Спосіб імунологічного моніторингу активності неопластичного процесу при гострій лімфобластній лейкемії у дітей

Спосіб імунологічного моніторингу активності неопластичного процесу при гострій лімфобластній лейкемії у дітей, що полягає у дослідженні сироватки крові, який відрізняється тим, що визначають вміст IL-6, IL-8 та TNF- у сироватці крові у гострі періоди захворювання (дебют, дуже ранній, ранній та пізній рецидиви). (19) (21) u200905161 (22) 25.05.2009 (24) 10.03.2011 (46) 10.03.2011, Бюл.№ 5, 2011 р. (72) ДУБЕЙ ЛЕОНІД ЯРОСЛАВОВИЧ, ДУБЕЙ НАТАЛІЯ ВАСИЛІВНА, ДОРОШ ОЛЬГА ІГОРІВНА (73) ДЕРЖАВНА УСТАНОВА "ІНСТИТУТ ПАТОЛОГІЇ КРОВІ ТА ТРАНСФУЗІЙНОЇ МЕДИЦИНИ АМН УКРАЇНИ", ДУБЕЙ ЛЕОНІД ЯРОСЛАВОВИЧ, 3 тей, який би забезпечив використання найбільш інформативних параметрів для оцінки прогресування хвороби в окремого пацієнта на певному її етапі. В основу запропонованого нами моніторингу перебігу ГЛЛ у дітей покладено власний п'ятирічний досвід дослідження імунологічних механізмів виникнення хвороби на підставі вивчення не лише морфологічної та імунофенотипової характеристики клітин кісткового мозку, але й дослідження імунологічних показників, зокрема, цитокінового профілю, а саме, IL-6, IL-8 та TNF-. За отриманими даними, до початку лікування у дітей з не-Т-клітинною лейкемією при її різних імунофенотипових підваріантах показники досліджуваних цитокінів у сироватці крові значно перевищували такі, які були у дітей контрольної групи. Аналогічні зміни спостерігались при порівнянні концентрації цитокінів у сироватці крові дітей з Вта Т-ГЛЛ, які суттєво не відрізнялися один від одного. На особливу увагу заслуговує той факт, що до початку лікування у сироватці крові дітей основної групи виявлено високі рівні TNF-. Особливо це було помітно при Т- і common-В-ГЛЛ. У сироватці крові дітей з дуже раннім рецидивом ГЛЛ середні показники IL-6, IL-8 були значно нижчими, порівняно з такими, які спостерігалися у дебюті хвороби. Вони максимально наближались до рівня контрольної групи. Зазначимо, що більш помітними виявилися зміни концентрації IL-6 при common- та рrе-В варіанті дуже раннього рецидиву ГЛЛ та IL-8 при pro-В варіанті дуже раннього рецидиву ГЛЛ. Незважаючи на те, що у дітей з дуже раннім рецидивом ГЛЛ вміст IL-6, та IL-8 у сироватці крові був низьким, середня концентрація TNF- у цих хворих залишалася високою. Вона була у два рази нижчою порівняно з тією, що спостерігалася у дебюті хвороби та суттєво відрізнялася від такої у дітей контрольної групи. Щодо концентрації досліджуваних цитокінів у сироватці крові дітей з раннім та пізнім рецидивом ГЛЛ, то вона суттєво не відрізнялася від тієї, що була у дітей з дуже раннім рецидивом захворювання. Привертає увагу той факт, що у дітей як з раннім, так і пізнім рецидивами хвороби спостерігалися високі рівні TNF- у сироватці крові. Нами також встановлено, що чим пізніший рецидив ГЛЛ, тим вищий рівень TNF- у сироватці крові. Слід зазначити, найвищою концентрація TNF- була у сироватці крові дітей з дуже раннім рrе-В, раннім common-B та пізнім Т-клітинним рецидивами гострої лейкемії. Нами також проведено аналіз кореляційних взаємозв'язків абсолютної кількості бластних клітин у периферичній крові із сироватковими цитокінами у гострі періоди хвороби: до початку лікування, при встановленні дуже раннього, раннього та пізнього рецидивів. За отриманими даними у дебюті хвороби спостерігалися в основному прямі сильні кореляційні взаємозв'язки рівнів абсолютної кількості бластних клітин із досліджуваними цитокінами. Нами не виявлено суттєвої різниці у силі кореляційного взаємозв'язку між різною абсолютною кількістю бластних клітин периферичної крові (1-10 Г/л, 11-15 Г/л, 51-100 Г/л та більше 100 Г/л) 57540 4 та концентрацією досліджуваних цитокінів у сироватці крові дітей основної групи. При підтвердженні факту рецидиву ГЛЛ у дітей спостерігалися деякі відмінності у показниках кореляційних взаємозв'язків рівнів бластних клітин із цитокінами порівняно з такими, які були виявлені перед початком програмної терапії гемобластозу. Так, у дітей з дуже раннім рецидивом ГЛЛ при зростанні абсолютної кількості бластних клітин у периферичній крові кореляційний взаємозв'язок з TNF- посилювався. У дітей з дуже раннім рецидивом ГЛЛ виявлено стабільно сильний взаємозв'язок з позитивним значенням