Спосіб лікування хворих на плоскоклітинний рак ротової частини глотки

Спосіб лікування хворих на плоскоклітинний рак ротової частини глотки шляхом опромінення в комбінації з хіміотерапією, який відрізняється тим, що під час опромінення через день на пухлину аплікаційно наносять цисплатин разом з антиCD95 МКАТ ІПО-4 і витримують не менше 20 хв тової частини глотки, який заявляється, є метод фракційної променевої терапії у комплексі з тривалою внутрішньовенною хіміотерапією цисплатином і 5-фторурацилом Фракційний вид гамматерапії полягає у застосуванні подрібнених доз по 2гр в день 5 разів на тиждень переривчастим курсом Розщеплений тимчасовий інтервал між етапами лікування не перевищував 2 - 3 тижнів Сумарна осередкова доза складала 60 - 70гр /4/ Методика хіміотерапії полягає в наступному в перший день внутрішньовенно одноразово на фоні ппергідратацм вводять цисплатин - по 100мг/м і 5фторурацил - по 1000мл/м2 з 1-го по 5-ий день у вигляді безперервної 100-годинноі інфузм Інтервал між курсами - 3 - 4 тижні Катетер вводять в підключичну або ліктьову вену Проводять три таких курси хіміотерапії, після чого починають променеву терапію /5/ Спосіб лікування за прототипом поряд з невисокою ефективністю викликає серйозні побічні ефекти та значно погіршує якість життя хворих Загальні ускладнення та побічні явища пов'язані як з технікою катетеризації артерії, так і з токсичним впливом протипухлинних препаратів, який супроводжується пригніченням кістково-мозкового кровотворення нирко- та гепатотоксичністю, диспептичними явищами Таким чином, низька вибірковість протипухлинної дії та токсичність препаратів є серйозною перешкодою для успішного лікування онкологічних хворих Пошук нових ПІДХОДІВ до використання цитостатиків в менших дозах у комплексі з іншими агентами, які здатні індукувати загибель пухлинних клітин при низькій концентрації протипухлинного ю ю (О 46551 препарату, є аісгуальним завданням сучасної клінічної онкології Відомо, ЩО завдяки великим успіхам молекулярної біологи і біохімії пухлин та розвитку бютехнолопй особлива увага приділяється способам лікування на основі нових ПІДХОДІВ З використанням "сигнальних" МКАТ, що здатні модулювати чутливість пухлинних клітин до дії традиційної хіміотерапії В основу винаходу, що заявляється, поставлено задачу удосконалення способу лікування хворих на рак ротової частини глотки шляхом використання моноклональних антитіл, що здатні модулювати чутливість пухлинних клітин до дії цисплатину, з тим, щоб забезпечити підвищення ефективності терапії, зниження токсичного впливу цисплатину на організм хворого та покращання якості його життя Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі лікування шляхом опромінення в комбінації з хіміотерапією, згідно з винаходом, що заявляється, під час опромінення на пухлину, яка експресує СО95-антиген, через день аплікаційно наносять цисплатин разом з анти-СО95 МКАТ ІПО4 і витримують не менше 20хв Для досягнення лікувального ефекту у хворих на плоскоклітинний рак ротової частини глотки, новий спосіб дозволяє цисплатин вводити в нетоксичних дозах, оскільки нами експериментально доведено, що комбіноване застосування цисплатину та анти-СО95 МКАТ ІПО-4 призводить до синергічного ефекту в індукції загибелі клітин лінії епідермоідної карциноми ротової порожнини людини KB Об'єктом дослідження була клітинна ЛІНІЯ епідермоідної карциноми ротової порожнини людини KB Клітини ЦІЄЇ ЛІНІЇ культивували у культуральному середовищі RPMI 1640 ("Sigma", США) з додаванням 10% ембріональної телячої сироватки ("Сангва", Україна) при температурі 37°С та насиченні повітря 5% СОг Інкубація клітин KB з цисплатином у терапевтичних концентраціях призводить до розвитку апоптозу в ПІДДОСЛІДНИХ клітинах Аналіз залежності індукції апоптозу від концентрації цисплатину показав, що цисплатин у малих дозах (0,3 та 0,6мкг/мл) через 24 години інкубації не викликає у клітинах KB апоптичних змін Невелике (на 4%) зростання апоптичних клітин відбувається лише при дозі препарату 1,2мкг/мл При підвищенні концентрації цисплатину в культуральному середовищі до 5мкг/мл, КІЛЬКІСТЬ апоптичних клітин поступово збільшується до 20% /8/ Інкубація клітин KB з анти-СО95 МКАТ ІПО-4 в дозі 1мкг/мл призводить до розвитку апоптозу в клітинах і через 24 години інкубації 12% клітин гинуть під дією моноклональних антитіл Коли ж клітини KB культивували з цисплатином і антиCD95 МКАТ ІПО-4 протягом 24 годин, то цитотоксичний ефект препаратів зростав і ставав синергічним При використанні комбінації цисплатину і МКАТ ІПО-4, цитотоксичний ефект був вищий, ніж сума цитотоксичних ефектів при використанні цих препаратів окремо Наприклад, у дозі 2,5мкг/мл цисплатин індукує апоптоз у 12% клітин МКАТ ІПО4 також індукують апоптоз у 12% клітин Комбіноване використання цисплатину і МКАТ ІПО-4 через 24 години інкубації з клітинами KB призводить до апоптичної загибелі 58% клітин, що в 2 рази більше, ніж при окремому застосуванні препаратів /6,7/ Цисплатин, використаний в дозі 0,6мкг/мл окремо, не індукує апоптоз в клітинахмішенях Комплексне застосування цисплатину та ІПО-4 призводить до значного зростання КІЛЬКОСТІ КЛІТИН в апоптозі, а саме - до 28% /8/ Таким чином, використовуючи комбінацію препаратів, можна одержати цитотоксичний ефект, для досягнення якого за допомогою одного протипухлинного препарату необхідно було б значно збільшити дозу цитостатику/9/ З метою вивчення експресії СО95-антигену, на клітинах пухлин ротової порожнини було проведено імунопстохімічне дослідження 16 хворих на плоскоклітинний рак ротової порожнини У 60% хворих на клітинах плоскоклітинного раку ротової порожнини було виявлено присутність СО95-антигену, при цьому експресія антигену була на більшості пухлинних клітин Важливо, що експресія СО95-антигену не залежала від морфологічної будови пухлин і виявлялась як при ороговіваючому, так і при неороговіваючому плоскоклітинному раку ротової порожнини Отримані нами дані дали підстави вважати, що пухлинні клітини ротової порожнини, які експресують антиген CD95, будуть чутливими до СО95-залежного апоптозу, що дозволяє отримати високий протипухлинний ефект застосовуючи нетоксичні дози цисплатину у комбінації з МКАТ ІПО4 Використання синергічного ефекту комбінованої дії цисплатину з МКАТ ІПО-4 до СО95-антигену на індукцію апоптозу ракових клітин дозволяє забезпечити високий протипухлинний ефект при застосуванні низьких доз цисплатину, який наносять на пухлину аплікаційно разом з МКАТ ІПО-4, що зумовлює нешвазивний метод застосування хіміотерапії, високий протипухлинний ефект та дозволяє суттєво знизити токсичний вплив цисплатину на організм і покращити якість життя хворого на рак ротової частини глотки Суть способу лікування хворих на плоскоклітинний рак ротової частини глотки полягає в наступному Хворим призначають фракційне опромінення Під час променевого лікування через день на відкриту поверхню пухлини аплікаційно наносять розчин цисплатину разом з анти-СО95 МКАТ-ІПО4 і витримують не менше 20хв Суть способу, що заявляється, пояснюється конкретними прикладами застосування Приклад І Історія хвороби № 663, хворий С , 45 років Поступив 98 03 12 в ЛОР-онколопчне відділення Київської лікарні №14 і НДІ отоларингологи їм О С Коломійченка МОЗ України /вул Зоологічна 3/ із скаргами на відчуття стороннього тіла та болі в горлі з іррадіацією в праве вухо Не лікувався Патопстолопчне заключения від 98 11 27 №2803-07 6/98 - перехідноклітинний рак При фарингоскопії виявлено