Спосiб одержання вiтамiн д3 – бiлкового препарату “вiдеїн”

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно, к производству витаминных препаратов в таблетированной форме. Получаемый согласно изобретению препарат может быть использован для профилактики и лечения Д-гипевитаминоза и рахита у детей и разных форм костных патологий. Известен лабораторный способ получения комплекса на основе жирорастворимых витаминов и белка, где казеин растворяют в щелочи, а витамины (например Д2, Д3, А, Е) - в органическом растворителе, в коротый предварительно вводят ледяную уксуную кислоту. После смешивания полученных растворов выпавший осадок, представляющий собой витамин-белковый комплекс, центрифугируют, сушат, измельчают. Полученные комплексы содержат до 2 % витаминов Д2 и Д3, до 6% витамина А и до 8% витамина Е [1]. Известен также производственный способ получения витамин Д-белкового препарата "Видеин" для сельского хозяйства, где растворенный в щелочном растворе казеин смешивают со спиртовым концентратом витамина Д3 [2]. Полученный комплекс осаждают уксусной кислотой, фильтруют, измельчают и сушат. Выход витамина Д3 составляет 87,8%, активность 200000 ME на 1 г сохраняется в течение 0,5 года. Однако, известный способ обладает рядом недостатков: в качестве активного начала используют спиртовый концентрат витамина Д3, который содержит около 12% примесей в виде промежуточных продуктов получения витамина Д3, например: 7-дегидрохолестерин, люмистерин и ряд продуктов окисления. Получаемый препарат может использоваться только в качестве кормовой добавки для сельского хозяйства. В основу изобретения поставлена задача усовершенствовать производственный способ получения витамин Д3-белкового препарата "Видеин" путем улучшения качества очистки препарата, что обеспечит повышение активности и стабильности препарата и, как следствие, улучшение терапевтического действия при лечении рахита. Эта задача решена в способе получения витамин Д3-белкового препарата, включающем растворение казеина в щелочи, а витамин Д3-содержащего препарата в спирте, смешивание обоих растворов, осаждение витамин Д3-белкового комплекса уксусной кислотой с последующим центрифугированием, гранулированием и сушкой, где, согласно изобретению: - казеин предварительно очищают путем растворения в щелочи, осаждения уксусной кислотой, грануляции и сушки; - в качестве витамин Д3-содержащего препарата используют виде хол, который смешивают с витамином Е в соотношении 1:1, растворяют в спирте; и дополнительно введена операция получения готовой лекарственной формы: - после сушки витамин Д3-белковый комплекс смешивают с сахарным гранулятом и стеариново-кислым кальцием в соотношении соответственно (5-2):(18,6-22,0):0,24 и полученную массу таблетируют. При этом сахарный гранулят получают п утем увлажнения сахара поливинилпирролидоном в соотношении (18,6-22,0):0,11. Предложенная технологическая схема условия и режимы операций позволяют получить высокоочищенный препарат для применения в медицине. Выход витамина Д3 - 98,6-99,0%. В одной таблетке полученного препарата (20 или 50 мг субстанции) содержится 2 или 5 тыс. ME витамина Д3 (из расчета 100 тыс. ME на 1 г). Препарат сохраняет 100% активность в течение 2,5 лет и 95-90% активность в течение 3-4 лет. Исследование биологической активности нового препарата показывает существенные преимущества по сравнению с известными препаратами витамина Д3 в спирте и масле, а именно высокий терапевтический эффект при лечении рахита. Способ иллюстрируется примерами конкретного выполнения. Общая схема способа включает три основных этапа: - предварительная очистка казеина; - получение витамин Д3-белкового комплекса; - получение таблетированной формы препарата "Видеин". Конкретизация качественного и количественного состава для поэтапного осуществления способа показана в таблице 1 в примерах 1-6. I. Предварительная очистка казеина. Реактор с мешалкой и нагревателем заполняют дистиллированной водой при 40°С и добавляют гидроокись натрия до конечной концентрации 0,2 ± 0,05%. затем вводят казеин до концентрации 3-3,5%, перемешивают до полного растворения в течение 20-30 мин. при t 40°С. Фильтруют через два слоя хлопчатобумажной ткани. Осаждают казеин в реакторе при работающей мешалке в течение 1-2 мин. ледяной уксусной кислотой до достижения рН 4,5-4,6. После отстаивания в течение 10 мин. осадок фильтруют, промывают 2-3 раза дистиллированной водой. Жидкость снова центрифугируют, полученный осадок пропускают через сито 1,0-2,0 мм и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 45 ± 1°С в течение 4 часов. II. Получение витамин Д3-белкового комплекса. В реакторе очищенный казеин растворяют в гидроокиси