Спосіб одержання лікувального препарату на основі вітаміну д3

1 Способ получения лечебного препарата на основе витамина D3, предусматривающий эмульгирование витамин D3 содержащего препа рата, о тли чающийся тем, что в качестве эмуль гатора используют фосфатидилхолин, в качестве витамин Оз содержащего препарата - видехол, а эмульгирование осуществляют путем растворения в органическом растворителе эмульгатора и холестерина в молярном соотношении 2 1с последующим смешиванием со спиртовым раствором видехол а и а-токоферола ацетата, после чего смесь упаривают, диспергируют в физиологическом растворе, отделяют липидные компоненты и сушат, причем соотношение эмульгатора к витаминам Оз и Е составляет, соответственно, (мас%) 10 (0 ,2- 2 ) (0,1-1 ) 2 Способ по п . 1 , о тлича ющийся тем , что в качестве органического растворителя используют хлороформ Предлагаемое техническое решение относится к лекарственным препаратам, содержащим биологиче ски активные ингредиен ты и может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности для производства лечебно-профилактических препаратов, применяемых как в медицине, так и в ветеринарии, преимуществен* но для инъекций. Известны способы получения лечебных препаратов, содержащих витамин D, однако эти способы не обеспечивают получение эффективного и в то же время экономически выгодного лечебно-профилактического препарата. Так, например, известен способ получения липосом, включающий процесс растворения эмульгатора фосфатидилхолина в органическом растворителе с последующим диспергированием полученного состава в физиологическом растворе /См. авт. свид. СССР № 1186212 по кл. А 61 К 9/22, 1983г./ Известный способ не может быть использован для получения лечебного препарата. Наиболее близким аналогом по технической сущности заявляемому те хническому решению является способ получения лечебного препарата на основе витамина Da, описанный в авт. св. СССР № 980722, кл А 61 К 31/59, приоритет 13 01 81 г., заявитель НПО "Витамины", который расширил спектр активности по сравнению с ана логом Этот способ включает эмульгирование расплава витамина D3 в присутствии антиоксиданта и жидкого эмульгатора с последующими гомогенизацией и гранулированием, причем эмульгирование витамина Эз проводят в расплаве пальмитиновой или стеариновой кислоты или их метиловых или этиловы х эфиров при температуре 25 - 70°С Известный способ имеет малую эффективность при лечебно-профилактических мероприятиях вследствие отрицательного воздействия детергентов желудочно-кишечного тракта на витамин D3 и более низкой проницаемости его через мембраны кишечника, что приводит к более низкому содержанию витамина D3 в организме, образованию активного метаболита витамина Ds, иного распределения витамина по клеткам печени. Задачей заявляемого технического решения является создание способа получения препарата на основе витамина D3, позволяющего получи ть высокоэффективное лечебно-профилактическое средство для профилактики и лечения D-гиповитаминоза, нарушений минерального обмена, костных заболеваний, пареза, заболеваний желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой системы и иммунодефицитного состояния, а также возможность его введения в организм путем инъекций. см о О) о> 27479 Решение поставленной задачи достигается тем, что в способе получения лечебного препарата на основе витамина Оз, предусматривающем эмульгирование витамин Оэ содержащего препарата, согласно изобретению, в качестве эмульгатора используют фосфатидилхолин, в качестве ви тамин Рз содержащего препарата - видехол, эмульгирование осуществляют путем растворения в органическом растворителе (например, хлороформе) эмульгатора и холестерина в молярном соотношении 2 : 1 с последующим смешиванием со спиртовым раствором видехола и а-токоферола ацетата, после чего смесь упаривают, диспергируют в физиологическом растворе, отделяют липидные компоненты и сушат, причем соотношение эмульгатора к ви таминам D3 и Е составляет, соответственно, (мас.