Спосіб кількісного визначення піпемідієвої кислоти

Спосіб кількісного визначення піпемідієвої кислоти, що включає приготування проби для аналізу, взаємодією її з хімічним реагентом у розчині, вимірювання інтенсивності флуоресценції розчину, який відрізняється тим, що пробу піддають взаємодії із стандартним розчином хлориду європію при pH 7,8-8,0, у присутності лаурілсульфату натрію та вимірюють інтенсивність флуоресценції европію (111), по величині якої визначають концентрацію піпемідієвої кислоти. (19) (21) 99063195 (22) 09.06.1999 (24) 15.02.2001 (33) UA (46) 15.02.2001, Бюл. № 1, 2001 р. (72) Бельтюкова Світлана Вадимівна, Єгорова Алла Володимирівна, Теслюк Ольга Іванівна, Целік Олена Іванівна (73) Фізико-хімічний інститут ім. О. В. Богатського HАH України, Одеська державна академія харчових технологій 34166 Новим у заявлюваному винаході є використання сенсибілізованої флуоресценції іону європію, посиленої у присутності поверхневоактивної речовини - лаурілсульфату натрію. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, і досягнутим результатом можна пояснити таким. Підвищення чутливості стало можливим завдяки використанню сенсибілізації флуоресценції іону європію (ІІІ) внаслідок внутрішньомолекулярної передачі енергії збудження піпемідієвої кислоти. Піпемідієва кислота має в ультрафіолетовій зоні спектру смугу поглинання lmax=275 нм. Високий молекулярний коефіцієнт поглинання E1=90000 обумовлює ефективне поглинання світлової енергії лігандом. Триплетний рівень ліганда складає 22350 см-1. Мабуть, у даному випадку виникає передача енергії збудження на енергетичний рівень європію 5D2 (21500 см-1) з подальшою безвипромінювальною дезактивацією до першого збудженого стану 5D2 (17300 см-1). Усе це надає можливість досягнути найвищої інтенсивності флуоресценції, на відміну від прототипу. Використання поверхневоактивної речовини лаурілсульфату натрію сприяє дегідратації комплексу, що веде до збільшення інтенсивності флуоресценції. Взаємодія піпемідієвої кислоти з європієм відбувається при рН 3,0-9,0, максимум флуоресценції комплексу спостерігається при рН 7,0-7,5 (фіг. 1). Залежність І люм. європію у комплексі з піпемідієвою кислотою від pН розчину CEU=1×105 моль/л. В способі, що пропонується, для створення рН розчину (7,0-7,5) використовується уротропін (0,2 мл 40%-го розчину). Інтенсивність флуоресценції європію у розчині оптимальна при вмісті лаурілсульфату натрію 1 мл (1×10-1 мол/л) (фіг. 2). Залежність І люм. європію у комплексі з піпемідієвою кислотою від кількості доданого розчину лаурілсульфату натрію CEU =1×10-5 моль/л. Приклад Таблетки лікарського препарату "Палін" ретельно розтирають у ступці. Наважку препарату 280 мг розчиняють у 50 мл етанолу при 30°С, суміш відстоюють, розчин фільтрують та охолоджують. Визначення проводять за методом добавок (див.: Васильев В.П. Аналитическая химия. – М.: Высшая школа, 1989. - Т. 2. - С. 8). Для цього у три пробірки вміщують по 0,1 мл приготовленого аналізованого розчину, у дві пробірки додають 0,3 мл та 0,6 мл робочого розчину піпемідієвої кислоти з концентрацією 1 мг/мл. У кожну пробірку додають по 0,1 мл розчину хлориду європію з концентрацією 1 мг/мл, додають по 1 мл водного розчину 1×10-2 моль/л лаурілсульфату натрію, 0,2 мл 40% розчину уротропіну і доводять об'єм до 10 мл водою. Паралельно готують розчин холостої проби, яка містить усі компоненти, крім піпемідієвої кислоти. Проби перемішують, вимірюють інтенсивність флуоресценції і європію при l=612нм. Чутливість способу, яка визначена за допомогою стандартних розчинів піпемідієвої кислоти, складає 0,003 мкг/мл. Точність і достовірність визначення піпемідієвої кислоти у розчині перевірена шляхом статистичної обробки результатів визначення. При n=5, Р=0,95 величина відносного стандартного відхилення 0,05-0,07. Таким чином, спосіб дозволяє підвищити чутливість визначення піпемідієвої кислоти в 70 разів. 2 34166 Фіг. 1 3 34166 Фіг. 2 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 4