натрия до конечной концентрации 3-3,5%. Выход казеина составляет 98 ± 2%. Фильтруют через два слоя хлопчатобумажной ткани. Видехол берут из расчета 0,0025 кг витамина Д3 на 1 кг казеина. Альфа-токоферол ацетат (витамин Е) берут в равном количестве - 0,0025 кг. В мернике со спиртом растворяют соответствующие навески витаминных препаратов и смешивают с уксусной кислотой. Приготовленную витаминную смесь вводят тонкой струёй в реактор и перемешивают с очищенным казеином в течение 1-2 мин при температуре не выше 40°С. Смесь отстаивают, фильтруют. Осадок промывают дистиллированной водой, центрифугируют для обезвоживания полученного витамин Д3-белкового комплекса. Комплекс гранулируют через сито с диаметром отверстий 1-2 мм и сушат при температуре не выше 45°С при перемешивании. Высушенный препарат измельчают, просеивают через сито с диаметром отверстий 0,3 мм. III. Полученный таблетировамной формы препарата "Видеин". Сахарный гранулят получают путем смешивания измельченного сахара с 10% поливинилпирролидоном, просеивают через сито (ячейки диаметром 1 мм), просушивают на воздухе до остаточной влажности 0,15%. Сухой гранулят снова просеивают через это сито. В смеситель загружают сахарный гранулят (диаметр частиц 1 мм), витамин Д3-белковый комплекс, кальция стеарат и перемешивают до получения однородной массы в течение 15-20 мин. Таблетирование осуществляют на роторном таблеточном машинопрессе РТМ-12. Получаемые таблетки имеют плоскоцилиндрическую форму с диаметром 8 ± 0,2 мм и средней массой 0,24 ± 0,01 г. Готовые таблетки препарата "Видеин" расфасовывают в контурные ячейковые упаковки по 10 шт. Активность препарата по витамину Д3 2000 ME (субстанция весом 20 мг) или 5000 ME (субстанция весом 50 мг). Выход витамина Д3 - 98,6 ± 0,2 %. Пример 7. Биологическую активность препарата "Видеин" изучают на крысах-отьемышах массой 30-40 г которых разделяют на 5 групп по 5 животных и содержат в течение 30 дней на витамин Д-дефицмтной диете. Отрицательным контролем (I группа) служит гр уппа животных, которая получает только витамин Д-дефицитмую диету (рахит); II группа животных получает 10 ME витамина Д3 в масле; III группа получает 10 ME витамина Д2 в спирте. Животные IV и V гр упп получают препарат "Видеин" в дозах 10 ME и 5 ME витамина Д3 соответственно. Препараты витамина Д вводят перорально с помощью зонда. Учитывая, что биологическая и лечебная эффективность препаратов группы витамина Д связана с наличием в организме их биологически активных метаболитов: 25-оксихолекальциферол (25-ОНД), 24,28диоксихолекальциферол (24,25-ОНД), 1,25-диоксихолекальциферол (1,25-(ОН)2Д), во все х исследуемых группах в сыворотке крови определяют содержание указанных метаболитов витамина Д, а также уровень минеральных компонентов и активность щелочной фосфатазы. Полученные результаты представлены в таблице 2. Сопоставление данных показывает, что высокий уровень содержания активных метаболитов витамина Д в сыворотке крови наблюдается у животных, получавши х новый препарат "Видеин". Эти данные коррелируют с уровнем минеральных компонентов в сыворотке крови этих животных. Полученные результаты свидетельствуют, что "Видеин" обладает высокой биологической активностью, превышающей активность коммерческого препарата витамина Д2 в спирте, витамина Д3 в масле, что является следствием лучшего транспорта данной формы витамина через желудочно-кишечный тракт и уменьшения степени его окисления а организме. При этом показатели в V гр уппе животных, получавши х 1/2 дозы ви-деина, сопоставимы с показателями II и III гр упп. Следовательно, благодаря высокой биологической активности нового препарата расчетные дозы можно уменьшить вдвое. Анализ доклинических испытаний показал, что данная форма препарата обеспечивает точность дозирования витамина Д, что в свете последних данных о его физиологической роли в организме и дозозависимости этих процессов очень существенно, а именно: передозирование вызывает явления Д-гипервитаминоза (гиперкальциемия), нарушение синтеза белков, липидов, так как витамин Д относится к группе прогормонов. Кроме того, таблетированная форма обеспечивает возможность применения препарата при желудочнокишечных заболеваниях и исключает вредное воздействие растворителей витамина Д (спирта и масла растительного) на организм новорожденных детей. Результаты клинических испытаний применения таблетированного препарата "Видеин" при лечении рахита и рахитопо-добных заболеваний у детей, Д-гиповитами-ноза у беременных женщин и ряда заболеваний костной системы свидетельствуют о высокой лечебной эффективности препарата, которая выражается в сокращении сроков выздоровления, полной нормализации патологических изменений.