Спосіб визначення генетичної схильності до розвитку хронічної лімфоцитарної лейкемії в осіб, які зазнали впливу іонізуючого випромінювання

Спосіб визначення генетичної схильності до розвитку хронічної лімфоцитарної лейкемії в осіб, які зазнали впливу іонізуючого випромінювання, що включає дослідження поліморфізмів генів XPD і XRCC1 в лімфоцитах периферичної крові, який відрізняється тим, що поліморфізм досліджують за допомогою полімеразної ланцюгової реакції з рестрикцією продуктів реакції і визначають ризик розвитку хронічної лімфоцитарної лейкемії після дії іонізуючого випромінювання. (19) (21) u201107548 (22) 15.06.2011 (24) 26.12.2011 (46) 26.12.2011, Бюл.№ 24, 2011 р. (72) ЧУМАК АНАТОЛІЙ АНДРІЙОВИЧ, АБРАМЕНКО ІРИНА ВІКТОРІВНА, БІЛОУС НАДІЯ ІВАНІВНА, КОСТІН ОЛЕКСІЙ ВОЛОДИМИРОВИЧ (73) ДЕРЖАВНА УСТАНОВА "НАУКОВИЙ ЦЕНТР РАДІАЦІЙНОЇ МЕДИЦИНИ НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ" 3 66223 осіб, які зазнали впливу іонізуючого випромінювання. Поставлена технічна задача вирішується через отримання генетичного матеріалу лейкемічних клітин, проведення двох ампліфікацій з набором специфічних праймерів до генів XRCC1 і ERCC2 (XPD), проведення рестрикції отриманих продуктів реакцій відповідними рестриктазами та встановлення експресії певних алелей двох генів. За умов носійства домінантних алелей генів XPD і XRCC1 ризик розвитку ХЛЛ на тлі дії IB (зокрема, постраждалих внаслідок Чорнобильської катастрофи) є меншим за очікуваний. За умов носійства поліморфних алелей генів XPD і XRCC1 ризик розвитку ХЛЛ на тлі дії IB (зокрема, постраждалих внаслідок Чорнобильської катастрофи) є більшим за очікуваний. На відміну від найближчого аналога, в даному випадку проаналізована генетична схильність до іншої форми онкологічного захворювання, викори 4 стано інший спосіб визначення поліморфізмів, який є технічно більш простим та менш витратним, враховується дія генотоксичного фактора (IB). Спосіб визначення генетичної схильності до розвитку хронічної лімфоцитарної лейкемії у осіб, які зазнали впливу іонізуючого випромінювання, був апробований при обстеженні 169 хворих на ВХЛЛ (54 пацієнта, які зазнали впливу IB - основна група; 115 хворих без впливу IB в анамнезі - група порівняння) та 121 особа без онкологічної патології (контрольна група) (табл.). Група неопромінених хворих на ХЛЛ не відрізнялась за розподілом генотипів від осіб контрольної групи без онкогематологічної патології. Водночас в основній групі була знижена кількість гомозигот домінантних алелей обох генів (генотип Lys751Lys/Arg399Arg) порівняно з контролем (р=0,03) та групою порівняння (р=0,014). Таблиця Результати сумісного визначення поліморфізмів Arg399Gln гена XRCC1 та Lys751Gln гена XPD, кількість хворих Групи обстежених Поліморфізми гена XPD Lys751Lys Lys751Gln Gln751Gln Генотип Arg399Arg XRCC1 Основна група Група порівняння Контрольна група Генотип Arg399Gln XRCC1 Основна група Група порівняння Контрольна група Генотип Gln 399Gln XRCC1 Основна група Група порівняння Контрольна групa Примітка: р1 - вірогідність розбіжностей між показниками в основній та контрольній групах; р2 вірогідність розбіжностей між показниками в групі порівняння та контрольній групі; р3 - вірогідність розбіжностей між показниками в основній групі та групі порівняння. Ризик розвитку ХЛЛ у осіб, гомозиготних за домінантною алеллю гена XPD, постраждалих внаслідок Чорнобильської катастрофи, зменшувався: OR = 0,36 (95 % довірчий інтервал 0,17170,785), особливо за умов одночасної гомозиготності за домінантною алеллю гена XRCC1: OR=0,29 (95 % довірчий інтервал 0,09-0,92). Навпаки, ризик розвитку ХЛЛ у носіїв поліморфної алелі гена XPD підвищувався: OR=2,24 (95 % довірчий інтервал 1,1049-4,5488), р=0,03. Таким чином, на основі визначення поліморфізмів генів XPD та XRCC1 можна передбачити вірогідність розвитку ХЛЛ на тлі дії IB. Корисна модель, що заявляється, може бути впроваджена в роботі медико-генетичних консультацій та медичних закладів, де проводяться обстеження осіб, які мають (або планують мати) контакт з IB. Вірогідність 4 18 24 11 13 23 7 3 6 p1=0,03 p2=0,771 p3=0,014 9 18 17 14 39 5 2 8 30 p1=0,761 p2=0,945 p3=0,682 5 0 7 9 7 5 2 0 4 p1=0,009 p2=0,342 p3=0,111 Джерела інформації: 1. A high-density SNP genomewide linkage scan for chronic lymphocytic leukemia-susceptibility loci / G. Sellick, E. Webb, R. Allinson et al. // Am. J. Hum. Genet.-2005. -Vol.77.-P. 420-429. 2. Genome-wide association study identifies a novel susceptibility locus at 6p21.3 among familial CLL / S.L. Slager, K.G. Rabe, S.J. Achenbach et al. // Blood.-2011. - Vol. 117, N6.-P. 1911-1916. 3. Shen MR. Nonconservative amino acid substitution variants exist at polymorphic frequency in DNA repair genes in healthy humans./ M.R. Shen, I.M. Jones, H. Mohrenweiser // Cancer Res. -1998. № 58 - P. 604-608. 4. Bolegenova NK. Genetic polymorphisms and expression of minisatellite mutations in a 3-generation population around the Semipalatinsk nuclear explosion test-site, Kazakhstan. / N.K. Bolegenova, B.O. Bekmanov, L.B. Djansugurova, R.I. Bersimbaev, S.A. Salama, W.W.Au //Int. J. Hyg. Environ. Health. 2009. - № 212. - P. 654-660. 5. Genetics polymorphism in DNA repair genes by base excision repair pathway (XRCC1) and homologous recombination (XRCC2 and RAD51) and 5 the risk of breast carcinoma in the Polish population / H. Romanowicz, B. Smolarz, J. Baszczynski et al. // Pol. J. Pathol.-2010. - Vol. 61, N4. - P. 206-216. 6. Smoking, DNA adducts and number of risk DNA repair alleles in lung cancer cases, in subjects with benign lung diseases and in controls / M. Peluso, A. Munnia, S. Piro et al. // J. Nucleic Acids.-2010.-P. 386798. 7. Mechanic LE. Polymorphisms in XPD and TP53 and mutation in human lung cancer./ L.E. Комп’ютерна верстка М. Мацело 66223 6 Mechanic, A.J. Marrogi, J.A. Welsh, E.D. Bowman, M.A. Khan, L. Enewold, Y.L. Zheng, S. Chanock, P.G. Shields, C.C. Harris // Carcinogenesis. -2005. - №26. - P. 597-604. 8. Zgemin F., Zuye Z. Reagent kit for detecting susceptibility of cancer of the lungs with SNPs of gene XRCC1 and ERCC2 // Patent CN101153345; C12R1/68. Application N CN20061116663; application data 28.09.2006. Publ. Data 02.04.2008. Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601