Спосіб кількісного аналізу фітину в рослинних кормах

Изобретение относится к а н а л и тической химии и может быть испЬльэовано для определения фитина в р а с тительных кормах методом жидкостной хроматографии. Цель изобретения повышение чувствительности и с о к р а щение времени анализа. Фитин экстрагируют из растительных кормов соляной к и с лотой и отделяют экстракт от нерастворимого осадка центрифугированием. Полученный э к с т р а к т пропускают ч е р е з хроматографическую колонку с сильнокислотным компонентом, содержащим 0,1-1 мг-экв железа в 1 г катионита, Б качестве элгоента используют 0,4-* 0,8 М раствор соляной кислоты. Определяют фитин спектрофотометрически в УФ-спектре по светопоглощению фитинового комплекса с железом. 2 э . п . ф-лы, 2 т а б л . (Л 1 1432399 изобретение относится к аналитической химии н может быть использовано для определения фитина в растительных кормах методом жидкостной хроматографии. Цель изобретения ~ повышение чувствительности и сокращение времени анализа. Способ осуществляют следующим об- 10 разом. Экстрагируют фитин из растительных кормов соляной кислотой и отделяют экстракт от нерастворимого осадка центрифугированием. Полученный 15 экстракт пропускают через хроматографическую колонку с сильнокислотным катпонптом, например полистирол ьным катионптом КУ-2, содержащим 0,1—1,0 мг-экв железа в 1 г катиони- 20 т а , В качестве элюепта используют 0,4-0,С М раствор соляной кислоты. Определяют фитин спектроботометрическн в УФ-спектре по светопоглощепию фитинового комплекса с железом. В 25 качестве раствора сравнения используют элюент, пропущенный через колонку перед введением э к с т р а к т а . корма 0 , 2 - 1 , 0 заливают 0,35 М соляной кислотой, экстрагируют фитин в течение 120 мин и отделяют экстракт фитина. 0,5-5 мл экстракта фитина вводят в хроматографігческую колонку с катионитом, содержащим 0,1-1,0 мг-экв железа в I г катионита. Образовавшийся в колонке фитиновый комплекс с железом элюируют 0 , 4 - 0 , 8 М соляной кислотой, отбирают фракцию, с о - __ держащую фитиновый комплекс с железом, по времени выхода из колонки и спектрофотометрируют в УФ-спектре при 240 нм. Расчет фитина ведут по величине светопоглощеиия фитинового комплекса с железом. Результаты определения фитина в растительных кормах представлены в табл. 2. Аналогично определяют фитин в других растительных кормах, при этом относительное стандартное отклонение f не превышает С,05. Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я 1. Способ количественного анализа фитина в растительных кормах, включающий экстракцию фитина соляной к и с лотой, отделение экстракта от нерастворившегося осадка центрифугированием и определение фитина, о т л ич а ю щ и й с я тем, ч т о , с целью повышения чувствительности и сокращения времени анализа, экстракт после центрифугирования пропускают через хроматографическую колонку с сильнокислотным катионитом, содержащим 0 , 1 - 1 , 0 мг-экв з-елеза в I г катионита, элюируют фитиновый комплекс с железом из колонки 0 , 4 0,8 молярной соляной кислотой и определяют фитин спектрофотометрически Результаты определения фитина в искусственных растворах представлены '45 в УФ-спектре по светопоглощению фитинового комплекса с железом. в табл. 1 ь. Как видно из представленных в 2. Способ по п. 1, о т л и ч а табл. I данных, чувствительность опю щ и й с я тем, что в качестве ределения фитина в искусственных сильнокислотного катионита испальзурастворах равна 0,0015%. Относи50 ют полистирольиый кятионит КУ-2, тельное стандартное отклонение не 3 . Способ по п. 1, о т л и ч а юпревышает 0 , 0 5 . Определению фитина не мешают более, чем 60-кратиые щ и и с я тем, что перед введением избытки неорганических фосфатов. экстракта через колонку пропускают элюент, используемый в качестве П р и м е р 2. Определение фити55 раствора сравнения. на в растительных кормах. Навеску П р и м е р 1. Определение фитина в искусственных растворах. 0 , 5 30 5 мл исходного раствора фитина в 0,33 М соляной кислоте вводят в хроматографическую колонку с катионитом, содержащим 0 , 1 - 1 , 0 мг-экв железа в 1 г катионита. Образовавшийся в колонке фитиновый комплекс с железом элю- 35 ируют 0 , 4 - 0 , 8 М соляной кислотой, о т бирают фракцию фитинового комплекса с железом по времени выхода из колонки н спектрофотометрируют з УФ-спектре при 240 им. Расчет содержания Фи- 40 тина ведут по величине свегопоїлощения фитинового комплекса с железом. 1432399 Т а б л и ц а Концентрация фитина, % п Найдено фитина, X 0,00150 10 0,0014 0,00150 5 0,0016 0,05 0,00300 10 0,0031 0,04 0,01200 10 0,0124 0,04 • 0,06000 10 0,0580 0,02 0,10000 10 0,1030 0,04 0,17000 10 0,1725 1 0,02 f 0,05 Определение фитина ведут в присутствии 0,1% неорганического фосфата из растительного корма от нерастворившегося осадка центрифугированием* і Т а б л и ц а Объем Введено фитина, 7с на абс. сухое вещество 2 Зерно овса ВНШШИ 10 0,023 0,05 Без добавки 10 0,022 0,04 0,020 10 0,040 0,05 Без добавки 10 0,265 0,03 10 0,586 0,05 Без добавки 10 0,285 0,05 10 0,582 0,02 Без добавки 10 0,272 0,04 0,300 Зерно пшеницы 0,04 ' 0,300 Зерно кукурузы 0,012 0,300 Листья и .стебли кукурузы 10 0,010 Люцерна п Найдено Фитина, % на абс. сухое вещество 10 0,581 0,03 Без добавки Заказ 5418/36 Тираж 847 f Подписное Произв.-полигр. пр~тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4