І[4- (n’- бутилуреїдосульфоніл) феніл] піролідин-2, 5-діон, який виявляє цукрознижуючу, протизапальну, антиоксидантну, імуномодулюючу активність та стимулює регенеративні процеси в панкреатичних бета-клітинах

Изобретение относится к новому биологически активному соединению, а именно, к 1[4-(N1бутилуреидосульфонил)фенил]пирролидин-2,5-диону, проявляющему сахароснижающую, противовоспалительную, антиоксидантную, иммуномодулирующую активность и стимулирующему регенеративные процессы в панкреатических бета-клетках· Указанные свойства дают возможность предположить использование данного соединения в медицине для лечения сахарного диабета и связанных с ним осложнений. Известно использование в качестве препаратов с антиоксидантним, противовоспалительным, иммуномодулирующим и стимулирующим регенеративные процессы в бета-клетках действием, соответственно: витамина Е, индометацина, левамизола, никотинамида (Машковский М. Д. Лекарственные средства: В 2-х т. - М: Медицина, 1988.-Т. 1.-С. 551-564). Наиболее близким по структуре и свойствам к предложенному соединению является букарбан (І\|-(парааминобензолсульфонил)-1N1-н-бутилмочевина), обладающий гипогликемической активностью (Галлер Г., Штрауценберг С. Э. Пероральная терапия диабета. - М.: Медицина, 1973. - 342 с.) Однако все вышеуказанные препараты проявляют биологический эффект, как правило, одной направленности из целого комплекса фармакологических свойств, необходимых для реальной компенсации сахарного диабета. Предлагается новое химическое соединение 1[4-(N1-бутилуреидосульфонил)фенил]пирролидин-2,5-дион, проявляющий сахароснижающее, иммуномодулирующее, антиоксидантное, противовоспалительное действие и стимулирующий регенеративные процессы в бета-клетках поджелудочной железы. Наличие комплексной фармакологической активности предлагаемого соединения позволит эффективно использовать его в терапии сахарного диабета в качестве препарата, воздействующего на различные патогенетические звенья заболевания. 1[4-{1N1-Бутилуреидосульфонил)фенил]пир-ролидин-2,5-дион получают циклизацией 4-N-бутил(н)-уреидосульфонилсукцинаниловой кислоты в уксусном ангидриде. Изобретение иллюстрируется следующими примерами: Пример 1. Способ получения 1[4-{N1-бутилуреидосульфонил)фенил]пирролидин-2,5-диона. К 3,7 г (0,01 моль) 4-(N-бутил(н)уреидосульфонил)сукцинаниловой кислоты добавляют 2 мл (0,02 моль) уксусного ангидрида. Реакционную смесь нагревают 1,5 часа. Выпавший осадок отфильтровывают, сушат. Выход 3,1 г (85%), бесцветные кристаллы ст, пл. 286-8°С. Кристаллизуют имид из ДМФА. Найдено, %: С 49,3; N 12,0; S 8,9. C15H19N3O5S Вычислено, %: С 49,6; N 11,9; S 8,8. ИК-спектр в таблетках КВr, см-1: ν 1693 "амид I", 1503 "амид Η", Ν Η 3346-3242, С=О экзоцикл. 1770,1713. SO2as 1303, SO2S 1160. УФ-спектр: A max 232-238 (e=4,11 103). Данные количественного элементного анализа и спектральные данные полностью подтверждают строение соединения I как 1[4-{N1-бутилуреидосульфонил)фенил]пирро-лидин-2,5-диона. Пример 2. Испытание биологической активности соединения I. Гипогликемическую активность соединения I изучали на моделях химически индуцированной абсолютной и относительной инсулиновой недостаточности, соответственно инсулинзависимого (ИЗСД) и инсулиннезависимого (ИНЗСД) сахарного диабета. Низкодозовый стрептозотоциновый диабет (ИЗСД) у мышей линии BALb/c индуцировали путем внутрибрюшинного введения стрептозотоцина в дозе 40 мг/кг ежедневно на протяжении 5 дней. Исследуемое соединение и препарат сравнения букарбан вводили перрорально в максимально эффективной дозе (250 мг/кг) через 14 дней после последней инъекции цитостатика. Уровень глюкозы в крови экспериментальных животных оценивали через 2,4 и 6 часов после введения препаратов с помощью ферментативного анализатора глюкозы "Эксан-Г". Неонатальный стрептозотоциновый диабет (ИНЗСД) вызывали внутрибрюшинным инъецированием цитостатика двухдневным крысятам в дозе 90 мг/кг. Испытуемое соединение и букарбан вводили однократно перорально в максимально эффективной дозе для крыс (50 мг/кг) после достижения ими 8-недельного возраста. В результате проведенных экспериментов установлено, что соединение I при остром пероральном введении в максимально эффективных дозах проявляет стойкий сахароснижающий эффект, достигающий максимума через 4 часа, у животных с абсолютной (табл. 1) и относительной (табл. 2) недостаточностью и по степени выраженности