Спосіб одержання засобу, що відновлює функцію передміхурової залози

1. Спосіб одержання засобу, що відновлює функцію передміхурової залози, що включає екстракцію з тканини передміхурової залози забійних тварин, центрифугування екстракту, виділення сирцю з супернатанту, очи щення і ліофільне сушіння цільового продукту, який відрізняється тим, що виділення сирцю проводять концентруванням супернатанту ліофілізацією, одержаний концентрат розчиняють водою з розрахунку 0,8...1,5 л води на 50 г концентрату, одержаний розчин піддають очищенню ультрафільтрацією, а очищення цільового продукту здійснюють стерилізуючою фільтрацією одержаного ультрафільтрату, до якого попередньо додають гліцин. А (54) СПОСІБ ОДЕРЖАННЯ ЗАСОБУ, ЩО ВІДНОВЛЮЄ ФУНКЦІЮ П ЕРЕДМІХУРОВОЇ З АЛОЗИ 39022 пропонованим способом, виявляє високу ефективність при застосуванні. Поставлена задача вирішується запропонованим способом одержання засобу, що відновлює функцію передміхурової залози, який містить екстракцію з тканини передміхурової залози забійних тварин, центрифугування екстракту, виділення сирцю з супернатанту, очи щення і ліофільне сушіння цільового продукту, в якому виділення сирцю проводять концентруванням супернатанту ліофілізацією, одержаний концентрат розчиняють водою з розрахунку 0,8...1,5 л води на 50 г концентрату, одержаний розчин піддають очищенню ультрафільтрацією, а очищення цільового продукту здійснюють стерилізуючою фільтрацією одержаного ультрафільтрату, до якого попередньо додають гліцин. При цьому перед екстракцією додатково здійснюють гомогенізацію зазначеної тканини передміхурової залози забійних тварин, а екстракцію здійснюють 3-5%-ним розчином оцтової кислоти з додаванням хлориду цинку у кількості 0,5...1,5 г/л. До одержаного ультрафільтрату додають гліцин у кількості 10...25 г/л та луг до рН розчину 5-7. Для стерилізуючої фільтрації використовують мембранні фільтри з розміром пор 0,22 мкм. Ліофільне сушіння цільового продукту здійснюють шляхом заморожування стерильного розчину, що містить цільовий продукт, до -35...-70°С протягом 24...48 годин з наступним підвищенням температури до +28...+38°С зі швидкістю 5...10°С/год. Нами експериментально було встановлено, що виділення сирцю концентруванням супернатанту з наступним його розчиненням і очищенням розчину ультрафільтрацією дозволяє виділити активну фракцію передміхурової залози з вмістом пептидів 4...6 мг/мл. При цьому збереження властивостей цієї фракції забезпечується додаванням запропонованого стабілізатору і, при необхідності, лугу. Спосіб здійснюється таким чином. Для отримання цільового продукту - засобу, що відновлює функцію передміхурової залози, використовують передміхурові залози молодняку великої рогатої худоби. Розморожені передміхурові залози подрібнюють на електром'ясорубці, додають 3-5%-ний розчин оцтової кислоти з цинку хлоридом у кількості 0,5...1,5 г/л при співвідношенні об'ємів сировини до розчину 1:5 відповідно. Для збільшення поверхні речовини, що екстрагується, одержану суміш гомогенізують - двічі пропускають крізь роторнопульсаційний апарат. Гомогенат витримують при температурі 4...10°С протягом 30...50 год. Одержаний екстракт центрифугують при 2500...6000 об./хв. Супернатант концентрують ліофілізацією - заморожують до температури -35...70°С, витримують протягом 48...72 год, з наступним підвищенням температури до 28...38°С. Одержаний концентрат розчиняють у воді з розрахунку 0,8...1,5 л води на 50 г концентрату. Розчин піддають очищенню ультрафільтрацією, при якій до ультрафільтрату потрапляє активна фракція з вмістом пептидів 4...6 мг/мл. До одержаного ультрафільтрату додають гліцин у кількості 10...25 г на л ультрафільтрату і, при необхідності, луг до рН розчину 5-7. Перед розливом у мілкоємну тару здійснюють стерилізуючу фільтрацію через мембранні фільтри з розміром пор 0,22 мкм. Стерильний розчин, що містить цільовий продукт, піддають ліофільному сушінню за умовами: заморожують до -35...70°С протягом 24...48 год з наступним підвищенням температури до +28...