Спосіб профілактики оксидативного стресу та нормалізації процесів перекисного окиснення ліпідів у тварин

Спосіб профілактики оксидативного стресу та процесів вільнорадикального окиснення ліпідів у 3 29167 4 Заявлений нами спосіб усуває недоліки про- та антиоксидантного статусу організму тварин прототипу і забезпечує нормалізацію процесів та попереджує виникнення оксидативного стресу. вільнорадикального окиснення ліпідів у тварин за При проведенні патентно-інформаційного рахунок того, що біомаса дріжджів Phaffia пошуку заявником і авторами знайдено технічне rhodozyma містить каротиноїд астаксантин, який, рішення [Ключников СО. b-каротин при завдяки особливостям будови молекули, є метаболической корреции у часто болеющих сильним антиоксидантом і не проявляє детей // Русский медицинский журнал. - 2006, т.14, прооксидантних властивостей. №1. - c.18-21], що містить найбільшу кількість В основу корисної моделі (корисної моделі) ознак, спільних із заявленим рішенням: спосіб покладено завдання: створити ефективний, включає застосування комплексної економічно вигідний і зручний у застосуванні антиоксидантної терапії з використанням спосіб нормалізації процесів перекисного каротиноїдів. Однак наявність зазначених, окиснення ліпідів, які посилюються у організмі при спільних з прототипом ознак не забезпечує оксидативному стресі та різних патологічних одержання технічного результату, якого досягає станах. заявлений спосіб. Технічних рішень, які б повністю Технічний результат досягають тим, що як співпадали із заявленим, - не знайдено. Це джерело каротиноїдів використовують біомасу дозволяє зробити висновок про відповідність дріжджів P. rhodozyma IMB Y-5026, яку вносять у заявленого технічного рішення критерію корисної стандартний комбікорм в кількості 2%, замінюючи моделі «новизна». нею кормові дріжджі комбікорму та згодовують У патентній і науково-технічній інформації не тваринам у критичні періоди росту або при знайдено технічних рішень, в яких були б описані стресових ситуаціях при вільному доступі до води відомості про ознаки, що відрізняють заявлений та корму. спосіб від прототипу і забезпечують досягнення Зазначена заміна кормових дріжджів на технічного результату: що як джерело каротиноїдів біомасу каротиносинтезуючих дріжджів P. використовують біомасу дріжджів P. rhodozyma rhodozyma IMB Y-5026 забезпечує додаткове IMB Y-5026, яку вносять у стандартний комбікорм введення в раціон 400мг каротиноїдів на 1кг в кількості 2%, замінюючи нею кормові дріжджі корму, в тому числі 268мг астаксантину на 1кг комбікорму та згодовують тваринам у критичні корму. Астаксантин належить до каротиноїдів, а періоди росту або при стресових ситуаціях при саме до ксантофілів, оскільки містить у молекулі вільному доступі до води та корму. атоми кисню. Завдяки молекулярній структурі, Отже, заявлене технічне рішення не випливає астаксантин проявляє високу спорідненість до явним чином з рівня техніки, що дозволяє зробити синглетного кисню і ефективно гасить вільні висновок про відповідність його критерію корисної радикали. Астаксантин виявлений у лососевих моделі "винахідницький рівень". рибах, омарах, крабах, а також у дріжджах P. Заявлений спосіб належить, до галузі rhodozyma. ветеринарної медицини, зокрема до профілактики В останні роки стало відомо, що серцевоі терапії патологічних станів сільськогосподарських судинні, ендокринні, онкологічні, неврологічні тварин, а саме до способів профілактики захворювання супроводжуються активацією виникнення оксидативних стресів та активізації перекисного окиснення ліпідів, що пошкоджує процесів вільнорадикального окислення ліпідів, а мембранні структури клітин живих організмів. Для тому відповідає критерію корисної моделі захисту від руйнівного