Спосіб корекції прооксидантної системи в нирках при токсичному гепатиті

Спосіб корекції прооксидантної системи в нирках при токсичному гепатиті шляхом використання біооксидантів, який відрізняється тим, що після інтоксикації тетрахлорметаном проводять біохімічну оцінку прооксидантного стану нирок за вмістом окисномодифікованих білків та малонового альдегіду з наступною корекцією порушень шляхом застосування настоянки ехінацеї пурпурової та мелатоніну. (19) (21) u200902057 (22) 10.03.2009 (24) 10.08.2009 (46) 10.08.2009, Бюл.№ 15, 2009 р. (72) МАЦЬОПА ІННА ВОЛОДИМИРІВНА, МЕЩИШЕН ІВАН ФЕДОРОВИЧ (73) БУКОВИНСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ МОЗ УКРАЇНИ 3 43232 4 опубл.17.01.2005. - Бюл. "Промислова власність" В основу корисної моделі поставлене завдан№1). ня покращення прооксидантного стану тканин ниВ основу способу-прототипу покладено визнарок при їх пошкодженні шляхом внутрішньошлунчення вмісту прооксидантів та антиоксидантів в кового введення тетрахлорметану щурам. крові та печінці щурів за умов токсичного гепатиту. Поставлена задача вирішується шляхом викорисНедоліком прототипу є те, що не вивчено протання настоянки ехінацеї пурпурової та мелатоніцес впливу тетрахлорметану на перекисне окисну, згідно корисної моделі, які впливають на пронення. В той же час для оцінки збільшення окисоксидантний стан нирок щурів, який оцінювали за лювальної модифікації білків насправді найбільш допомогою визначення вмісту окисномодифіковапринципово вияснити співвідношення між карбоніних білків в реакції з динітрофенілгідразином, з льними та аміногрупами протеїнів у тканинах нинаступним виявленням останнього, та малонового рок. В прототипі досліджували лише кров та печінальдегіду в реакції з тіобарбітуровою кислотою. ку. Недоліком вищезгаданого методу також є те, Спільними ознаками прототипу та корисної що спосіб-прототип для інших органів, окрім печінмоделі, що пропонується є використання фітопреки, не апробований, тому може бути для них непарату при експериментальному пошкодженні орадекватним. ганів щурів тетрахлорметаном. Нами пропонується спосіб, який усуває вказані Відмінність корисної моделі та прототипу понедоліки, тобто дозволяє провести біохімічний лягає у визначенні вмісту окисно-модифікованих аналіз тканин нирок щурів і визначити вміст окисбілків та малонового альдегіду для виявлення інно-модифікованих білків та малонового альдегіду, тенсивності утворення активних форм кисню в а, отже, і судити про інтенсивність утворення актинирках та їх корекція. вних форм кисню в даній тканині. Таблиця Ознаки Експериментальна модель Об'єкт дослідження Препарат Що досліджували Прототип Токсичний гепатит Печінка, кров Настоянки перстачу прямостоячого Прооксидантний та антиоксидантний стан печінки та крові Теретичною передумовою здійснення корисної моделі є експериментальна інтоксикація тетрахлорметаном, який є сильною гепатотропною отрутою за рахунок безпосереднього впливу на мембранні структури гепатоцитів та посилення процесів пероксидації біополімерів клітин, що порушує як структуру, так і функції печінки з послідуючим вивченням прооксидантної системи нирок та корекцією мелатоніном, який є гормоном епіфізу, що синтезується з амінокислоти триптофану переважно у темновий період доби та проявляє виражені біоритморегулюючі, а також прямі і непрямі антиоксидантні властивості та настоянкою ехінацеї пурпурової. Спосіб, що заявляється, здійснюється наступним чином. В 5% супернатантах нирок щурів, які готують на трис-НСІ буфері (рН=7,4) визначають вираженість процесів пероксидації біомолекул за вмістом окисно-модифікованих білків та малонового альдегіду після внутрішньошлункового введення (з добовим інтервалом) тетрахлорметану в дозі 0,25мл 50% олійного (оливкове масло) розчину на 100г маси тварини. На фоні інтоксикації тетрахлорметаном вводиться розчин мелатоніну ("Sigma", США) виготовлений на 0,9% розчині NaCl у дозі 3мг/кг маси тварини, інтрагастрально, у ранкові години (8.00) та настоянки ехінацеї пурпурової в дозі 0,25мл/кг маси тварини в той же час. Використання способу пояснюється конкретними прикладами. Приклад використання способу №1. Отримано супернатанти нирок щурів, яких за 5 днів до почат Винахід Токсичний гепатит Нирки 1 .