Спосіб кількісного визначення похідних фенотіозину

Спосіб КІЛЬКІСНОГО визначення похідних фенотюзину, який вміщує обробку проби, що аналізується, кислотним агентом і розчином ванадату натрію та наступну реєстрацію зміни кольору фотометричним методом, який відрізняється тим, що використовують розчин ванадату натрію з концентрацією 1х103-1,5х10 3 моль/л і як кислотний агент - розчин сульфосаліцилової кислоти з концентрацією 0,2-0,3 моль/л, який містить первинний ароматичний амін, наприклад п-фенетидину пдрохлорид, в концентрації 1x10 3-5х10 3 моль/л Винахід, що, передбачається, має бути віднесений до розділу аналітичної хімії, а саме, до способів КІЛЬКІСНОГО визначення похідних фенотіазину при різноманітних дослідженнях лікарських речовин в таблетках, порошках чи розчинах ПОХІДНІ фенотіазину займають центральне місце серед психотропних засобів Вони чинять багатогранний, переважно пригноблюючий вплив на центральну нервову систему людини Неконтрольоване споживання фенотіазинів (ФТА) може привести до серйозних психічних розладів Це викликає необхідність розробки простих високочутливих методів їх КІЛЬКІСНОГО визначення ВІДОМІ методи визначення похідних фенотіазину, засновані на утворенні іонних асоциатів з індикаторами сульфофталешового ряду, такими як бромкрезоловий зелений [Basavaiah К, Knshnamurthy G Talanta, 1998, v 46, №4, p 665-670], бромкрезоловий пурпурний або бромфеноловий синій [Жебентяев А И , Яранцева Н Д Органич реагенты в аналитич химии Тезисы докл 7 Всерос конфер, Саратов, 20-25 сент 1999 г, с 175] Оскільки сульфофталешові барвники взаємодіють з багатьма алкалоїдами й іншими азотовмісними лікарськими препаратами з утворенням кольорових іонних асоциатів, методи з їх застосуванням не є селективними і вимагають попереднього відділення ФТА шляхом екстракції легколеткими органічними розчинниками (наприклад, сухим хлороформом або бутиловим спиртом), що ускладнює аналіз Відомо, ЩО ПОХІДНІ фенотіазину легко окислюються в кислому середовищі з утворенням інтенсивно забарвленого катюн-радикалу Ця реакція широко використовується для КІЛЬКІСНОГО визна чення похідних фенотіазину Як окислювачі використовуються металоюни вищого ступеня окислення, наприклад, Се(4+) у сірчанокислому середовищі [Sultan S М , Walmsley A D Talanta, 1998, v 46, № 5, р 897-906] або в хлорнокислому середовищі [Aly F А , Alarfaj N А , Alwarthen A A Anal chim acta, 1998, v 358, №3, p 255-262] Застосовуються також аніонні окислювачі, наприклад, йодат-юн кислому середовищі [Indian J Pharm Sci , 1985, v 47, № 3, р 125-127] Окислення ФТА проводять також хлораміном Т в сірчанокислому середовищі [Anal Lett, 1999, v 32, №13, р 2613-2623] Методи, засновані на окисленні похідних фенотіазину до катюн-радикалу прості, достатньо селективні, проте їх загальним недоліком є невисока чутливість (5-25 мкг/мл), а також необхідність використання агресивних середовищ - концентрованих мінеральних кислот соляної, сірчаної, хлорної або фосфорної Найбільш близьким до винаходу, що передбачається, є прийнятий нами за прототип спосіб визначення одного з похідних фенотіазину мепазину, за яким до проби лікарської речовини додають сірчану кислоту до концентрації 1 моль/л в кінцевому об'ємі, 0,02% (1x10 3 моль/л) розчин ванадату натрію, розводять до 25 мл водою, перемішують 15 хв і вимірюють світлопоглинання розчину, що аналізується, проти контрольного розчину [Ramoppa P G , Rao N R R J Inst Chem (India), 1988, v 60, № 1, p 147-148] Недоліками прототипу є використання агресивної сірчаної кислоти та порівняно невисока чутливість методу 1 мкг/мл, недостатня при проведенні ХІМІКОтоксиколопчнихта КЛІНІЧНИХ досліджень 00 CO ГО 42338 Задача нинішнього винаходу - розробка способу КІЛЬКІСНОГО визначення похідних фенотіазину в різних об'єктах, який би дозволив за рахунок використання нових реагентів значно збільшити чутливість визначення ФТА та підвищити рівень безпеки при проведенні аналізу Рішення поставленої задачі забезпечується тим, що у способі КІЛЬКІСНОГО визначення похідних фенотіазину, який вміщує обробку проби, що аналізується, кислотним агентом і розчином ванадату натрію та реєстрацію зміни кольору фотометричним методом, згідно з винаходом, використовують розчин ванадату натрію з концентрацією 1x10 3 -1,5х10 3 моль/л і як кислотний агент - розчин сульфосаліцилової кислоти з концентрацією 0,2-0,3 моль/л, який містить первинний ароматичний амін, наприклад, п-фенетидину пдрохлорид (ГХ), в концентрації 1х10 3 -5х10 3 моль/л