%) Введение в способ получения лечебного препарата путем эмульгирования витамин Оз содержащего препарата новых признаков, заключающи хся в растворении холестерина в эмульгаторе в молярном соотношении 1:2 и использовании в качестве одного из компонентов витаминов группы D видехола, а также дополнительное введение а-токоферола ацетата (витамина Е) при соотношении эмульгатора к витаминам Оз и Е (мас.%) 10:(0,2-2): (0,1-1). позволяет получить новый технический результат, выразившийся в получении стабильной формы витаминного препарата, устойчивого к воздействию желудочно-кишечных де тергентов, с повышенной проницаемостью действующих компонентов через мембраны кишечника, что находится в прямой причинно-следственной связи с совокупностью существенных признаков объема притязаний. При запредельных значениях отношения эмульгатора к холестерину не достигается максимальная стабильность препарата, а при запредельных значениях соотношения эмульгатора к витаминам увеличивается процент не включенных в субстан цию (раствор) витаминов. Использование в качестве активного компонента видехола (комплекс витамина Da с холестерином) вместо витамина ' Рз значительно увеличивает сохранность витамина из в готовой лекарственной форме препарата. Способ заключается в следующем. Фосфа тидилхолин и кристаллический холестерин растворяют в органическом растворителе (например, хлороформе), смешивают его со спиртовым раствором витаминов D3 (видехол) и Е (а-токоферола ацетат). Полученный таким образом состав упаривают в вакуумном испарителе до образования пленки липидов и добавляют к ней физиологический раствор, насыщенный инертным газом. Смесь подвергают ультразвуковой обработке, а затем центрифугируют с последующим разделением на фракции и подвергают лиофильной сушке. Пример 1. 1 г фосфа тидилхолина , 0,26 г кристаллического холестерина в растворе хлороформа смешивают с 40 мг 50% кристаллического видехола (или 20 мг кристаллического витамина D3) и 10 мг альфа токоферола ацетата (витамин Е) в спирте. Полученный раствор упаривают на вакуумном роторном испарителе при 40°С до образования тонкой пленки липидов. К полученной пленке добавляют 20 мл физиологического раствора, насыщенного инертным газом. Полученную смесь подвергают ультразвуковой обработке в течение 20-30 мин при частоте 22 кГц при температуре не выше 10°С. Диспергированную смесь центрифугируют при 6 000 об. в мин в течение 30 мин, надосадочную жидкость разливают по 1 мл во флаконы или ампулы и лиофилизируют. В результате получают препарат, содержащий в одной упаковке: Витамин D3 2 мг (80 000 ME ) Витамин Е 0,7 мг. Пример 2. 1 г фо сфатидилхолина, 0 ,26 г кристаллического холестерина в растворе хлороформа смешивают со 100 мг 50% кристаллического видехола (или 50 мг кристаллического витамина Эз) и 30 мг витамина Е в спирте. Полученный раствор насыщают инертным газом и упаривают на роторном испарителе при 40°С до образования тонкой пленки липидов. К полученной пленке добавляют 20 мл физиологического раствора, смесь подвергают ультразвуковой обработке в течение 20-30 мин при частоте 22 кГц при температуре не выше 10вС. Диспергированную смесь центрифугируют при 6 000 об. в мин в течение 30 мин, надосадочную жидкость разливают по 1 мл во флаконы или ампулы и лиофилизируют. В результате получают препарат, содержащий в одной упаковке: - ВитаминD3 2 ,5 м г (10 0000 ME) Витамин Е 1,2 мг. Пример 3. 1 г фосфа тидилхолина, 0,26 г кристаллического холестерина в растворе хлороформа, смешивают с 400 мг 50% кристаллического видехола (или 200 мг кристаллического витамина D3) и 60 мг витамина Е в спирте. Полученный раствор насыщают инертным газом и упаривают на роторном испарителе при 40°С до образования тонкой липидной пленки. К полученному сухому остатку добавляют 20 мл физиологического раствора, насыщенного инертным газом, смесь подвергают ультразвуковой обработке при частоте 22 кГц в течение 20-30 мин при температуре не вы ше 10°С. Диспергированную смесь центрифугир уют при 6 000 об. в мин в течение 30 мин, надосадочную жидкость разливают по 1 мл во флаконы или ампулы и лиофилизируют. В результате получают препарат, содержащий в одной упаковке: Витамин D3 4,0 мг (160 000 ME) витамин Е 2,0 мг. Пример 4. 