2-(5-r-4-арил-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетати, що знижують рівень тригліцеридів в сироватці крові

2-(5-R-арил-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетати, які містять морфоліній 2-(5-(4-піридил)-4-(2-толіл)1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат 2 3 43391 4 N N H3C HN O N S OCH3 H3C H2 C O C O + C4 H9 HN C4 H9 C 4 H9 CH3 N O HO HO OH F виробництва "КРКА" (Словенія), що використовується для лікування атеросклерозу шляхом зниження рівня тригліцеридів (показання до застосування препарату "Аторіс" діюча речовина аторвастатин). Суттєві ознаки прототипу і корисної моделі, що збігаються, є такі: - наявність в структурі нітрогенвмісних азогетероциклів (з атомами нітрогену які мають валентність III); - молекули даних речовин містять карбоксильні групи; - в структурі прототипу і корисної моделі присутні групи C=N; - наявність в структурі ароматичних замісників. Але прототип у порівнянні з корисною моделлю не так активно знижує рівень тригліцеридів в сироватці крові. В основу корисної моделі поставлено задачу створення нових біологічно активних сполук, що можуть знайти своє застосування як оригінальні лікарські засоби у ряду 1,2,4-тріазолу, що знижують рівень тригліцеридів в сироватці крові. Поставлена задача вирішується тим, що створено похідні 1,2,4-тріазолу: морфоліній 2-(5-(4-піридил)-4-(2-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетат містить при N4-aтомі ядра 1,2,4-тріазолу 2-толільний замісник, в положенні 5 ядра 1,2,4-тріазолу 4-піридиновий радикал, двовалентний атом сірки, карбоксильну групу, з'єднану іонним зв'язком з молекулою морфоліну, і має формулу: N N O H2 + N C S C O H2N N O CH3 сполука 1, трибутиламоній 2-( 5-метил-4-(2метоксифеніл)-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетат містить при N4-атомі ядра 1,2,4-тріазолу 2метоксифенільний замісник, в положенні 5 ядра 1,2,4-тріазолу метильний радикал, двовалентний атом сірки, карбоксильну групу, з'єднану іонним зв'язком з молекулою трибутиламонію, і має формулу: сполука 2. Сполуку 1, що заявляється, отримують шляхом взаємодії 2-(5-(4-тридил)-4-(2-толіл)-1,2,4тріазлол-3-ілтіоацетатної кислоти з морфоліном в спиртовому середовищі при температурі 78°С. Приклад В трилітрову колбу, обладнану змішувачем, холодильником, термометром завантажують 326г (1М) 2-(5-(4-піридил)-4-(2-толіл)-1,2,4-тріазол-3тіо)ацетатної кислоти, 1500мл 96% етанолу. Суміш при постійному перемішуванні нагрівають до кипіння, протягом 5 хвилин додають 87,1г морфоліну, нагрівають 30 хвилин (до повного розчинення), охолоджують, випаровують на ¾ об'єму, охолоджують до 25°С, додають 200мл ацетону і залишають на 24 години. Осад відфільтровують і висушують на повітрі. Вихід складає 361г (87,4% в розрахунку на 2-(5-(4-піридил)-4-(2-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетатну кислоту). Жовта кристалічна речовина з Тпл. 190-192°С (із суміші етанол : ацетон 1:1) розчинна у воді, мало розчинна в органічних розчинниках. Знайдено, % С58,07, Н5,61, N16,91, S7,83. С20Н23Н5O3S1. Вирахувано, % С58,11, Н5,57, N16,95, S7,75. В ІЧ-спектрах сполуки, що заявляється наявні смуги поглинання -C=N-груп при 1602см-1 C-Sгрупи при 698см-1, -С-O-С-групи при 1239см-1, O=С-групи при 1631см-1, а також наявна смуга поглинання, характерна для солей карбонових кислот, що містять СОO- групу при 1435см-1. Дослідження на гостру токсичність проводили по експрес-методу В.