Настоянка ехінацеї пурпурової 2.Мелатонін Прооксидантний стан нирок ку та впродовж всього експерименту утримували в умовах штучного освітлення з відношенням тривалості світлого та темного періодів (12 год світла : 12 год темряви). Для відтворення токсичного гепатиту (експериментальна модель патології мембран) вводили тетрахлорметан інтрагастрально дворазово (з добовим інтервалом) в дозі 0,25 мл 50 % олійного (оливкове масло) розчину на 100 г маси тварини. Паралельно була відібрана група тварин, які утримувались за таких же умов освітлення, без інтоксикації тетрахлорметаном. На шосту добу після останньої затравки проводили евтаназію контрольних та інтоксикованих тварин (декапітація під легкою інгаляційною ефірною анестезією). В 5% супернатантах нирок, які готують на трис-НСІ буфері (рН=7,4) визначають вміст окисно-модифікованих білків та малонового альдегіду. В не інтоксикованій групі тварин вміст ОМБ становив - 24,8±1,07о.о.г./г.тканини, а в гепатитній - 32,9±1,21о.о.г./г.тканини. Поруч з цим, вміст МА 43,2±1,46 мкмоль/г.тканини, в нирках тварин з токсичним гепатитом - 61,6±2,76 мкмоль/г.тканини. Приклад використання способу №2. Отримані супернатанти нирок від двох груп тварин, яких утримували в умовах освітлення та моделювали гепатит за описаною вище методикою, а також від тварин третьої групи, яким на фоні токсичного гепатиту вводили розчин мелатоніну. Визначають вміст окисно-модифікованих білків та малонового альдегіду проводили як описано в прикладі №1. Визначено, що у групі тварин яким вводили мелатонін на фоні тетрахлорметанового токсичного 5 43232 6 гепатиту знизився вміст ОМБ і становив них умовах експерименту. Після евтаназії тварин 26,6±1,60о.о.г./г.тканини, а МА на отримали зразки нирок, з яких готували 5% супер47,8±1,89мкмоль/г.тканини. Це свідчить про зменнатанти на трис-НСІ буфері (7,4) В отриманому шення процесів пероксидації біополімерів, а також матеріалі визначають вміст окисно-модифікованих ще раз підтверджує потужні антиоксидантні можбілків та малонового альдегіду проводили як опиливості гормону пінеальної залози - мелатоніну. сано в прикладі №1. Визначили, що застосування Також можна рекомендувати застосування даної даного лікарського препарату знижує рівень окисречовини в комплексній терапії токсичних уражень нювальної модифікації білків до значення нирок різного ґенезу. 27,1±1,43о.о.г./г.тканини, а малонового альдегіду Приклад використання способу №3. Отримані до ±48,8±2,55мкмоль/г.тканини. Це ще раз засвіднирки тварин, яких утримували в умовах штучного чує, що настоянка ехінацеї пурпурової володіє освітлення (12 год світла : 12 год темряви) за 5 вираженими антиоксидантними властивостями і її днів до та впродовж всього експерименту. Затравп'ятиденне застосування є ефективним у лікуванні ку тварин тетрахлорметаном провели за описаною уражень даного органу. вище методикою. На наступний день після останТехнічний результат: вищеописаний спосіб донього введення токсину тваринам впродовж назволяє визначити вміст окиснювальної модифікації ступних 5-ти діб внутрішньошлунково вводили білків та малонового альдегіду в нирках на фоні настоянку ехінацеї пурпурової. Для порівняння тетрахлорметанового токсичного гепатиту та коревикористали тканину нирок тварин з токсичним гувати показники за допомогою настоянки ехінацеї гепатитом, яких утримували в попередньо описапурпурової та мелатоніну. Комп’ютерна верстка В. Мацело Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601