значительно превосходящий гипогликемизирующее действие букарбана. Противовоспалительные свойства соединения I, изучали на модели острого воспалительного отека, вызванного субплантарным введением в заднюю лапку крыс 0,1 мл 1 % водного раствора каррагенина. Исследуемое вещество применяли внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг за 30 мин до введения флогогенного агента. Измерение объема лапки осуществляли с помощью онкометра до начала опыта и в момент максимального развития отека (через 4 часа). Противовоспалительную активность выражали в процентах снижения величины отека по отношению к контролю и сопоставляли с таковой у индометацина (5 мг/кг). Анализ полученных результатов показал, что на момент максимального развития отека степень ингибирования воспалительной реакции у животных, получавших соединение I составила 42,2% по сравнению с контролем, тогда как при применении препарата сравнения индометацина наблюдали снижение изучаемого показателя на 63,4% (табл. 3). Антиоксидантные свойства соединения I оценивали по способности исследуемого вещества уменьшать в печени крыс накопление малонового диальдегида (МДА) в условиях индуцированного неферментативного перекисного окисления липидов (ПОЛ) (Владимиров Ю. Α., 1972). В результате проведенных исследований установлено (табл.4), что применение соединения І в дозе 50 мг/кг на протяжении 30 дней приводит к угнетанию интенсивности аскорбат-зависимого ПОЛ, снижая накопление МДА в 2,5 раза по сравнению с контролем. При этом степень ингибирования ПОЛ витамином Ε была несколько выше по сравнению с исследуемым веществом. С целью изучения влияния соединения I на клеточный иммунный ответ на мышах (CBAxC57BL/6)Fi воспроизводили феномен гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) по методу (Kitamiira К, 1980). В качестве референс-препарата использовали левамизол (5 мг/кг). Данные исследований показали, что пероральное применение исследуемого вещества в дозе 25 мг/кг в течение 7 дней приводит к снижению индекса реакции ГЗТ в 2 раза по сравнению с контрольной группой, что соответствует уровню эффективности препарата сравнения (табл. 5). Влияние соединения I на регенеративные процессы в бета-клетках поджелудочной железы проводили на модели неонатального стрептозотоцинового диабета. Изучаемое вещество, букарбан и никотинамид вводили в эффективных дозах (50 мг/кг) внутрижелудочно первые 20 дней лактирующим самкам, а затем вещества скармливали крысятам до достижения ими восьминедельного возраста. Контрольная группа животных получала placebo. Функциональное состояние инсулин-продуцирую-щего аппарата поджелудочной железы оценивали по динамике базальной гликемии и во время внутрибрюшинного теста толерантности к глюкозе (2 г/кг). Содержание сахара в крови определяли глюкозооксидазным методом с помощью ферментативного анализатора глюкозы "Эксан-Г". Для выявления возможных деструктивных явлений в поджелудочной железе последняя подвергалась гистологическому исследованию. Установлено, что 8-недельная постнатальная обработка соединением І в большей степени по сравнению с букарбаном и никотинамидом ослабляет выраженность диабетогенных эффектов стрептозотоцина, обеспечивая базальную нормогликемию и отсутствие изменений толерантности к глюкозе (табл. 6), предупреждая повреждения морфоструктуры островков и активируя компенсаторные и регенеративные Процессы в бета-клетках. В результате оценки острой токсичности соединения I по методу Кербера установлено, что ЛДбо при внутрибрюшинном введении на крысах составляет 3050 мг/кг, а при пероральном применении превышает 10000 мг/кг, что позволяет отнести соединение I к практически безвредным веществам (Сидоров К. К., 1975). Таким образом, приведенные биологические испытания вещества I свидетельствуют о выраженном гипогликемическом, иммуномодулирующем, противовоспалительном, антиоксидантном и стимулирующем регенеративные процессы в бета-клетках действии заявляемого соединения. Все вышеуказанные активности находятся во взаимосвязи и позволяют одновременно воздействовать на различные патогенетические звенья сахарного диабета. Преимуществом заявляемого соединения перед аналогами является наличие комплексных антидиабетических свойств в сочетании с низкой токсичностью, что свидетельствует о перспективности разработки на основе данной субстанции потенциального препарата для лечения сахарного диабета как I, так и II типа.