Спосіб визначення фунгіцидів класу триазолів у воді

Спосіб визначення фунгіцидів класу триазолів у воді, що включає підготовку проб води до екст 3 64195 рування та власне хроматографування, згідно з корисною моделлю, хроматографування суміші триазолів проводять в тонкому шарі силіказолю на пластинках "Сорбфіл", імпрегнованих вазеліновим маслом, в системі рухомої фази ацетон+вода (1:1) з наступним детектуванням компонентів реагентом бромфеноловий синій. Речовини, що аналізуються, проявляються у вигляді плям насиченоблакитного кольору на блідо-жовтому фоні. Спосіб ґрунтується на екстракції дифеноконазолу та паклобутразолу із проб води хлороформом та визначенні методом оберненої тонкошарової хроматографії. Спосіб здійснюється наступним чином: Підготовка проби: 250 мл води поміщають у ділильну лійку місткістю 500 мл. До проби додають тричі порціями по 30 мл хлороформ, екстрагують дифеноконазол та паклобутразол протягом 1-2 хвилин, і після розділення фаз збирають нижній шар (хлороформ) в конічну колбу місткістю 250 мл. Об'єднаний екстракт сушать настоюванням над безводним сульфатом натрію (20-25 г) протягом 30 хвилин. Екстракт переносять у грушоподібну колбу для відгону розчинників місткістю 250 мл і концентрують на ротаційному випарнику при температурі водяної бані не вище за 45C до об'єму ~0,5 мл. Залишок розчинника випаровують на повітрі. Після підготовки проби до вимірювання сухий залишок екстракту переносять в градуйовану пробірку за допомогою ацетону (загальний об'єм 1 мл). Наступним етапом є визначення вмісту дифеноконазолу та паклобутразолу методом оберненої тонкошарової хроматографії. В оберненій тонкошаровій хроматографії нерухомою фазою є шар сорбенту, оброблений неполярною рідиною [5]. В данному випадку нерухо 4 мою фазою є шар силіказолю, імпрегнований вазеліновим маслом. Як рухома фаза при хроматографуванні використовувалась суміш ацетон+вода. Для підбору оптимальних умов розділення дифеноконазолу та паклобутразолу, а також враховуючи те, що розділення досліджуваних речовин та коекстрактивних речовин в значній мірі залежить від рухомої фази, була вивчена ефективність цього процесу із застосуванням різних співвідношень ацетону та води в рухомій фазі (табл. 2). У всіх випадках використовували детектуючий реагент бромфеноловий синій. Із табл. 2 видно, що при застосуванні рухомої фази ацетон+вода (1:3), рухомість досліджуваних речовин досить низька (дифеноконазол залишився на старті, значення Rf для паклобутразолу 0,2). При використанні рухомої фази ацетон+вода (2:3) рухомість паклобутразолу зросла, але значення Rf для дифеноконазолу залишилося досить низьким (0,2). Найкраще розділення досліджуваних речовин досягається при застосуванні рухомої фази ацетон+вода у співвідношенні 1:1. Отже встановлено (табл. 2), що для розділення дифеноконазолу та паклобутразолу найбільш ефективно використовувати імпрегновану вазеліновим маслом пластинку "Сорбфіл" з сумішшю ацетон+вода (1:1) як рухомої фази. Найменша концентрація дифеноконазолу та паклобутразолу, яка детектується за допомогою методу тонкошарової хроматографії, складає 1 мкг. Кількісне визначення проводили візуально, порівнюючи площі та інтенсивність забарвлення плям. Розробка і апробація способу одночасного визначення дифеноконазолу та паклобутразолу у пробі води проводилась в Інституті гігієни та екології Національного медичного університету імені О.О. Богомольця. Таблиця 1 Характеристика дифеноконазолу та паклобутразолу Діюча речовина Дифеноконазол Хімічна назва за IUPAC цис, транс-4-[4-метил-2(1Н-1,2,4-триазол-1ілметил)-1,3-діоксолан2-іл]-3-хлорфеніл-4хлорфеніловий ефір, співвідношення ізомерів цис-транс 45:55 Емпірична фор- Молекулярна мула маса Хімічна формула O Cl O Cl CH2 C19H17Cl2N3O3 O N 406,27 C15H20ClN3O 293,8 CH3 N N CH3 Паклобутразол (2RS, 3RS)-1-(4хлорофеніл)-4,4диметил-2-(1Н-1,2,4триазол-1-іл)пентан-3ол H3 C CH3 OH Cl N N N 5 64195 6 Таблиця 2 Рухомість дифеноконазолу та паклобутразолу (Rf) в різних умовах хроматографування Значення Rf в рухомій фазі Система рухомих розчинників (об'ємні співвідношення) Дифеноконазол Паклобутразол Ацетон+Вода (1:1) 0,3 0,65 Ацетон+Вода (1:3) старт 0,2 Ацетон+Вода (2:3) 0,2 0,5 Примітка: відносна похибка визначення Rf - 0,05. Джерела інформації:: 1. Перелік пестицидів і агрохімікатів, дозволених до використання в Україні. - Київ, Юнівест Медіа.-2010.-543 с. 2. Методические указания по газохроматографическому определению дифеноконазола (скора) в растительном материале, почве, воде. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Сб. № 22, част 1. - Киев, 1995.- С. 5964. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський 3. Методичні вказівки з визначення паклобутразолу у воді методом газорідинної хроматографії: MB № 967-2009 (подано до друку). 4. Клисенко М.А., Александрова Л.Г. Определение остаточных количеств пестицидов. Под ред. акад. АН УССР, чл.-кор. АМН СССР Ю.И. Кундиева. - Киев, "Здоров'я".-1983.-247 с. 5. Клисенко М.А., Александрова Л.Г., Демченко В.Ф., Макарчук Т.Л. Аналітична хімія залишкових кількостей пестицидів. Навч. посібник. Інститут екогігієни та токсикології їм… Л.І. Медведя. - Київ.1999.-238 с. Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601