абсолютної кількості Т-, В- і Олімфоцитів, діагностують вузловий зоб з ауто імунним компонентом; при зниженні вмісту малих лімфоцитів на 70% і більше, відхиленні від норми вмісту середніх лімфоцитів, незмінному вмісту великих лімфоцитів на фоні зниження відносної і абсолютної кількості Т-лімфоцитів, підвищенні Влімфоцитів, відхилення О-лімфоцитів у порівнянні з нормою, діагностують ди фузний токсичний зоб. Імунологічні аспекти вивчались за допомогою комплексу методів, який включав визначення загальної кількості лімфоцитів, вмісту морфометрично різних по величині лімфоцитів (великих, середніх і малих), абсолютних і відносних показників Т-, В- і О-лімфоцитів. Крім цього були виявлені закономірності співвідношення великих, середніх і малих лімфоцитів до Т-, В- і О-лімфоцитів, що дозволило виконувати диференційну діагностику захворювань щитовидної залози. Одержані кількісні значення великих, середніх і малих лімфоцитів були встановлені експериментальним шляхом на 124 хворих у віці від 19 до 70 років. Морфометричний аналіз лімфоцитів має високу чутли вість, дозволяє реєструвати відмінність від норми навіть при слабких слабуваннях, а також доброю відновлюванністю, легко піддається автоматизації. Ступінь відхилення розподілу лімфоцитів від норми корелює з загальним станом організму. Спосіб виконують таким чином: При морфометрії в декількох мазках крові, які пофарбовані по Романовському, підраховують 100 лімфоцитів. Діаметр виміряють окуляр-мікрометром під іммерсіонним об'єктивом. Виконують ідентифікацію лімфоцитів: - Великі - широкоцитоплазменні, діаметром 14 мкм і більше, з центрально розташованним зрілим або молодим ядром і широким ободком цитоплазми; - Малі - діаметром 7-6 мкм, із зрілим ядром і вузькою або відсутньою цитоплазмою; - Середні - всі проміжні по величині і ядерноцитоплазматичному індексу клітини; Категорії і розміри лімфоцитів визначені по В.І.Говалло. Стан клітинного і гуморального імунітету визначають по показниках Т-, В-розеткоутворюючих лімфоцитів і О-клітин по методиці Г.І.Гришиної. Цифрові дані приводять в системі CJ і обробляють статистично. При одержані кількісних значень по одному якісному показнику з відхиленням від норми в один чи інший бік на один і той же порядок говорять про "відхилення від норми". Якщо просліджується тенденція відхилення від норми в один бік більше чим в інший, говорять про "підвищення" або "зниження". Вузловий зоб діагностують при виконанні морфометричного аналізу лімфоцитів периферичної крові, коли реєструють відхилення від норми вмісту малих лімфоцитів, зниженні вмісту середніх і великих лімфоцитів на 20% і більше. При цьому реєструють зниження відносних і абсолютних значень Т-лімфоцитів і підвищення цих же значень Ві О-лімфоцитів. Вузловий зоб з аутоімунним компонентом діагностують, коли реєструють відхилення від норми вмісту малих та великих лімфоцитів, зниження середніх лімфоцитів на 40% і більше. При 2 37664 цьому відносні і абсолютні значення Т-, В- і Олімфоцитів відхиляються від норми. Дифузний токсичний зоб діагностують при зниженні вмісту малих лімфоцитів на 70% і більше, відхиленні від норми вмісту середніх лімфоцитів, незмінному вмісті великих лімфоцитів на фоні зниження відносного і абсолютного вмісту Тлімфоцитів, збільшенні В-лімфоцитів та відхиленні О-лімфоцитів у порівнянні з нормою. Спосіб ілюструють такі приклади: Приклад № 1. Ященко Є.І., 43 роки, історія хвороби № 4451. Надійшла 01.06.2000 року в хірургічне відділення ХОКЛ з діагнозом вузловий зоб III ступення, еутиреоїдний стан, на хірургічне лікування. В якості передопераційного обстеження були виконані: клінічний аналіз крові, гормональні і імунологічні дослідження, морфометрія периферичної крові. Клін. аналіз: гемоглобулін - 130 г/л, еритроцити - 4,2х1012/л, лейкоцити - 6,2х109/л, палички 2%, лімфоцити - 36, моноцити - 6%, сегменти 70%, ШОЕ – 5 мм/год. Гормони: Т3 - 1,7 нмоль/л, Т4 - 86,3 нмоль/л. Імунологія: Т-лімфоцити - 50,5%, В-лімфоцити - 15,4%, О-лімфоцити -34,1%. Морфометрія: малі лімфоцити - 19% при N 37%, середні лімфоцити - 81% при N 89-95%, велики лімфоцити - 0% при N 2-5%. D-s: Вузловий зоб III ступеня з аутоімунним компонентом. В післяопераційному терміні не показана імунокорекція. Приклад №2. Гусєва В.П., 41 рік, іст. хвороби № 3927. Надійшла 10.02.2000р. в хірургічне відділення ХОКЛ з діагнозом аутоімунний тиреоїдит III ступеня на хірургічне лікування. Були виконані: клінічний аналіз крові, гормональні і іммунологічні дослідження, морфометрія периферичної крові. Клін. аналіз: гемоглобін - 135 г/л, ери троцити - 3,7х1012/л, лейкоцити -6,3х109/л, палички - 1%, лімфоцити - 49, моноцити - 6%, сегменти - 39%, еузенофіли - 5%, ШОЕ - 6 мм/год. Гормони: Т3 - 0,2 нмоль/л; Т4 - 34,7 нмоль/л. Іммунологія: Т-лімфоцити - 9,5%, В-лімфоцити - 9,5%, О-лімфоцити - 22%. Морфометрія: малі лімфоцити - 12% при N 37%; середні лімфоцити - 80% при N 89-95%; велики лімфоцити - 8% при N 2-5%. D-s: аутоімуний тиреоїдит в сполученні з вузловим зобом. Діагноз було верифіковано післяопераційним гістологічним дослідженням. Таким чином, запропонований спосіб діагностики захворювань щитовидної залози є ефективним діагностичним інструментом, який може бути використаний не тільки в комплексі діагностичних заходів, а і як самостійний. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3