Спосіб діагностики затримки внутрішньоутробного розвитку плоду за показниками функціонального стану геному нейтрофільних гранулоцитів периферійної крові новонароджених

Спосіб діагностики затримки внутрішньоутробного розвитку плоду за показниками функціонального стану геному нейтрофільних гранулоцитів 3 ням індексів морфологічно змінених ядер і мікроядер, які відображають порушення імуногенетичного статусу новонародженого, генетичну нестабільність і схильність до захворювань. Це дозволить отримати об'єктивну оцінку функціональної активності генів на різних етапах реалізації спадкової інформації та встановити особливості функціонального стану геному (ФСГ) НГПК новонароджених із ЗВУР та здорових дітей за індексами хроматизації (IX), статевого хроматину (СХ), ядерцевих (ЯІ) та патологічних ядер (ПЯ). Поставлена задача вирішується тим, що у способі визначення спадкової схильності за активністю функціонального стану геному НГПК, що включає цитологічне дослідження клітин крові з виявленням в них ядерних структур, додатково проводять цитогенетичний аналіз нейтрофільних гранулоцитів крові з визначенням індексів морфологічно змінених ядер (патологічних ядер) та мікроядер. Поліфункціональна здатність нейтрофільних гранулоцитів зумовлена активною експресією генів, продукти яких забезпечують продукцію ферментів (кислі протеази, мієлопероксидаза). Достовірних змін відносного показника нейтрофілів серед загальної кількості формених елементів у периферійній крові дітей із ЗВУР порівняно з таким у здорових новонароджених нами не виявлено (відповідно 53,33±2,70 і 54,95±3,30 у дівчаток, та 52,63±5,48 і 54,43±3,16 у хлопчиків). Водночас зміни структури хроматину, які засвідчують активність реалізації спадкової інформації, підтвердили інтенсифікацію транскрипції та трансляції. Це доводить перевага IX, який засвідчує активність транскрипції, у новонароджених дітей порівняно з таким у новонароджених із ЗВУР (відповідно 0,98±0,02 та 0,95±0,03 у дівчаток і 0,97±0,01 та 0,95±0,02 у хлопчиків). Отримані дані засвідчили, що активність першого етапу реалізації генетичної інформації - транскрипції була вищою у новонароджених дітей. Саме такий механізм лежить в основі порушення контролю транскрипції. Закономірним продовженням дослідження ФСГ був аналіз регуляторних сайтів Х-хромосоми за показником СХ з урахуванням статевих особливостей. За результатами індексу СХ доведено, що у новонароджених дівчаток він у 1,2 рази перевищував аналогічний показник у здорових новонароджених зі ЗВУР, у хлопчиків навпаки - СХ у здорових новонароджених в 2,3 рази менший, ніж аналогічний показник у новонароджених із ЗВУР. Показником другого етапу реалізації спадкової інформації - трансляції (рРНК) цього процесу є активність ядерцевого апарату, де здійснюється транскрипція генів, які кодують рибосомні білки [Lachner M., O'Sullivan R. J., Jenuwein T. An epigenetic road map for histone lysine methylation // J. Cell Sci. - 2003. - V. 116. - P. 2117-2124]. Оскільки структурно-функціональні зміни ядерець є важливим компонентом реакції клітин на стрес і зумовлюють їх адаптацію до зовнішніх впливів, ЯІ може бути об'єктивним діагностичним маркером активності трансляційного апарату. Встановлено, що частота клітин з ядерцями в усіх новонароджених 62672 4 дівчаток (4,48±0,34) суттєво не відрізняється, а у здорових новонароджених хлопчиків (4,43±0,43) відмічено перевагу даного показника в 1,3 рази над таким у дітей із ЗВУР 4,62±0,44 і 3,48±0,31 (у дівчаток і хлопчиків відповідно). Функціональна активність геному залежить і від стану каріолеми, з якою з'єднується ДНК хроматину для наступної деспіралізації. Оскільки морфологічні зміни компонентів ядра впливають на конденсацію хроматину і транскрипцію, закономірним було зростання частоти патологічних ядер (ПЯ) у всіх новонароджених із ЗВУР порівняно з такою у здорових новонароджених дівчаток і хлопчиків, відповідно у 1,1, 1,2 рази. Об'єктивним критерієм ступеня порушення структури хромосомного апарату НГПК у новонароджених із ЗРУР є збільшення частоти клітин з мікроядрами у дівчаток (1,02±0,03) та хлопчиків (1,05±0,04) порівняно із здоровими новонародженими (відповідно 0,12±0,06 та 0,23±0,05). Для виявлення особливостей підтримання функціональної єдності всієї системи реалізації спадкової інформації проведено кореляційний аналіз. Визначено обернений зв'язок між IX та НІ. Характерним для хлопчиків із ЗВУР є посилення позитивного взаємозв'язку між IX та НІ (r = 0,2), яке перевищує таке у здорових новонароджених у 2,5 рази. У хлопчиків цієї групи із ЗВУР маркером дисрегуляторного процесу синтезу і РНК були слабкі позитивні кореляції між IX та СХ. У цих же хлопчиків, як пристосувальний процес до підтримки необхідної активності функціонального стану геному, є сильна позитивна кореляція між IX та ПЯ (r = 0,7; р