асиметрію ротової частини глотки за рахунок бугоркового екзоедофітного тумору, що вражає правий піднебінний мигдалик, поширюючись у верхній и частині на 46551 піднебінно-язикову та піднебінно-глоткову дужки, гментоядерні - 58, лімфоцити - 20, моноцити - 10, інфільтруючи нижню поверхню м'якого піднебіння, ШОЕ - 8мм/г але не доходячи до його язичка і дещо сковуючи Хворий отримував фракційне променеве опрухомість правого піднебінного мигдалика при акті ромінення кожного дня на протязі 25 днів Під час ковтання променевого лікування через день проводили хіміотерапію цисплатином разом з МКАТ 3 метою Репонарні шийні лімфатичні вузли не збільзменшення соливацм в глотці вводили підшкірне шені Інші ЛОР-органи - без вираженої патології 0,5мл 0,1% розчину атропіну, через ЗОхв за допоДіагноз рак правого піднебінного мигдалика з могою бюпсійних щипців стерильною марлевою розповсюдженням на піднебінні дужки, м'яке підтурундою наносили аплікаційне на поверхню пухнебіння, стадія III, клінічна група II, ТзМоМо лини розчин цисплатину в концентрації 5мкг/мл, Загальний аналіз крові від 98 11 24 гемогло9 разом з МКАТ-ІПО-4 в концентрації Імкг/мл та бін - 1 26, лейкоцити 5,1 х10 г/л, еритроцити 12 залишали ці ліки на пухлині 20-25хв 4,0х10 г/л, лімфоцити - ЗО, паличкоядерні - 3, сегментоядерні - 55, моноцити - 8, ШОЕ - 2мм/г ЗаПри обстеженні хворого за допомогою фарингальний аналіз сечі - без особливостей госкопії після лікування пухлина, яка вражала правий піднебінний мигдалик, інфільтрувала мигдалиХворий отримував фракційне променеве опкові дужки, створювала асиметрію ротової частини ромінення кожного дня на протязі 25 днів Під час глотки, не виявлена Правий піднебінний мигдалик променевого лікування через день проводили зменшений в розмірах хіміотерапію цисплатином разом з МКАТ 3 метою зменшення соливацм в глотці вводили підшкірно Репонарні шийні лімфатичні вузли не збіль0,5мл 0,1% розчину атропіну, через ЗОхв за допошені Результати загальних аналізів сечі та крові могою бюпсійних щипців стерильною марлевою не зазнали змін турундою наносили аплікаційно на поверхню пухЕфект лікування - повна регресія ракової пухлини розчин цисплатину в концентрації 5мкг/мл, лини правого піднебінного мигдалика разом з МКАТ-ІПО-4 в концентрації 1мкг/мл та Метод лікування хворих раком ротової частини залишали ці ліки на пухлині 20-25 хв глотки, що заявляється, був випробуваний у ВІДДІЛІ онкології Інституту отоларингології АМНУ Під час проведеного нами лікування загальний аналіз крові не зазнав значних змін гемоглобін Лікування проводили хворим, які по розпов134, еритроцити - 4,0x1012г/л, лейкоцити сюдженості процесу за системою TNM мали 5,8x109г/л, еозинофіли - 2, паличкоядерні - 11, сеT3N0M0 Оцінка загального стану хворих проводигментоядерні - 60, лімфоцити - 15, моноцити - 12, лась за шкалою Карновського Хворих для ШОЕ-Юмм/г лікування методом, що заявляється, відбирали з врахуванням наявності експресії CD95 антигену на Після лікування при фарингоскопії зникла асиклітинах пухлини, яку виявляли на бюпсійному метрія порожнини глотки за рахунок зниклого екматеріалі пухлини методом імуноцитохімм зоендофітного тумору правого піднебіння мигдалика, піднебінних дужок, м'якого піднебіння При лікуванні хворих методом, який заявляРухомість правого піднебінного мигдалика при акті ється, вже на першому етапі лікування, отримана ковтання не порушена повна регресія пухлини у 70% хворих та у 20% часткова, в той час, як в групі хворих, які лікуваРепонарні шийні лімфатичні вузли не збільлись згідно способу-прототипу тільки 30% хворих шені Інші ЛОР-органи - без вираженої патології на І етапі лікування мали повну регресію пухлини Ефект лікування - повна регресія злоякісної та 40% - часткову