Малеїльований галотанін з протимікробними властивостями

Реферат: Малеїльований галотанін з протимікробними властивостями. Модифікацію галотаніну проводять шляхом ацилування малеїновим ангідридом його структури при співвідношенні галотанін:малеїновий ангідрид 1:4. UA 116810 U (12) UA 116810 U UA 116810 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до біотехнології та фармацевтичної галузі, стосується похідних малеїльованих галотанінів, що проявляють антибактеріальні властивості, та може бути використана для розширення спектра антибактеріальних засобів шляхом модифікації для подальшого використання при розробці фармацевтичних препаратів. Необґрунтованість режиму антибіотикотерапії має не тільки важкі індивідуальні наслідки для пацієнта, але й сприяє подальшому розповсюдженню інфекційного агенту в межах стаціонару. Пошук та розробка протимікробних лікарських засобів залишається актуальною задачею сучасної медицини та фармації. При цьому ефективність існуючих на фармацевтичному ринку антибактеріальних засобів знижується пропорційно зростанню обсягів їх використання, що зумовлено поширенням резистентних штамів. Нами запропоновано речовину з антибактеріальними властивостями - малеїльований галотанін (МГ). Відомий спосіб синтезу фосфорильованого галотаніну для обробки шкіри та слизових оболонок для косметології та фармації. Модифікований галотанін має помірні антибактеріальні властивості та ефект його пов'язаний з вивільненням галотаніну в шкірі чи слизових [Заявка на Патент США US 2008/0095866 А1, від 24.04.2008]. Недоліком прототипу є використання складного та екологічно небезпечного синтезу фосфорильованих похідних з токсичних хлорпохідних фосфорної кислоти. Окрім того, отримана речовина погано розчинялася у воді, нестійке до окислення, а антибактеріальний ефект проявлявся виключно у високих дозах, які перевищували 1 %. В основу корисної моделі поставлена задача модифікувати похідні галотаніну малеїльований галотанін (МГ). Поставлена задача вирішується шляхом комбінаторного синтезу малеїльованого складноетерного похідного галотаніну із співвідношенням танін:малеїновий ангідрид від 1:1, 1:2 до 1:4. Немодифікований галотанін не проявляв антибактеріальну активність по відношенню до дослідних мікроорганізмів. Малеїльований галотанін із співвідношенням малеїновий ангідрид:галотанін менше 1:1 не проявляв антибактеріальної активності, при співвідношенні більше за 1:4 малеїновий ангідрид не розчинявся у розчині, що свідчило про відсутність доступних акцепторних груп для атаки малеїновим ангідридом. У зв'язку з тим, що ацилюванню піддається тільки частина фенольних гідроксилів, спостерігається утворення великої кількості комбінаторних похідних молекули галотаніну - більше 10 тис. речовин. Вказані речовини не тільки взаємодіють з мішенню, але й здатні утворювати супрамолекулярні комплекси один з одним з індукцією пориноподібних структур у мембрані мікроорганізмів. Така реакція комплексоутворення йде тільки у випадку, коли заміщеними є тільки частина доступних для модифікації фенольних груп. Дана корисна модель пропонує високорозчинний МГ зі ступенем хімічної модифікації 1:4 з антибактеріальною властивістю. Отримані засоби можуть бути використані в фармації для розробки високоефективних протимікробних засобів, які можуть використовуватись при лікуванні гнійно-запальних захворювань. Приклад 1. Синтез МГ здійснюється таким чином: 1,0 г галотаніну розчиняють у 40 мл дистильованої води (t=70-80 °C), додають 1,0-4,0 г малеїнового ангідриду, розчин перемішують до повного розчинення останнього. При охолодженні до +5 °C випадає осадок МГ, який перекристалізовували аналогічним чином з дистильованої води. Приклад 2. Дослідження антибактеріальних властивостей отриманого комплексу, здійснювалося методом серійних розведень. Також вивчали протимікробні властивості МГ при модифікації 1:1 та 1:2. Дані, наведені у прикладах та таблиці. В дослід брали стандартні штами Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Bacillus subtilis ATCC 6633, Proteus vulgar is ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, які регламентовані ВОЗ для вивчення протимікробної дії препаратів та клінічні штами: Staphylococcus aureus 1/239-1, Escherichia coli 1/254-1, Pseudomonas aeruginosa 2/116-1. Для визначення антибактеріальної дії дослідної речовини мікроорганізми вирощували на поживному агарі при t=37 °C. Термін культивування мікроорганізмів складав 24 години. Мінімальна інгібуюча концентрація (МІК) встановлювалась за найменшою концентрацією досліджуваної речовини, яка пригнічувала видимий ріст культури. Для визначення мінімальної бактерицидної концентрації (МБцК) виконували дозовані висіви на тверде поживне середовище (агар Мюллер-Хінтона) культуральної рідини з усіх пробірок, у яких не спостерігали росту мікроорганізму. За МБцК вважали найнижчу концентрацію, яка викликала загибель не менше 99,9 % бактерій. Облік результатів проводили через 24-48 годин. Дані наведені в таблиці. 1 UA 116810 U Таблиця Антибактеріальна активність похідного малеїльованого галотаніну Мікроорганізми S. aureus ATCC 25923 Е.соlі АТСС 25922 P. vulgarisATCC 4636 P. aeruginosa ATCC 27853 В. subtilis ATCC 6633 S. aureus 1/239-1 E. coli 1/254-1 P. aeruginosa 2/116-1 5 Мкг/мл Малеїніл-галотанін Малеїніл-галотанін Малеїніл-галотанін (1:2) (1:1) (1:4) MIK МБцК МІК МБцК МІК МБцК 62,5 125,0 31,25 62,5 15,6 31,25 31,25 62,5 31,25 62,5 15,6 31,25 125,0 250,0 125,0 250,0 62,5 125,0 125,0 250,0 125,0 250,0 62,5 125,0 125,0 250,0 62,5 125,0 62,5 125,0 125,0 250,0 125,0 250,0 62,5 125,0 125,0 250,0 125,0 250,0 62,5 125,0 250,0 500,0 125,0 250,0 62,5 125,0 В результаті проведенного дослідження антимікробної активності було встановлено, що активним за протимікробними властивостями виявились частково малеїльований галотанін в модифікації 1:4. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 Малеїльований галотанін з протимікробними властивостями, який відрізняється тим, що модифікацію галотаніну проводять шляхом ацилування малеїновим ангідридом його структури при співвідношенні галотанін:малеїновий ангідрид 1:4. Комп’ютерна верстка М. Мацело Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2