показників абсолютної кількості бластних клітин із IL-6 і IL-8, які суттєво не відрізнялися від таких, що спостерігалися перед початком цитостатичного лікування. При ранньому рецидиві хвороби у дітей кореляційні взаємозв'язки значень IL-6 та IL-8 були середньої сили незалежно від абсолютної кількості бластних клітин у периферичній крові. Показово, що сила цього кореляційного взаємозв'язку була слабшою порівняно з тією, яка спостерігалася у дітей з дуже раннім рецидивом. Стосовно TNF-, то взаємозв'язок цього цитокіну з бластними клітинами був сильним і незначно послаблювався при зростанні абсолютної кількості бластних клітин у периферичній крові. Аналогічна закономірність спостерігалася під час проведення аналізу кореляційних взаємозв'язків концентрації досліджуваних цитокінів у сироватці крові із абсолютною кількістю бластних клітин у периферичній крові дітей з пізнім рецидивом ГЛЛ. Таким чином, у дебюті ГЛЛ у дітей спостерігається висока цитокінова активність, яка не залежить від імунофенотипового підваріанту даного гемобластозу. При рецидивах хвороби, незалежно від терміну його виникнення, зростає концентрація IL-6 і TNF- та знижується вміст IL-8 у сироватці крові, що супроводжується сильним взаємозв'язком досліджуваних цитокінів із бластними клітинами, незалежно від їх абсолютної кількості у периферичній крові. Отже, особливості динаміки змін концентрації IL-6, IL-8 та TNF- у сироватці крові при ГЛЛ у дітей дозволяє виділити їх як додаткові імунологічні маркери активності неопластичного процесу. Джерела інформації: 1. Дубей Л.Я. Концентрація інтерлейкіну-6 (IL6) у сироватці крові дітей на різних етапах перебігу гострої ліфмобластної лейкемії //Укр. журн. гемат. і трансфуз.-2008.-№ І (8).-С 12-16. 2. Концентрація фактора некрозу пухлин (ФНП-) у сироватці крові дітей на різних етапах перебігу гострої лімфобластної лейкемії /Н.В. Дубей, Дубей Л.Я., Масляк З.В., Дорош О.І. //Укр. журн. гемат. і трінсф. - 2008. -№2 (8).-С 18-22. 3. Buizer A.B., de Sonneville L., van den HeuvelEibrink M. et al. Chemotherapy and attentional dysfunction in survivors of childhood acute lymphoblastic leukaemia: effect of treatment intensity //Ped. Blood Cancer. - 2005. - Vol. 45, №3.-P. 281290. 4. Hann I.P., Vora A.J., Harrison C.U. et al. Detremint of outcome after intensified therapy oh childhood acute lymphoblastic leukemia: result from Medical research council United Kingdom acute 5 57540 lymphoblastic leukaemia XI protocol //Br. J. Hematol2001.-Vol. 113, №7.-P. 103-114. 5. Hehlgans T.I., Pfeffer К.A. The intriguing biology of the tumor necrosis factor/tumor necrosis factor receptor superfamily: players, rules and the games //Immunol. - 2005. - Vol. 175, № 5. - P. 84388440. 6. Koishi S.A., Kubota M.H., Sawada M.O. et al. Biomarkers in long survivors of pediatric acute lymphoblastic leukemia patients: late effects of cancer chemotherapy //Mutat. Res. - 1998. - Vol. 422, № 2. P. 213-222. 7. Luczyński W.O., Stasiak-Barmuta A.G., Krawczuk-Rybak M.F. et al. Th1/Th2 balance in acute lymphoblastic leukemia in children //Przegl. Lek. 2004. -Vol. 61, №9. -P. 919-923. 8. Mazur B.O., Olejnik I.V., Wylezol I.B. et al. Assessment of chosen parameters of the immune system in children with acute lymphoblastic leukaemia. //Ped. Hemat. Oncol. - 2003. - Vol. 20, № 4. - P. 303-308. Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 6 9. Minamishima I.G., Ohga S.H., Ishii E.U. et al. Serum interleukin-6 and fever at diagnosis in children with acute leukemia //Am. Jor. Ped. Hemat. Oncol. 1993. - Vol. 15, № 2. - P. 239-244. 10. Miniero R.C., Saracco P.H., Pastore G.V. et al. Relapse after first cessation of therapy in childhood acute lymphoblastic leukemia: a 10-year Follow-Up Study //Med. Ped. Oncol. - 1999. - Vol. 33, № 2. - P. 65-70. 11. Pituch-Noworolska A.N., Wieckiewicz J.L, Gawlicka M.E. et al. The IL-6 gene expression by leukemic cells from acute lymphoblastic leukemia common and Τ type and modulation of IL-6 production by TNF //Haemat. - 1998. - Vol. 29, №2.P. 101-114. 12. Zeng B.M. Tumor necrosis factor alpha activity in peripheral blood in patients with acute leukaemia: changes and clinical implications //Zhonghua Yi Xue Za Zhi. - 1992. - Vol. 72, № 7. - P. 405-407. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601