+38°С зі швидкістю 5...10°С/год. Одержаний препарат характеризується вмістом специфічних пептидів та стабільністю. Випробування підтвердили високу ефективність його при застосуванні як протизапального, органотропного специфічного засобу, що чинить імуномодулюючий вплив на стан Т- і В-лімфоцитів. Приклад 1 20 кг розморожених передміхурових залоз подрібнюють на м'ясорубці, додають 100 л 3%-ного розчину оцтової кислоти, та цинк хлорид у кількості 1,5 г/л. Одержану суміш гомогенізують - двічі пропускають через роторно-пульсаційний апарат. Гомогенат витримують при температурі 10°С протягом 50 год. Отриманий екстракт центрифугують при 3000 об./хв протягом 15 хв. С упернатант концентрують ліофілізацією: заморожують до температури -40°С, витримують протягом 48 год, з наступним підвищенням температури до +38°С. Одержаний концентрат розчиняють у воді з розрахунку 1 л води на 50 г концентрату. Розчин піддають очищенню ультрафільтрацією. До одержаного ультрафільтрату додають 240 г гліцину і луг до рН розчину 5,7. Перед розливом у дрібноємну тару здійснюють стерилізуючу фільтрацію через мембранні фільтри з розміром пор 0,22мкм. Стерильний розчин, що містить цільовий продукт, піддають ліофільному сушінню за умовами: заморожують до -45°С протягом 48 год з наступним підвищенням температури до +34°С зі швидкістю 10°С/год. Одержано 50 г засобу у формі ліофілізату. Одержаний засіб характеризується вмістом специфічних пептидів та стабільністю. Випробування підтвердили високу ефективність його при застосуванні як протизапального органотропного специфічного засобу, що чинить імуномодулюючий вплив на стан Т- і В-лімфоцитів. Приклад 2 20 кг розморожених передміхурових залоз подрібнюють на м'ясорубці, додають 100 л 5%-ного розчину оцтової кислоти, та цинку хлорид у кількості 1,0 г/л. Одержану суміш гомогенізують - двічі пропускають через роторно-пульсаційний апарат. Гомогенат витримують при температурі 4°С протягом 30 год. Отриманий екстракт центрифугують при 2500 об./хв протягом 20 хв. С упернатант концентрують ліофілізацією: заморожують до температури -70°С, витримують протягом 24 год, з наступним підвищенням температури до +38°С. Одержаний концентрат розчиняють у воді з розрахунку 0,8 л води на 50 г концентрату. Розчин піддають очищенню ультрафільтрацією. До одержаного ультрафільтрату додають 200 г гліцину і луг до рН розчину 6,2. Перед розливом здійснюють стерилізуючу фільтрацію через мембранні фільтри з розміром пор 0,22 мкм. Стерильний розчин, що містить цільовий продукт, піддають ліофільному 2 39022 сушінню за умовами: заморожують до -70°С протягом 48 год з наступним підвищенням температури до +38°С зі швидкістю 5°С/год. Одержано 48 г засобу у формі ліофілізату. Одержаний засіб характеризується вмістом специфічних пептидів та стабільністю. Випробу вання підтвердили високу ефективність його при застосуванні як протизапального, органотропного специфічного засобу, що чинить імуномодулюючий вплив на стан Т- і В-лімфоцитів. __________________________________________________________ ДП “Український інститут промислової власності (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид.арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3