впливу цих процесів «промислова придатність». використовують екзогенні антиоксиданти, до яких Таким чином, заявлене технічне рішення є відносяться і каротиноїди. Каротиноїди є новим, промислово придатним, має важливим компонентом неферментативної винахідницький рівень, тобто відповідає всім системи антиоксидантного захисту в організмі умовам патентоспроможності корисної моделі тварин. Каротиноїди захищають клітини від відповідно до ст.7 розділу П Закону України «Про окиснення шляхом 1) - уловлювання синглетного охорону прав на винаходи і корисні моделі» кисню; 2) - нейтралізацією вільних радикалів, що №1771-111, 2000р. попереджує або зупиняє реакцію. Відомо, що bПорядок здійснення способу. каротин є пасткою вільних радикалів, він захищає У господарствах, які утримують тварин у ліпіди мембран від переокиснення, проявляє стандартному комбікормі 2% кормових дріжджів, виражений антиоксидантний вплив. Завдяки своїй що входять до його складу, замінюють на біомасу молекулярній структурі, астаксантин значно дріжджів P. rhodozyma IMB Y-5026 і згодовують ефективніший і сильніший антиоксидант від тваринам у критичні періоди росту або у стресових вітаміну Е та інших каротиноїдів. Згодовування ситуаціях при вільному доступі до води і корму. тваринам 2% біомаси дріжджів P. rhodozyma IMB Приклади конкретного виконання. Y-5026 у складі раціону підвищує вміст Ефективність заявленого способу, його каротиноїдів у кормах на 400мг/кг, а астаксантину переваги перед прототипом підтверджені на 268мг/кг, що покращує антиоксидантний захист прикладами конкретного виконання. при оксидативному стресі. Приклад 1. Дослід було проведено на самцях Заявлений спосіб забезпечує зниження щурів лінії Вістар із початковою масою тіла 120інтенсивності процесів перекисного окиснення 130г, яких утримували у стандартних умовах ліпідів та активацію ферментів системи віварію. Тварини були поділені на 4 групи (по 8 антиоксидантного захисту, що нормалізує стан тварин): 1 - контрольна група; 2 - щури, яким моделювали оксидативний стрес, для чого 5 29167 6 внутріочеревинно двічі через день вводили продукти, нмоль/г тетрахлорметан в дозі 0,2мл/100г маси тіла у Дієнові кон'югати, 83,43±2,59 141,79±15,19* 117,94±6, вигляді 50% олійного розчину. 3 - щури, яким мкмоль/кг згодовували b-каротин у дозі 40мг/100г Гідропероксиди 13,33±1,17 19,63±1,92* 12,75±3,7 комбікорму. 4 - тварини, яким згодовували біомасу ліпідів, ОЕ/г дріжджів P. rhodozyma (2%), вміст каротиноїдів у якій становив 20мг/г сухої біомаси (кількість * - різниця достовірна відносно інтактних тварин контрольної груп каротиноїдів, що споживали щури 3 та 4 груп була ** - різниця достовірна відносно тварин з групи прототипу одинаковою). Тваринам 3 і 4 груп на 12 день досліду вводили тетрахлорметан двічі через день в дозі 0,2мл/100г маси тіла у вигляді 50% олійного розчину. Забій тварин проводили через 48год. Активність ферментів антиоксидантного захисту в тканинах печінк після останнього введення токсиканту. різних способах профілактики оксидативного стресу (M Ефективність препаратів визначали за впливом на вміст продуктів перекисного окиснення ліпідів Групи тварин (ТБК-активних продуктів, дієнових кон'югатів, III - дослідна, III - д гідроперекисів ліпідів) та активність ферментів Показники контрольна, стандартний + b-ка антиоксидантної системи захисту (каталази, стандартний комбікорм + Т супероксиддисмутази та глютатіонпероксидази) у комбікорм ТХМ (про тканинах печінки та головного мозку. печінка Введення в раціон тварин біомаси дріжджів Р. Каталаза, мкмоль Н2О2×хв.-1·мг rhodozyma знижує вміст продуктів перекисного 120±1,9 61±2,9* 11 1 білку окиснення ліпідів у тканинах печінки та мозку, -1 4,71±0,20 2,57±0,12* 3,72 COД, ум. Од.