Застосування основного фактора росту фібробластів (bfgf) для корекції порушень кровообігу в нирках

1. Застосування основного фактора росту фібробластів (bFGF) як засобу для корекції порушень кровообігу в нирках. 2. Застосування основного фактора росту фібробластів за п. 1, яке відрізняється тим, що його 3 26456 Дослідження проводилося на 35 кроликах (самках) вагою 2,5-3 кг в умовах експерименту з випадками хронічної ішемії. Методи дослідження: ангіографія нирок; допплерівська сонографія нирок; морфометрія. Ангіографію проводили на апараті «Уроскоп» D3 фірми «Сіменс», ФРН. Контрастна речовина - «Ультравіст» (фірма «Шерінг», ФРН). Контраст підігрівався до температури 30°35°С і вводився у вушн у вену в об'ємі 10-15 мл. Дослідження проводилося на ультразвуковій діагностичній системі XARIO фірми «Toshiba» експертного класу. Візуалізація органу проводилася в чорно-білому режимі, спільно з методом допплероскопії, імпульсної допплерографії та дослідження індексів доплерографії. Всім обстеженим було проведене конвекційне ультразвукове дослідження з метою виявлення традиційних змін в чорно-білому режимі. У даному режимі оцінювалося анатомічне розташування органів, їх форма, розміри, товщина паренхіми та її ультрасонографічні особливості. При використанні кольорового допплерівського картування оцінювалася судинна ангіоархітектоніка, особливості інтрапаренхіматозного кровотоку (його наявність або відсутність в сегментах нирки). Проводилася імпульсна допплерографія з оцінкою індексів допплерографії. Показники судинного кровотоку (артеріальний кровотік) визначалися в проекції воріт нирок. Враховуючи особливості дослідження, показники швидкості кровотоку вдалося досліджувати лише в проекції воріт нирок. Індекси допплерівських кривих визначались із комбінації декількох домінантних ознак цієї кривої. При дослідженні використовували один і той же кут між променем і судиною - 40 градусів, вибиралися допплерівські сигнали хорошої якості. Розрахунок отриманих результатів проводився в автоматичному режимі, індекси допплерівських кривих отримували з комбінації декількох домінантних ознак цих кривих. Використовували наступні індекси: моментний об'ємний кровотік, максимальна систолічна швидкість, індекс резистентності, індекс пульсативності. 4 Індекс резистентності (IR) визначався за формулою IR=(S-D)/S, де S - це максимальна систолічна швидкість, a D - діастолічна швидкість. Індекс Пульсативності (IP) визначали як IP=максимальне коливання швидкості/середня швидкість. Моментний об'ємний кровотік визначався за формулою: моментний об'ємний кровотік=м оментна площа поперечного перетину+моментна швидкість. Моментний - означає, що показники вимірюються в певній точці серцевого циклу. Моментна середня швидкість розраховувалася з середнього значення швидкостей на спектральному дисплеї. У цьому розрахунку використовувався як рівень потужності кожної швидкості в спектрі, так і сама швидкість. Рівень потужності кожної швидкості є показником кількості кліток, які рахуються з тією ж швидкістю. Для проведення точного підрахунку судина, по можливості, лоціровалася рівномірно. Порівнювались дії препаратів aFGF (FGF-1) та bFGF (FGF-2). Введення препаратів FGF в нирку проводилося в умовах стерильної операційної під час операції. Схема операції: Розкривалася очеревинна порожнина. Петлі кишечнику зміщувалися праворуч. Над лівою ниркою була розкрита парієнтальна очеревина і виділені ліва нирка, ниркова артерія та вена, а також черевний відділ аорти нижче відходження ниркової артерії. На межу верхнього і середнього сегменту нирки накладалася кетгутова странгуляційна лігатура для створення ішемії верхнього полюса нирки. Виконувалась аплікація целюлози («Тавотам» фірми «Джонсон і Джонсон»), просоченої FGF уподовж аорти і проведена під капсулу верхнього сегменту нирки. У верхній полюс нирки препарат FGF вводився шляхом ін'єкції з розрахунку 10 мкг або 64 мкг на 1 кг ваги тварини + 1 міліграм гепарину (суль фат-вмістний полімер, як молекулярний носій FGF). Черевна стінка пошарово ушивалася. Дослідження ниркового кровотоку проводилося через 4-6 місяців після операції методами ангіографії та допплерівської сонографії. Всі кролики були розділені на групи, представлені в таблиці 1. Таблиця 1 Розподіл експериментальних тварин по групах Контрольна група 1 група 2 група 3 група 4 група 5 група 6 група сегментарна ішемія; аплікація aFGF; сегментарна ішемія, аплікація сегментарна ішемія, аплікація сегментарна ішемія, аплікація сегментарна ішемія, аплікація сегментарна ішемія, аплікація Показники допплерівської сонографії і ангіографії нирок кролика в нормі представлені в таблиці 2. aFGF, ін'єкція в нирку aFGF bFGF, ін'єкція в нирку bFGF aFGF, ін'єкція в нирку bFGF aFGF, ін'єкція в нирку aFGF bFGF, ін'єкція в нирку aFGF в дозі 10 мкг на 1 кг ваги; в дозі 10 мкг на 1 кг ваги; в дозі 10 мкг на 1 кг ваги; в дозі 64 мкг на 1 кг ваги; в дозі 64 мкг на 1 кг ваги. 5 26456 6 Таблиця 2 Показники допплерівської сонографії і ангіографії нормальних нирок кролика Показники Розмір нирки (см) Об'ємний кровотік (см/сек) Систолічна швидкість Діастолічна швидкість Індекс резистентності Паренхіма Ліва нирка Допплер Права нирка Показники Ангіографія Ліва нирка Права нирка 3,61х2,11 3,43х2,03 Розмір нирки (см) +++ +++ 15,3±2,1 15,2±2,0 Ниркова артерія +++ +++ 57,19±8,4 57,3±8,5 Часткова артерія +++ +++ 0,7±0,01 0,7±0,01 +++ +++ 0,75±0,01 0,75±0,01 ++ ++ 0,75±0,01 0,74±0,01 Дугоподібна артерія Стриарні гілки кіркової речовини Порівняння допплерівських показників і ангіографії ішемізованої нирки кролика під впливом FGF та інтактної нирки представлене в таблиці 3. Таблиця 3 Показники допплерівської сонографії і aнгiorpaфії ішемізованої нирки під впливом FGF та інтактної нирки кролика Допплер Показники Розмір нирки (см) Об'ємний кровотік (см/сек) Систолічна швидкість Діастолічна швидкість Індекс резистентності Паренхіма Ліва нирка (ішемізована) 3,39х2,05 3,48х1,8 47,21±8,62 17,1±3,0 *** Показники Права нирка (інтактна) 57,19±8,4 27,4±6,56 0,709±0,02 0,6115±0,03 Розмір (см) нирки Ниркова артерія Часткова артерія Дугоподібна ар7,8±2,3 * терія Стриарні гілки 0,788±0,03* кіркової речовини 0,5775±0,01 ** 30,6±2,8 ** Ангіографія Ліва нир- Права нирка Ліва нирка (ішемізована) ка (зона (інтактна) ішемії) +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ +++ +++ ++ ++ *р0,05). Об'ємний кровотік досліджуваної нирки (Мі) був більший за інтактну нирку (Мк) в 2,4 рази (р0,05). Діастолічна швидкість була вища в 1,1 рази (р