Штам вірусу західного нілу (virus nili occidentalis) для виготовлення специфічних імунобіологічних препаратів

Реферат: Штам вірусу Західного Нілу (Virus Nili Occidentalis) № 5374, ізольований в Україні від комарів Anopheles maculipenis, має високу вірулентність для лабораторних мишей, виражену репродуктивність в організмі тварин та культурі клітин, значну антигенну, імуногенну активність і більшу специфічність в серологічних реакціях порівняно із промислово-комерційним штамом Eg-101 і циркулюючими в Україні прототипними штамами - кандидат для виготовлення специфічних імунобіологічних препаратів: діагностикуму, імуноглобуліну та вакцини. Дозволяє суттєво підвищити достовірність діагностики та ефективність профілактики та лікування захворювань гарячкою Західного Нілу в країнах, де циркулюють споріднені віруси. UA 107248 U (12) UA 107248 U UA 107248 U 5 10 15 20 25 30 Корисна модель належить до медичної вірусології, а саме до лабораторної діагностики і профілактики захворювань, що викликаються вірусом Західного Нілу. Сьогодні відомі кілька штамів вірусу Західного Нілу, які використовуються за кордоном для виготовлення діагностичних та лікувально-профілактичних препаратів, серед них найбільш широко вживається еталонний штам Eg-101, виділений у 1951 році в Єгипті [1]. У природних вогнищах гарячки Західного Нілу циркулюють відмінні від вищезгаданих штамів збудники цієї інфекції, що спричиняють захворювання серед людей [2, 3]. Однак, виробництво специфічних імунобіологічних препаратів із місцевих штамів до цього часу не налагоджено. Недоліком штаму Eg-101 є його нижча авідність та специфічність у порівнянні із місцевими штамами, що циркулюють в Україні, а це негативно відображується на антигенній активності та профілактичній ефективності виготовлених із них препаратів. Задачею корисної моделі є новий оригінальний штам вірусу Західного Нілу, що є потенційним кандидатом для виготовлення імунобіологічних препаратів для діагностики та профілактики і лікування даної інфекції. Вирішити поставлену задачу можливо шляхом використання штаму № 5374 вірусу Західного Нілу, ізольованого в Україні від комарів Anopheles maculipenis. Він добре розмножується у перещеплюваній культурі клітин СНЕВ, проявляє високу репродуктивну активність в організмі лінійних і безпородних новонароджених та дорослих білих мишей. Гемаглютинуюча активність пропонованого штамму, отриманого в результаті пасажування на лабораторних мишах, становить 1:320 в зонах рН 6,0-6,4. Оптимальне значення рН - 6,2. Антигенні властивості штаму № 5374 вивчені в реакції зв'язування комплементу (РЗК) [4]. Як видно із даних, наведених в таблиці, антиген даного штаму в реакції з гомологічною імунною сироваткою давав титр 1:320, з імунною сироваткою еталонного штаму Eg-101-1:80. Стосовно інших штамів вірусу Західного Нілу спостерігається певна антигенна спорідненість штаму № 5374 із штамом № 4270 (титр становив 1:160), яка натомість менш виражена по відношенню до штаму № 3266 (1:40) і майже повністю відсутня щодо штаму 4444 (1:10). Отже, штам № 5374 має високу антигенну та імуногенну активність, значну репродуктивність в організмі лабораторних тварин і культурі клітин, проявляє відмінні характеристики по відношенню до інших штамів вірусу Західного Нілу і може бути запропонований для виготовлення імунобіологічних препаратів для РЗК та інших імуносерологічних реакцій (РНІФ, ΡΗΓΑ, ΡΓΓΑ) [4]. Таблиця Антигенні зв'язки штамів вірусу Західного Нілу, визначені в РЗК. Антигени Eg-101 3266 4270 4444 Імунні сироватки Eg-101 320/320* 20/320 20/160 40/320 3266 40/640 640/640 160/640 80/640 4270 10/160 80/160 160/160 20/160 4444 20/160 80/160 40/20 160/160 5374 80/320 40/160 160/320 10/160 5374 80/320 80/320 160/160 10/160 320/320 Примітка: 10* - титри подані у вигляді обернених величин 35 40 45 Пасажування штаму № 5374 вірусу Західного Нілу здійснюється класичним способом шляхом інокуляції вірусовмісного матеріалу в живих чутливих системах, у тому числі в організмі лабораторних мишей. Безпородних білих мишей вагою 6-8 грамів заражають у мозок по 0,03 мл вірусною суспензією штаму № 5374. При появі виражених змін зі сторони центральної нервової системи на 4-6 добу мишей забивають за правилами евтаназії, асептично добувають мозок і шляхом розтирання мозку у фарфоровій ступці із додаванням фізіологічного розчину готують 10 % завісину мозкової тканини. Отриману завісину центрифугують при 1500 об/хв протягом 10 хв. Рідину, що утворилась над осадом, використовують для зараження наступної партії мишей. Після проведення 2-3 пасажів інфікований мозок мишей використовується для приготування діагностикуму [4]. Таким чином, штам № 5374 вірусу Західного Нілу підтверджує гетерогенність популяції вірусів Західного Нілу за рядом біологічних властивостей та проявляєспорідненість із іншими аналогічними штамами, що циркулюють в природі. Він проявляє суттєві відмінності від збудників даного виду, зберігаючи при цьому високу специфічність, антигенну, імуногенну та 1 UA 107248 U 5 10 15 репродуктивну активність і відповідає регламентованим параметрам відбору штамів-кандидатів для виробництва імунобіологічних препаратів [5]. Використання цього штаму для виготовлення специфічного діагностикуму, імуноглобуліну та культуральної вакцини дозволить суттєво підвищити достовірність діагностики та ефективність профілактики і лікування захворювань гарячкою Західного Нілу в країнах, де циркулюють споріднені віруси. ДЖЕРЕЛА ІНФОРМАЦІЇ: 1. Львов Д.К., Клименко С.М., Гайдамович С.Я. // Арбовирусы и арбовирусные инфекции. М.: Медицина, 1989. - 335 с. 2. Виноград И.А. Арбовирусы в Украинской ССР и их медико-биологическое значение: Дис. д-ра мед. наук. - Львов, 1983. - 505 с. 3. Лозинський Ι.Μ., Виноград Ι.Α. Арбовіруси та арбовірусні інфекції у лісостеповій зоні України // Мікробіол.журнал. - 1998. - Т. 60, № 2. - С. 49-60. 4. Арбовирусы. Сборник научних трудов. - М., 1986-180 с. 5. Верета Л.А., Воробьева М.С. Природная гетерогенность и целенаправленний отбор штамов вируса клещевого енцефалита // М.: Медицина, 1990. - 123 с. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 20 25 Штам вірусу Західного Нілу (Virus Nili Occidentalis) № 5374, ізольований в Україні від комарів Anopheles maculipenis, що має високу вірулентність для лабораторних мишей, виражену репродуктивність в організмі тварин та культурі клітин, значну антигенну, імуногенну активність і більшу специфічність в серологічних реакціях порівняно із промислово-комерційним штамом Eg-101 і циркулюючими в Україні прототипними штамами - кандидат для виготовлення специфічних імунобіологічних препаратів: діагностикуму, імуноглобуліну та вакцини. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2