Спосіб заселення пористого носія
Номер патенту: 48530
Опубліковано: 25.03.2010
Автори: Петренко Олександр Юрійович, Грищенко Валентин Іванович, Петренко Юрій Олександрович
Формула / Реферат
Спосіб заселення пористого носія клітинами, що включає просочення носія суспензією клітин, який відрізняється тим, що просочення носія здійснюють шляхом циклічного прокачування суспензії клітин через увесь об'єм носія з використанням двох сполучених поршневих посудин.
Текст
Спосіб заселення пористого носія клітинами, що включає просочення носія суспензією клітин, який відрізняється тим, що просочення носія здійснюють шляхом циклічного прокачування суспензії клітин через увесь об'єм носія з використанням двох сполучених поршневих посудин. (19) (21) u200909107 (22) 04.09.2009 (24) 25.03.2010 (46) 25.03.2010, Бюл.№ 6, 2010 р. (72) ПЕТРЕНКО ЮРІЙ ОЛЕКСАНДРОВИЧ, ПЕТРЕНКО ОЛЕКСАНДР ЮРІЙОВИЧ, ГРИЩЕНКО ВАЛЕНТИН ІВАНОВИЧ 3 суспензією. У результаті клітини рівномірно розподіляються в об'ємі носія і готові до використання. Приклад Як поршневі посудини використовували шприци об'ємом 1мл. В один шприц помішували диск макропористого губчатого носія, виготовленого з альгіната, діаметром 5мм, в другий - 0,1мл суспензії клітин фібробластів з концентрацією 5 3х10 кл/мл. Шприци з'єднували еластичною пластиковою трубкою. Повільно рухаючи поршні здійснювали циклічне прокачування суспензії клітин через увесь об'єм носія протягом 5хв. Після заселення клітинами носій виймали з шприця і переносили в живильне середовище, де культивували при 37°С, 5% СО2, 95% вологості. Для оцінки розподілу і локалізації клітин в носіях використовували індикатор МТТ (3-(4,5dimethilthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide), який відображує активність дегидрогеназ в клітинах. В результаті ферментативних реакцій дегідрогеназ відбувається накопичення нерозчинюваних кристалів формазана, які легко візуалізуються під мікроскопом. [3]. Заселені клітинами макропористі носії інкубували при 37°С протягом 3 годин в середовищі культивування, доповненому розчином МТТ, після чого середовище видаляли, а носії переносили у безбарвний сольовий розчин Хенкса. Зразки аналізували з використанням стереомикроскопа при збільшенні у 40 разів. 48530 4 На рисунку видно, що при використанні способу за прототипом більшість клітин розміщувалась у поверхневій ділянці макропористого носія і тільки невелика кількість клітин проникла углиб носія (А) Фіг.1. Використання заявленого способу заселення забезпечило рівномірний розподіл клітин усередині тримірної структури: клітини розміщувались як на поверхні, так і по всьому об'єму носія (Б) Фіг.2. Таким чином заявлений спосіб забезпечує ефективне заселення пористого носія клітинами при мінімальних затратах часу. Джерела інформації. 1. Roh J. D., Nelson G.N., Udelsman B.V., Brennan M.P., Lockhart В., Fong P.M., Lopez-Soler R.I., Saltzman W. M., Breuer C.K.. Centrifugal seeding increases seeding efficiency and cellular distribution of bone marrow stromal cells in porous biodegradable scaffolds// Tissue engineering. - 2007. - Vol.13, N11. - P.2743 -2749. 2. Holy C.E., Shoichet M.S., Davies J.E. Engineering three-dimensional bone tissue in vitro using biodegradable scaffolds: investigating initial cell-seeding density and culture period // J Biomed Mater Res. - 2000. - Vol.51. - P.376-382. 3. D. Wendt, A. Marsano, M. Jakob, et al, Oscillating perfusion of cell suspensions through three-dimensional scaffolds enhances cell seeding efficiency and Uniformity // Biotechnology and Bioengineering. - 2003. - V. 84, № 2. - P.205-214. 5 Комп’ютерна верстка О. Рябко 48530 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for colonization of porous carrier
Автори англійськоюPetrenko Yurii Oleksandrovych, Petrenko Oleksandr Yuriovych, Hryschenko Valentyn Ivanovych
Назва патенту російськоюСпособ заселения пористого носителя
Автори російськоюПетренко Юрий Александрович, Петренко Александр Юрьевич, Грищенко Валентин Иванович
МПК / Мітки
МПК: C12N 5/00
Мітки: носія, заселення, пористого, спосіб
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/3-48530-sposib-zaselennya-poristogo-nosiya.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб заселення пористого носія</a>
Попередній патент: Вузол приєднання скляної перегородки до дерев’яного дверного блока
Наступний патент: Робочий орган тістомісильної машини
Випадковий патент: Спосіб і пристрій для одержання стрічки із сталі для легких конструкцій з високим вмістом марганцю