3-(2-тіохіноліл)пропанова кислота, що виявляє антиоксидантну активність

3-(2-тіохіноліл) пропанова кислота, формули: Винахід відноситься до галузі синтезу біологічно активних хімічних сполук, а саме, до синтезу 3(2-тіохіноліл) пропанової кислоти. Відомий структурний аналог заявленого рішення - хіноліл-2-тіооцтова кислота, що має помірну антимікробну дію (Мартиновський О.О., Бражко О.А., Лущинська О.М. // Синтез та біологічна активність похідних 2-меркаптохіноліну // Фармацевтичний журнал. - К., 1986. - № 6. - С. 62-64) і за антиоксидантною дією поступається 3-(2-тіохіноліл) пропановій кислоті. Структурний аналог має таку формулу: ність аміногрупи в 2-му положенні цистеїну та атому водню в меркаптогрупі цистеїну. Ознакою, спільною з прототипом, є наявність залишку 3-меркаптопропанової кислоти. В основу винаходу поставлено задачу створити біологічно активну речовину, що має виражену антиоксидантну активність, шляхом заміни атому водню в меркаптогрупі цистеїну на 2-хінольний радикал, а також заміна аміногрупи в цистеїні на атом водню. Суттєвими ознаками рішення є: наявність 2хінольного радикалу; наявність залишку 3-меркаптопропанової кислоти. Ознаки, відмінні від прототипу: наявність 2хінолільного радикалу; заміна аміногрупи цистеїну на атом водню. Дана сполука має таку формулу: HS-CH2 -CH-COOH NH2 Амінокислота L (-) цистеїн проявляє антиоксидантну активність. Причиною, що перешкоджає підвищенню антиоксидантної активності, є наяв N S-CH2-CH2-COOH Уведення в меркаптогрупу цистеїну 2-хінолільного радикалу і заміна аміногрупи цистеїну на атом водню веде до значного підвищення антиоксидантної активності. Процес одержання сполуки складається з: приготування розчину 2-тіохіноліну в етанолі; приготування розчину калію гідроксиду в етанолі; приготування розчину β-бромпропіонової кислоти в етанолі; одержання реакційної суміші і подальше її нагрівання на киплячому водяному нагрівнику; упарювання розчиннику; збирання осаду, промивання його водою, сушку; кристалізацію з етанолу. A (13) 38185 (11) Сполука, відрізняється від структурного аналога гомологічно метиленовою (-СН2-) різницею в залишку карбонової кислоти. Ця відзнака приводить до появи антиоксидантної дії. Прототипом рішення є амінокислота L (-) цистеїн (Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х томах. - М.: Медицина, 1988. - Т. 2-П-е изд. стер. - 576 с.). Прототип має таку структурну формулу: , що виявляє антиоксидантну активність. UA S-CH2-COOH S-CH2-CH2-COOH (19) N N 38185 Приклад одержання сполуки (МБ-89): до розчину 1,61 г (0,01 мол) 2-тіохіноліну в 40 мл етанолу додають 0,56 г (0,01 мол) калію гідроксиду в 5 мл етанолу і 1,53 г (0,01 мол) β-бромпропіонової кислоти в 10 мл етанолу, реакційну суміш нагрівають на киплячому водяному нагрівнику 45 хвилин. Розчин виливають у чашку для упарювання і розчинник відганяють при 40-50°С, залишок збирають, промивають на фільтрі водою, сушать. Вихід 1,87 (85%). Кристалізують з етанолу. Жовті голки з температурою топлення 78-79°С. Знайдено: С 61,6; Н 4,9; N 6,2 ; S 13,5. Вирахувано: С 61,8; Н 4,8; N 6,0; S 13,7. Індивідуальність сполуки контролювалась і підтверджена методом тонкошарової хроматографії на пластинках "Silufol" у системах розчинників: диметилформамід - вода (1:2), хлороформ - ацетон (4:1), бензол - етанол (9:1). Значення Rf-100 відповідно до систем дорівнюють: 80, 86, 50. ІЧ-спектр (КВr) см-1; VCH2930, VASCOO-1700. VSCOO-1410, VC=C,C=N-1635, 1600, Vcн2-s-670. Сполука МБ-89 являє собою жовті голки, розчинні в гідроксидах, карбонатах та гідрокарбонатах лужних металів, метанолі, етанолі, пропанолах, діоксані, диметилформаміді, не розчинний у воді. Дослідження біологічної дії даної сполуки МБ89 свідчить, що вона має антиоксидантну активність. ЛД50 визначалась на білих безпородних мишах вагою 18-25 г за методом Кербера при внутрішньочеревинному введенні досліджуваної сполуки. ЛД50 - для 3-(2-тіохіноліл) пропанової кислоти складає 175±13 мг/ кг. Вивчення антиоксидантної активності (АОА) сполуки в дослідах in vitro було проведено на трьох моделях ініціювання вільнорадикального окислення (ВРО): неферментативне ініціювання (НФІ),: ферментативне ініціювання (ФІ), інгібірування супероксирадикалу. Неферментативне ініціювання ВРО моделювали в суспензії яйцевих ліпопротеїдів, додаючи солі заліза (II). Ферментативне ініціювання ВРО у гомогенаті мозкової тканини білих турів лінії Вістар, в який додавали надлишок нікотинамідаденіндинуклеотиду фосфату відновленого (НАДФН2). АОА оцінювали у відсотках гальмування утворення кінцевого продукту. ВРО - малонового діальдегіду (МДА). Методи оцінки АОА на ініціальних етапах розвитку ВРО проводили шляхом інгібірування супероксидрадикалу в реакції аутоокислення адреналіну в адренохром у лужному середовищі, що приводить до утворення активної форми кисню - супероксирадикалу. Дані, наведені в таблиці, свідчать, що дана сполука МБ-89 проявляє антиоксидантну активність і перевершує за силою фармакологічної дії як фармакологічні препарати-стандарти (дибунол на 51%, унітіол на 56%, сечовину на 14%), так і прототип - L(-)-цистеїн (на 11%, 27%, 29% відповідно з моделями ВРО) на усіх трьох експериментальних моделях. Дана сполука МБ-89 має виражену антиоксидантну активність і може бути використана в медичній практиці як антиоксидантний засіб після доклінічних випробувань. Таблиця Антиоксидантна активність сполуки за винаходом МБ-89 Неферментативне ініціюСполука МБ -89 Хіноліл-2 тіооцтова кислота Інтакт Контроль L-(-)-цістеїн Інтакт Контроль Дибунол Унітіол Сечовина Ферментативне вання 88 ініціювання МДА, АОА, % ммол/л 0,68±0,05 88 3,00±0,13 56 0,88±0,03 59 0,14+0,02 33 1,33±0,12 5,11±0,31 2,00±0,07 1,00±0,09 5,28±0,14 3,68±0,05 - 77 37 0,60±0,05 1,28±0,07 0,75±0,05 0,47±0,07 1,27±0,11 1,00±0,06 61 32 0,2І±0,01 0,16±0,01 0,21±0,01 0,13±0,01 23 38 МДА, ммол/л 1,78±0,21 АОА, % Інгібірування супероксидрадикалу Оптична гусАОА, % тина 0,10±0,01 52 Примітка: сполуки, що досліджувались, вивчались у дозах: ФІ ВРО - 0,38 ммол/л; НФІ ВРО - 1,5 ммол/л; інгібірування супероксидрадикалу - 0,25 ммол/л; дибунол, унітіол, сечовину додавали в дозах - 3,0, 0,76; 0,15 мг/л відповідно до моделей ініціювання ВРО. 2 38185 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3