Б. Прозоровського на білих щурах лінії Вістар. Використовувались 5 груп тварин по 2 спостереження в кожній з додатковим використанням однієї попередньої та наступної дози. Досліджувану сполуку розчиняли в 1,5мл дистильованої води і вводили, з додержанням правил асептики та антисептики, за допомогою шприца внутрішньочеревне. Спостереження проводили через 24, 48, 72 та 96 годин. Виявлено, що LD50 морфолінію 2-(5-(4-піридил)-4-(2-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетату дорівнює 554 (550-570) мг/кг. Сполуку 2, що заявляється, отримують шляхом взаємодії 2-(5-метил-4-(2-метоксифеніл)-1,2,4тріазлол-3-ілтіоацетатної кислоти з трибутиламіном в спиртовому середовищі при температурі 78°С. Приклад В трилітрову колбу, обладнану змішувачем, холодильником, термометром завантажують 279г (1М) 2-(5-метил-4-(2-метоксифеніл)-1,2,4-тріазол3-тіо)ацетатної кислоти, 2500мл 96% етанолу. Суміш при постійному перемішуванні нагрівають до кипіння, протягом 5 хвилин додають 185г (237мл) трибутиламіну, нагрівають 10 хвилин (до повного 5 43391 розчинення), охолоджують, осад відфільтровують і висушують на повітрі. Вихід складає 213,44г (46% в розрахунку на 2-(5-метил-4-(2-метоксифеніл)1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетатну кислоту). Біла кристалічна речовина з Тпл. 221-222°С (із етанолу) розчинна у воді, мало розчинна в органічних розчинниках. Знайдено, % С62,05, Н8,71, N12,04, S6,89. С24Н40N40O3S1. Вирахувано, % С62,04, Н8,68, N12,06, S6,90. В ІЧ-спектрах сполуки, що заявляється наявні смуги поглинання -C=N-груп при 1573см-1, C-Sгрупи при 694см-1, -С-O-С-групи при 1261см-1, а також наявна смуга поглинання, характерна для солей карбонових кислот, що містять СОО- групу при 1402см-1. Дослідження на гостру токсичність проводили по експрес-методу В.Б. Прозоровського на білих щурах лінії Вістар. Використовувались 5 груп тварин по 2 спостереження в кожній з додатковим використанням однієї попередньої та наступної дози. Досліджувані сполуки розчиняли в 1,5мл дистильованої води і вводили, з додержанням правил асептики та антисептики, за допомогою шприца внутрішньочеревне. Спостереження проводили через 24, 48, 72 та 96 годин. Виявлено, що LD50 трибутиламонію 2-(5-метил-4-(2метоксифеніл)-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетату дорівнює 700 (691-709) мг/кг. 6 З цією метою експериментальну гіперліпідемію моделювали за короткотривалою моделлю Yousufzai-Siddigi [Yousufzai S.Y. К., Siddigi M. 3Hydroxy-3-Methylglutaric Acid and Experimental Atherosclerosis in Rats // Experietia. - 1976. - Vol.32, №8. - P.1033-1034.] у дослідах на 35 білих щурах лінії Вістар обох статей масою 220-280г які були розбиті на 5 груп по 7 тварин в кожній (1 група інтактні, 2 - контроль, 3 - отримували аторвастатин, 4 і 5 отримували сполуки 1 і 2). Шляхом перорального зондового введення тварини 2-5 груп отримували холестерол в добовій дозі 40мг/кг та, як фактор порушення ліпідного метаболізму і для посилення всмоктування стероїдів в кишковику 0,125% олійний розчин вітаміну D2 в добовій дозі 8мг/кг. Сполуки 1, 2 розчиняли в 1,5мл фізіологічного розчину і вводили в дозі 1/10 від LD5o per os через годину після введення гіперліпідогенної суміші протягом 5 діб. На шосту добу, після наркотизації дослідних тварин ефіром здійснювали забір крові з біфуркації аорти. Кров центрифугували при 3000об./хв., виділяли сироватку. В сироватці визначали вміст ТГ ферментативним методом [Приказ МЗ СССР №960 от 15.10.74г. «Об унификации клинических лабораторных методов исследования», стр.69]. Результати досліджень наведені в табл. 1. Таблиця 1 № з/п 1. 2. 3. 4. 5. Група Інтактні Контроль Аторвастатин Морфоліній 2-(5-(4-піридил)-4-(2толіл)-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетат Трибутиламоній 2-(5-метил-4-(2метосифеніл)-1,2,4-тріазол-3ілтіо)ацетат Комп’ютерна верстка О. Рябко Середній вміст тригліцеридів в сироватці крові, ммоль/л М±m 0,66±0,02 1,82±0,09 1,60±0,08 Відношення порівняно з контролем, D % 100 -12,09 1,57±0,06 -13,89 1,58±0,08 -13,27 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601