БІЛЬШІСТЬ хворих, які лікувались пухлини ротової частини глотки методом, що заявляється, не потребували провеПриклад 2 Хворий II , 52 роки, амбулаторна дення II етапу хімю-променевого лікування карта Інституту отоларингології АМН України №2294/00, був направлений 00 03 21 на амбулаПісля лікування загальний стан хворих які торне лікування в радіологічне відділення Інститулікувались способом, що заявляється, був значно ту із скаргами на біль в горлі справа, яка посилюкращим, ніж тих, що лікувались за способомється при ковтанні, дещо утруднюючи його Раніше прототипом У 50% хворих були мінімальні ознаки він не лікувався Патолопстолопне заключения хвороби, не відмічалось токсичного впливу цис№705-706 6/00 від 00 03 15 плоскоклітинний неоплатину на організм, а також мали місце лише роговіваючий рак мінімальні ознаки променевого епітелмту ротового відділу глотки Факт зменшення променевого При фарингоскопії видно ендофітну, брудного епітелмту глотки можна пояснити протизапальною кольору пухлину з ділянками некрозу та розпаду, дією локально застосованого цисплатину Якість яка уражає передньоверхню поверхню правого життя цих дуже тяжких хворих покращилась піднебінного мигдалика, інфільтруючи піднебінноязикову та піднебінно-глоткову дужки, створюючи Література асиметрію ротової частини глотки, але не пору1 Абизов Р А Онкоотоларингология - Київ шуючи рухомість ураженого пухлиною мигдалика «Книга плюс» - 2001 - 272 с Репонарні шийні лімфатичні вузли не збіль2 Шувалов С М Злокачественные опухоли шені ротоглотки -Винница -«Винничина» -1996 -231 с Діагноз рак правого піднебінного мигдалика з поширенням на піднебінні дужки, стадія III, T3N0M0, 3 Абызов Р А Лучевое лечение больных со клінічна група II злокачественными опухолями гортани и глотки (эндофитной и смешанной форм роста) с укрупнеЗагальний аналіз крові від 00 03 21 гемоглонием разовой очаговой дозы на первом этапе оббін - 115, лейкоцити 4,8x109г/л, еритроцити лучения Журнал внутрішніх носових і горлових 4,0х1012г/л, лімфоцити - 25, паличкоядерні - 3, се 46551 8 хвороб -1999 - №6 - с 25-30 4 -С 210-216 4 Киселева В В , Степанов В Г , Королев В В 7 Chekhun V F , Shishova Yu V , Yurchenko Эффективность полихимиотерапии цисплатином, О V , Vodyamk M A , Sidorenko S P Drug resistance метотрексатом и 5-фторурацилом при неопераin KB/DDP5 cells associated with hypersensitivity to бельных формах плоскоклеточного рака области CD95-mediated apoptosis // Experimental Oncologyголовы и шеи Вопр Онколо - 1992 - Т 38 - №2 2000 -V 22 -Suppl 2 -P 20-26 с 205-208 8 Шишова Ю В , Юрченко О В , Хромяк В Н , 5 Рыспаева ГС Комплексное лечение местСидоренко С П , Чехун В Ф Резистентность к циснораспостраненного плоскоклеточного рака слиплатине, ассоциированная с гиперчувствительнозистой оболочки полости рта с использованием стью к СО95-опосредованному апоптозу клеток длительной инфузионной химиотерапии платиэпидермоидной карциномы человека сублинии диамом и 5-фторурацилом Автореф дис Канд KB/DDP5 // Экспериментальная онкология,- 1999 Мед Наук - М -1992-23 с Т21,№2-С 141-145 6 Чехун В Ф , Шишова Ю В , Юрченко О В , 9 Шишова Ю В , Юрченко О В , Кулик Г I, СиШлапацкая Л Н , Михалап С В , Бердова А Г, Сидоренко С П , Паламарчук В В , Заболотний Д М , доренко С П , Кулик Г И , Глузман Д Ф СинергичЧехун В Ф Обґрунтування комбінованого застосуное цитотоксическое действие цисплатины и мовання анти-СО95 моноклональних антитіл і цисноклональных антител IPO-4 на клетки платину в ОНКОЛОГІЧНІЙ КЛІНІЦІ // Шляхи та перспекэпидермоидной карциномы человека линии KB // тиви розвитку експериментальної онкології в Экспериментальная онкология-1998 - Т 20, № 3Україні-2001 -Киів-"Діа" - С 91-104 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71