1 г фосфа тидилхо лина, 0,26 г кристаллического холестерина в растворе хлороформа смешивают с 200 мг 50% кристаллического виде хола (или 100 мг кристаллического ви тамина Оз) и 100 мг витамина Е в спирте. Полученный раствор насыщают инертным газом и упаривают на роторном испарителе при 409С до образования тонкой пленки липидов. К сухому остатк у добавляют 20 мл физиологического раствора, насыщенного инертным газом, смесь подвергают ультразвуковой обработке при частоте 22 кГц в течение 20 -30 мин при температуре не вы ше 10°С. Диспергированную смесь центрифугир уют при 6 000 об. в мин в течение 20-30 мин, надосадочную жидкость разливают по 1 мл во флаконы 27479 или ампулы и лиофилизир уют. В результа те получают препарат, содержащий в одной упаковке: Витамин D3 2 ,5 м г (10 0000 ME) Витамин Е 4,5 мг. Пример 5. Для исследования биологической активности предлагаемого препарата проведены опыты на животных. Для этого крысят отъемышей массой 30-40 г содержали на диете, лишенной витамина Оз в течение 30 дней (1-я группа). Остальным группам животных, содержащихся на этой диете, вводили ежедневно в течение 30 дней: II гр уппа - 10 ME ви тамина Оз в растворе масла перорально; Остальным группам вводили витамин Оз в виде нового препарата: III группа -10 ME ви тамина Эз перорально; IV группа - 2 ME витамина Оз подкожно; V группа - З МЕ витамина D3 подкожно; VI группа - 0,26 ME витамина Оз внутримы шечно; VII гр уппа - 1 ME ви тамина Оз вн утримы шечно; VIII гр уппа - 3 ME ви тамина Оз вн утримы шечно. В Таблице 1 предста влены данные о содержании в сыворотке крови основной гормонально активной формы витамина Оз и минеральных компонентов - кальция и фосфора. Введение нового препарата в физиологических дозах перорально по сравнению с витамином Оз в Группа Общее количество введенного Оз, ME растворе масла приводит к значительному повышению обеспеченности организма минеральными компонентами и активной формы витамина Оз, уровень которого в 10 раз выше в этой группе, что свидетельствует об улучшении проницаемости заявленного препарата через мембраны кишечника и повышении стабильности витамина Оз к воздействию желудочно-кишечных детергентов. При парентеральных способах введения заявленного препарата в дозах значительно ниже тех, которые вводились перорально, содержание гормональной формы витамина Оз во много раз превышает его уровень у крыс, получа вши х этот препарат перорально. И только при внутримышечном введении 0,26 ME ви тамина Оз в заявленной форме, что в 38 раз ниже дозы коммерческих препаратов витамина при их лероральном применении, содержание 1,25(ОН)2Оз близко к тем показателям, которые наблюдаются во II гр уппе. Высекая активность заявленного препарата при парентеральных способах е го введения является следствием большего поглощения витамина Оз печенью, где происходит первый этап его гидроксилирования в 25OHD3, большего его погло щения непаренхимальными клетками печени, которые по отношению к витамин у D выполняют роль депо, и более высокой активности витамин Оз 25-гидроксилазных ферментов, вследствие уменьшения их ингибирования субстратом и 25ОЬЮз ввиду особенностей его распределения по клеткам печени. Содержание исследуемых компонентов 1,25(OH)aD, мг/мл кальций, ммоль/л фосфор, ммоль/л I 0 9.5 ±0.3 1,50 ±0,10 0,7 ± 0,05 II 300 36,9 ±1,3 2,20 ±0,10 1,34±0,07 III 300 372,0 ±12,0 2,50 ± 0,20 1,47 ±0,05 IV 60 275,0 ± 8,0 2,58 ± 0,09 1,50 ±0,07 V 90 386,0 ±15,0 3,00 ±0,08 2,00 ± 0,04 VI 7,8 62,0 ±1,0 2,30±0 ,09 1,41 ±0,01 VII 30 230,0±9,0 2,42± 0,06 1,62 ±0,02 VIII 90 414,0± 9,0 3,20± 0,09 2,20± 0,04 Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101 (03 12 2) 3-7 2-8 9 ( 0 31 22) 2- 57- 03 I