Спосіб екстракції поліпептидів із тваринної речовини

Спосіб екстракції поліпептидів із тваринної речовини, що включає зневоднення подрібненого тканинного матеріалу в органічному розчиннику 3 53801 4 кой медицине и геронтологии //Клиническая медирафільтрації через фільтри з діаметром пор цина. - 2000.- № 2.- С. 42-45. Катрушов А.В. Вико10кДа. ристання нових органоспецифічних поліпептидних Запропонований спосіб виконують наступним препаратів для експериментальної терапії патолочином: гій, викликаних пошкоджуючими факторами отоТканинний матеріал - скелетні м'язи бедра чуючого середовища. Автореф. дис. д.мед.н. Київ, щурів очищують від судин, фасцій та жирової тка1995.- 40 а). нини, подрібнюють до консистенції фаршу у ступці Найбільш близьким до запропонованого спона холоду, заливають холодним ацетоном у співсобу є спосіб отримання поліпептидів, що включає відношенні 1:10 та зберігають при +4°С протягом обробку подрібнених кровоносних судин сільсько12-24 годин. Ацетон зливають, тканини висушують господарських тварин ацетоном у співвідношенні постійно помішуючи при кімнатній температурі. 1:8 протягом 24 годин, екстракцію сировини 3 % Висушені тканини поміщують у екстрагуючий розрозчином оцтової кислоти у присутності хлористочин (3 % льодова оцтова кислота з додаванням го цинку та хлористого магнію, преципітацію аце0,1 % хлориду цинку та 0,1 % хлориду магнію) у тоном у співвідношенні 1:8 при температурі +4°С з співвідношенні 1:10 при температурі +4°С протянаступним відмиванням його ацетоном та ефіром, гом 72 годин при постійному перемішуванні. Суміш ультрафільтрацією отриманих поліпептидних фрафільтрують через лавсанові та бязеві фільтри при кцій через фільтри з діаметром пор 10кДа (Пат. +4°С для видалення дисперсного осаду. Фільтрат 45251 А Україна, МПК Н61К35/30,38/00. Спосіб обробляють ацетоном у співвідношенні 1:10 при отримання поліпептидів /Чекаліна Н.І., Кайдашев +4°С протягом 12-24 годин. Отриманий преципітат І.П., Катрушов О.В.; заявники і патентоутримувачі збирають, промивають сумішшю ацетону та ефіру Чекаліна Н.І., Кайдашев І.П., Катрушов О.В.- № у співвідношенні 1:1 та висушують. Потім розчи2001074761; заявл. 09.07.2001; опубл. 15.03.2002.няють у підкисленій дистильованій воді та отриБюл. № 3.). мують пептиди з молекулярною масою до 10кДа Недоліком існуючого способу є використання в шляхом центрифугування через фільтр з діаметякості сировини тканин великою рогатої худоби, ром пор 10кДа. що не дає можливості дослідити вміст пептидних За допомогою запропонованого способу нами речовин в тканинах інших тварин, недостатнє отримано поліпептиди з тканин скелетних м'язів співвідношення органічного розчинника до тканин, бедра щурів. Аналіз тканинного екстракту провощо призводить до погіршеного зневоднення та дили за допомогою обернено-фазової високоефепреципітації. ктивної рідинної хроматографії, яка дає можлиВ основу корисної моделі поставлено задачу вість розділення складних сумішей та дослідження створити спосіб екстракції поліпептидів із тваринречовин тваринного походження, що мають мініної речовини шляхом удосконалення відомого мальні відмінності у фізико-хімічних властивостях. способу, який надасть можливість отримувати пеВикористовували систему SMART tm SYSTEM птидні речовини із тканин різних тварин для пода(LKB, "Pharmacia", Швеція). Колонка mRPC льшого дослідження їх характеристик та механізC2/C18, SC=2*1/100, градієнтне подання елюєнта мів секреції. від 10 до 100% розчину В в розчин А (розчин А: Поставлену задачу вирішують створенням 0,1% розчин трифтороцтової кислоти; розчин В: способу отримання поліпептидів, який включає 0,085% розчин трифтороцтової кислоти у 80% екстракцію подрібненої сировини (скелетні м'язи ацетонітрилі) за 80 хвилин, детекція при 214 та тварин) 3 % розчином оцтової кислоти в присутно280нм. сті хлориду цинку та магнію, преципітацію екстракХроматографічний спектр отриманих поліпепту, висушування преципітату з послідуючим його тидів стегнових м'язів наведено на фіг.. розчиненням, фільтруванням та ліофілізацією, в Згідно отриманим даним, для пептидів скелетякому, згідно корисної моделі, в якості сировини них м'язів характерна наявність добре визначених використовують тканини м'язів бедра щурів, перед чотирьох піків, які відповідають часу утримання від екстракцією сировину обробляють ацетоном у 20 до 50 хвилин та достатньо високій отпичній співвідношенні 1:10 протягом 12-24 годин, прецигустини при 280 нм. пітацію здійснюють ацетоном у співвідношенні 1:10 Таким чином, запропонований спосіб дозволяє при температурі +4°С протягом 12-24 годин, з наотримувати поліпептидні екстракти з тканин різних ступним відмиванням ацетоном та ефіром та тварин для подальшого їх дослідження та визнаотриманням пептидів масою до 10кДа після ультчення фізико-хімічних характеристик та механізмів секреції. 5 Комп’ютерна верстка В. Мацело 53801 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601