Спосіб кількісного визначення галової кислоти

Спосіб кількісного визначення галової кислоти, що включає відбір проби, виділення реагенту, який містить ортодифенольне групування, взаємодію виділеного реагенту з проявним розчином та вимірювання інтенсивності флуоресценції сорбату тербію, який відрізняється тим, що з проби виділяють галову кислоту шляхом тонкошарової хроматографії, а виділену таким чином галову кислоту піддають взаємодії з розчином хлориду тербію в присутності 1.10-3 - 5.10-3 моль/л триоктилфосфіноксиду та уротропіну при рН = 6,8-7,2. (19) (21) 2004031987 (22) 18.03.2004 (24) 15.12.2004 (46) 15.12.2004, Бюл. № 12, 2004 р. (72) Бельтюкова Світлана Вадимівна, Теслюк Ольга Іванівна, Лівенцова Олена Олегівна (73) ФІЗИКО-ХІМІЧНИЙ ІНСТИТУТ ІМ. О.В.БОГ АТСЬКОГО НАЦІОН АЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ НАУК УКРАЇНИ, ОДЕСЬКА НАЦІОНАЛЬН А АКАДЕМІЯ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ 3 3802 4 дають взаємодії з розчином реагентів і записують галову кислоту піддають взаємодії з розчином Ілюм. тербію (III). Отриманні результати обробляють хлориду тербію в присутності триоктилфосфінокза допомогою мікрокомп'ютера. Межа визначення сиду (ТОФО) та уротропіну при рН=6,8-7,2. 0,02мкг/мл. Новим у способі, що заявляється, є те, що: Даний спосіб обрано прототипом. - з проби виділяють галову кислоту, а не проПрототип співпадає з корисною моделлю, що пілгалат, як це передбачено в прототипі; заявляється, в наявності спільних ознак: - галову кислоту виділяють шляхом тонкоша- відбір проби; рової хроматографії; - виділення реагенту, який містить ортодифе- галову кислоту піддають взаємодії з розчинольне групування; ном хлориду тербію в присутності інших проявля- взаємодія виділеного реагенту з проявляюючих реагентів, а саме, триоктилфосфіноксиду і чим розчином; уротропіну; - вимірювання інтенсивності флуоресценції - умови реакції взаємодії - pH=6,8-7,2. тербію. Наведені відмінності дозволяють підвищити Але цей спосіб не має достатньої вибірності і селективність і чутливість визначення галової кисточності. Це пояснюється наступним. лоти. 1. При визначенні пропілгалату в харчови х Це можна пояснити наступним. оліях можливе накладення на Ілюм. Tb(ІІІ) інтенсивПідвищення селективності і чутливості стало ності люмінесценції комплекса Tb(III) з галовою можливим завдяки виділенню галової кислоти кислотою. шляхом тонкошарової хроматографії. Кожна речоЕтери галової кислоти (етил-, пропіл-, гексилвина має свою індивідуальну рухомість (Rf) на талати) застосовуються для консервування продухроматографічній пластині. ктів рослинного та тваринного походження, зокреВикористання розчину хлориду тербію, як прома, жирів, як консерванти. Антиоксиданти являючого реагента, с присутності триоктилфосблокують ланцюгову реакцію автоокислення ряду фіноксиду та уротропіну обумовлює появу на хроречовин, утворюючи з ними стабільні комплекси. матографічній пластині сенсибілізованої Але, з часом галати втрачають свої антиоксидантлюмінесценції іону Тb (III) в присутності галової ні властивості через те, що гідролізуються з утвокислоти, яка з'являється на твердій матриці внарюванням галової кислоти і відповідного спирту. слідок внутрішньомолекулярної передачі енергії Галова кислота також є сенсибілізатор люмінесзбудження від галової кислоти до іону лантаніду. ценції іону тербію (III), але інтенсивність люмінесТОФО дозволяє підвищити інтенсивність люмінесценції в порівнянні з галатами, буде іншою. Внаценції в 4,5 рази. слідок цього можна отримати невірні результати. Галова кислота має в ультрафіолетовій обла2. При визначенні пропілгалату в косметичних сті спектру смуги поглинання, що зумовлює ефеколіях не враховується те, що ці олії, як правило, тивне поглинання енергії збудження. Остання пемістять добавки детергентов, як катіонні і нейтраредається з триплетного рівня ліганду (Е=21600см1 льні поверхнево-активні речовини. Наявність цих ) на енергетичний рівень ТЬ (III) 20500см-1, що речовин може викликати сенсибілізацію люмінісприводить до значного зростання Ілюм. останнього. ценції комплекса Tb(III) з пропілгалатом, що також Передача енергії збудження відбувається і в тверможе призвести до невірних результатів. дій фазі, тому на хроматографічній пластинці спо3. Цей спосіб не придатний для визначення стерігається інтенсивна люмінесценція іона Тb (III), галової кислоти у винах, чаї через те, що в цих пропорційна кількості ГК. продуктах міститься велика кількість різних феноВикористання донорно-активної