Спосіб тест-визначення ломефлоксацину

Спосіб тест-визначення ломефлоксацину, що включає відбір проби, взаємодію її з хімічним реагентом в присутності аніонної поверхнево-активної речовини та уротропіну та вимірювання аналітичного сигналу, який відрізняється тим, що відокремлення ломефлоксацину здійснюють сорбцією на ксерогелю, модифікованому іонами Тb (III), а як аніонну поверхнево-активну речовину використовують гексадецилсульфат натрію, і процес здійснюють при рН 6,8-7,0. (19) (21) u200908899 (22) 26.08.2009 (24) 10.03.2010 (46) 10.03.2010, Бюл.№ 5, 2010 р. (72) БЕЛЬТЮКОВА СВІТЛАНА ВАДИМІВНА, ЛІВЕНЦОВА ОЛЕНА ОЛЕГІВНА, ТЕСЛЮК ОЛЬГА ІВАНІВНА (73) ОДЕСЬКА НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ, ФІЗИКО-ХІМІЧНИЙ ІНСТИТУТ ІМ. О.В. БОГАТСЬКОГО НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ НАУК УКРАЇНИ 3 В основу корисної моделі поставлена задача створити спосіб, в якому за рахунок застосування кінетичної реакції взаємодії ломефлоксацину і іону Тb (III), використовування твердофазної люмінесценції тербію на ксерогелю, забезпечити спрощення апаратурного оформлення аналізу, підвищення селективності визначення і зниження межі визначення ломефлоксацину. Поставлена задача вирішена в способі тествизначення ломефлоксацину, що включає відбір проби, взаємодію її з хімічним реагентом в присутності аніонної поверхнево-активної речовини та уротропіну та вимірювання аналітичного сигналу, тим, що відокремлення ломефлоксацину здійснюють сорбцією на ксерогелю, модифікованому іонами Tb (III), а як аніонну поверхнево активну речовину використовують гексадецилсульфат натрію, а процес здійснюють при рН 6,8-7,0. Новим у корисної моделі, що заявляється є використання кінетичної реакції взаємодії ломефлоксацину з іонами Тb (III), яка проходить у фазі сорбенту - ксерогелю, модифікованому іонами Тb (III), з метою відділення антибіотика із розчину і підсилення сенсибілізованої твердофазної люмінесценції іона Тb (III) у присутності поверхневоактивної речовини - гексадецилсульфату натрію та уротропіну при рН 6,8-7,0. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю заявлених ознак і досягненням технічного результату складається в наступному. Підвищення селективності визначення, спрощення апаратурного оформлення, зниження межі виявлення стало можливим завдяки наступним прийомам: 1. застосуванню кінетичної реакції взаємодії ломефлоксаціну з іонами тербію (III). Застосування такого прийому дозволяє підвищити селективність визначення ломефлоксацину, так як ця реакція є для даного реагенту вибирчою в групі похідних хінолонкарбонової кислоти. Інші антибіотики цього ряду кінетичної реакції з іонами Тb (III) не виявляють. 2. Застосуванню сорбції ломефлоксацину на ксерогелі, модифікованому іонами Тb (III). Застосування такого прийому дозволяє поєднувати стадію попереднього відокремлення антибіотика з отриманням сорбату комплексу, володіючого люмінесцентними ознаками в твердій фазі сорбенту, що дозволяє проводити тест-визначення ломефлоксацину і не вимагає наявності люмінесцентного спектрометру. 3. Застосування сорбції ломефлоксацину на модифікованому ксерогелю веде до дегідратації комплексу у твердій фазі і, відповідно, зменшенню безвипромінювальних втрат енергії збудження, що сприяє збільшенню інтенсивності люмінесценції сорбату і зниженню межи визначення ломефлоксацину. Сенсибілізована люмінесценція іона Тb (III) на сорбенті посилюється у присутності поверхневоактивної речовини - гексадецилсульфату натрію, який сприяє дегідратації утвореного комплексу і тим самим зменшенням безвипромінюваних втрат енергії збудження. 48116 4 Вибір поверхнево-активної речовини (ПАР) проведено експериментально. Дослідження впливу різноманітних аніонних ПАР на Iлюм , Тb (III) на сорбенті показало, що найбільша Iлюм Tb (III) спостерігається у присутності гексадецилсульфату натрію (табл. 1). Інтенсивність люмінесценції сорбату тербію (III) залежіть від кількості гексадецилсульфату натрію у розчині. Найбільша Iлюм виявляється при вмісті гексадецилсульфату натрію у розчині 6 10 3 моль/л. Сорбат комплексу Тb (III) з ломефлоксацином володіє люмінесцентними властивостями в інтервалі значень рН від 5,5 до 8,5 з максимумом люмінесценції при рН 6,8-7,50 (Фіг.1) Для створення необхідного значення рН використовували розчин уропропіну 40%-ого. Реакція взаємодії тербію з ломефлоксацином є кінетичною і протікає в часі. Найбільша Iлюм виявляється через 25-30хв. після зливання розчинів (Фіг.2) Інтенсивність люмінесценції сорбату залежить від температури і часу його висушування. Оптимальним є висушування сорбату при температурі 100 С протягом 10хв. При висушуванні ксерогеля в мікрохвильовій печі час висушування зменшується до 3-х хв. Визначення ломефлоксацину проводили на модельному розчині живильного середовища. В якості модельного було обрано м'ясо - пептонний бульйон, в який вводили різну кількість антибіотика. Приклад 1. 50мг ксерогелю, модифікованого іонами Тb (III), поміщають у хімічну склянку, додають 0,5мл бульйону з добавкою ломефлоксацину, додають 0,6мл 1 10 2 моль/л гексадецилсульфату натрію, 0,2мл розчину уротропіну 40%-ого і дистильовану воду до 3мл. Проводять сорбцію при перемішуванні протягом 30 хвилин. Потім сорбент відфільтровують й висушують при температурі 95-100С протягом 10 хв. Люмінесценцію комплексу збуджують при збу д. 365 нм. Вміст ломефлоксацину в живильному середовищі визначають візуально, порівнюючи сорбату Tb (III) Iлюм ( випр . 545 нм зелене світіння) з еталонними зра зками. Межа виявлення препарату становить 3 10 8 моль/л. Результати визначення ломефлоксацину приведені в таблиці 2. Точність і відтворюваність визначення перевірена методом статистичної обробки результатів. При n=5 і Р=0,95 величина відносного стандартного відхилення (Sr) складає 0,08-0,09. Межа виявлення ломефлоксацину розрахована по ( 3 ) критерію і складає 3 10 8 моль/л. 5 48116 6 Таблиця 1 Вплив аніонних ПАР на Iлюм Тb (III) у комплексі з ломефлоксацином АПАР Збільшення Iлюм Додецилcульфат натрію 0 Тридецилсульфат натрію 2 Тетрадецилcульфат натрію 2,2 Гексадецилcульфат натрію 6,2 Таблиця 2 Результати визначення ломефлоксацину у м'ясо - пептонному бульйоні (n = 5; Р = 0,95) Введено, мкг/мл 0,05 0,10 0,20 Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Знайдено, мкг/мл 0,048 0.103 0,019 Підписне Sr 0,09 0,08 0,08 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601