Катюн-радикали, які утворюються при окисленні похідних фенотіазину ванадатом натрію, самі можуть бути окислювачами У запропонованому методі вони взаємодіють з первинним ароматичним аміном з утворенням інтенсивно забарвлених продуктів реакції Використання каталітичної активності катюн-радикалів дало можливість підвищити чутливість запропонованого способу в порівнянні з прототипом у 50 разів Використання регулятором кислотності середовища нелеткої органічної кислоти - сульфосаліцилової кислоти замість сірчаної дозволило підвищити рівень безпеки способу Приклад 1 Кількісне визначення похідних фенотіазину У вимірювальну колбу МІСТКІСТЮ 10 МЛ вміщують 1-5 мл (0,04-3,0 мкг ФТА) розчину, що аналізується, додають 1 мл розчину сульфосаліцилової кислоти з концентрацією 0,2 моль/л, який містить 5x10 3 моль/л п-фенетидину пдрохлориду, і розводять водою до об'єму 8 мл Потім прибавляють 1 мл розчину ванадату натрію з концентрацією 1x10 3 моль/л, швидко доводять водою до риски, перемішують та вимірюють світлопоглинання на фотоелектроколориметрі або спектрофотометрі протягом 5 хв , починаючи з першої хвилини після додавання ванадату натрію По результатах вимірювань обчислюють швидкість реакції в контрольній та досліджуваній пробах і визначають вміст по хідних фенотіазину в розчині, що аналізується, за допомогою градуювального графіка, який будують в координатах квадрат швидкості каталітичної реакції - маса ФТА (мкг), або за допомогою рівняння, параметри якого розраховують за способом найменших квадратів Дані, наведені у табл 1, показують, що для КІЛЬКІСНОГО визначення ФТА оптимальними є розчини з концентраціями 0,2-0,3 моль/л сульфосаліцилової кислоти з 3x10 3 -5х10 3 моль/л п-фенетидину пдрохлориду та 1x10 3 -1,5х10 3 моль/л ванадату натрію Відхилення концентрацій від вказаних інтервалів призводить до зниження чутливості визначення ФТА при менших концентраціях - через недостачу реагентів, при більших - за рахунок перебігу некаталітичної реакції окислення ароматичного аміну ванадатом натрію у відсутності ФТА При цьому зростає також швидкість каталітичної реакції, що призводить до збільшення похибки визначення фенотіазинів Запропонований спосіб перевірено на п'яти похідних фенотіазину Інтервал концентрацій, які визначаються, та метрологічні характеристики способу при довірчій вірогідності 0,95 для п'яти паралельних ДОСЛІДІВ наведено у табл 2 Спосіб є специфічним для всіх алкілпохідних фенотіазину Перевірка селективності способу показала, що лікарські препарати з інших груп (анальгетики, вітаміни, серцеві глікозиди, судиннорозширюючі та снотворні засоби, сульфамідні препарати, транквілізатори) в обраних умовах дають негативну реакцію Запропонований спосіб КІЛЬКІСНОГО визначення фенотіазинів характеризується високою селективністю і підвищеним рівнем безпеки, завдяки застосуванню регулятором кислотності нелеткої органічної кислоти Він ДОЗВОЛЯЄ ШВИДКО І надійно виявляти присутність ФТА в різноманітних лікарських формах Підвищення чутливості способу КІЛЬКІСНОГО визначення похідних фенотіазину в 50 разів у порівнянні з прототипом відкриває широкі можливості для контролю споживання психотропних засобів при хіміко-токсиколопчних та КЛІНІЧНИХ дослідженнях 42338 Таблиця 1 сульфосаліц кислоти 0,1 0,2 0,3 0,5 0,2 0,2 Концентрація реагентів, моль/л п-фенетидину ГХ 5x10' 1x10' 3x10 3 5x10 3 1хЮ2 5x10' ванадату натрію 1x10' мкг/мл 0,30 0,02 0,01 0,05 0,04 0,01 0,02 0,06 0,20 0,02 0,02 0,05 1,5x10' 5x10 4 1хЮ3 1,5хЮ 3 2x10 3 *Стщ - мінімальна концентрація промазину, яка може бути визначена запропонованим способом в умовах, наведених у таблиці Таблиця 2 ФТА Промазин Тизерцин Метеразин Трифтазин Дипразин Уведено, мкг Знайдено, мкг 0,04 0,1 0,2 0,4 1,0 2,0 0,05 0,1 0,3 0,5 1,0 0,1 0,2 0,5 1,0 3,0 0,1 0,2 0,5 1,0 3,0 0,2 0,5 1,0 2,0 3,0 0,05±0,01 0,10±0,01 0,19±0,01 0,39±0,03 1,01 ±0,09 2,01 ±0,19 0,05±0,01 0,09±0,02 0,30±0,08 0,53±0,06 0,98±0,08 0,11 ±0,03 0,19±0,04 0,50±0,06 0,97±0,18 3,03±0,37 0,11±0,01 0,21 ±0,03 0,45±0,06 1,00±0,08 3,04±0,41 0,23±0,09 0,41 ±0,08 1,12±0,12 1,92±0,14 2,98±0,33 Відносне стандартне відхилення 0,16 0,08 0,04 0,06 0,07 0,08 0,16 0,18 0,21 0,09 0,06 0,20 0,17 0,10 0,15 0,10 0,07 0,11 0,11 0,09 0,11 0,32 0,16 0,09 0,06 0,09 42338 ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Киів-133, бульв Лесі Українки, 26 (044)295-81-42, 295-61-97 Підписано до друку Обсяг сібл -вид арк 2002р Формат 60x84 1/8 Тираж 50 прим Зам УкрІНТЕІ, 03680, Киів-39 МСП, вугі Горького, 180 (044) 268-25-22