домішки льних сполук, які теж можуть сенсибілізувати триоктилфосфіноксиду сприяє дегидратації комІлюм..Tb(ІІІ). плекса, який утворюється, а також підвищує жорсВ основу корисної моделі поставлено задачу, ткість структури, яка утворюється. За рахунок цьорозробити спосіб кількісного визначення галової го відбувається зниження втрат енергії збудження. кислоти, в якому за рахунок виділення галової киОкрім того, реєстрація інтенсивності люмінесслоти з аналізуємої проби шляхом тонкошарової ценції сорбату тербію на поверхні твердої матриці хроматографії та взаємодії її з хлоридом тербію в - хроматографічної пластині, дозволяє підвищити присутності інших проявляючих реагентів, забезжорсткість комплексу, який утворюється. Це припечити підвищення чутливості і селективності спозводить до зменшення дезактивації енергії збусобу. дження, і, як наслідок, до підвищення чутливості Поставлена задача вирішена в способі кількісвизначення. Чутливість визначення цим способом ного визначення галової кислоти, щo передбачає складає 0,001мкг/мл, що у 20 разів вище, ніж в відбір проби, виділення реагенту, якій містить орпрототипі. Інтенсивність люмінесценції ТЬ (III) на тодифенольне групування, взаємодію виділеного хроматограмі залежить від кількості ТОФО у прореагенту з проявляючим розчином та вимірювання являючому розчині. Найбільша Ілюм. Тb (III) спостеінтенсивності флуоресценції сорбата тербія тим, рігається при концентрації ТОФО 1.10-3 моль/л що з проби виділяють галову кислоту шля хом тон(табл.). кошарової хроматографії, а виділену таким чином Таблиця Залежність Ілюм. Тb (III) на хроматограмі від кількості ТОФО у проявляючому розчині. 5 3802 6 Продовження таблиці СТОФО моль/л Ілюм.% 1.10-5 1.10-4 1.10-3 5.10-3 1.10-2 42 67 100 97 95 Максимальна інтенсивність люмінесценції тербію на пластинці спостерігається при рН проявляючого розчину 6,8-7,2 (див. графік). В пропонуємому способі для створення рН розчину використовували уротропін 0,1мл 4%-го розчину Приклад. Проводили визначення галової кислоти методом "введено-найдено". Для хроматографування використовували пластинки для тонкошарової хроматографії марки Silufo1 UV254. 20мкл аналізуємого вина наносили мікрошприцем на лінію старту па пластинку розміром 2,5 х 7,5см. Параллельно на пластинку наносять стандартний розчин ГК. В якості стандартного розчину використовували розчин галової кислоти з концентрацією 5.10-5 – 1.10-3 моль/л у водно-етанольному розчині (1:1). Пластинку висушували. Після висушування пластинку занурювали у хроматографічну камеру у рухому фазу (0,3см). У якості рухомої фази використовували суміш розчинників бензол: метанол: оцтова кислота у співвідношенні 10:5:1. Коли фронт розчинників досягнув висоти 7,2см пластинку виймали з хроматографічної камери, відмічали положення фронту розчинників. Пластинку висушували та обробляли проявляючим розчином, який; готували таким чином: у пробірку вміщували 1мл 0,01 моль/л розчину хлориду тербію, 1мл 0,01 моль/л етанольного розчину ТОФО, 0,1мл 4%-го розчину уротропіну, доводили об'єм до 10мл дистильованою водою. Після нанесення проявляючого розчину пластинку сушили і іденти Комп’ютерна в ерстка Г. Паяльніков фікували галову кислоту згідно положенню плями на хроматографічній пластинці у світлі ультрафіолетової лампи з l збудж. = 365нм . Обчислювали значення Rf для аналізуємої речовини. Рухомість галової кислоти становила 0,53. Кількісне визначення галової кислоти проводили використовуючи стандартні розчини галової кислоти з точним вмістом останньої по градуювальному графіку. Градуювальний графік будували таким чином: на пластинку наносили різні кількості стандартного розчину галової кислоти і проводили хроматографування і проявлення хроматограми, як це описано вище. Після цього з пластинки вирізали плями з галовою кислотою, вміщували в кювету для твердих зразків і вимірювали інтенсивність люмінесценції при l = 545нм . За отриманими даними Ілюм . Тb (ІІІ) - концентрація галової кислоти будували градуювальний графік, по котрому визначали вміст галової кислоти в аналізуємій пробі. Приклад 2. Проводили визначення галової кислоти аналогічно тому, як описано в Прикладі 1. Введено в пробу вина 0,1мкг/мл галової кислоти, знайдено 0,095мкг/мл. Помилка Sr=0,08. Приклад 3 Проводили визначення галової кислоти аналогічно тому, як описано в Прикладі 1. Введено в пробу вина 0,2мкг/мл галової кислоти, знайдено 0,198мкг/мл. Помилка Sr=0,06. Підписне Тираж 37 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601