×мг білку причому заявлений спосіб проявляє кращу дію ніж 366±12,7 204±15,8* 291 ГПО, нмоль×хв.-1·мг-1білку прототип (табл. 1). головний мозок Так, вміст ТБК-активних продуктів та дієнових кон'югатів у тканинах головного мозку при Каталаза, мкмоль Н2O2·хв.-1·мг 4,27±0,46 3,22±0,32* 3,83 1 використанні заявленого способу є нижчим білку -1 відповідно на 28% та 21%, порівняно з COД, ум. Од.·мг білку 0,64±0,02 0,38±0,03* 0,55 прототипом, а рівень дієнових кон'югатів та ГПО, нмоль·хв.-1·мг -1білку 101,5±2,3 74,5±3,5* 86, гідроперекисів ліпідів у тканинах печінки є меншим порівняно з прототипом на 23% та 33% відповідно. * - різниця достовірна відносно інтактних тварин контрольної груп Дані, приведені в таблиці 2 свідчать про те, що ** - різниця достовірна відносно тварин з групи прототипу. введення в раціон тварин біомаси дріжджів P. rhodozyma або b-каротину посилює систему Приклад 2. В господарстві ВАТ "Птахофабрика антиоксидантного захисту шляхом "Львівська" за принципом аналогів було безпосереднього впливу на активність каталази, сформовано 2 групи курей-несучок кросу "Ломанн супероксиддисмутази та глютатіонпероксидази. браун" по 50 голів у кожній, віком 180 днів. Аналіз одержаних результатів показує, що Утримання і годівлю птиці здійснювали згідно активність каталази у печінці та технологічних норм кліткового утримання з глютатіонпероксидази у мозку щурів є вищою у вільним доступом до корму і води. Перша група тварин ІV групи (новий спосіб) порівняно з III (прототип) одержувала стандартний комбікорм, до групою (прототип), що покращує антиоксидантний складу якого входило 4% кормових дріжджів (вміст захист при заявленому способі порівняно з каротиноїдів у комбікормі становив 248мг/кг). прототипом. Друга група курей (новий спосіб) одержувала зазначений вище комбікорм, в який була введена Таблиця 1 біомаса дріжджів P. rhodozyma замість кормових дріжджів у кількості 2% (вміст каротиноїдів Вміст продуктів перекисного окиснення ліпідів у печінці та головному мозку щурів за різних числі становив 395мг/кг, в тому 257мг способів профілактики оксидативного стресу (М±m, n=4) астаксантину/кг комбікорму). Через 20 днів після початку досліду із кожної групи відбирали тканини Групи тварин для визначення вмісту продуктів перекисного ІV окиснення ліпідів. - дослідна + Одержані результати III - дослідна + I - контрольна, II - дослідна, Показники представлені в P.rhodozyma + Показано, що таблиці 3. стандартний стандартний b-каротин + ТХМ (новий використання нового способу зменшує вміст комбікорм комбікорм + ТХМ ТХМ (прототип) спосіб) продуктів гідроперекисного окиснення ліпідів в організмі птиці порівняно з прототипом. печінка ТБК-активні 18,41±1,70 36,25±2,39* 21,48±2,51 24,59±1,02 продукти, нмоль/г Дієнові кон'югати, 89,87±3,13 113,98±1,82* 92,18±3,34 71,07±6,18** Вміст продуктів пероксидації ліпідів у організмі курей-несучок з мкмоль/кг профілактики оксидативного стресу (М±m, n=5 Гідропероксиди 16,35±1,62 21,6±1,92* 21,00±1,50 14,17±0,86** ліпідів, ОЕ/г Показники Групи головний мозок ТБК-активні 26,71±2,04 52,02±2,58* 43,14±1,62 30,95±2,75** 7 29167 Контрольна група (прототип) Гідропероксиди ліпідів, од.Е480/мл Малоновий діальдегід, мкмоль/мл Гідропероксиди ліпідів, од. Е480/г Малоновий діальдегід, мкмоль/г Гідропероксиди ліпідів, од. Е480/Г Малоновий діальдегід, мкмоль/г Гідропероксиди ліпідів, од. Е480/Г Малоновий діальдегід, мкмоль/г Кров 0,709±0,073 1,750±0,171 Печінка 12,433±0,913 2,393±0,214 12-пала кишка 2,375±0,159 2,083±0,198 Яйцепровід 2,325±0,149 3,045±0,302 8 Дослідна група (новий спосіб) 0,590±0,051 1,247±0,083* 11,200±1,900 2,363±0,238 1,850±0,126* 2,500±0,213 1,150±0,119*** 1,699±0,132** Примітка. Різниця в даному показнику між дослідною і контрольною групами вірогідна (* р